Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Иммуноферментная тест-система определения уровня антирабических антител в сыворотках крови привитых против бешенства кошек и собак

Диссертация: Иммуноферментная тест-система определения уровня антирабических антител в сыворотках крови привитых против бешенства кошек и собак
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Бешенство распространено практически по всему миру, за исключением некоторых островных государств (Великобритания, Ирландия, Новая Зеландия, Япония) и Антарктиды. По данным экспертов’ВОЗ и МЭБ болезнь регистрируется более чем в 110 стран земного шара. Ежегодно погибает около 50 тысяч человек, из этого числа 35−45 тысяч (90%) приходится на Азиатский континент, в основном на Индию. Доля детской… Читать ещё >

Иммуноферментная тест-система определения уровня антирабических антител в сыворотках крови привитых против бешенства кошек и собак (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ
  • 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. БЕШЕНСТВО ЖИВОТНЫХ
      • 1. 1. 1. Эпизоотическая обстановка по бешенству в РФ
      • 1. 1. 2. Эпидемиологическая ситуация бешенства (гидрофобии) в Российской Федерации.*
    • 1. 2. ВОЗБУДИТЕЛЬ БЕШЕНСТВА
      • 1. 2. 1. ' Характеристика возбудителя
      • 1. 2. 2. 'Морфология и химический состав
      • 1. 2. 3. Устойчивость вируса
      • 1. 2. 4. Культивирование вируса
    • 1. 3. ЭПИЗООТОЛОГИЯ
    • 1. 4. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА
      • 1. 4. 1. Методы обнаружения антигенов вируса бешенства
      • 1. 4. 2. Методы выделения вируса бешенства
      • 1. 4. 3. -Методы обнаружения генома вируса
      • 1. 4. 4. Обнаружение антирабических антител
    • 1. 5. ИММУНИТЕТ, МЕРЫ БОРЬБЫ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА

— Актуальность темы. В Российской Федерации на протяжении последних 11 лет не снижается опасность распространения заболеваний бешенством среди животных и возникновения случаев заболевания людей. Несмотря на то, что основными резервентами и распространителями рабического вируса остаются дикие хищники семейства псовых, все чаще вовлекаются в эпизоотический процесс домашние животные (собаки и кошки) [1,2,8,15,34].

В 2005 году, по сравнению с 2000 годом, число заболевших бешенством животных увеличилось в 3,7 раза с 1406 до 5253 случаев. Интенсивность распространения" бешенства домашних животных находится’в прямой зависимости отчисленности безнадзорных собак и кошек [8,28,31,36,57,61].

В 2000;2005гг в Российской Федерации увеличилось количество неблагополучных пунктов по бешенству собак и кошек до 39,4%. Бешенство среди различных видов животных регистрировалось в 2007 году на территории 49 субъектов РФ.

Основными средствами контроля бешенства среди домашних и диких животных являются специфическая профилактика, обеспечивающая устойчивость животных к заражению бешенством, и лабораторная диагностика. Однако применение антирабических вакцин и эффективных схем иммунизации животных, часто недостаточно из-за гетерогенности популяционной и индивидуальной защиты животных [14,32].

Наличие в сыворотке крови вакцинированных животных вируснейт-рализующих антител является фактором эффективности вакцинации, так как только вируснейтрализующие антитела рассматриваются как основа защиты против рабической инфекции [15,119].

В соответствии с рекомендациями Комитета экспертов ВОЗ по бешенству, содержание в сыворотках крови привитых против бешенства животных вируснейтрализующих антител 0,5 МЕ/мл, считается минимальным уровнем протективного антирабического иммунитета (Manual of standards Diagnostic Tests and Vaccines, 2004) [120].

С 2003 года обязательными условиями, подлежащими исполнению при ввозе домашних животных (кошек, собак, домашних хорьков) из стран, не входящих в Европейский Союз, являются наличие имплантированных микрочипов и содержание вируснейтрализующих антител в сыворотке крови не менее 0,5МЕ/мл (Регламент Совета и Европейского парламента, 2003). 44.

