Состояние процессов свободнорадикального окисления в ткани предстательной железы при простатите

Актуальность проблемы. Хронический простатит (ХП) представляет собой наиболее распространенное воспалительное заболевание предстательной железы. По данным Российских ученых ХП страдают 20−43% мужчин и является самой распространенной патологией в амбулаторнойпрактике уролога*. (Аполихит О.И., 2002; Капто A.A., 2006). Простатит поражает мужчин молодого и среднего возраста, то есть наиболее сексуально активных и работоспособных, и может привести к нарушению копулятивной и генеративной функций (Лоран О.Б. и Сегал A.C., 2002; Мазо Е. Б., 2004; Schaeffer А., 2003). У всех больных существенно снижается качество жизни, на которое влияет не только проявления заболевания, но и сопутствующие психопатологические, сексуальные расстройства, возможная семейная и социальная дезадаптация (Сегал A.C. и соавт., 2004): Ряд исследователей полагают, что абактериальный ХП в 8 раз более распространен, чем его бактериальная форма, составляющая около* 10% всех случаев (Bushman W., 2000): Хотя есть публикации, оспаривающие это мнение и приводящие данные о больших случаях бактериальной формы ХП (Камалов A.A., 2006; Лямин Б. А., 2002). Такие противоречивые данные об эпидемиологии ХП обусловлены несовершенством-методов диагностики различных форм данного заболевания и отсутствием единого мнения в вопросах патогенеза и классификации воспалительных заболеваний предстательной железы.

Это во многом связано с трудностью моделирования-экспериментального простатита. Основной проблемой является полиэтиологичность заболевания, сложность доступа к предстательной железе. Существующие экспериментальные модели не позволяют детально изучить патогенез заболевания, являются высокотравматичными. Изученные патогенетические факторы воспаления предстательной железы не дают ответа на вопрос о причинах хронизации данного процесса. Остается недостаточно освещенными характер изменения патоморфологических изменений предстательной железы при длительно протекающем хроническом воспалительном процессе и различных способах лечения.

Нет абсолютно совершенных диагностических критериев, позволяющих судить о возникновении патологического процесса в предстательной железе. При всем многообразии диагностических методов исследования существует проблема взаимосвязи клинических симптомов с диагностическими критериями в разных стадиях ХП. Остается неизученным вопрос о характере изменений в тканипредстательной железы под влиянием различных видов лечения.

ХП во многих случаях представляет трудную задачу, как для диагностики, так и для лечения. При лечении затянувшихся простатитов неудачи встречаются тем чаще, чем большевремени прошло от момента заболевания. Само по себе лечение хронического простатита не может привести к быстрому восстановлению функций предстательной* железы, нормализации ее микроциркуляции и секрета. Для этого требуется довольно продолжительный период реабилитации. В настоящее время еще нет единого подхода к лечению ХП, в особенности неинфекционного (Сивков A.B. и соавт., 2004; Мазо Е. Б., 2004). Применяемая традиционная лекарственная терапия не всегда дает желаемый результат, т.к. эпителий и капсула предстательной железы представляют собой ткани с развитыми биологическими барьерами.

Исследования последних лет указывают на изменения процессов сво-боднорадикального окисления в секрете предстательной железы у людей, страдающих хроническим простатитом (Божедомов В.А. и др., 2009). Однако степень и характер нарушения СРО его влияние на течение заболевания остаются под вопросом. В здоровом организме сохраняется равновесие в системе оксиданты — антиоксиданты. Поддержание окислительно-восстановительных реакций на стационарном уровне обеспечивается действием согласованной антиоксидантной системы. Одним из вероятных факторов возникновения хронического процесса может быть нарушение процессов перекисного окисления липидов в ткани предстательной железы (Серегин С.П., 1997).

В настоящее время существует большое количество методов оценки состояния антиоксидантной системы. Широкое использование получили хеми-люминесцентные (XJI) методы исследования. Регистрацию XJI используют для изучения свободнорадикального окисления, характера и причин его нарушения в биологическом материале растительного и природного происхождения (Байматов В.Н., Фархутдинов P.P., Багаутдинов A.M., 2009). Исследуя* XJI биосубстратов, можно судить о СРО в организме, органах и тканях.

Цель исследования. Разработать экспериментальную модель простатита на самцах белых крыс, изучить морфо-функциональные характеристики воспалительного процесса в предстательной железе животных и сопоставить их с клинико-лабораторными проявлениями-простатита у мужчин при различных вариантах лечения.

Задачи исследования:

1. Разработать экспериментальную модель простатита, доказать правомочность использования предлагаемого’способа моделирования воспаления предстательной железы.

2. Сопоставить морфо-функциональные проявления экспериментального простатита у животных с изменением процессов свободнорадикального окисления в предстательной железе.

3. Провести «пробную терапию» в группах лабораторных животных с применением антибактериальных и антиоксидантых препаратов, дать сравнительный анализ различных вариантов лечения, оценить патогенетическую значимость оксидативного стресса и возможность использования его показателей в качестве дополнительного маркера воспаления и контроля экспериментальной терапии.

