Получение и экспериментальная оценка новых пищевых источников органических форм цинка

Концепция оптимального питания предполагает в качестве одного из важнейших условий сохранения здоровья человека адекватную обеспеченность его организма как макро, так и микронутриентами, в том числе и эссенциальными микроэлементами. При этом предполагается не только необходимое количественное содержание микроэлементов в пище, но также их соответствующие химические формы и физиологически обоснованные соотношения с другими компонентами пищи, наиболее полно удовлетворяющие потребности организма.

Цинк наряду с железом, медью, селеном, йодом, марганцем, молибденом, хромом и кобальтом относится к эссенциальным микроэлементам, массовая доля которых в организме человека составляет Биохимические механизмы действия цинка связаны с участием в построении и функционировании более 200 ферментов, катализирующих различные метаболические процессы, включающие синтез и распад углеводов, жиров, белков и нуклеиновых кислот. Неадекватная обеспеченность организма данным микроэлементом приводит к задержке роста, развития, полового созреванияснижению иммунитета, репродуктивной функциинарушениям кроветворения, вкуса и обоняниярепарации ран и другим нарушениям [1, 66, 111, 127]. На основании балансовых исследований, проведенных специалистами ФАО в 176 странах, Международная консультативная группа по цинку в питании (International Zinc Nutrition Consultative Group) сделала заключение, что около 20% населения мира имеют риск неадекватной обеспеченности цинком [136] с учетом имеющихся сведений по усвоению цинка из наиболее употребляемых продуктов питания в данной стране. Согласно данным эпидемиологических исследований в ряде регионов Российской Федерации выявлена высокая частота встречаемости недостаточной обеспеченности цинком, особенно у детского населения [12, 26, 28].

Соответственно весьма актуальной является задача профилактики и диетической коррекции недостаточной обеспеченности этим эссенциальным для организма человека микроэлементом путем использования в питании специализированных обогащенных продуктов и биологически активных добавок (БАД) к пище — дополнительных источников цинка. При этом фактическое содержание цинка, как и других микроэлементов, в диете без учета его биологической доступности (химической формы, содержания других компонентов в пище, способствующих или препятствующих его усвоению) не является показателем объективной оценки адекватной обеспеченности пищи минеральными микронутриентами [63, 130]. В связи с тем, что обогащение пищевых продуктов микронутриентами является серьезным вмешательством в традиционно сложившуюся структуру питания человека, к дополнительным пищевым (и часто нетрадиционным) источникам эссенциальных микроэлементов должны предъявляться повышенные требования, обеспечивающие как их полную безопасность, так и достаточную эффективность.

Известно, что цинк из продуктов животного происхождения усваивается намного лучше, чем из растительных источников. Главным диетическим фактором, препятствующим усвоению цинка из растительной пищи, являются фитаты. Значение молярного отношения фитатыщинк в диете, превышающее 15, сопряжено с нарушением статуса цинка у обследуемого контингента населения [85]. Эффективным фактором, способствующим лучшему усвоению цинка организмом, является белок животного происхождения, а также аминокислоты и пептиды [1, 19, 86], с которыми цинк может образовывать растворимые и достаточно устойчивые комплексы. В повседневной жизни человек потребляет эссенциальные микроэлементы, в том числе и цинк, в составе растительных и животных продуктов, в связи с этим представляется целесообразным обогащать рационы питания именно органическими формами цинка. Одним из возможных вариантов решения проблемы поиска таких новых пищевых источников эссенциальных микроэлементов, к которым относится цинк, является его комплексирование с аминокислотами и пептидами в составе ферментативных гидролизатов пищевых белков.

Целью данной работы явились получение новых пищевых источников органических форм цинка, их комплексная физико-химическая, физиолого-биохимическая характеристика и экспериментальная оценка возможности использования этих пищевых источников для профилактики и диетической коррекции недостаточности данного микроэлемента.

Основные задачи исследования.