Для определения антител в сыворотках крови к вирусу бешенства, ВОЗ рекомендует использовать реакцию нейтрализации in vivo РН на мышах и тесты in vitro на культуре клеток: тест ингибиции фокусов флюоресценции (fluorescent focus inhibition test (RFFIT) и тест флюоресценции вируснейтрализующих антител (FAVN)[ 17,24,95,96,119,120].

Постановка тестов in vitro требует специально аккредитованной лаборатории, длительного времени (2−3 дня), необходимости поддержания культуры клеток, использования вирулентного вируса. Постановка РН на мышах трудоемка, длительна во времени (14−21 день), требует живого вируса и значительного количества мышей, что увеличивает • стоимость анализа.

В практике применяются традиционные методы определения антира-бических антител, такие как РНГА, РСК, РНИФ, РДП [24,26].

Для решения аналогичных задач предложены методы иммунофер-ментного анализа, основанные на использовании целого вируса бешенства, или и его оболочечного белка-гликопротеина (белок G), однако, эти методы пригодны для качественного определения антител, но не позволяют количественно определять наличие антител против бешенства в сыворотках крови животных после вакцинации [3,10,26,35,45,66,79,113].

На основании этого, комитет экспертов ВОЗ по бешенству, в качестве альтернативного, рекомендует метод непрямого иммуноферментного анализа для количественного определения в сыворотке крови привитых кошек и собак антител к вирусу бешенства [96].

К преимуществам непрямого ИФА относится высокая чувствительность, автоматизация, использование инактивированного вируса бешенства штамм «CVS», референс-сыворотки с известным содержанием вирус-нейтрализующих антител и возможность в короткие сроки (3−4ч) по количественному содержанию антител в сыворотках крови вакцинированных животных определить уровень антирабического иммунитета.

С учетом этого, разработка тест-системы непрямого ИФА для определения уровня антирабических антител в сыворотках крови привитых против бешенства кошек и собак, является актуальной задачей для практической ветеринарии. 7 Цель и задачи исследования Основной целью данной работы являлась разработка тест-системы, на основе непрямого иммуноферментного анализа, для количественного определения антител к вирусу бешенства в сыворотках крови привитых против бешенства кошек и собак.

Для достижения указанной цели необходимо решить следующие задачи:

1. Отработать условия получения очищенного и концентрированного вируса бешенства штамм «CVS» и его компонента-гликопротеина для использования их в качестве антигенов в иммуноферментной тест-системе.

2. Синтезировать протеин Апероксидазный коньюгат для иммуноферментной тест-системы.

3. Получить контрольные сыворотки для иммуноферментной тест-системы.

4. Разработать тест-систему на основе непрямого ИФА для количественного определения к вирусу бешенства антител в сыворотках крови привитых кошек и собак.

5. Исследовать эффективность применения разработанной иммунофер-ментной тест-системы для определения уровня антирабических антител у привитых против бешенства кошек и собак в сравнении с РН в культуре клеток.

7 Научная новизна работы.

Научная новизна результатов, полученных при выполнении работы, состоит в следующем:

Впервые в РФ разработана иммуноферментная /гест-система на основе непрямого ИФА с применением культурального фиксированного вируса бешенства штамм «CVS» и референс-препарата для определения уровня антирабических антител в сыворотках крови привитых против бешенства кошек и собак.

Отработаны условия очистки и концентрирования культурального фиксированного вируса бешенства' штамм «CVS» и гликопротеина вируса бешенства, пригодных в качестве антигенов иммуноферментной тест-системы.

Подобрана схема иммунизации продуцентов для получения антира-бической сыворотки, используемой в качестве контрольной при постановке непрямого ИФА.

Исследована возможность применения протеин Апероксидазного коньюгата в иммуноферментной тест-системе для определения антирабических антител в сыворотках крови привитых против бешенства кошек и собак.

Установлена согласованность между результатами определения уровня антирабических антител в сыворотках привитых против бешенства ко г Практическая значимость работы.

