ΠŸΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ Π² написании студСнчСских Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚
АнтистрСссовый сСрвис

ИспользованиС Π±Π΅Ρ‚Π°-ΡΠΏΠΈΡ€Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½Π° ΠΈ ΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ΄ΠΈΠ»-ΠΏΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠ» ΠΈΠ·ΠΎΠΌΠ΅Ρ€Π°Π·Ρ‹ для получСния фибриллярного Π°Π΄Π³Π΅Π·ΠΈΠ½Π° Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° Π’4

Π”ΠΈΡΡΠ΅Ρ€Ρ‚Π°Ρ†ΠΈΡΠŸΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ Π² Π½Π°ΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΈΠΈΠ£Π·Π½Π°Ρ‚ΡŒ ΡΡ‚ΠΎΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒΠΌΠΎΠ΅ΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹

Π’ Ρ€Π°ΠΌΠΊΠ°Ρ… Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹ Π½Π°ΠΌΠΈ Π²ΠΏΠ΅Ρ€Π²Ρ‹Π΅ Π±Ρ‹Π»Π° ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½Π° Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ использования Ρ‚Ρ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Ρ‚Π°-ΡΠΏΠΈΡ€Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π‘-ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π²ΠΎΠ³ΠΎ Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½Π° Π±Π΅Π»ΠΊΠ° базальной пластинки Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° Π’4 — gp5 для управлСния сворачиваниСм ΠΈ ΠΎΠ»ΠΈΠ³ΠΎΠΌΠ΅Ρ€ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ фибриллярных Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ². Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠΌ, Π½Π°ΠΌΠΈ Π±Ρ‹Π» ΠΎΠ±Π½Π°Ρ€ΡƒΠΆΠ΅Π½ ΠΈ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½ Π½ΠΎΠ²Ρ‹ΠΉ эффСктивный Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹ΠΉ Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½ — ассистСнт Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³Π°. Π’ Π»ΠΈΡ‚Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Π΅ описано мноТСство ΠΏΠΎΠ΄Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΠΊ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΡŽ… Π§ΠΈΡ‚Π°Ρ‚ΡŒ Π΅Ρ‰Ρ‘ >

ИспользованиС Π±Π΅Ρ‚Π°-ΡΠΏΠΈΡ€Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½Π° ΠΈ ΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ΄ΠΈΠ»-ΠΏΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠ» ΠΈΠ·ΠΎΠΌΠ΅Ρ€Π°Π·Ρ‹ для получСния фибриллярного Π°Π΄Π³Π΅Π·ΠΈΠ½Π° Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° Π’4 (Ρ€Π΅Ρ„Π΅Ρ€Π°Ρ‚, курсовая, Π΄ΠΈΠΏΠ»ΠΎΠΌ, ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒΠ½Π°Ρ)

Π‘ΠΎΠ΄Π΅Ρ€ΠΆΠ°Π½ΠΈΠ΅

  • БПИБОК Π‘ΠžΠšΠ ΠΠ©Π•ΠΠ˜Π™
  • 1. ΠžΠ‘Π—ΠžΠ  Π›Π˜Π’Π•Π ΠΠ’Π£Π Π«
  • 1. ГСтСрологичСская экспрСссия Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π² ΡΠΈΡΡ‚Π΅ΠΌΠ΅ Π΅. col
    • 1. 1. ΠžΠΏΡ‚ΠΈΠΌΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΡ экспрСссии Π±Π΅Π· измСнСния ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ Π³Π΅Π½Π°
    • 1. 2. ΠžΠΏΡ‚ΠΈΠΌΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΡ экспрСссии с ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ Π³Π΅Π½Π°
      • 1. 2. 1. ΠŸΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ΄ΠΈΠ»-ΠΏΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠ»-цис/транс-ΠΈΠ·ΠΎΠΌΠ΅Ρ€Π°Π·Π° E. coli (SLyD)
      • 1. 2. 2. ß--ΡΠΏΠΈΡ€Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ Π‘-ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π²ΠΎΠΉ Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° gp5 Ρ„Π°Π³Π° Π’4 (5HENS)
  • 2. Бтруктурная организация ΠΈ ΠΎΠ±Ρ‰ΠΈΠΉ ΠΏΡƒΡ‚ΡŒ сборки Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° Π’
    • 2. 1. Π‘Π°Π·Π°Π»ΡŒΠ½Π°Ρ пластинка Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° Π’
    • 2. 2. ΠŸΡ€ΠΎΡ†Π΅ΡΡ инфицирования Ρ„Π°Π³ΠΎΠΌ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ-хозяина
    • 2. 3. Π₯арактСристика Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ комплСкса Π΄Π»ΠΈΠ½Π½Ρ‹Ρ… хвостовых 26 Ρ„ΠΈΠ±Ρ€ΠΈΠ»Π»
      • 2. 3. 1. Бтруктурная характСристика Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π΄Π»ΠΈΠ½Π½Ρ‹Ρ… хвостовых 28 Ρ„ΠΈΠ±Ρ€ΠΈΠ»Π»
      • 2. 3. 2. Бтруктурная характСристика gp
  • 2. ΠœΠΠ’Π•Π Π˜ΠΠ›Π« И ΠœΠ•Π’ΠžΠ”Π«
    • 2. 1. Π‘Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ ΡˆΡ‚Π°ΠΌΠΌΡ‹
    • 2. 2. Π‘Ρ€Π΅Π΄Ρ‹ для выращивания Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΉ ΠΈ Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³ΠΎΠ²
    • 2. 3. Π’Π΅ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ для клонирования. ΠŸΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄Ρ‹
      • 2. 3. 1. Π’Π΅ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ для клонирования ΠΈ ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΠΈ
      • 2. 3. 2. ΠŸΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄Ρ‹ с Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°ΠΌΠΈ Π”ΠΠš, ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ Π°Π²Ρ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΌ Π² Ρ…ΠΎΠ΄Π΅ 35 исслСдований
    • 2. 4. Π€Π΅Ρ€ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Ρ‹
    • 2. 5. ΠŸΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π°Π·Π½Π°Ρ цСпная рСакция
    • 2. 6. Π’Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ ΠΎΡ‡ΠΈΡΡ‚ΠΊΠ° Π”ΠΠš
      • 2. 6. 1. ΠžΡ‡ΠΈΡΡ‚ΠΊΠ° Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ², Π°ΠΌΠΏΠ»ΠΈΡ„ΠΈΡ†ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ ПЦР
      • 2. 6. 2. Π’Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ ΠΎΡ‡ΠΈΡΡ‚ΠΊΠ° ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄Π½ΠΎΠΉ Π”ΠΠš
    • 2. 7. ΠšΠΎΠ»ΠΈΡ‡Π΅ΡΡ‚Π²Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ опрСдСлСния ΠΏΡ€Π΅ΠΏΠ°Ρ€Π°Ρ‚ΠΎΠ² Π”ΠΠš
    • 2. 8. Π‘Π΅ΠΊΠ²Π΅Π½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π”ΠΠš
    • 2. 9. ΠŸΡ€ΠΈΠ³ΠΎΡ‚ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ΅Ρ‚Π΅Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ
    • 2. 10. Врансформация ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ΅Ρ‚Π΅Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ Π•. coli ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄Π½ΠΎΠΉ Π”ΠΠš
    • 2. 11. БСлСкция ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΎΠ², содСрТащих Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄Ρ‹
    • 2. 12. ЭкспрСссия Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠ°Ρ… Π•. coli BL21(DE3)
    • 2. 13. Π­Π»Π΅ΠΊΡ‚Ρ€ΠΎΡ„ΠΎΡ€Π΅Π· Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π² ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠ°ΠΊΡ€ΠΈΠ»Π°ΠΌΠΈΠ΄Π½ΠΎΠΌ Π³Π΅Π»Π΅
    • 2. 14. Π’Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²
    • 2. 15. ΠžΡ‡ΠΈΡΡ‚ΠΊΠ° Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²
    • 2. 15. Π‘ΠΏΠ΅ΠΊΠ³Π³Ρ€ ΠΊΡ€ΡƒΠ³ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ Π΄ΠΈΡ…Ρ€ΠΎΠΈΠ·ΠΌΠ°
    • 2. 16. Π£Π»ΡŒΡ‚Ρ€Π°Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€ΠΈΡ„ΡƒΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅
    • 2. 17. ΠŸΠΎΠ΄Π±ΠΎΡ€ условий кристаллизации
    • 2. 18. ΠœΠ°Π»ΠΎΡƒΠ³Π»ΠΎΠ²ΠΎΠ΅ рСнтгСновскоС рассСяниС
    • 2. 19. ЭкспСримСнты ΠΏΠΎ ΠΎΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΡŽ биологичСской активности
  • 3. РЕЗУЛЬВАВЫ И ΠžΠ‘Π‘Π£Π–Π”Π•ΠΠ˜Π•
    • 3. 1. Π‘ΠΎΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΠ΅ гСнСтичСских конструкций
    • 3. 2. ЭкспрСссия гСнСтичСских конструкций
    • 3. 3. ΠžΡ‡ΠΈΡΡ‚ΠΊΠ° Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²
    • 3. 4. ИсслСдованиС Ρ„ΠΈΠ·ΠΈΠΊΠΎ-химичСских, структурных ΠΈ Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΠΈΡ… 52 свойств ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²
      • 3. 4. 1. ΠšΡ€ΡƒΠ³ΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π΄ΠΈΡ…Ρ€ΠΎΠΈΠ·ΠΌ
      • 3. 4. 2. ΠžΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ олигомСрности Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ², гСль-Ρ„ΠΈΠ»ΡŒΡ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΡ
      • 3. 4. 3. Бтруктурная характСристика gpSLYD37TGP
      • 3. 4. 4. ΠœΠΎΠ΄Π΅Π»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ молСкулярной структуры gpSLYD37TGP 58 Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠ³ΠΎ Ρ€Π°Π·Ρ€Π΅ΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΠΎ Π΄Π°Π½Π½Ρ‹ΠΌ ΠΌΠ°Π»ΠΎΡƒΠ³Π»ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ рассСяния
      • 3. 4. 5. ΠžΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ биологичСской активности gpSLYD37TGP
  • Π’Π«Π’ΠžΠ”Π«
  • БПИБОК Π›Π˜Π’Π•Π ΠΠ’Π£Π Π«