1. Оптимизировать условия ферментативного гидролиза пищевых белков (концентрата белков коровьего молока, белка куриного яйца, изолята соевых белков) для дальнейшего использования ферментолизатов при получении новых пищевых источников цинка.

2. Получить комплексы ферментативных гидролизатов вышеперечисленных пищевых белков с цинком, охарактеризовать молекулярно-массовое распределение пептидных фракций в составе комплексов и определить в них содержание цинка.

3. В исследовании in vitro оценить антигенные свойства ферментативных гидролизатов пищевых белков и их комплексов с цинком.

4. Количественно охарактеризовать протекание реакции системной анафилаксии к модельному антигену — овальбумину у крыс, получавших с кормом комплексы цинка с ферментативными гидролизатами пищевых белков.

5. Охарактеризовать всасывание и ретенцию цинка в форме комплекса с ферментативным гидролизатом белков коровьего молока у лабораторных животных (крыс) в условиях недостаточного потребления этого микроэлемента.

6. Дать сравнительную оценку эффективности потребления лабораторными животными (крысами), предварительно получавшими цинкдефицитный корм, органической формы цинка — комплекса ферментативного гидролизата белков коровьего молока с этим микроэлементом и сульфата цинка.

Научная новизна.

Определены оптимальные условия ферментативного гидролиза пищевых белков (концентрата белков коровьего молока, белка куриного яйца, изолята соевых белков) для их последующего комплексирования с цинком в целях получения новых пищевых источников этого микроэлемента.

Охарактеризовано молекулярно-массовое распределение пептидных фракций в составе комплексов ферментативных гидролизатов пищевых белков с цинком и определено фракционное содержание этого микроэлемента.

В опытах in vitro установлено практически полное отсутствие в составе комплексов ферментативных гидролизатов пищевых белков с цинком антигенных детерминант, взаимодействующих с антителами к пищевым белкам в сыворотках крови детей, страдающих пищевой непереносимостью.

В опытах in vivo установлено, что длительный пероральный прием комплексов цинка с ферментативными гидролизатами пищевых белков не влияет на тяжесть проявлений реакций системной анафилаксии у лабораторных животных (крыс), многократно сенсибилизированных модельным антигеном (анафилактогеном) — овальбумином.

Количественно охарактеризованы всасывание и ретенция органического соединения цинка — его комплекса с ферментативным гидролизатом белков коровьего молока у лабораторных животных (крыс) в условиях недостаточного потребления ими этого микроэлемента.

Дана сравнительная оценка эффективности использования нового пищевого источника органической формы цинка (его комплекса с ферментативным гидролизатом белков коровьего молока) и сульфата цинка в восстановительном" питании крыс, предварительно получавших в течение 14 дней цинкдефицитный полусинтетический корм.

Практическая значимость.

Предложенные для лабораторных условий схемы проведения процессов ферментативного гидролиза пищевых белков (концентрата белков коровьего молока, белка куриного яйца, изолята соевых белков) могут быть использованы для разработки схем промышленного получения пищевых ферментативных гидролизатов перечисленных белков. Полученные таким способом ферментативные гидролизаты при комплексировании с цинком представляют собой новые пищевые источники органических форм этого микронутриента.

Высокое содержание в составе полученных комплексов цинка и отсутствие сенсибилизирующих и аллергизирующих свойств свидетельствуют о возможных перспективах их использования в целях алиментарной профилактики случаев недостаточной обеспеченности этими микронутриентами детского и взрослого населения. На примере органического соединения цинка — его комплекса с ферментативным гидролизатом белков коровьего молока предложен и апробирован метод оценки всасывания и ретенции микроэлемента в опытах на лабораторных животных (крысах). Метод может найти своё применение для характеристики биодоступности различных пищевых источников микрои макроэлементов.

Апробация работы.