Впервые в РФ разработан набор компонентов и иммунофермент-ная тест-система для определения уровня антирабических антител в сыворотках привитых против бешенства кошек и собак, внедрение которой в практику ветлабораторий, позволит в короткие сроки провести исследования сывороток крови на наличие антирабических антител, и оценить эффективность вакцинации кошек и собак.

Разработанная тест система может быть использована для определения антирабических антител у привитых против бешенства кошек и собак, при перевозе их через границу Российской Федерации. з Практические предложения.

Для практического использования предлагаются: Инструкция по применению набора «Глобулин флюоресцирующий для диагностики бешенства животных». Регистрационный № ПВР.1.2.-9/80, утверждена 22.02.06. Инструкция по изготовлению и контролю «Глобулина флюоресцирующего для диагностики бешенства животных» утверждена директором ВНИТИБП 01.2006г.

Методические указания по определению уровня антител у привитых против бешенства кошек и собак методом ИФА", рассмотренные и одобренные на заседании секции «Ветеринарная биотехнология» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии.

Технические условия «Иммуноферментная тест-система для определения уровня антирабических антител в сыворотках привитых против бешенства кошек и собак».

Временная инструкция по применению иммуноферментной тест-системы для определения уровня антирабических антител в сыворотках привитых против бешенства кошек и собак".

НТД и акты комиссионных испытаний одобрены Ученым советом, утверждены директором ВНИТИБП (03.2008г).

Основные положения, выносимые на защиту.

Иммуноферментная тест-система для количественного определения антител в сыворотках крови кошек и собак, привитых против бешенства.

Результаты определения уровня антирабических антител у привитых против бешенства кошек и собак в иммуноферментной’тест-системе и РН в культуре клеток. :

Оценка эффективности применения разработанной иммуноферментной тест-системы для определения уровня антирабических антител у привитых против бешенства кошек и собак.

Апробация работы и публикация результатов.

Материалы исследований были доложены на заседаниях научного совета ГНУ ВНИТИБП. По теме диссертации опубликовано 6 научных работ, в том числе 1 статья в журнале «Ветеринария и кормление».

Личный вклад соискателя.

Представленные в диссертационной работе материалы получены, проанализированы и обработаны автором самостоятельно. Практическую и консультативную помощь при исследовании сывороток крови кошек и собак в РН на культуре клеток оказал д.б.н., профессор Кузнецов Д. П., ведущий научный сотрудник ФГУ ВГНКИ к. б.н. Елаков A.JI.

1.0Б30Р ЛИТЕРАТУРЫ I. Бешенство животных.

Бешенство — особо опасная инфекционная болезнь, характеризующаяся поражением центральной нервной системы, к которой восприимчивы домашние и дикие животные, а также человек [2,5]. Бешенство, по оценкам ВОЗ, входит в пятерку зоонозов, наносящих наибольших социально-экономический ущерб и является постоянной угрозой для жизни человека и животных [15,17,89].

Бешенство распространено практически по всему миру, за исключением некоторых островных государств (Великобритания, Ирландия, Новая Зеландия, Япония) и Антарктиды. По данным экспертов’ВОЗ и МЭБ болезнь регистрируется более чем в 110 стран земного шара. Ежегодно погибает около 50 тысяч человек, из этого числа 35−45 тысяч (90%) приходится на Азиатский континент, в основном на Индию. Доля детской смертности составляет 30−50%, от числа заболевших [1,7,98].

В зависимости от резервуаров и особенностей течения, распространение t бешенства можно отнести к нескольким ареалам:

Полярный ареал, включающий РФ, Чукотку, Гренландию, Аляску, где в 60 — 90% случаев резервуаром вируса бешенства служат песцы.

Центральная и Западная Европа, азиатская часть РФ, США, Мексика входят в зону, характеризующуюся многочисленными носителями бешенства: куницы, красные лисы, барсук, волки, грызуны, скунсы, енотно-видная собака [75,117].