4. Сопоставить клинико-лабораторные показатели, характеризующие воспалительный процесс у больных с хроническим простатитом с состоянием свободнорадикального окисления в эякуляте.

5. Провести патогенетически ориентированное лечение хронического простатита, направленное на коррекцию оксидативного стресса и воспалительной реакции с комплексным применением а-токоферола и антибактериальной терапии, оценить возможность использования исследования состояния^ свободнорадикального окисления в эякуляте, больных для1 характеристики воспалительного процесса и дополнительного маркера излеченности.

Научная, новизна. Впервые разработана экспериментальная' модель острого простатита с применением эндоуретрального введения детергента. Уточнены патоморфологические изменения, в предстательной железе при остром простатите у экспериментальных животных. Впервые проведен сравнительный анализ состояния свободнорадикального окисления и морфологических изменений ткани предстательной железы при экспериментальном простатите и различных вариантах его лечения. В эксперименте на' животных обосновано и предложено исследование свободнорадикального окисления в ткани предстательной железы, как маркеравоспаления и необходимости применения антиоксидантов. в комплексной терапии простатита. Уточнен характер изменений состояния свободнорадикального окисления в эякуляте пациентов с хроническим простатитом, выявлена зависимость данного процесса от выраженности воспаления и различных вариантов лечения. Предложены и апробированы подходы к патогенетически ориентированному лечению хронического простатита с учетом роли свободнорадикального окисления.

Практическая значимость результатов исследований. Внедрена в практику экспериментальная модель острого простатита на животных. Рекомендован экспресс-метод оценки состояния свободнорадикального окисления в гомогенате предстательной железы экспериментальных животных, заключающийся в определении интегральных показателей суммарной антиок-сидантной активности гомогената в модельной системе, генерирующей активные формы кислорода, и спонтанного люминолзависимого свечения гомоге-ната, позволяющая определить выраженность воспаления, изучить эффективность различных вариантов лечения. В эксперименте на животных патогенетически обоснованны показания к применению антиоксидантов всочетании с антибиотиками.

У больных с хроническим простатитом рекомендовано учитывать изменения СРО в эякуляте, — как дополнительного диагностического критериявоспаления и при необходимости включать в комплексное лечение антиоксидан-ты. Результаты проведенных исследований характера изменений СРО * при" г различных вариантах лечения ХП способны оказать содействие практическому здравоохранению в определении медико-экономических стандартов лечения данного заболевания.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Предложена модель экспериментального простатита, которая дает I возможность изучить биометрические показатели, гистологическую картину и характер изменений свободнорадикального окисления в предстательной желе-1 зе, влияние различных лекарственных препаратов.

2. Воспалительный процесс в предстательной железе сопровождается ок-сидативным стрессом в виде усиления генерации активных форм кислорода на фоне снижения уровня суммарной антиоксидантной активности в гомогенате предстательной железы в эксперименте на животных, а таюке изменением процессов свободнорадикального окисления в эякуляте больных, что может служить дополнительным маркером воспаления.

3. Выявленные нарушения свободнорадикального окисления в гомогенате предстательной железы экспериментальных животных и эякуляте пациентов позволяют обосновать тактику лечения с комплексным применением антибиотиков и антиоксидантов, направленную на коррекцию воспалительного процесса и оксидативного стресса. Хемилюминесцентные методы исследования гомогената предстательной железы экспериментальных животных и эякулята у мужчин, дают возможность получить объективные данные об эффективности проводимых лечебных мероприятий.

Внедрение результатов исследования. Предложена экспериментальная модель острого простатита. На основании проведенных исследований показана роль нарушений свободнорадикального окисления в ткани предстательной железы в патогенезе заболевания. В результате анализа различных вариантов лечения экспериментального" простатита обоснована необходимость антиоксидантной терапии для восстановления антиоксидантной защиты в ткани предстательной железы и коррекции воспалительного процесса.

Предложен в практическую деятельность врачей-урологов метод оценки состояния свободнорадикального окисления и антиоксидантной активности эякулята у больных хроническим простатитом, основанный на регистрации хемилюминесценции, как дополнительный способ контроля воспалительного процесса и эффективности проводимого лечения.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на VIII дальневосточной конференции урологов (Благовещенск, 2009) — международной научной школе для молодежи «Инновационные технологии в здравоохранении: молекулярная медицина, клеточная терапия, трансплантология, реаниматология, нанотехнологии» (Екатеринбург, 2009) — III научно-практическом симпозиуме «Свободнорадикальная медицина и антиоксидантная терапия» (Волгоград, 2010) — VIII международной конференции «Биоантиоксидант» (Москва, 2010) — на совместном заседании кафедр патологической физиологии, биологии, биологической и биоорганической химии, урологии с курсом ИПО, нормальной физиологии, послевузовской подготовки провизоров ИПО, Центральной научно-исследовательской лаборатории БГМУ, онкологии, медико-биологических основ физвоспитания и физиологии БГПУ, спортивной медицины Башкирского института физической культуры 24 ноября 2010 года (протокол № 35).