Основные положения и результаты работы были представлены и обсуждены на XIII международной конференции «Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармакологии и экологии», Украина, Крым, Ялта-Гурзуф, 2005 г.- на 7-ом Международном Славяно-Балтийском научном форуме «Санкт-Петербург — Гастро 2005" — на XI Российской гастроэнтерологической неделе, Москва, 2005 г.- на VIII Всероссийском конгрессе «Оптимальное питание — здоровье нации», Москва, 2005гна I Всероссийском съезде диетологов и нутрициологов «Диетология: проблемы и горизонты», Москва, 2006.

Публикации.

По результатам работы опубликовано 5 статей в рецензируемых научных журналах и 5 публикаций в сборниках научных трудов.

Объем и структура диссертации.

Диссертационная работа состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследования, заключение и выводы. Указатель литературы содержит 33 российских и 108 зарубежных источников. Диссертация изложена на 109 страницах машинописного текста, включает 24 таблицы и 8 рисунков.

ВЫВОДЫ.

1. В лабораторных условиях получены новые пищевые источники органических форм эссенциального микроэлемента — цинка. Схема получения включает ферментативный (одно или двухстадийный) гидролиз пищевых белков, мембранную ультрафильтрацию получаемых гидролизатов, их комплексирование с этим микроэлементом с последующей нанофильтрацией и сушкой.

2. Определение молекулярно-массового распределения пептидных фракций и содержания цинка в составе комплексов с ферментативными гидролизатами белков коровьего молока, белка куриного яйца и изолята соевых белков показало, что основная часть цинка прочно связывается с фракцией относительно коротких пептидов в диапазоне молекулярных масс 0,5−1,4 кД.

3. В условиях in vitro с использованием сыворотки крови детей, страдающих различными формами пищевой непереносимости, не выявлено наличия антигенных свойств у вышеперечисленных комплексов цинка с ферментативными гидролизатами пищевых белков.

4. Показано отсутствие потенциально аллергизирующего влияния новых пищевых источников органической формы цинка — комплекса этого микроэлемента с ферментолизатами пищевых белков при использовании модели системной анафилаксии в опытах на лабораторных животных (крысах).

5. При 11-ти дневном потреблении крысами цинкдефицитного полусинтетического корма одноразовое пероральное введение им цинка в составе нового пищевого источника — комплекса цинка с ферментативным гидролизатом белков коровьего молока характеризуется величиной кажущейся абсорбции — 76%, ретенцией -72% и эффективной ретенцией — 94%, что свидетельствует о высокоэффективном всасывании и усвоении этого микроэлемента.

6. При содержании лабораторных животных (крыс) на цинкдефицитном корме в течение 28 суток имеет место существенное отставание в росте массы тела животных, а также достоверное снижение содержания цинка в костной ткани и активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови на 30% и 33% соответственно. После 2-х недельного потребления крысами цинкдефицитного корма введение в их корм органически связанной формы цинка — комплекса этого микроэлемента с ферментативным гидролизатом белков коровьего молока приводит к восстановлению массы тела и уровня цинка в костной ткани значительно более эффективно по сравнению с сульфатом цинка.