Южная и Центральная Америка, где резервуарами являются летучие мыши-вампиры [62,94,97].

Африканский ареал, где основными носителями вируса являются собаки, шакалы, мангусты.

Распространено бешенство, главным образом, среди плотоядных животных как диких, так и домашних.

Из всего многообразия животного мира только 4 отряда хладнокровных животных не подвержены этой инфекции, которая, помимо диких животных, поражает домашних и сельскохозяйственных животных, а также человека [25,36,48,50].

За период 2000;2005 гг. среди животных было отмечено более 82 тыс. случаев бешенства, подтвержденных лабораторным анализомпогибло свыше 30 млн человек и более 10 млн. человек получили различные повреждения от животных и более 5 млн. человек специфическое антираби-ческое лечение [15,22].

Несмотря на все усилия санитарных властей, случаи заболевания среди людей все еще регистрируются в районах, где дикие животные служат резервуаром вируса бешенства [29,34]. Спектр патогенности ВБ тесно связан с его экологией и имеются 2 формы эпизоотии Б: городская и лесная, при которой возбудитель циркулирует среди диких плотоядных по типу природно-очаговой инфекции. Периодичность эпизоотии — характерная особенность Б, а сезонные подъемы заболеваемости Б среди животных тесно связаны с географией региона и биологическими циклами активности животных [75,90,121].

Лисицы обусловливают 60 — 85% от’всех случаев заболевания бешенством среди диких животных. Их роль в эпизоотологии бешенства объясняется чрезвычайной восприимчивостью к ВБ, увеличением популяции этих животных, а также возможностью перорального заражения[ 19,29,47].

Увеличению численности лисиц способствует истребление их естественных врагов — волков, рысей, медведей, орлов и других хищников, а также увеличение количества грызунов — основного источника корма для лисиц[69,70]. У 40−89% лисиц болезнь часто протекает хронически и латентно, обеспечивая длительную персистенцию вируса в естественных условиях^ 6,65].

Имеются сообщения о выделении возбудителя. Б от грызунов — белок, сурков, крыс, зайцев, ондатр, хомяков, мышей. Однако роль этих животных в экологии Б окончательно не установлена [29,47].

Несмотря на то, что эпизоотии Б поддерживаются, главным образом, дикими животными, человеку угрожают, прежде всего, собаки и кошки [5,8,34,48]. Собаки, летучие мыши, обезьяны, волки, енотовидные собаки, койоты, кошки составляют не более 5% от общего числа иммунизированных животных и существенно влияют на распространение Б [15,47,52,112,115].

Собаки среди прочих восприимчивых животных представляют собой группу наивысшего риска в виду их абсолютной преобладающей роли в реализации связей между природными и антропургическими экотипами бешенства за счет контактов с лисицами — в свою очередь преобладающими резервуарами и источниками инфекции.

В городских эпизоотиях бешенство у собак, как правило, заканчивается их гибелью, поэтому механизм поддержания вируса сводится к коротким циклам репродукции в организме и быстрой передаче восприимчивому организму [30,31,82].

В настоящее время наблюдается увеличение популяции собак, в том числе бездомных, которые служат звеном в цепи передачи инфекций во многих развивающих странах, продолжают также сохраняться среди диких животных очаги бешенства, даже в условиях ежегодной вакцинации^, 30,81].

Кошки, среди прочих восприимчивых животных, представляют собой по значению вторую после собак и прогрессирующую группу риска. Кошки вовлекаются в экологические циклы инфекции лишь спорадически, не участвуют в циркуляции возбудителя, остаются его биологическими тупиками и обладают низким эпидемическим потенциалом[29].

5. ВЫВОДЫ.

1. С использованием последовательного центрифугирования при 1 Tbic. g, 50 Tbic. g и гель-хроматографии на сефарозе 4 В получен очищенный и концентрированный вирус бешенства штамм «CVS», 97,4% чистоты побелку, инфекционностью на 1,2 IgLD 5о/сМ выше исходной и активностью в ИФА 1:800.