БПИБОК Π‘ΠžΠšΠ ΠΠ©Π•ΠΠ˜Π™ Π°.ΠΎ. — Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ‚Π½Ρ‹ΠΉ остаток ББА — раствор Π±Ρ‹Ρ‡ΡŒΠ΅Π³ΠΎ Π°Π»ΡŒΠ±ΡƒΠΌΠΈΠ½Π° Π”ΠΠš — дСзоксирибонуклСиновая кислота Π”Π₯Π€ — длинная хвостовая Ρ„ΠΈΠ±Ρ€ΠΈΠ»Π»Π° Π˜ΠŸΠ’Π“ — ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΠΏΠΈΠ»-1-Ρ‚ΠΈΠΎ-Π -0-Π³Π°Π»Π°ΠΊΡ‚ΠΎΠ·ΠΈΠ΄ ΠΊΠ”Π° — ΠΊΠΈΠ»ΠΎΠ΄Π°Π»ΡŒΡ‚ΠΎΠ½ ΠšΠ” — ΠΊΡ€ΡƒΠ³ΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π΄ΠΈΡ…Ρ€ΠΎΠΈΠ·ΠΌ КЭМ — криоэлСктронная микроскопия МУР — ΠΌΠ°Π»ΠΎΡƒΠ³Π»ΠΎΠ²ΠΎΠ΅ рассСяниС ΠŸΠΠΠ“ — ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠ°ΠΊΡ€ΠΈΠ»Π°ΠΌΠΈΠ΄Π½Ρ‹ΠΉ гСль ПЦР — полимСразная цСпная рСакция РНК — рибонуклСиновая кислота ЭДВА — этилСндиаминтСтраацСтат натрия ЯМР — ядСрный ΠΌΠ°Π³Π½ΠΈΡ‚Π½Ρ‹ΠΉ рСзонанс E. coli — Escherichia coli gp — ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ Π³Π΅Π½Π°

PDB — Protein Data Bank, www.pdb.org

STEM — ΡΠΊΠ°Π½ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰Π°Ρ элСктронная трансмиссионная микроскопия SDS — Π΄ΠΎΠ΄Π΅Ρ†ΠΈΠ»ΡΡƒΠ»ΡŒΡ„Π°Ρ‚ натрия ts — Ρ‡ΡƒΠ²ΡΡ‚Π²ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ ΠΊ Ρ‚Π΅ΠΌΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Π΅ (temperature-sensitive)

ΠΠΊΡ‚ΡƒΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π»Π΅ΠΌΡ‹.

Для гСтСрологичСской ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ†ΠΈΠΈ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π² Π½Π°ΡƒΡ‡Π½Ρ‹Ρ…, мСдицинских ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹ΡˆΠ»Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… цСлях примСняСтся отработанная систСма экспрСссии Π² ΡΠ½Ρ‚Π΅Ρ€ΠΎΠ±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΈ Escherichia coli. ΠŸΡ€ΠΈ этом исслСдоватСли Π·Π°Ρ‡Π°ΡΡ‚ΡƒΡŽ ΡΡ‚Π°Π»ΠΊΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‚ΡΡ с ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π»Π΅ΠΌΠΎΠΉ образования нСрастворимых Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹Ρ… Π°Π³Ρ€Π΅Π³Π°Ρ‚ΠΎΠ² — Ρ‚Π΅Π» Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ. Π­Ρ‚Π° ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π»Π΅ΠΌΠ° особСнно Π°ΠΊΡ‚ΡƒΠ°Π»ΡŒΠ½Π° Π² ΡΠ»ΡƒΡ‡Π°Π΅ фибриллярных Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ², Ρ‚Π°ΠΊ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΠΎΠΌΠΈΠΌΠΎ принятия Π±Π΅Π»ΠΊΠ°ΠΌΠΈ ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΠ»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ Ρ‚Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΡ‡Π½ΠΎΠΉ структуры ΠΎΠ½ΠΈ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Ρ‹ ΠΈΠΌΠ΅Ρ‚ΡŒ ΠΈ Π½Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΡƒΡŽ Ρ‡Π΅Ρ‚Π²Π΅Ρ€Ρ‚ΠΈΡ‡Π½ΡƒΡŽ структуру. Π’Π°ΠΊΠΈΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ, ΠΊΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, ΠΎΠ±Ρ‹Ρ‡Π½ΠΎ склонны ΠΊ Π°Π³Ρ€Π΅Π³Π°Ρ†ΠΈΠΈ Π² ΡΠΈΠ»Ρƒ пСриодичности ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ΄Π°. Π Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΊΠ° эффСктивной стратСгии получСния ΠΎΠ»ΠΈΠ³ΠΎΠΌΠ΅Ρ€Π½Ρ‹Ρ… фибриллярных Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π² Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½ΠΎΠΌ Π²ΠΈΠ΄Π΅ являСтся Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎΠΉ практичСской Π·Π°Π΄Π°Ρ‡Π΅ΠΉ.

Π˜Π½Ρ‚Π΅Ρ€Π΅Ρ исслСдоватСлСй ΠΊ Ρ„ибриллярным Π±Π΅Π»ΠΊΠ°ΠΌ, ΠΌΠ΅Ρ…Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ°ΠΌ ΠΈΡ… ΡΠ²ΠΎΡ€Π°Ρ‡ΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΈ ΠΎΠ»ΠΈΠ³ΠΎΠΌΠ΅Ρ€ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠΈ обусловлСн рядом ΠΏΡ€ΠΈΡ‡ΠΈΠ½. Π’Π°ΠΊ, Π½Π°ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€, Π² ΠΌΠ΅Π΄ΠΈΡ†ΠΈΠ½Π΅ Π°ΠΊΡ‚ΡƒΠ°Π»ΡŒΠ½ΡƒΡŽ ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π»Π΅ΠΌΡƒ ΠΏΡ€Π΅Π΄ΡΡ‚Π°Π²Π»ΡΡŽΡ‚ собой ΠΈΠ΅ΠΉΡ€ΠΎΠ΄Π΅Π³Π΅Π½Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½Ρ‹Π΅ Π±ΠΎΠ»Π΅Π·Π½ΠΈ, Π²Ρ‹Π·Π²Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ Π½Π°ΠΊΠΎΠΏΠ»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π² Π½Π΅ΠΉΡ€ΠΎΠ½Π°Ρ… Π°Π³Ρ€Π΅Π³Π°Ρ‚ΠΎΠ² Π±Π΅Π»ΠΊΠ° — Π°ΠΌΠΈΠ»ΠΎΠΈΠ΄Π½Ρ‹Ρ… Ρ„ΠΈΠ±Ρ€ΠΈΠ»Π». Π˜Π·ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π΄Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… Ρ„ΠΈΠ±Ρ€ΠΈΠ»Π» in vitro, посрСдством получСния ΠΈΡ… Π² Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½ΠΎΠΌ Π²ΠΈΠ΄Π΅, нСсомнСнно, ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΠΈΡ‚ ΠΏΡ€ΠΈΠ±Π»ΠΈΠ·ΠΈΡ‚ΡŒΡΡ ΠΊ ΠΏΠΎΠ½ΠΈΠΌΠ°Π½ΠΈΡŽ процСссов ΠΈΡ… ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ. ΠŸΡ€ΠΈ Ρ€Π΅ΡˆΠ΅Π½ΠΈΠΈ пространствСнных структур фибриллярных Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² исслСдоватСлями Π·Π°Ρ‡Π°ΡΡ‚ΡƒΡŽ ΠΎΠ±Π½Π°Ρ€ΡƒΠΆΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‚ΡΡ Ρ€Π°Π½Π΅Π΅ Π½Π΅ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½Π½Ρ‹Π΅ структурныС Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½Ρ‹ — Ρ„ΠΎΠ»Π΄Ρ‹, Ρ‚Π΅ΠΌ самым вносится Π²ΠΊΠ»Π°Π΄ Π² ΡΡ‚Ρ€ΡƒΠΊΡ‚ΡƒΡ€Π½ΡƒΡŽ биологию. Π’ ΠΏΡ€ΠΎΡ†Π΅ΡΡΠ΅ ΡΠ²ΠΎΠ»ΡŽΡ†ΠΈΠΈ Ρ„Π°Π³ΠΈ Π²Ρ‹Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π»ΠΈ ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ спСцифичСски ΠΏΡ€ΠΈ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΠΈ фибриллярных Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Ρ€Π°ΡΠΏΠΎΠ·Π½Π°Π²Π°Ρ‚ΡŒ ΠΈ ΡΠ²ΡΠ·Ρ‹Π²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ с Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹ΠΌΠΈ структурами ΠΏΠ° ΠΏΠΎΠ²Π΅Ρ€Ρ…ности Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ. Π­Ρ‚ΠΈ свойства находят ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π² ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΠΈ Π½ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… Ρ€Π΅Π°Π³Π΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠΈ Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Ρ… сорбСнтов с Ρ‚Ρ€Π΅Π±ΡƒΠ΅ΠΌΡ‹ΠΌΠΈ характСристиками связывания.

Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΈΠ·Π±Π΅ΠΆΠ°Ρ‚ΡŒ образования Ρ‚Π΅Π» Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ ΠΏΡ€ΠΈ гСтСрологичСской экспрСссии, ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡŽΡ‚ Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Π΅ стратСгии: Ρ€Π΅Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³ нСрастворимого Π°Π³Ρ€Π΅Π³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° ΠΈΠ· Ρ‚Π΅Π» Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ, ΠΏΠΎΠ΄Π±ΠΎΡ€ ΡˆΡ‚Π°ΠΌΠΌΠΎΠ² E. coli ΠΈ ΡƒΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΠΉ экспрСссии, ΡƒΠ»ΡƒΡ‡ΡˆΠ°ΡŽΡ‰ΠΈΡ… Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³, Π΄Π΅Π»Π΅Ρ†ΠΈΠΎΠΏΠΈΡ‹ΠΉ ΠΌΡƒΡ‚Π°Π³Π΅Π½Π΅Π·, ΡΠΎΠ²ΠΌΠ΅ΡΡ‚Π½ΡƒΡŽ ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡŽ с ΡˆΠ°ΠΏΠ΅Ρ€ΠΎΠ½Π°ΠΌΠΈ ΠΈ Ρ€Π°Π·Π½Ρ‹Π΅ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²ΠΎ-ΠΈΠ½ΠΆΠ΅ΠΏΠ΅Ρ€ΠΈΡ‹Π΅ ΠΏΠΎΠ΄Ρ…ΠΎΠ΄Ρ‹. Одним ΠΈΠ· ΡΠΎΠ²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ² прСодолСния образования Ρ‚Π΅Π» Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ ΠΈ Π°Π³Ρ€Π΅Π³Π°Ρ†ΠΈΠΈ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ², синтСзируСмых E. coli, являСтся тСхнология создания Ρ…ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² (fusion technology). Π’ ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π° Π»Π΅ΠΆΠΈΡ‚ конструированиС ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄Ρ‹, ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰Π΅ΠΉ Π² Π½Π΅ΠΏΡ€Π΅Ρ€Ρ‹Π²Π½ΠΎΠΉ Ρ€Π°ΠΌΠΊΠ΅ считывания Π³Π΅Π½, состоящий ΠΈΠ· Π΄Π²ΡƒΡ… частСй. Одна Ρ‡Π°ΡΡ‚ΡŒ Ρ…ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π³Π΅Π½Π° ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡ€ΡƒΠ΅Ρ‚ Ρ†Π΅Π»Π΅Π²ΠΎΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ, Π° Π΄Ρ€ΡƒΠ³Π°Ρ — «Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ-ассистСнт», ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ΠΉ способствуСт ΠΊΠΎΡ€Ρ€Π΅ΠΊΡ‚Π½ΠΎΠΉ ΡƒΠΊΠ»Π°Π΄ΠΊΠ΅ Ρ†Π΅Π»Π΅Π²ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°, ΡƒΠ²Π΅Π»ΠΈΡ‡ΠΈΠ²Π°Π΅Ρ‚ Π΅Π³ΠΎ Ρ€Π°ΡΡ‚Π²ΠΎΡ€ΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΈ ΠΏΠΎΠ²Ρ‹ΡˆΠ°Π΅Ρ‚ ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π΅Π½ΡŒ экспрСссии ΠΈ Π²Ρ‹Ρ…ΠΎΠ΄ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚Π°.

ЦСль ΠΈ Π·Π°Π΄Π°Ρ‡ΠΈ исслСдования

.

ЦСлью нашСй Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹ являлась Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΊΠ° Π½ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΉ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ синтСза фибриллярных Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π² ΠΊΠΎΡ€Ρ€Π΅ΠΊΡ‚Π½ΠΎΠΌ ΠΎΠ»ΠΈΠ³ΠΎΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠΌ состоянии, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹Π΅ Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³Π°.

Для достиТСния Ρ†Π΅Π»ΠΈ Π±Ρ‹Π»ΠΈ поставлСны ΡΠ»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ Π·Π°Π΄Π°Ρ‡ΠΈ:

— Π‘ΠΎΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄Π½Ρ‹Ρ… конструкций, содСрТащих Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Ρ‹ Π³Π΅Π½Π° Π±Π΅Π»ΠΊΠ°-Π°Π΄Π³Π΅Π·ΠΈΠ½Π° g37 Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° Π’4 ΠΈ Π³Π΅Π½ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°-ассистСнта Π² ΠΎΠ±ΡŠΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ€Π°ΠΌΠΊΠ΅ считывания ΠΏΠΎΠ΄ ΠΎΠ±Ρ‰ΠΈΠΌ ΠΈΠ½Π΄ΡƒΡ†ΠΈΡ€ΡƒΠ΅ΠΌΡ‹ΠΌ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΠΎΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΌ.

— Π­ΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡ ΠΈ ΠΎΡ‡ΠΈΡΡ‚ΠΊΠ° Ρ…ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π½Ρ‹Ρ… Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ².

— Π˜ΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Ρ„ΠΈΠ·ΠΈΠΊΠΎ-химичСских ΠΈ Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΠΈΡ… свойств ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ΠΎΠ².

Научная Π½ΠΎΠ²ΠΈΠ·Π½Π° ΠΈ ΠΏΡ€Π°ΠΊΡ‚ичСская Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹.

Π’ Ρ€Π°ΠΌΠΊΠ°Ρ… Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹ Π½Π°ΠΌΠΈ Π²ΠΏΠ΅Ρ€Π²Ρ‹Π΅ Π±Ρ‹Π»Π° ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½Π° Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ использования Ρ‚Ρ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Ρ‚Π°-ΡΠΏΠΈΡ€Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π‘-ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π²ΠΎΠ³ΠΎ Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½Π° Π±Π΅Π»ΠΊΠ° базальной пластинки Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° Π’4 — gp5 для управлСния сворачиваниСм ΠΈ ΠΎΠ»ΠΈΠ³ΠΎΠΌΠ΅Ρ€ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ фибриллярных Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ². Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠΌ, Π½Π°ΠΌΠΈ Π±Ρ‹Π» ΠΎΠ±Π½Π°Ρ€ΡƒΠΆΠ΅Π½ ΠΈ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½ Π½ΠΎΠ²Ρ‹ΠΉ эффСктивный Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹ΠΉ Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½ — ассистСнт Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³Π°.

Π’ΠΏΠ΅Ρ€Π²Ρ‹Π΅ описана ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΏΠ΅ΠΏΡ‚Π½Π΄ΠΈΠ»-ΠΏΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠ»-ΠΈΠ·ΠΎΠΌΠ΅Ρ€Π°Π·Ρ‹ SLyD E. coli эффСктивно Π½Π°ΠΏΡ€Π°Π²Π»ΡΡ‚ΡŒ Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³ фибриллярных Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ², Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ Ρ€Π°ΡΡˆΠΈΡ€ΡΠ΅Ρ‚ ΡΡƒΡ‰Π΅ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ Π³Ρ€Π°Π½ΠΈΡ†Ρ‹ использования SLyD Π² ΠΊΠ°Ρ‡Π΅ΡΡ‚Π²Π΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°-Π°ΡΡΠΈΡΡ‚Π΅ΡˆΠ° Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³Π°.

ΠžΠΏΡ‹Ρ‚ использования Π΄Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²-ассистСнтов Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³Π° Π±ΡƒΠ΄Π΅Ρ‚ нСсомнСнно вострСбован Π² Π±ΠΈΠΎΡ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ, Ρ€Π°Π²Π½ΠΎ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΈ Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚анная Π½Π°ΠΌΠΈ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΈΠΊΠ° экспрСссии ΠΈ ΠΎΡ‡ΠΈΡΡ‚ΠΊΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π°Π΅ΠΌΡ‹Ρ… с ΠΈΡ… ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ Ρ…ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ².

Π’ ΠΊΠ°Ρ‡Π΅ΡΡ‚Π²Π΅ Ρ†Π΅Π»Π΅Π²ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° — ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»ΠΈ Π½Π°ΠΌΠΈ Π±Ρ‹Π» Π²Ρ‹Π±Ρ€Π°Π½ фибриллярный Π°Π΄Π³Π΅Π·ΠΈΠΈ Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° Π’4 — Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ gp37, ΠΈΠ³Ρ€Π°ΡŽΡ‰ΠΈΠΉ ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π²ΡƒΡŽ Ρ€ΠΎΠ»ΡŒ Π½Π° Π½Π°Ρ‡Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ стадии Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΠΈΠ½Ρ„Π΅ΠΊΡ†ΠΈΠΈ. Он ΡƒΠ·Π½Π°Π΅Ρ‚ спСцифичСскиС Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹Π΅ Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ Π½Π° ΠΏΠΎΠ²Π΅Ρ€Ρ…ности внСшнСй ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹ ΠΊΠΈΡˆΠ΅Ρ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΏΠ°Π»ΠΎΡ‡ΠΊΠΈ E.coli. ИсслСдованиС Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎ Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎΠ³ΠΎ участка gp37, ΠΎΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π΅Π³ΠΎ структуры ΠΈ ΠΌΠ΅Ρ…Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ° взаимодСйствия с Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€Π°ΠΌΠΈ E. coli прСдставляСт нСсомнСнный интСрСс ΠΊΠ°ΠΊ с Ρ„ΡƒΠ½Π΄Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ Ρ‚ΠΎΡ‡ΠΊΠΈ зрСния — для Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Π³Π»ΡƒΠ±ΠΎΠΊΠΎΠ³ΠΎ понимания процСсса Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΠΈΠ½Ρ„Π΅ΠΊΡ†ΠΈΠΈ, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΈ Ρ ΠΏΡ€Π°ΠΊΡ‚ичСскойнапримСр, для Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΊΠΈ тСст-систСм для типирования ΠΈ Π΄Π΅Ρ‚Π΅ΠΊΡ†ΠΈΠΈ Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΉ, Π° Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ биосСнсоров.