5.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Проведенное в нашей работе исследование связано с реализацией положений, выдвигаемых концепцией оптимального питания. Продолжая и одновременно развивая основные положения теории рационального питания А. А. Покровского и теории адекватного питания A.M. Уголева, концепция оптимального питания предполагает необходимость адекватного обеспечения организма человека как макро, так и микронутриентами. Не вызывает сомнений эссенциальность для организма человека и животных ряда микроэлементов. С позиций доказательной медицины соответственно установлено, что при дефиците (недостаточности) этих микроэлементов в рационе человека имеет место снижение резистентности к неблагоприятным факторам окружающей среды (феномен маладаптации), формированию иммунодефицитных состояний, нарушению функции систем антиоксидантной защиты, хронизации болезней, повышению риска развития распространенных заболеваний, снижению качества жизни эффективности лечебных мероприятий. Концепция оптимального питания констатирует, что у современного человека имеет место недостаточное поступление с пищей микронутриентов, в том числе и эссенциальных микроэлементов, вследствие снижения энерготрат и соответственно уменьшения общего количества потребляемой пищи. Негативное влияние на обеспеченность населения эссенциальными микроэлементами пищи оказывают также новые интенсивные технологии, используемые в сельском хозяйстве (как в земледелии, так и животноводстве) и современные способы переработки пищевой продукции. Положение о регулярном потреблении пищевых продуктов, обогащенных витаминами и минеральными веществами как важнейшем факторе оптимизации питания и здоровья человека является научным обоснованием разработки, широкого производства и использования в питании населения новых пищевых источников этих биологически активных веществ. Оптимальное питание предъявляет жесткие требования к форме, в которой искомое биологически активное соединение находится в составе нового пищевого источника. Правила соответствия химического состава пищи ферментным взаимоотношениям организма на всех уровнях её ассимиляции, сформулированные академиком А. А. Покровским, концепция оптимального питания детализирует по отношению к определенным микронутриентам, в первую очередь эссенциальным микроэлементам. Констатируется целесообразность использования в питании человека органических форм эссенциальных микроэлементов, так как на протяжении эволюции человека как вида, преимущественно органические соединения этих микронутриетов потреблялись им в составе растительной и животной пищи. Эффективным способом, позволяющим получать в широких масштабах пищевые источники органических соединений эссенциальных микроэлементов, является наукоёмкое биотехнологическое производство. Как уже отмечалось нами ранее, одним из возможных биотехнологических подходов к получению органических форм эссенциальных микроэлементов-переходных металлов является их комплексирование с пептидными структурами, образующимися в результате ферментативного гидролиза белков.

Данное исследование было посвящено получению в лабораторных условиях, экспериментальной физико-химической, иммунохимической характеристике, а также физиолого-биохимической и аллергологической оценке в опытах in vivo и in vitro новых пищевых источников органической формы цинка — комплексов этого микроэлемента с ферментативными гидролизатами пищевых белков.

Выбор цинка в качестве объекта исследования определился, во-первых, его эссенциальностью для организма человека, во-вторых, недостаточной обеспеченностью населения, в том числе и детей этим микроэлементов в некоторых регионах РФ и зарубежных стран [12, 28, 47, 49, 92] и, в третьих, способностью к комплексообразованию с пептидами и свободными аминокислотами в составе белковых гидролизатов.

Известны разработки, согласно которым цельный и/или слабо гидролизованный белок в смеси с неорганическими соединениями микроэлементов подвергается гомогенизации Полученные по такой технологии продукты имеют плохую растворимость, низкую устойчивость и значительное количество микроэлементов в составе таких продуктов может находиться в исходной неорганической форме. Ферментативный гидролиз, проводимый в оптимальных условиях, позволяет перевести белковый материал в хорошо растворимые пептидно-аминокислотные смеси, что увеличивает возможности связывания микроэлемента с органическим лигандом. При этом возможно получать пептидные структуры с заданным профилем молекулярно-массового распределения без изменения конфигурации аминокислот.

Традиционно используемые в питании белки коровьего молока, куриного яйца и изоляты соевых белков, были выбраны нами для проведения ферментативного гидролиза с целью дальнейшего использования ферментолизатов для комплексирования с цинком. Представлялось целесообразным дать сравнительную физико-химическую и иммунохимическую характеристику получаемых комплексов цинка с пептидными фрагментами, образующимися в результате ферментолиза пищевых белков.

На первом этапе исследования в целях оптимизации ферментативного гидролиза пищевых белков нами были апробированы схемы однои двухстадийного гидролиза с варьированием фермент-субстратного соотношения, времени гидролиза, изменения рН реакционной среды и последовательности применения ферментных препаратов.