2. Обработкой вируса бешенства штамм «CVS» 2% тритоном Х-100 получен гликопротеин вируса с сохранением антигенной активности, определяемой в ИФА в титре 1:600.

3. При введении животным очищенный вирус бешенства и гликопротеин вызывали образование в сыворотках вируснейтрализующих антител в титрах 1:8 -1:64 и содержанием антирабических антител 2−12 МЕ/мл.

4. Иммунизацией баранов и собак инактивированным (З-пропиолактоном 1:4000 очищенным вирусом бешенства штамм «CVS» получены антирабические сыворотки с титром вируснейтрализующих антител, определенных в РН 1:16—1:64 и содержанием 4−24 МЕ/мл антител, пригодные в качестве контрольных, положительных сывороток и референс-препаратов для иммуноферментной тест-системы.

5. Показано, что протеин Апероксидазный коньюгат в рабочем разведении 1:4000 и концентрации по ПХ — 240 мкг/ОДмл может быть использован в иммуноферментной тест-системе для количественного определения антител к вирусу бешенства в сыворотках привитых кошек и собак.

6. Разработана иммуноферментная тест-система непрямого ИФА для количественного определения в сыворотках крови антител к вирусу бешенства с чувствительностью 0,02−0,03 МЕ/мл антирабических антител. Установлено, что относительно РН, чувствительность и специфичность тест-системы непрямого ИФА с использованием в «качестве антигена очищенного вируса была выше (91% и 94%), в сравнении с использованием гликопротеина вируса (88% и 86% соответственно).

6. Установлена пороговое значение ОП490 =0,620 о.е., по которой определен в сыворотках крови привитых кошек и собак минимальный уровень антирабических антител (менее 0,5 МЕ/мл).

7. Установлена согласованность (К=0,67) результатов, полученных при определении уровня' антирабических антител в сыворотках крови привитых против бешенства кошек и собак в разработанной' иммуноферментной тест-системе и РН в культуре клеток. Чувствительность разработанной тест-системы непрямого ИФА относительно РН составила 88%, специфичность 80%.

6. Практические предложения.

Для практического использованияпредлагаются:

Инструкция по применению набора «Глобулин флюоресцирующий для диагностики бешенства животных». Регистрационный № ПВР.1.2.-9/80, утверждена 22.02.06. Инструкция по изготовлению и контролю «Глобулин флюоресцирующий для диагностики бешенства животных» и утвержденная директором ВНИТИБП 01.2006г.

Методические указания по определению уровня антирабических антител в сыворотках крови привитых против бешенства кошек и собак методом ИФА", рассмотрены и одобрены на заседании секции «Ветеринарная биотехнология» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии.

Технические условия «Иммуноферментная тест-система для определения уровня антирабических антител в сыворотках крови привитых против бешенства кошек и собак».

Временная инструкция по применению иммуноферментной тест-системы для определения уровня антирабических антител в. сыворотках крови привитых против бешенства кошек и собак".

НТД и акты комиссионных испытаний одобрены Ученым советом, утверждены директором ВНИТИБП (03.2008).