Для контроля биологичСской Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π°Π΅ΠΌΡ‹Ρ… ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ΠΎΠ² экспрСссии Π½Π°ΠΌΠΈ Π±Ρ‹Π»Π° Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π° новая ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΈΠΊΠ° ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΊΠΈ нативности Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π°Π΄Π³Π΅Π·ΠΈΠ½ΠΎΠ² Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³ΠΎΠ² in vivo, Π½Π° ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°-Π°Π΄Π³Π΅Π·ΠΈΠ½Π° Ρ„Π°Π³Π° Π’4 gp37.

ΠžΠ‘Π—ΠžΠ  Π›Π˜Π’Π•Π ΠΠ’Π£Π Π«.

1. ГстСрологнчСская экспрСссия Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π² ΡΠΈΡΡ‚Π΅ΠΌΠ΅ E.coli.

Для гСтСрологичСской ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ†ΠΈΠΈ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π² Π½Π°ΡƒΡ‡Π½Ρ‹Ρ…, мСдицинских ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹ΡˆΠ»Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… цСлях примСняСтся отработанная систСма экспрСссии Π² ΡΠ½Ρ‚Π΅Ρ€ΠΎΠ±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΈ Escherichia coli. Благодаря высокому Π²Ρ‹Ρ…ΠΎΠ΄Ρƒ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ†ΠΈΠΈ, нСвысокой стоимости ΠΈ Ρ…ΠΎΡ€ΠΎΡˆΠΎ ΠΎΡ‚Π»Π°ΠΆΠ΅Π½Π½Ρ‹ΠΌ тСхнологиям экспрСссии Π² ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΠΉ систСмС E. coli Π±Ρ‹Π»ΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΎ мноТСство Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² [1−4]. Однако, исслСдоватСли Π·Π°Ρ‡Π°ΡΡ‚ΡƒΡŽ ΡΡ‚Π°Π»ΠΊΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‚ΡΡ с ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π»Π΅ΠΌΠΎΠΉ образования нСрастворимых Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹Ρ… Π°Π³Ρ€Π΅Π³Π°Ρ‚ΠΎΠ² — Ρ‚Π΅Π» Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ. Для проявлСния биологичСской активности Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Π³Π½Ρ‹Π΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Ρ‹ ΠΏΡ€ΠΈΠ½ΡΡ‚ΡŒ свою ΡΠΏΠ΅Ρ†ΠΈΡ„ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΡƒΡŽ Π½Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΡƒΡŽ Ρ‚Ρ€Π΅Ρ…ΠΌΠ΅Ρ€Π½ΡƒΡŽ ΠΊΠΎΠ½Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠ°Ρ†ΠΈΡŽ (Ρ„ΠΎΠ»Π΄), ΠΎΠ±ΡƒΡΠ»ΠΎΠ²Π»Π΅Π½Π½ΡƒΡŽ ΠΏΠ΅Ρ€Π²ΠΈΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΈ Π²Ρ‚ΠΎΡ€ΠΈΡ‡Π½ΠΎΠΉ структурами Π±Π΅Π»ΠΊΠ°. Π€ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° — спонтанный процСсс, Π΄Π²ΠΈΠΆΠΈΠΌΡ‹ΠΉ Ρ€Π°Π·Π½ΠΈΡ†Π΅ΠΉ Π² ΡΠ½Π΅Ρ€Π³ΠΈΠΈ Гиббса ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ Π½Π°Ρ‚ΠΈΠ²ΠΏΡ‹ΠΌ ΠΈ Ρ€Π°Π·Π²Π΅Ρ€Π½ΡƒΡ‚Ρ‹ΠΌ (Π΄Π΅Π½Π°Ρ‚ΡƒΡ€ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹ΠΌ) состояниями Π±Π΅Π»ΠΊΠ°. Π€ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ ΠΎΡ‡Π΅Π½ΡŒ эффСктивным процСссом, ΠΈ Π½Π΅ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ ΠΏΡ€ΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Ρ‚ΡŒ Π½Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΡƒΡŽ ΠΊΠΎΠ½Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠ°Ρ†ΠΈΡŽ Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ миллисСкунд, Ρ‚ΠΎ Π΅ΡΡ‚ΡŒ фактичСски быстрСС, Ρ‡Π΅ΠΌ происходит биосинтСз Π½Π° Ρ€ΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠΌΠ΅. ΠžΠ±Ρ‹Ρ‡Π½ΠΎ, Π²ΠΏΡ€ΠΎΡ‡Π΅ΠΌ, Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³ происходит Π½Π°ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΠ΅Π΄Π»Π΅Π½Π½Π΅Π΅ Π² ΡΠ²ΡΠ·ΠΈ с Ρ‚Π΅ΠΌ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Π΅Ρ‚ Π² ΡΠ΅Π±Ρ ΠΈ ΠΌΠ΅Π΄Π»Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ этапы, Π½Π°ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€, ΠΈΠ·ΠΎΠΌΠ΅Ρ€ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΡŽ ΠΏΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠ½Π° [2]. Π’ Π΄Π΅ΠΉΡΡ‚Π²ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ рСакция ΠΈΠ·ΠΎΠΌΠ΅Ρ€ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠ½Π° Ρ„Π΅Ρ€ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°ΠΌΠΈ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π΄Π»ΠΈΡ‚ΡŒΡΡ ΠΎΡ‚ Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΈΡ… ΠΌΠΈΠ½ΡƒΡ‚ Π΄ΠΎ Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΈΡ… часов, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΎΠ½Π° Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Π΅Ρ‚ Π²Ρ€Π°Ρ‰Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π²ΠΎΠΊΡ€ΡƒΠ³ частично Π΄Π²ΠΎΠΉΠ½ΠΎΠΉ связи [5, 6]. Π’ Ρ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ·ΠΎΠ»Π΅ E. coli Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Π³Π½Ρ‹Π΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ, Π² Ρ‚ΠΎΠΌ числС ΠΈ Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ ΠΏΡ€ΠΈΡ€ΠΎΠ΄Ρ‹, Π½Π΅Ρ€Π΅Π΄ΠΊΠΎ Π½Π΅ ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ достаточно быстро ΠΏΡ€ΠΈΠ½ΡΡ‚ΡŒ Π½ΡƒΠΆΠ½Ρ‹ΠΉ Ρ„ΠΎΠ»Π΄, ΠΈ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΡƒΡŽΡ‚ Ρ‚Π΅Π»Π° Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ ΠΈΠ»ΠΈ нСрастворимыС Π°Π³Ρ€Π΅Π³Π°Ρ‚Ρ‹ [2]. ΠžΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Ρ‚Π΅Π» Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ in vivo происходит Π² ΡΠΈΠ»Ρƒ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π² Π³Π΅Ρ‚СрологичСской срСдС ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ΄Π½Ρ‹Π΅ Ρ†Π΅ΠΏΠΈ ΡΠΈΠ½Ρ‚Π΅Π·ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ постоянно ΠΈ Π°Π³Ρ€Π΅Π³ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ ΠΈΠ·-Π·Π° нСспСцифичСских взаимодСйствий ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ частично ΡƒΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΈΠ½Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠ΅Π΄ΠΈΠ°Ρ‚Π°ΠΌΠΈ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ-хозяина [7]. ЀибриллярныС Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ, Π² ΡΠΈΠ»Ρƒ пСриодичности ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ΄Π°, особСнно склонны ΠΊ Π°Π³Ρ€Π΅Π³Π°Ρ†ΠΈΠΈ [2, 4].

Π’ Π»ΠΈΡ‚Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Π΅ описано мноТСство ΠΏΠΎΠ΄Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΠΊ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΡŽ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π² Ρ€Π°ΡΡ‚Π²ΠΎΡ€ΠΈΠΌΠΎΠΌ Π²ΠΈΠ΄Π΅, основныС ΠΈΠ· ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Ρ… прСдставлСны Π½Π° Ρ€ΠΈΡΡƒΠ½ΠΊΠ΅ 1. Π˜Ρ… ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Ρ€Π°Π·Π΄Π΅Π»ΠΈΡ‚ΡŒ Π½Π° Π΄Π²Π΅ Π³Ρ€ΡƒΠΏΠΏΡ‹: Ρ€Π΅Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³ Ρ†Π΅Π»Π΅Π²Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΈΠ· Ρ‚Π΅Π» Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ, ΠΈ ΠΌΠΎΠ΄ΠΈΡ„икация экспрСссиониой стратСгии.

ΠŸΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ.