По результатам проведенных экспериментов для получения ферментативного гидролизата белков коровьего молока выбрана одностадийная схема гидролиза «Панкреатином» в концентрации 2% от массы белка в течение 3 часов при температуре 50 °C и рН 7,5.

Существенно более трудоёмким оказался метод эффективного гидролиза белка куриного яйца. Проведение предварительной термической денатурации белка куриного яйца при значении рН 9,6, температуре 80 °C в течение 25 минут с последующим использованием двухстадийной схемы гидролиза («Флавоэнзимом» при рН значении рН 6,5 в течение 22 часов и «Панкреатином» — рН 7,5 в течение 5 часов) позволило получить гидролизат с высоким содержанием низкомолекулярных пептидов. В полученном продукте доля пептидов молекулярной массы менее 2,1 кД составила более 60%.

Двухстадийный ферментативный гидролиз изолята соевых белков (ИСБ) с применением на первой стадии ферментного преарата «Флавоэнзим» приводил к полной элиминации белковых структур с молекулярными массами более 28 кД с переходом более 90% белка в раствор. В гидролизате ИСБ, полученном с использованием на первой стадии ферментного препарата «Флавоэнзим» (рН 6,5, температура 50 °C, 22 часа) и на второй стадии «Панкреатина» (рН 7,5, температура 50 °C, 5 часов) в концентрациях соответственно 5 и 3% от массы ИСБ, доля фракции с молекулярной массой менее 4 кД составила более 70% с минимальными потерями исходного белка.

Таким образом, применение двухстадийной схемы ферментативного гидролиза с помощью ферментных препаратов «Флавоэнзим» и «Панкреатин» позволило получить гидролизаты белков куриного яйца и изолята соевых белков, молекулярно-массовое распределение пептидных фракций в которых близко к таковым гидролизата белков коровьего молока, получаемого по одностадийной схеме гидролиза «Панкреатином». Предварительная термическая денатурация белка куриного яйца перед гидролизом существенно влияла на гидролизуемость субстрата. Полученные нами ферментативные гидролизаты пищевых белков характеризовались высоким содержанием низкомолекулярных пептидных структур.

Для использования в качестве лиганда при получении комплексов цинка с ферментативными гидролизатами пищевых белков (Zn-ФГПБ) целесообразно использовать низкомолекулярные пептидные структуры, так как с ними комплексообразование катионов цинка должно протекать более эффективно. Мембранные технологии позволяют проводить разделение высокои низкомолекулярных пептидных фракций гидролизата и получать их в концентрированном виде. Поэтому в дальнейшей работе для получения образцов комплексов гидролизатов пищевых белков с цинком использовали ультрафильтраты вышеназванных белковых гидролизатов. Тем не менее в дальнейшем изложении нами, использумый при получении комплексов ультрафильтрат будет называться нами гидролизатом.

Схема получения комплексов включала инкубацию неорганической соли микроэлемента с гидролизатами (ультрафильтратами) пищевых белков в определенных массовых соотношениях в водной среде при значении рН 7,1 в течение 1 часа при комнатной температуре. Далее не связавшиеся с пептидными фрагментами катионы удаляли с использованием нанофильтрацииконцентрированные растворы комплексов Zn-ФГПБ лиофильно высушивали. Полученные комплексы цинка с ферментативными гидролизатами всех трех пищевых белков характеризовались высоким содержанием этого микроэлемента: 72,2- 89,6- 68,9 мг/г сухой массы комплекса Zn-ФГБКМ, Zn-ФГБКЯ и Zn-ФГИСБ соответственно и хорошей растворимостью в воде.

Проведение хроматографического фракционирования комплексов Zn-ФГПБ на колонке «Superose 12» с использованием буфера с рН 6,5 (0,2 М NaCl, содержащий азид натрия) показало, что преобладающей формой ЭМ в составе полученных продуктов являются его комплексы с относительно короткими пептидами. Количество ЭМ, включенного во фракцию свободных аминокислот и не связанных с белком ионов (выходящую в области УПОЛн колонки) относительно мало. Значительное количество цинка в составе комплексов Zn-ФГПБ сосредоточено в области коротких пептидов в диапазоне молекулярных масс менее 1,4 кД.