Показать весь текст

Список литературы

  1. В.М., Седов В .А. и др. Необходим учет новых особенностей эпизоотологии бешенства. //Ветеринария.-1998,№ 6,-С.З-б
  2. В.М., Гусев А. А., Савин А. В. Эпизоотическое состояние и эффективность производимых мероприятий против бешенства в России. //Ветеринария., № 6., 2002,-С.З-6.
  3. Т.В. Разработка набора реагентов для оценки эффективности поствакцинального иммунитета к вирусу бешенства в серологических реакциях. Автореферат дисс., Щелково, 2005, С.-25
  4. В.Э., Артамонов А.Ф.// Вопросы вирусологии-1985,-№ 5,-С.568−571
  5. И.А., Книзе А. В., Котляров В. М. и др. Система эпизоотологиче-ского мониторинга и особо опасных, экзотических, малоизученных, в том числе зооантропонозных болезней животных. Покров, ВНИИВВиМ, 2001,72С.
  6. В.И.- Бирюков А.Г.- Кузнецова С.В.- Клюкина В.И.- Кочиш ИМ. Флюоресцирующий антирабический глобулин из сыворотки крови различных видов животных. Науч. основы технологии пром. пр-ва
  7. Бешенство. Сюрин В. Н., Самуйленко А. Я., Соловьев Б. В., Фомина Н. В. //Вирусные болезни животных.- МД998.-С.300−319
  8. Е.С. Особенности экологии собак.// Вет. консультант М., 2002,№ 5, -С.13−15
  9. К.Н.- Квасов И.Л.- Турсункулов Ш. Ж. Вируснейтрализующая и преципитирующая активность сывороток крови лошадей, привитых ра-бическими вирус-антигенами. Вестник с.-х. .науки Казахстана, 1985- T.2I -С. 71−75.
  10. А.Д., Наволокин В. В. Обнаружение антител к вирусу бешенства с помощью ELISA в пробах крови, собранных на бумажные диски. Лаб. Дело, 1988, № 3, -С. 73−77
  11. Р.А.- Рунова В.Ф.- Романова Л.Н.- Храпова И.С.- Эльберт Л.Б.- Мальдов Д. Г. Применение ракетного иммунозлектрофореза для определения гликопротеина в концентрированных антирабических вакцинах. Вопр. вирусологии, 1994- Т.39, N2 -С. 68−71 ,
  12. И.Ф., Недосеков В. В., Груздев К. Н. и др. Способ определения антирабических вируснейтрализующих антитиел.// Патент № 97 116 427, 1997г
  13. С.А., Сазанова Э. Я., Акиньшина Т. В. и др. Клеточный иммунитет при культуральной антирабической вакцинации. Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. 2006, № 2,-С 76−78.
  14. Л.К., Дешевых А. Е., Груздев К. Н., Изучение репродукции фиксированного штамма вируса бешенства в культуре клеток. Вопр. Приклад. Экологии (природопользования), охотоведения и звероводства.-Киров, 1997,-С. 285−286.
  15. Государственный стандарт СССР. Животные сельскохозяйственные. Методы лабораторной диагностики бешенства. ГОСТ 26 075–84 (СТ СЭВ 3452−81).-М. 1984.9с.
  16. С.А., Кременчугская С. Р., Дудникова Е. К., Селютина И. Н. Получение гликопротеина GP-67 вируса бешенства. Проблемы инфек. па-тол, с-х животных.-Владимир, 1997*.-С. 171−172
  17. С.А. Лисы как маркеры при бешенстве. ч1−2., Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропонозов. Материалы научно-прак. конфе-рен. Покров 2003.,-С 69−73
  18. Н.Т. Чувствительность некоторых культур клеток к вирусу бешенства. Бюл. ВИЭВ, 1991- Вып.75−76. -С. 119−121
  19. B.C., Школьников Е. Э. Состояние и перспективы борьбы с бешенством. //Вестник РАСХН, 2000,№ 2,-С 63−65
  20. КовалевА.Н., ШашёнькоА.С., Иммунофлюоресцентное исследование отпечатков роговицы глаза при бешенстве.//Ветеринария, 1970,№ 9,-С.44−46.
  21. Кунакаев Г. Г. Эпизоотическая обстановка по бешенству животных в
  22. РБ. // Информ.бюл.МСХ и продовольствия Респ. Башкортостан, 2000- N 11.-С. 26−27*