Личный вклад автора заключается в самостоятельной разработке и постановке эксперимента на 60 крысах-самцах, изучении биометрических показателей, хемилюминесцентного анализа гомогенатов предстательных желез на аппарате «Хемшпоминомер-003" — контролировании проведения изучения поведенческих реакций и гистологических исследований. Самостоятельно выполнено клиническое обследование 80 человек, изучение хемилюминесцен-ции эякулятапроведение консервативной терапии 60 пациентам с воспалительным заболеванием предстательной железыконтролирование проведения иммунологических и уродинамических исследований, ультразвуковой диагностики и исследований эякулятаосуществление статистической обработки результатовизучение и анализ полученных данных исследования.

Публикации результатов исследований. Опубликовано 11 печатных работ, из них 2-е в изданиях, рекомендованных ВАК. Получен патент РФ: «Способ моделирования острого простатита» № 2 410 760 от 05.10.2009, опубликован 27.01.2011 Бюл. № 3.

Структура и объем диссертации

Работа изложена на 126 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы. Диссертация иллюстрирована 19 таблицами, 20 рисунками. В библиографический указатель включено 198 источников литературы, из которых 119 отечественных и 79 зарубежных.

выводы.

1. Разработана модель экспериментального простатита, с характерными для воспалительного процесса морфо-функциональными изменениями, окси-дативным стрессом в ткани предстательной железы, свидетельствующими о возможности использования предлагаемого способа моделирования воспаления предстательной железы.

2. У крыс с острым простатитом выявлено снижение коэффициента подвижности на 37,9±2,8%, ориентировочной активности на 48,7±4,1% неповышение эмоциональной тревожности на 47,8±6,6%, увеличение веса предстательной железы в 1,4 раза. Обнаружены воспалительные изменения в ткани предстательной железы в виде отека, инфильтрации стромы лейкоцитами, появления очагов микроабсцедирования, тромбоза отдельных сосудов. Имеет место усиление генерации активных форм> кислорода в 3,6 раз, снижением общей антиоксидантной активности в 1,7 раз, угнетение ферментативного и неферментативного звеньев антиоксидантной защиты в гомогенате предстательной железы.

3. При проведении «пробной терапии" — показана эффективность сочетания антибиотиков с антиоксидантами, что проявляется восстановлением поведенческих реакций и гистологической картины, снижением веса предстательной железы в 1,2 раза и уровня образования свободных радикалов в 1,95 раз, повышением антиоксидантной активности гомогената в 1,9 раз, восстановлением ферментативного и неферментативного звеньев антиоксидантной защиты, что является подтверждением патогенетической значимости оксидативного стресса при воспалении предстательной железы, а так же свидетельствует о возможности использования показателей нарушения свободнорадикального окисления как дополнительного маркера воспаления и оценки эффективности проводимой терапии.

4. У больных с обострением хронического простатита отмечалось повышение бальной симптоматики простатита в 16,7 раз, лейкоцитов в секрете предстательной железы и в эякуляте в 1,7 раз и в 1,6 раз (соответственно), повышение уровня ИЛ-10 и ФНО-1а, повышение уровня Т-клеточного звена, В-лимфоцитов, и снижения уровня №С-клеток. В эякуляте больных происходило снижение антиоксидантной активности на 46,1% и повышение генерации активных форм кислорода в 1,5 раза.

5. При комплексной терапии происходило снижение шкалы N111-СРБ! в 2,1 раза, количества лейкоцитов в секрете предстательной железы и в эякуляте в 1,5 ив 1,4 раза (соответственно), уровня ИЛ-1Р и ФНО-1а, так же отмечалось повышение антиоксидантной активности эякулята на 22,8%. Уровень генерации активных форм кислорода в эякуляте снижался в 1,2 раза, по сравнению с периодом обострения заболевания. Учитывая зависимость между выраженностью воспалительного процесса и нарушением свободнорадикального окисления в эякуляте больных, показатели оксидативного стресса в эякуляте могут быть использованы как дополнительный маркер обострения хронического простатита и диагностический критерий излеченности заболевания.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

1. Разработанная экспериментальная модель воспаления в предстательной железе может быть использована для изучения патогенеза простатита и определения эффективности различных вариантов лечения.

2. Рекомендуется исследовать хемилюминесценцию эякулята у пациентов с хроническим простатитом для оценки выраженности воспалительного процесса и контроля эффективности лечения.

3. Препарат а-токоферол может быть рекомендован как антиоксидант, ограничивающий развитие оксидативного стресса, вызванного воспалительным процессом в предстательной железе. Использование а-токоферола в комплексном лечении повышало антиоксидантную активность эякулята, улучшало клиническую картину заболевания, способствовало более быстрому снижению симптоматики воспаления.