Прежде, чем перейти к исследованиям in vivo на лабораторных животных для предварительного обоснования возможности безопасного использования полученных комплексов в питании человека, нами было проведено тестирование антигенных (и соответственно потенциально аллергенных) свойств комплексов Zn-ФГПБ в составе микроэлементных премиксов in vitro. Предпосылкой для такого исследования послужило положение о том, что a priori нельзя исключать сенсибилизирующую активность комплексов ЭМ с белками и пептидами. В работе проводили определение IgG-антител в сыворотках крови детей к трем микроэлементным премиксам, каждый из которых содержал в своем составе наряду с комплексом Zn-ФГПБ дополнительно три комплекса ФГПБ с Си, Мп и Сг (табл. 7). Полученные результаты свидетельствовали об очень низкой антигенности комплексов в составе премиксов (особенно по сравнению с исходными белками, которые подвергались ферментолизу). Действительно, если в сыворотках крови больных детей (104 ребенка) антитела к белку коровьего молока выявлялись в 97% случаев, при этом в сыворотках 34% больных в диагностическом титре (более 1:1500), то антитела к премиксу, содержащему Zn-ФГБКМ, не были обнаружены ни в одной из сывороток больных и лишь в одной сыворотке крови выявлены антитела в титре >1:100 к ФГБКМ.

При тестировании антител к микроэлементному премиксу, содержащему Zn-ФГБКЯ, только в сыворотке 1 больного ребенка из 85 больных детей выявлены антитела в титре >1:100 к исходному ФГБКЯ, а антитела к собственно Zn-ФГБКЯ в составе премикса отсутствовали в сыворотках всех больных детей. Антитела к белку куриного яйца (овальбумину) присутствовали более чем в половине сывороток крови больных детей, причем в диагностическом титре (более 1:1800) у 8% обследованных.

Аналогичные данные, полученные при тестировании сывороток крови 85 больных детей, на наличие антител к ФГИСБ и микроэлементному премиксу, содержащему Zn-ФГИСБ, также свидетельствуют об отсутствии антител к гидролизату и к премиксу на его основе. При этом в сыворотках крови 6% больных детей присутствовали антитела к не гидролизованному изоляту белка сои. Поскольку в состав обычных пищевых продуктов, потребляемых больными (мясные, молочные продукты, рыба, овощи и др.) Zn входит преимущественно в виде комплексов с белками, то в случае наличия у таких комплексов сенсибилизирующих свойств антитела к ним должны были бы выявляться, во всяком случае, у больных с поливалентными формами пищевой сенсибилизации.

Следующим этапом наших исследований явилось тестирование в опытах in vivo возможных проявлений микроэлементными премиксами, содержащими в своем составе комплекс Zn-ФГПБ, иммуномодулирующих свойств, влияющих на аллергическую реактивность организма, с использованием модели системной анафилаксии на крысах. Данная модель позволила оценить влияние корма, обогащенного Zn-ФГПБ в составе микроэлементного премикса, на тяжесть анафилактического шока и уровень циркулирующих специфических антител к овальбумину куриного яйца у сенсибилизированных этим белком крыс. В результате проведенного исследования для всех трех комплексов микроэлементных премиксов, содержащих в составе Zn-ФГПБ, не выявлено достоверного усиления аллергической чувствительности (тяжесть анафилактического шока и уровень циркулирующих специфических антител к овальбумину) у животных, сенсибилизированных «посторонним» модельным аллергеномовальбумином куриного яйца. При этом в случае использования премикса, содержащего Zn-ФГБКЯ, отмечено даже некоторое снижение аллергической реактивности, которое, однако, не достигает уровня статистической достоверности. Ни один из тестируемых продуктов не влиял значимым образом на гуморальный иммунный ответ к модельному антигену, как это видно из данных, представленных в табл. 19, 20, 21 .