Π”ΠΠš.

Π’Π΅Π»Π° Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ.

Π Π΅Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³.

ΠœΠΎΠ΄ΠΈΡ„ΠΈΠΊΠ°Ρ†ΠΈΡ экспрСссиониой стратСгии.

Π‘Π΅Π· измСнСния ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ Π³Π΅Π½Π°:

β€’ Π²Π°Ρ€ΡŒΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Ρ‚Π΅ΠΌΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹ экслроссии.

β€’ Π²Π°Ρ€ΡŒΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ экспрСссионных ΡˆΡ‚Π°ΠΌΠΌΠΎΠ² Π²Π°Ρ€ΡŒΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ экспроссиамных срСд.

β€’ Ρ€Π΅Π³ΡƒΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ уровня транскрипции < совмСстная экспрСссия с ΡˆΠ°Π»ΠΎΡ€ΠΎΠΌΠ·ΠΌΠΈ.

β€’ Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΠΉ Ρ‚Π ΠΠš ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°Ρ€Π½Ρ‹Ρ… ΠΏΠ»Π°Π· ΠΌΠΈΠ΄.

Π‘ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ Π³Π΅Π½Π°:

β€’ экспрСссия Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² Π³Π΅Π½Π°.

β€’ созданиС Ρ…ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π½Ρ‹Ρ… конструкций.

β€’ стабилизации мРНК.

β€’ скрининг растворимых Π²Π°Ρ€ΠΈΠ°Π½Ρ‚ΠΎΠ².

β€’ Π°Π»ΡŒΡ‚Π΅Ρ€Π½Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½Ρ‹Π΅ Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ.

Рисунок 1. ΠžΡΠ½ΠΎΠ²Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΠΎΠ΄Ρ…ΠΎΠ΄Ρ‹ получСния растворимых Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΏΡ€ΠΈ экспрСссии Π² E.coli.

Π²Ρ‹Π²ΠΎΠ΄Ρ‹.

— Π˜ΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π² Π³Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅Ρ€ΠΈΠΈ Ρ‚Ρ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠΎΠ½Π½Ρ‹Ρ… Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½ΠΎΠ² Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ происхоТдСния способствуСт ΠΊΠΎΡ€Ρ€Π΅ΠΊΡ‚Π½ΠΎΠΌΡƒ Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³Ρƒ Ρ‚Ρ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π½Ρ‹Ρ… Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ².

— ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Ρ‹ биологичСски Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΡ€Π΅ΠΏΠ°Ρ€Π°Ρ‚Ρ‹ Π½Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½Ρ‹Ρ… Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ², Ρ‡Ρ‚ΠΎ подтвСрТдаСтся Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹ΠΌΠΈ биохимичСскими ΠΈ Ρ„ΠΈΠ·ΠΈΠΊΠΎ-химичСскими ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π°ΠΌΠΈ.

— ΠŸΠΎΡΡ€Π΅Π΄ΡΡ‚Π²ΠΎΠΌ Ρ„ΠΈΠ·ΠΈΠΊΠΎ-химичСских ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡŒΡŽΡ‚Π΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ модСлирования, ΠΏΠΎΠ΄Ρ‚Π²Π΅Ρ€ΠΆΠ΄Π΅Π½Π° оТидаСмая конформация экспрСссируСмых Π² Escherichia coli Ρ†Π΅Π»Π΅Π²Ρ‹Ρ… фибриллярных Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ².

— ΠžΡ‚работанная систСма экспрСссии ΠΈ ΠΎΡ‡ΠΈΡΡ‚ΠΊΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² пСрспСктивна для нСпосрСдствСнного использования Π² Π±ΠΈΠΎΡ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ.

