Лабораторная диагностика гельминтозов

Цвет желтовато — коричневый. Размер 153×80 мкм.

ОписторхФорма овальная, на верхнем конце — крышечка. Цвет желтый. Размер 28×13 мкм.

ПарагонимФорма овальная, на верхнем конце — крышечка. Цвет золотисто — коричневый. Размер 100×50 мкм.

Шистосома урогенитальная.

Форма веретенообразная, с шипом на верхнем конце. Цвет прозрачный. Размер 150×60 мкм.

Шистосома Менсона.

Форма овальная, с шипом на боковой поверхности. Цвет желтый. Размер 112×60 мкм.

Шистосома японская.

Форма овальная, с шипом на боковой поверхности. Цвет желтый. Размер 90×74 мкм.

Цепни (свиной и бычий) Форма округлая, с онкосферой внутри. Цвет прозрачный с поперечной исчерченностью. Размер 35×25 мкм.

Цепень карликовый.

Форма округлая, с онкосферой внутри. Цвет прозрачный. Размер 40×50 мкм.

Лентец широкий.

Форма широкоовальная, с крышечкой на одном полюсе и бугорком на другом. Цвет серый или желтоватый. Размер 70×42 мкм.

АскаридаА) Оплодотворенные яйца. Форма овальная, с зародышевой клеткой внутри. Цвет темно-желтый. Размер 60×45 мкм.

Б) Неоплодотворенные яйца.

Форма овальная, с желточными клетками внутри. Цвет темно-желтый. Размер 65×45 мкм.

ВласоглавФорма лимонообразная, с пробкообразными структурами на концах. Цвет желто-коричневый. Размер 50×25 мкм.

ОстрицаФорма овально-вытянутая, асимметричная. Цвет прозрачный. Размер 55×30 мкм.

АнкилостомидаФорма овальная, с притупленными полюсами. Цвет прозрачный. Размер 60×36 мкм4.

3. Диагностика тканевых гельминтозов.

Для диагностики тканевых гельминтозов (например, цистицеркоза) применяют иммунологические методы исследования сыворотки крови, позволяющие обнаружить в ней специфические антитела:

реакция кольцепреципитации;

реакция связывания комплемента;

метод флюоресцирующих антител;

метод преципитации в агаре. Реакция кольцепреципитации. Реакцию кольцепрецепитации используют для обнаружения антигенов гельминтов с помощью иммунной сыворотки, которая содержит специфические антитела. Реакцию проводят в узких пробирках объемом 0,1 — 0,5 мл при помощи наслаивания на сыворотку антигена, содержащегося в жидкости. Обязательным условием должно быть наслаивание жидкостей — смешивание строго необходимо исключить. Количество сред, содержащих антиген и антитело, должно быть эквивалентно. Реакцию читают через 3 — 5 минут на темном фоне.

Положительной считается реакция, при которой на границе между средами образуется дымное кольцо. Метод преципитации в агаре. Для проведения этой реакции необходимо использовать мясопептонный агар, помещенный в чашку Петри. В застывшей пластинке агара с помощью металлической трубочки вырезают лунки 5 — 6 мм в диаметре в виде ромашки — одна в центре и 5 по окружности на расстоянии 2 см от центральной. В центральную лунку помещается взвесь антител, а в периферические — исследуемая сыворотка. Чашку помещают во влажную среду при комнатной температуре и оценивают реакцию через 24, 48 и 72 часа. Учет проводят на темном фоне.

При наличии в исследуемой сыворотке антигена между лункой, в которую она помещена, и центральной, образуется мутная полоса. Реакция связывания комплемента. Реакция происходит в две фазы:

первая — взаимодействие антигена и антитела. При этом в исследуемую сыворотку вводится антиген, затем стандартный комплемент. Сыворотку помещают в термостат при температуре 37ºС на 1 час;вторая — чтение реакции при помощи гемолитической системы. К смеси из первой фазы добавляют индикаторную систему (эритроциты барана в соединении с сывороткой кролика, содержащей гемолизины к эритроцитам барана) и повторно помещают в термостат на 30 — 60 минут. По истечении второй фазы проводят оценку результатов реакции. В том случае, когда в сыворотке содержатся антитела, происходит гемолиз эритроцитов. Метод флюоресцирующих антител. Принцип этого метода основан на том, что комплекс антиген — антитело, меченный флюорохромом, визуально легко обнаруживается по характерному свечению в лучах люминесцентного микроскопа. Для диагностики трихинеллеза и филяриатозов применяют специальные методы диагностики. Метод биопсии мышц. Применяется для диагностики трихинеллеза. Для исследования как правило берут несколько граммов дельтовидной или икроножной мышцы больного в асептических условиях. также необходимо провести исследование мяса животного, в результате употребления в пищу которого произошло заражение. Мышцу измельчают ножницами и помещают в компрессорий (между двумя толстыми стеклами), слегка раздавливают.

Затем полученный препарат изучают при малом увеличении микроскопа. Внутри мышечных волокон обнаруживаются хорошо заметные личинки трихинелл. Они свернуты в спирали и помещены в лимонообразные или округлые капсулы. Метод переваривания мышц. Данный метод диагностики трихинеллеза гораздо более эффективен, чем метод биопсии мышц. Дл его выполнения необходимо приготовить искусственный желудочный сок (1% раствор пепсина в 0,7% растворе соляной кислоты), поместить в него мелко нарезанные мышцы (на 1 г мышц 15 — 20 мл искусственного желудочного сока) и термостатировать 12 — 16 часов при температуре 37ºС.Затем осадок наносят на предметное стекло с помощью пипетки и микроскопируют. В осадке наблюдаются свободные от капсул личинки трихинелл. Метод мазка крови и толстой капли. Этот метод применяют для диагностики филяриатозов, поскольку большинство их видов локализуются в крови.

Кровь берут в асептических условиях из пальца преимущественно в ночное время. Каплю помещают на предметное стекло и размазывают вторым стеклом. Мазок фиксируют с помощью метилового спирта и производят окраску по Романовскому — Гимза. Для приготовления препарата толстой капли несколько капель крови помещают на предметное стекло и углом второго стекла размазывают круговыми движениями до получения пятна диаметром около 1,5 см. После высыхания эритроциты гемолизируют дистиллированной водой и также окрашивают по Романовскому — Гимза. Краситель Романовского — Гимза состоит из эозина, метиленового синего и азура. 10 капель красителя необходимо смешать с 10 мл дистиллированной воды и сразу нанести на зафиксированный препарат. Экспозиция — 1 час. Однако экспозицию можно уменьшить до 40 минут, если поместить препарат в термостат при температуре 37ºС. Затем необходимо смыть краску дистиллированной водой, высушить на воздухе и микроскопировать. Микрофиллярии выглядят как тонкие голубые нити [3].

Заключение

.

Резюмируя вышеизложенное, следует отметить, что на данный момент известно более 200 болезней человека, которые вызываются паразитическими червями. Такие болезни требуют особого подхода и своеобразной терапии. На данный момент развития медицинской науки известно боле 250 видов гельминтов, паразитирующих у человека, из них в Российской Федерации зарегистрировано около 70, а широко распространено только 28 видов. Кроме биологической, существует еще эпидемиологическая классификация гельминтозов. В основу эпидемиологической классификации гельминтозов положено место обитания личинки. При этом гельминты разделяются на 2 основные группы:

биогельминты — такие паразиты, личинки которых развиваются в организме промежуточного хозяина;

геогельминты — черви, личинка которых развиваются во внешней среде. Диагностику гельминтозов производят макроскопическими и микроскопическими методами. Для диагностики тканевых гельминтозов (например, цистицеркоза) применяют иммунологические методы исследования сыворотки крови, позволяющие обнаружить в ней специфические антитела. Для диагностики трихинеллеза и филяриатозов применяют специальные методы диагностики.

Список литературы

1. Аскерко А. Ч. Основы паразитологии Мн.: БГМУ, 2008 г. 140 с.

2. Петровский А. В. Паразитология, Мн.: Светач, 2007 г. 354 с.

3. Селявка А. А. Общая паразитология Мн.: Знание, 2007 г. 250 с.