  23. С.В. Диагностикумы на основе очищенных и концентрированных вирусных антигенов (на примере вируса бешенства и инфекционного ринотрахеита КРС). Авт. дис. док. биол. наук., ВИЭВ, 1991.
  24. С.В., Кузнецов П. П., Иванов B.C. Субъединичная антираби-ческая вакцина.// Науч. основы технологии пром. пр-ва вет.биол.препаратов. -Щелково, 1996, -С. 54,
  25. О.Б., Яковлев С. С., Бессонов И. Е. и др. Информационный бюллютень «Бешенство». -М.2007
  26. В.В. Бешенство, очерк мирового нозоареала и общие элементы контроля. /Ветеринарная патология. 2002,№ 1. -С. 13−20
  27. В.В., Недосеков В.В.- Середа А.Д., Сошенко Л. П. Опыт серологического мониторинга популяции собак при бешенстве. Ветеринарная патология, 2002,№ 1,-С. 140−143
  28. В.В., Джупина С. И., Ведерников В. А. и др. Бешенство животных разных видов в современных условиях-эпизоотологический образец и клиническая характеристика. Ветеринарная патология.-2002, № 1.-С. 214−217
  29. В.В.- Воробьев А.А. Актуальные проблемы бешенства: природная очаговость, методология исследований и контроля в центре России. Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии, 2005- N 1, С. 89−95
  30. М.А.- Татаров А.Т. Бешенство животных.// Ветеринария, 1984- № 12. -С. 67−69
  31. Методические указания по диагностике заболеваний сельскохозяйственных животных иммуноферментным методом. Владимир, 1998 г.
  32. А.А. Современные проблемы бешенства. //Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропонозов. Материалы научно-прак. конф. Покров 2003.,-С 26−31
  33. В .В., Вишняков И. Ф., Жестерев В. И., Балышев В. М., Груздев К.Н Титрование антирабических антител с помощью теста фокусов флюоресценции. Ветеринария, 1998: № 7,-С. 28−30
  34. Е.А. Изучение некоторых свойств антирабического имму-ноглобулина.Труды Томского НИИ вакцин и сывороток, 1983- Т. 7.-С. 103−109
  35. Г. С. Изучение иммуномоделирующих свойств неотима при рабической инфекции.// Вирус. болезни с.-х.животных. -Владимира 1995 -С. 153,
  36. Э.Я., Кузнецова С. В., Маслов Е. В., Бойко А. А., Иванов B.C., Кузнецов П. П. Иммуноферментный анализ при индикации вируса бешенства и определения уровня антител. Ветеринария, 1991, Т 8,-С. 62−64
  37. М.А.- Фодор И.И.- Грабко В. И. К проблеме генно-инженерной антирабической вакцины.//Генно-инженерные и синтетические вакцины. Пущино, 1990-С. 64−70
  38. Селимов М. А. Современная эпизоотическая ситуация и перспективы элиминации бешенства. Вопросы вирусологии. Т 43., № 5, 1998,—С. 196−198
  39. В.А.- Коромыслов Г.Ф.- Куликовский А. В. Семинар всемирной организации здравоохранения по борьбе с бешенством диких животных (Женева, июль 1990 г.), Вестн. с.-х. науки. М, 1991- № 4 -С. 172−173
  40. Сологуб Т.В., Никишин И. В., Вишняков И. Ф и др. Совершенствование МФА для обнаружения антигена вируса бешенства. Вопр.вет.вирус., микробиологии и эпизоотологии, 1992-Т.Ч.2--С.260−261.
  41. А.а. Суюбаева Б. П. перспективы и практические аспекты применения гибридомной технологии на модели вируса бешенства.// Вестник с-х науки Казахстана, 1990, Т 3,-с 69−72
  42. .Л. Типологическая классификация природных очагов иструктура мирового ареала природного бешенства. Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии, 1984- № 9 -С. 16−21• / *
  43. С.М. и др. Результаты использования прямого твердофазного иммуноферментного анализа для оценки специфической активности антирабических вакцин. ЖМЭИ, «Медицина», М 1991, № 5-С. 30−33
  44. Р.С., Фролова А. В. репродукция вируса бешенства в культуре перевиваемых клеток Vero. //Цитология, 1994/Г.36,№ 6,-С. 587−588