ΠŸΠΎΠΊΠ°Π·Π°Ρ‚ΡŒ вСсь тСкст

Бписок Π»ΠΈΡ‚Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹

  1. Sorensen, H.P. and K.K. Mortensen, Advanced genetic strategies for recombinant protein expression in Escherichia coli. Journal of Biotechnology, 2005. 115(2): p. 113−128.
  2. Baneyx, F. and M. Mujacic, Recombinant protein folding and misfolding in Escherichia coli. Nat Biotechnol, 2004. 22(11): p. 1399−408.
  3. Eiteman, M.A. and E. Altman, Overcoming acetate in Escherichia coli recombinant protein fermentations. Trends in Biotechnology, 2006. 24(11): p. 530−536.
  4. De Bernardez Clark, E., et al., Oxidative renaturation of hen egg-white lysozyme. Folding vs aggregation. Biotechnol Prog, 1998. 14(1): p. 47−54.
  5. Schmid, F.X., Prolyl isomerases. Advan. Protein Chem., 2002. 59: p. 243−282.
  6. Schmid, F.X., et al., Prolyl isomerases: role in protein folding. Advan. Protein Chem., 1993.44: p. 25−66.
  7. Young, J.C., et al., Pathways of chaperone-mediated protein folding in the cytosol. Nat Rev Mol Cell Biol, 2004. 5(10): p. 781−91.
  8. Schein, C.H., Production of soluble recombinant proteins in bacteria. Nature Biotechnology, 1989. 7(11): p. 1141−1149.
  9. Vasina, J.A. and F. Baneyx, Expression of Aggregation-Prone Recombinant Proteins at Low Temperatures: A Comparative Study of theEscherichia coli cspAandtacPromoter Systems. Protein Expression and Purification, 1997. 9(2): p. 211−218.
  10. Kiefhaber, T., et al., Protein aggregation in vitro and in vivo: a quantitative model of the kinetic competition between folding and aggregation. Nature Biotechnology, 1991. 9(9): p. 825−829.
  11. Chesshyre, J.A. and A.R. Hipkiss, Low temperatures stabilize interferon a-2 against proteolysis in Methylophilus methylotrophus and Escherichia coli. Applied microbiology and biotechnology, 1989.31(2): p. 158−162.
  12. Mogk, A., M.P. Mayer, and E. Deuerling, Mechanisms of protein folding: molecular chaperones and their application in biotechnology. Chembiochem, 2002. 3(9): p. 807 814.
  13. Ferrer, M., et al., Chaperonins govern growth of Escherichia coli at low temperatures. Nature Biotechnology, 2003. 21(11): p. 1266.
  14. Ferrer, M., et al., Expression of a temperature-sensitive esterase in a novel chaperone-based Escherichia coli strain. Applied and environmental microbiology, 2004. 70(8): p. 4499−4504.
  15. Miroux, B. and J.E. Walker, Over-production of proteins in Escherichia coli: mutant hosts that allow synthesis of some membrane proteins and globular proteins at high levels. Journal of molecular biology, 1996. 260(3): p. 289−298.
  16. Steinfels, E., et al., Highly efficient over-production in E. coli ofYvcC, a multidrug-like ATP-binding cassette transporter from Bacillus subtilis. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Biomembranes, 2002.1565(1): p. 1−5.
  17. Smith, V.R. and J.E. Walker, Purification and folding of recombinant bovine oxoglutarate/malate carrier by immobilized metal-ion affinity chromatography. Protein Expression and Purification, 2003. 29(2): p. 209−216.
  18. Arechaga, I., et al., Over-expression of Escherichia coli FIFo-ATPase subunit a is inhibited by instability of the uncB gene transcript. FEBS Letters, 2003. 547(1−3): p. 97 100.
  19. Lehmann, K., et al., High-yield expression in Escherichia coli, purification, and characterization of properly folded major peanut allergen Ara h 2. Protein Expression and Purification, 2003. 31(2): p. 250−259.
  20. Premkumar, L., et al., An unusual halotolerant a-type carbonic anhydrase from the alga Dunaliella salina functionally expressed in Escherichia coli. Protein Expression and Purification, 2003. 28(1): p. 151−157.
  21. Bessette, P.H., et al., Efficient folding of proteins with multiple disulfide bonds in the Escherichia coli cytoplasm. Proceedings of the National Academy of Sciences, 1999. 96(24): p. 13 703.
  22. Weickert, M.J., et al., A mutation that improves soluble recombinant hemoglobin accumulation in Escherichia coli in heme excess. Applied and environmental microbiology, 1999. 65(2): p. 640−647.
  23. Deucrling, E., et al., Trigger factor and DnaK possess overlapping substrate pools and binding specificities. Molecular microbiology, 2003. 47(5): p. 1317−1328.
  24. Schlieker, C., B. Bukau, and A. Mogk, Prevention and reversion of protein aggregation by molecular chaperones in the E. coli cytosol: implications for their applicability in biotechnology. Journal of Biotechnology, 2002. 96(1): p. 13−21.
  25. Kuczynska-Wisnik, D., et al., The Escherichia coli small heat-shock proteins IbpA and IbpB prevent the aggregation of endogenous proteins denatured in vivo during extreme heat shock. Microbiology, 2002. 148(6): p. 1757−1765.
  26. Kitagawa, M., et al., Escherichia coli small heat shock proteins, IbpA and IbpB, protect enzymes from inactivation by heat and oxidants. European Journal of Biochemistry, 2002. 269(12): p. 2907−2917.
  27. Ikura, K., et al., Co-overexpression of folding modulators improves the solubility of the recombinant guinea pig liver transglutaminase expressed in Escherichia coli. Preparative Biochemistry and Biotechnology, 2002. 32(2): p. 189−205.
  28. Nishihara, K., et al., Overexpression of trigger factor prevents aggregation of recombinant proteins in Escherichia coli. Applied and environmental microbiology, 2000. 66(3): p. 884−889.
  29. Sorensen, H.P. and K.K. Mortensen, Soluble expression of recombinant proteins in the cytoplasm of Escherichia coli. Microbial cell factories, 2005. 4(1): p. 1.
  30. Dale, G.E., et al., Improving protein solubility through rationally designed amino acid replacements: solubilization of the trimethoprim-resistant type SI dihydrofolate reductase. Protein engineering, 1994. 7(7): p. 933−939.
  31. Farinas, E.T., T. Bulter, and F.H. Arnold, Directed enzyme evolution. Current Opinion in Biotechnology, 2001. 12(6): p. 545−551.
  32. Jacquet, A., et al., Expression of a Recombinant Toxoplasma gondii ROP2 Fragment as a Fusion Protein in Bacteria Circumvents Insolubility and Proteolytic Degradation. Protein Expression and Purification, 1999.17(3): p. 392−400.
  33. Davis, G.D., et al., New fusion protein systems designed to give soluble expression in Escherichia coli. Biotechnol Bioeng, 1999. 65(4): p. 382−8.
  34. Kapust, R.B. and D.S. Waugh, Escherichia coli maltose-binding protein is uncommonly effective at promoting the solubility ofpolypeptides to which it is fused. Protein Sei, 1999. 8(8): p. 1668−74.
  35. Sorensen, H.P., H.U. Sperling-Petersen, and K.K. Mortensen, A favorable solubility partner for the recombinant expression of streptavidin. Protein Expression and Purification, 2003. 32(2): p. 252−259.
  36. Waldo, G.S., et al., Rapid protein-folding assay using green fluorescent protein. Nat Biotechnol, 1999. 17(7): p. 691−5.
  37. Baneyx, F., Recombinant protein expression in Escherichia coli. Current Opinion in Biotechnology, 1999.10(5): p. 411−421.
  38. Stevens, R.C., Design of high-throughput methods of protein production for structural biology. Structure, 2000. 8(9): p. R177-R185.
  39. Smith, D.B. and K.S. Johnson, Single-step purification of polypeptides expressed in Escherichia coli as fusions with glutathione S-transferase. Gene, 1988. 67(1): p. 31−40.
  40. LaVallie, E.R., et al., A thioredoxin gene fusion expression system that circumvents inclusion body formation in the E. coli cytoplasm. Biotechnology (N Y), 1993. 11(2): p. 187−193.
  41. Eliseev, R., A. Alexandrov, and T. Gunter, High-yield expression and purification of p!8 form of Bax as an MBP-fusion protein. Protein Expression and Purification, 2004. 35(2): p. 206−209.
  42. Smyth, D.R., et al., Crystal structures offusion proteins with large-affinity tags. Protein science, 2003.12(7): p. 1313−1322.
  43. Goh, L.L., et al., Soluble expression of a functionally active Plasmodium falciparum falcipain-2 fused to maltose-binding protein in Escherichia coll Protein Expression and Purification, 2003. 32(2): p. 194−201.
  44. Pedelacq, J.D., et al., Engineering and characterization of a superfolder green fluorescent protein. Nat Biotechnol, 2006. 24(1): p. 79−88.
  45. Tdcno, A., et al., Expression of foreign proteins in Escherichia coli by fusing with an archaeal FK506 binding protein. Applied microbiology and biotechnology, 2004. 64(1): p. 99−105.
  46. Scholz, Π‘., et al., Functional Solubilization of Aggregation-prone HIV Envelope Proteins by Covalent Fusion with Chaperone Modules. Journal of Molecular Biology, 2005. 345(5): p. 1229−1241.
  47. Han, K.Y., et al., Solubilization of aggregation-prone heterologous proteins by covalent fusion of stress-responsive Escherichia coli protein, SlyD. Protein Eng Des Sei, 2007. 20(11): p. 543−9.
  48. Scholz, Π‘., et al., SlyD proteins from different species exhibit high prolyl isomerase and chaperone activities. Biochemistry, 2006. 45(1): p. 20−33.
  49. Bhardwaj, A., et al., Foldon-guided self-assembly of ultra-stable protein fibers. Protein Sei, 2008. 17(9): p. 1475−85.
  50. Tao, Y., et al., Structure of bacteriophage T4 fibritin: a segmented coiled coil and the role of the C-terminal domain. Structure, 1997. 5(6): p. 789−98.
  51. Π›Π΅Ρ‚Π°Ρ€ΠΎΠ², A.B., et al., ΠšΠ°Ρ€Π±ΠΎΠΊΡΠΈΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π²ΠΎΠΉ Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½ ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠΈΡ€ΡƒΠ΅Ρ‚ Ρ‚Ρ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΡŽ ΠΈ Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³ Ρ„ΠΈΠ±Ρ€ΠΈΡ‚ΠΈΠ½Π° Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° Π’4. Биохимия, 1999. 64: Ρ€. 817−823.
  52. Boudko, S.P., et al., Domain organization, folding and stability of bacteriophage T4 fibritin, a segmented coiled-coilprotein. Eur J Biochem, 2002. 269(3): p. 833−41.