Таким образом, совокупность результатов определения антител к микроэлементным премиксам, — содержащим в своем составе комплексы Zn-ФГПБ, — в сыворотках крови детей, страдающих пищевой непереносимостью поливалентного типа, а также проведенного исследования влияния данных микроэлементных премиксов на степень сенсибилизации и протекание реакции анафилаксии у лабораторных животных, дает основание полагать, что изучаемые премиксы безопасны с позиции возможного аллергизирующего (сенсибилизирующего) действия.

Основными показателями при оценке биодоступности нутриентов являются показатели их всасывания и ретенции в организме, а также эффективность включения в метаболические процессы [130]. Достаточно высокую эффективность всасывания и усвояемости, нового пищевого источника органической формы цинка подтверждают данные, полученные при исследовании всасывания и ретенции цинка в составе комплекса Zn-ФГБКМ крысами, получавшими предварительно в течение 11 суток базовый цинкдефицитный полусинтетический корм. При однократном пероральном приеме комплекса Zn-ФГБКМ были определены высокие кажущиеся коэффициенты всасывания, ретенции и эффективной ретенции цинка, значения которых составили в %, соответственно 75,8±9,4- 71,9±9,6 и 94,4±1,3.

Важнейшим завершающим этапом работы явились исследования в эксперименте эффективности использования Zn-ФГПБ комплексов для диетической профилактики и/или коррекции недостаточной обеспеченности цинком лабораторных животных (крыс). Животные с четырехнедельным нормальным обеспечением цинком в составе полусинтетического корма, введенного в форме Zn-ФГБКМ в течение 4 недель (табл. 23, группа № 1), имели лучшие ростовые показатели по сравнению с животными, получавшими базовый цинкдефицитный корм в течение того же времени группа № 2). Двухнедельное «восстановительное» введение Zn-ФГБКМ в количестве 12 мг Zn/кг корма в базовый цинкдефицитный корм нормализовало ростовые показатели у животных, получавших прежде в течение двух недель цинкдефицитный базовый корм (табл. 23, группа № 3). У животных, содержавшихся предварительно в течение 2-х недель на цинкдефицитном корме, и получавших затем в последующие 2 недели добавку сульфата, прирост массы тела достоверно различался как от животных группы № 1, так и группы № 3.

Качественно сходные результаты получены и по накоплению цинка в костной ткани: двухнедельное «восстановление» животных на диете с добавлением в базовый полусинтетический корм комплекса ФГБКМ приводит к практически полной нормализации содержания цинка в бедренной кости по сравнении с крысами, содержавшимися на «восстановительном» корме с добавлением сульфата цинка.

Об эффективности усвоения и включения цинка в метаболические процессы, протекающие в организме животных, получавщих этот ЭМ в составе нового пищевого источника судили также, определяя активность цинк зависимого фермента — щелочной фосфатазы сыворотки крови. Четырёхнедельное потребление крысами цинкдефицитного корма приводило к существенному снижению активности этого фермента по сравнению со значениями, отвечающими нормальной обеспеченности животных цинком. В случае двухнедельного восполнения корма Zn-ФГБКМ отмечена тенденция к повышению активности щелочной фосфатазы в сыворотке по сравнению с уровнем этого фермента у животных, получавших цинкдефицитный корм в течение 4 недель, но не достигала уровня активности щелочной фосфатазы у животных групп №№ 1 и 4.

Таким образом, совокупность результатов, полученных в экспериментальных условиях как in vitro, так и in vivo свидетельствует о перспективности использования для профилактики и диетической коррекции недостаточности цинка новых пищевых источников органических форм этого микроэлемента — его комплексов с ферментативными гидролизатами пищевых белков.