  45. А.С. Распределение вируса бешенства и прижизненное обнаружение его с помощью исследования отпечатков роговицы. Автореферат дис. кан. вет. наук. Минск. 1971, 21с.
  46. A.M. Дисурина М.И.- Груздев К.Н. Бешенство и его распространение в мире. //Вопр. вирусологии, 2001- T.46,N 2, -С. 7−12
  47. Информационный бюллетень по бешенству. //ФГУ «Центр ветеринарии»., Лаборатория эпизоотологии ВИЭВ, 20 005 г, 41с.
  48. Н.А.- Разработка средств и методов иммунологического мониторинга и мер борьбы при бешенстве и лихорадке Ку животных. Автореферат дис. доктора биол. наук. -Казань, 2000, -С.48
  49. Н.А.- Савицкая Т.А. и др., Прижизненая диагностика гиброфобии. Междунар.науч.практ.конф." Ветеринарные и медицинские91
  50. Я.С. Разработка тест-системы для идентификации вируса арк- • тического бешенства на основе методов анализа генома: Автореферат дис. кан. биол. наук.-Покров, 2001. —24с.
  51. JI.А., Родина JI.A. Эпидемическая ситуация и меры профилактики бешенства в г. Москве. Междунар.науч.практ.конф." Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропонозов. Покров, 2003,4.1.-С 146−151.
  52. Alvarez Peralta Е. Rabia transmitida рог vamphos, distribution, frecuencia е importancia // Tecn.pec.en Mexico, 1997- Vol.35,N 2 -P. 93−104
  53. Aubert M. F. A. Practical significance of rabies antibodies in cats and dogs.//Rev. Sci. Tech. Off int. Epis, 1992, № 11, -P 735−760
  54. Arai Y.T.- YamadaK.- Kameoka Y.- Horimoto Т.- Yamamoto K.- Yabe S.- Nakayama M.- TashiroM. Nucleoprotein gene analysis of fixed and street rabies virus variants using RT-PCR //Arch.Virol., 1997- Vol. 142, N 9- -P. 17 871 796
  55. Artois M: — Cliquet F.- Barrat J.- Schumacher C.L. Effectiveness of SAG1 oral vaccine for the long-term protection of red foxes (Vulpes vulpes) against rabies //Veter.Rec, 1997- Vol. 140, N 3, P. 57−59
  56. Atanasiu P., Perrin P., Delegneau J. E., Use of an enzyme immunoassay with protein A for rabies antigen and antibody determination. // Proc. 3-d Gen. Meet. Eur. Soc. Anim. Cell Technol., 1979,-P 207−215
  57. Albas A.- Pardo P.E.- Rinaldi P.L.F.- Tarumoto M.H. Avaliacao do metodo de contra-imunoeletroforese para titular soros de bovinos vacinados contra a raiva Veter.Zootecn., 1995- Vol.7, -P. 141−145
  58. Artois M.- Charlton K.M.- Tolson N.D. Vaccinia recombinant virus expressing the rabies virus glycoprotein: safety and efficacy trials in Canadian
  59. Временная инструкция по изготовлению и контролю набора компонентов для определения уровня антител в сыворотках крови привитых против бешенства кошек и собак в ИФА1. Щелково-2008г1. УТВЕРЖДАЮ:1. ВНЩИБП Я. Самуйленко2006г
  60. Акт межлабораторных комиссионных испытаний метода определения антител в сыворотках крови привитых против бешенства кошек и собак в ИФА
  61. Разработанная иммуноферментная тест-система пригодна для серологического мониторинга вакцинированных против бешенства кошек и собак.1. Заключение.
  62. Комиссия рекомендует одобрить Ученым советом ВНИТИБП настоящий акт комиссионных испытаний и утвердить «Методические рекомендации по применению метода ИФА для
  63. Председатель комиссии И, И. Кочиш /
  64. Члены комиссии: Г. Л.Молчанова1. УфбГ П-В.Рахманинук),"^А-ЪЛРоничев
  65. Акт рассмотрен на ученом совете ВНИТИБП, одобрен и рекомендован для утверждения директором института.
  66. Протокол заседания ученого совета № /Г от 03. 2008 г Ученый секретарь ^(^A&jT&ft Ю.Д.Фролов
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!