  53. Miroshnikov, K.A., et al., Engineering trimeric fibrous proteins based on bacteriophage T4 adhesins. Protein Eng, 1998. 11(4): p. 329−32.
  54. ΠœΠΈΡ€ΠΎΡˆΠ½ΠΈΠΊΠΎΠ², K.A., et al., Врансформация beta-структурного Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π° Π°Π΄Π³Π΅Π·ΠΈΠ½Π° Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° Π’4 Π² Π°1рНа-ΡΠΏΠΈΡ€Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ ΡΡ‚Π°Π±ΠΈΠ»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ /ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€. Биохимия, 2000. 65: Ρ€. 1600−1606.
  55. Frank, S., et al., Stabilization of short collagen-like triple helices by protein engineering. Journal of Molecular Biology, 2001. 308(5): p. 1081−1089.
  56. Stetefeld, J., et al., Collagen stabilization at atomic level: crystal structure of designed (GlyProPro) 1 Ofoldon. Structure, 2003. 11(3): p. 339−46.
  57. Yang, X., et al., Highly stable trimers formed by human immunodeficiency virus type 1 envelope glycoproteins fused with the trimeric motif of T4 bacteriophage fibritin. J Virol, 2002. 76(9): p. 4634−42.
  58. Sissoeff, L., et al., Stable trimerization of recombinant rabies virus glycoprotein ectodomain is required for interaction with the p75NTR receptor. J Gen Virol, 2005. 86(Pt 9): p. 2543−52.
  59. Papanikolopoulou, K., et al., Formation of highly stable chimeric trimers by fusion of an adenovirus fiber shaft fragment with the foldon domain of bacteriophage t4 fibritin. J Biol Chem, 2004. 279(10): p. 8991−8.
  60. Papanikolopoulou, K., et al., Adenovirus Fibre Shaft Sequences Fold into the Native Triple Beta-Spiral Fold when N-terminally Fused to the Bacteriophage T4 Fibritin Foldon Trimerisation Motif. Journal of Molecular Biology, 2004. 342(1): p. 219−227.
  61. Papanikolopoulou, K., M.J. Raaij, and A. Mitraki, Creation of Hybrid Nanorods From Sequences of Natural Trimeric Fibrous Proteins Using the Fibritin Trimerization Motif2008. p. 15−33.
  62. Seo, H.-S., et al., Functional fusion mutant of Candida antarctica lipase B (CalB) expressed in Escherichia coli. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) Proteins & Proteomics, 2009. 1794(3): p. 519−525.
  63. Weininger, U., et al., NMR Solution Structure of SlyD from Escherichia coli: Spatial Separation of Prolyl Isomerase and Chaperone Function. Journal of Molecular Biology, 2009. 387(2): p. 295−305.
  64. Roof, W.D. and R. Young, Phi XI74 lysis requires slyD, a host gene which is related to the FKBP family of peptidyl-prolyl cis-trans isomerases. FEMS Microbiol Rev, 1995. 17(1−2): p. 213−8.
  65. Roof, W.D., et al., Mutational analysis of slyD, an Escherichia coli gene encoding a protein of the FKBP immunophilin family. Mol Microbiol, 1997. 25(6): p. 1031−46.
  66. Bernhardt, T.G., W.D. Roof, and R. Young, The Escherichia coli FKBP-type PPIase SlyD is required for the stabilization of the E lysis protein of bacteriophage phi XI74. Mol Microbiol, 2002. 45(1): p. 99−108.
  67. Mendel, S., et al., Interaction of the transmembrane domain of lysis protein E from bacteriophage phiXl 74 with bacterial translocase MraY and peptidyl-prolyl isomerase SlyD. Microbiology, 2006. 152(Pt 10): p. 2959−67.
  68. Roof, W.D., et al., slyD, a host gene required for phi X174 lysis, is related to the FK506-binding protein family of peptidyl-prolyl cis-trans-isomerases. J Biol Chem, 1994. 269(4): p. 2902−10.
  69. Martino, L., et al., The interaction of the Escherichia coli protein SlyD with nickel ions illuminates the mechanism of regulation of its peptidyl-prolyl isomerase activity. FEBS J, 2009.276(16): p. 4529−44.
  70. Mitterauer, T., et al., Metal-dependent nucleotide binding to the Escherichia coli rotamase SlyD. Biochem J, 1999. 342 (Pt 1): p. 33−9.
  71. Hottenrott, S., et al., The Escherichia coli SlyD is a metal ion-regulated peptidyl-prolyl cis/trans-isomerase. J Biol Chem, 1997. 272(25): p. 15 697−701.
  72. Zhang, J.W., et al., A role for SlyD in the Escherichia coli hydrogenase biosynthetic pathway. J Biol Chem, 2005. 280(6): p. 4360−6.
  73. Hesterkamp, T., et al., Escherichia coli trigger factor is a prolyl isomerase that associates with nascent polypeptide chains. Proc Natl Acad Sei USA, 1996. 93(9): p. 4437−41.
  74. Patzelt, H., et al., Binding specificity of Escherichia coli trigger factor. Proc Natl Acad Sei U S A, 2001. 98(25): p. 14 244−9.
  75. Leach, M.R., J.W. Zhang, and D.B. Zamble, The role of complex formation between the Escherichia coli hydrogenase accessory factors HypB and SlyD. J Biol Chem, 2007. 282(22): p. 16 177−86.
  76. Mukherjee, S., A. Shukla, and P. Guptasarma, Single-step purification of a protein-folding catalyst, the SlyD peptidyl prolyl isomerase (PPI), from cytoplasmic extracts of Escherichia coli. Biotechnol Appl Biochem, 2003. 37(Pt 2): p. 183−6.
  77. Wulfing, C., J. Lombardero, and A. Pluckthun, An Escherichia coli protein consisting of a domain homologous to FK506-binding proteins (FKBP) and a new metal binding motif. J Biol Chem, 1994. 269(4): p. 2895−901.
  78. Knappe, T.A., et al., Insertion of a Chaperone Domain Converts FKBP12 into a Powerful Catalyst of Protein Folding. Journal of Molecular Biology, 2007. 368(5): p. 1458−1468.
  79. Graubner, W., A. Schierhorn, and T. Bruser, DnaKplays a pivotal role in Tat targeting of CueO and functions beside SlyD as a general Tat signal binding chaperone. J Biol Chem, 2007. 282(10): p. 7116−24.
  80. Kanamaru, S., et al., Structure of the cell-puncturing device of bacteriophage T4. Nature, 2002. 415(6871): p. 553−7.
  81. Nakagawa, II., F. Arisaka, and S. Ishii, Isolation and characterization of the bacteriophage T4 tail-associated lysozyme. J Virol, 1985. 54(2): p. 460−6.
  82. Rossmann, M.G., et al., The bacteriophage T4 DNA injection machine. Curr Opin Struct Biol, 2004.14(2): p. 171−80.
  83. Leiman, P.G., et al., Three-dimensional rearrangement of proteins in the tail of bacteriophage T4 on infection of its host. Cell, 2004. 118(4): p. 419−29.
  84. Wood, W.B., Undelivered summary remarks for the 1974 Squaw Valley meeting on assembly mechanisms. J Supramol Struct, 1974. 2(2−4): p. 512−4.
  85. Hohn, B., et al., Phage lambda DNA packaging, in vitro. J Supramol Struct, 1974. 2(2−4): p. 302−17.
  86. Kaiser, D., M. Syvanen, and T. Masuda, Processing and assembly of the head of bacteriophage lambda. J Supramol Struct, 1974. 2(2−4): p. 318−28.
  87. Kikuchi, Y. and J. King, Genetic control of bacteriophage T4 baseplate morphogenesis. I. Sequental assambly of the major precursor, in vivo and in vitro. J. Mol. Biol., 1975. 99: p. 645−672.
  88. Eisrling, F.A. and L.W. Black, Pathway in T4 morphogenesis in Molecular biology of bacteriophage T4 (eel. J. Karam). American Society for Microbiology. Washington, D.C., 1994: p. 209−212.
  89. Kutter, E., G. Mosig, and. Genomic maps of bacteriophage T4 in Genetic Maps. Cold Spring Harbor Laboratory Press: Cold Spring Harbor, 1993: p. 1−27.
  90. Bradley, D.E., The structure ofcoliphages. J. Gen. Microbiol., 1963. 31: p. 435−445.
  91. Edgar, R.S. and I. Liclausis, Temperature-sensitive mutants of bacteriophage T4D: their isoltion and genetic characterization. Genetics, 1964. 52: p. 649−660.
  92. Epstein, R.H., et al., Physiological studies of conditional lethal mutants of bacteriophage T4D. Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol., 1964. 28: p. 375−392.
  93. Kellenberger, E., et al., Functiones and properties related to the tail fibers of bacteriophage T4. Virology, 1965. 26: p. 419−440.
  94. Yanagida, M. and C. Ahmad-Zadeh, Determination of gene product positions in bacteriophage T4 by specific antibody association. J Mol Biol., 1970. 51: p. 411−21.
  95. Cummins, D.J., V.A. Chapman, and S.S. De Long, Disruption ofT-even bacteripohage by dimeilsulfoxid. J. Virol., 1968. 2: p. 610−617.
  96. Van Vunakis, II., W.K. Baker, and K. Brown, Structural studies on the protein of bacteriophages. I. Alkaline dissociation of the protein coat «ghost» of bacteriophage T2. Virology, 1958: p. 327−332.
  97. Williams, R.C. and D. Fraser, Structural and functional differentiation in T2 bacteripohage. Virology, 1956. 2: p. 289−297.
  98. Edgar, R.S. and W.B. Wood, Morphogenesis of bacteriophage T4 in extracts of mutant-infected cells. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1966. 55: p. 498−505.
  99. Wood, W.B., Bacteriophage T4 morphogenesis as a model for assembly of subcellular structure. Q. Rev. Biol., 1980. 55: p. 353−367.
  100. Edgar, R.S. and I. Lielausis, Some steps in the assambly of bacteriophage T4. J. Mol. Biol., 1968. 32: p. 263−271.
  101. King, J., Bacteriophage T4 tail assembly: four steps in core formation. J. Mol. Biol., 1971. 58: p. 693−709.
  102. Wood, W.B., Bacteriophage T4 assambly and the morphogenesis of subcellular structure. Harvey Lect., 1979. 73: p. 203−223.
  103. Laemmli, U.K., J.R. Paulson, and J. Hitchins, Maturation of the head of bacteriophage T4. J. Supramol. Struct, 1974. 2: p. 276−301.
  104. Black, L.W., M.K. Shovve, and A.C. Steven, Morphogenesis of the T4 head in Molecular biology of bacteriophage T4 (ed. J. Karam). American Society for Microbiology. Washington, D.C., 1994: p. 218−258.
  105. Kellenberger, E., Studies on the morphogenesis of the head of phage T-even. V. The components of the T4 capsid and of other, capsid-related structures. Virology, 1968. 34: p. 549−61.
  106. Kikuchi, Y. and J. King, Genetic control of bacteriophage T4 baseplate morphogenesis. II. Mutants unable to form the central part of the baseplate. J. Mol. Biol., 1975. 99: p. 673−694.
  107. Kikuchi, Y. and J. King, Genetic control of bacteriophage T4 baseplate morphogenesis. III. Formation of the central plug and overall assembly pathway. J. Mol. Biol., 1975.99: p. 695−716.
  108. Meezan, E. and W.B. Wood, The sequence of gene product interaction in bacteriophage T4 tail core assembly. J. Mol. Biol., 1971. 58: p. 685−692.
  109. King, J., Assembly of the tail of bacteriophage T4. J. Mol. Biol., 1968. 32: p. 231−262.
  110. King, J. and N. Mykolajewycz, Bacteriophage T4 tail assembly: proteins of the sheath, core and baseplate. J. Mol. Biol., 1973. 75: p. 339−358.
  111. Kostyuchenko, V.A., et al., Three-dimensional structure of bacteriophage T4 baseplate. Nat Struct Biol, 2003. 10(9): p. 688−93.
  112. Crowther, R.A., et al., Molecular reorganization in the hexagon to star transition of the baseplate of bacteriophage T4. J Mol Biol, 1977. 116(3): p. 489−523.
  113. Liljas, L., Virus assembly. Curr Opin Struct Biol, 1999. 9(1): p. 129−34.
  114. Thomassen, E., et al., The structure of the receptor-binding domain of the bacteriophage T4 short tail fibre reveals a knitted trimeric metal-binding fold. J Mol Biol, 2003.331(2): p. 361−73.
  115. Crowther, R.A., Mutants of bacteriophage T4 that produce infective fibreless particles. J Mol Biol, 1980.137(2): p. 159−74.
  116. Kostyuchenko, V.A., et al., The structure of bacteriophage T4 gene product 9: the trigger for tail contraction. Structure, 1999. 7(10): p. 1213−22.
  117. Yamamoto, M. and H. Uchida, Organizaton and function of the tail of bacteriophage T4. Structural control of the tail contraction. J. Mol. Biol., 1973. 92: p. 207 223.
  118. Yamamoto, M. and H. Uchida, Organization and function of bacteriophage T4 tail. Isolation of heat-sensitive mutations. Virology 1973. 52: p. 234−245.
  119. Simon, L.D., J.G. Swan, and J.E. Flatgaart, Functional defects in T4 bacteriophage lacking the gene 11 and 12 products. Virology, 1970. 41: p. 77−90.
  120. Crawford, J.T. and E.B. Goldberg, The effect of baseplate mutation on the requirement for tail-fiber binding for irreversible adsorption on bacteriophage T4. J. Mol. Biol., 1977. Ill: p. 305 -313.
  121. Beckendorf, S.K., Structure of bacteriophage T4 genes 37 and 38. J.Mol.Biol., 1973. 73: p. 17−35.
  122. Dawes, J., Characterization of bacteriophage T4 receptor site. Nature, 1975. 256: p. 332−338.
  123. Brenner, F., G. Stuisiunger, and R.W. Hoene, Structural components of bacteriophage T4. J.Mol.Biol., 1959. 1: p. 281−292.
  124. Π“ΠΎΠ»ΠΈΡ†Ρ‹Π½Π°, H.JI., et al., Π’Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ биологичСски Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½Ρ‹Ρ… ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠ²ΠΈΠ½ΠΎΠΊ Π΄Π»ΠΈΠ½Π½Ρ‹Ρ… хвостовых Ρ„ΠΈΠ±Ρ€ΠΈΠ»Π» ΠΈ Π±Π°ΠΊΠ΅Π½Π±Π°Ρ€Π΄ Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° Π’4. Π‘ΠΈΠΎΠ». Науки, 1983. 114: Ρ€. 2732.
  125. Π‘Π΅Π»ΠΈΠ²Π°Π½ΠΎΠ², Н.А., et al., Π‘Ρ‚Ρ€ΡƒΠΊΡ‚ΡƒΡ€Π° ΠΈ Ρ€Π΅Π³ΡƒΠ»ΡΡ†ΠΈΡ сборки фибриллярных Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° Π’4. Π’Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ ΡΠΏΠ΅ΠΊΡ‚Ρ€Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ свойства Π΄Π»ΠΈΠ½Π½Ρ‹Ρ… хвостовых Ρ„ΠΈΠ±Ρ€ΠΈΠ». МолСк. биология, 1987. 21: Ρ€. 1258 1267.
  126. Wood, W.B., F.A. Eiserling, and R.A. Crowther, Long tail fibers: genes, proteins, structure, and assembly" in Bacteriophage T4 (Karam J.D., ed.). American society for microbiology, Washington D.C., 1994: p. 282−290.
  127. Earnshaw, W.G., E.B. Goldberg, and E.A. Crowther, The distal half of the tail fiber of the bacteriophage T4. Rigidly linked domains and cross b — structure. J. Mol. Biol., 1979. 132: p. 101−131.
  128. Oliver, D.B. and R.A. Crowther, DNA sequence of the tail fibre genes 36 and 37 of bacteriophage T4. J. Mol. Biol., 1989. 153: p. 545 568.
  129. Dickson, R.C., Assembly of bacteriophage T4. J.Mol. Biol., 1970. 53: p. 633−647.
  130. Laemmli, U.K., Cleavage of structural protein during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature, 1970. 227: p. 680 685.
  131. King, J. and U.K. Laemmli, Polypeptide of the tail fibres of bacteriophage T4. J. Mol. Biol., 1971. 62: p. 465−477.
  132. Cerritelli, M.E., et al., Stoichiometry and domainal organization of the long tail-fiber of bacteriophage T4: a hinged viral adhes in. J. Mol. Biol., 1996. 260: p. 767−780.
  133. Ward, S. and R.C. Dickson, Assembly of bacteriophage T4 tail fibers. Genetic control of the major tail fiber polypeptides. J. Mol. Biol., 1971. 62: p. 479 492.
  134. Makhov, A.M., et al., Filamentous hemagluttinin of Bordetella pertussis: A bacterial adhesin formed as a 50-nm monomeric rigid rod based on a 19-residue repeat motif rich in beta-strands and turns. J.Mol.Biol., 1994. 241: p. 110−124.
  135. Steinbacher, S., et al., Crystal structure ofP22 tailspike protein: inter digitated subunits in a thermostable trimer. Science, 1994. 265: p. 383−386.
  136. Stouten, P.F.W., et al., New triple-helical model for the shaft of the adenovirus fibre. J. Mol. Biol., 1992. 226: p. 1073−1084.
  137. Makhov, A.M., et al., The short tail fiber of bacteriophage T4: Molecular structure and a mechanism for its conformational transition. Virology, 1993. 194: p. 117- 127.
  138. Michel, C.J., et al., A remarkable amino acid sequence homology between a phage T4 tail fibre protein and ORF314 of phage lambda located in the tail operon. Genetics, 1986. 44: p. 147- 150.
  139. Bartual, S.G., et al., Structure of the bacteriophage T4 long tail fiber receptor-binding tip. Proc Natl Acad Sei USA, 2010.107(47): p. 20 287−92.
  140. Montag, D., H. Schwarz, and U. Henning, Receptor-recognizing proteins T-even type bacteriophages. Constant and hypervariable regions and an unusual case of evolution. J. Mol. Biol., 1987.196: p. 165 174.
  141. Tetart, F., et al., Bacteriophage T4 host range is expanded by duplications of a small domain of the tail fiber adhesin. J. Mol. Biol., 1996. 258: p. 726 731.
  142. Trojet, S.N., et al., The gp38 Adhesins of the T4 Superfamily: A Complex Modular Determinant of the Phage’s Host Specificity. Genome biology and evolution, 2011. 3: p. 674.
  143. Sambrook, R. and D.W. Russel, Molecular Cloning: A Laboratory Manual 3d ed. Cold Spring Harbor, N.Y., Cold Spring Harbor Lab. Press, 2001.
  144. Maniatis, T., Molecular cloning: a laboratory manual/J. Sambrook, EF Fritsch, T. Maniatis 1989: New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press.
  145. William Studier, F., et al., 6. Use of T7 RNA polymerase to direct expression of cloned genes. Methods in enzymology, 1990. 185: p. 60−89.
  146. Cleveland, D.W., et al., Peptide mapping by limited proteolysis in sodium dodecyl sulfate and analysis by gel electrophoresis. Journal of Biological Chemistry, 1977. 252(3): p. 1102.
  147. Provencher, S.W. and J. Glockner, Estimation of globular protein secondary structure from circular dichroism. Biochemistry, 1981. 20(1): p. 33−7.
  148. Venyaminov, S.Y., et al., Circular dichroic analysis of denatured proteins: inclusion of denatured proteins in the reference set. Analytical biochemistry, 1993. 214(1): p. 1724.
  149. Sreerama, N. and R.W. Woody, A self-consistent method for the analysis of protein secondary structure from circular dichroism. Analytical biochemistry, 1993. 209(1): p. 32−44.
  150. Lebowitz, J., M.S. Lewis, and P. Schuck, Modem analytical ultracentrifugation in protein science: a tutorial review. Protein science, 2002. 11(9): p. 2067−2079.
  151. Timofeev, V., et al., X-ray investigation of gene-engineered human insulin crystallized from a solution containing polysialic acid. Acta Crystallographica Section F: Structural Biology and Crystallization Communications, 2010. 66(3): p. 259−263.
  152. Svergun, D., A. Semenyuk, and L. Feigin, Small-angle-scattering-data treatment by the regularization method. Acta Crystallographica Section A: Foundations of Crystallography, 1988. 44(3): p. 244−250.
  153. Chertkov, O., et al., Properties of the peptidoglycan-degrading enzyme of the Pseudomonas aeruginosa UPMG1 bacteriophage. Russian Journal of Bioorganic Chemistry, 2011. 37(6): p. 732−738.
  154. Kelley, L.A., R.M. MacCallum, and M.J.E. Sternberg, Enhanced genome annotation using structural profiles in the program 3D-PSSM. Journal of molecular biology, 2000. 299(2): p. 501−522.
  155. , Π‘.Π’., ВосстановлСниС Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΡ‹ наночастгщы ΠΏΠΎ Ρ€Π΅ΡˆΠ΅Π½ΠΈΡŽ прямой ΠΈ ΠΎΠ±Ρ€Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΉ Π·Π°Π΄Π°Ρ‡ ΠΌΠ°Π»ΠΎΡƒΠ³Π»ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ рассСяния для Π΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡ‡Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠΎΡ‚Π΅Π½Ρ†ΠΈΠ°Π»Π° ΠΎΠ³Ρ€Π°Π½ΠΈΡ‡Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π² ΠΎΠ±ΡŠΠ΅ΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΡ€Π°. Π–ΡƒΡ€Π½Π°Π» ΡΠΊΡΠΏΠ΅Ρ€ΠΈΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ ΠΈ Ρ‚СорСтичСской Ρ„ΠΈΠ·ΠΈΠΊΠΈ, 2009. 135(4): Ρ€. 721−737.
  156. Svergun, D.I., et al., New developments in direct shape determination from small-angle scattering 2. Uniqueness. Acta Crystallogr., 1996. 52: p. 419−426.
  157. Svergun, D.I., Restoring low resolution structure of biological macromolecules from solution scattering using simulated annealing. Biophys J, 1999. 76(6): p. 2879−86.
  158. Petoukhov, M.V. and D.I. Svergun, New methods for domain structure determination ofproteins from solution scattering data. Journal of applied crystallography, 2003. 36(3): p. 540−544.
  159. Wriggers, W., Using Situs for the integration of multi-resolution structures. Biophysical reviews, 2010. 2(1): p. 21−27.
Π—Π°ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡ‚ΡŒ Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΡƒ Ρ‚Π΅ΠΊΡƒΡ‰Π΅ΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΎΠΉ