Биохимический анализ крови

Биохимический анализ крови показывает повышение серомукоида, С-реактивного белка, фибриногена (даже более 10 г/л при тяжелом течении), общей ЛДГ.

Серомукоиды: фракция углеводно — белковых комплексов, состоит из восьми индивидуальных белков, относящихся к белкам «острой фазы». Методы определения серомукоида основаны на осаждении белков сыворотки крови 1,8 М раствором перхлорной кислоты (HCIO4), выделения серомукоида из фильтрата с помощью фосфорно-вольфрамовой кислоты и последующем количественном определении его по одному из компонентов: белку, гексозам или тирозину. В норме содержание серомукоидов составляет 0,22 — 0,28 г/л. (таблица 2 — Нормы показателей биохимического анализа крови). У больных с пневмонией количество серомукоидов в крови возрастает до 1г/л [Камышников, 2009].

Так же белком «острой фазы» является СРБ, он способен очень быстро реагировать на появившийся воспалительный процесс, в норме СРБ не превышает 5 мг/л [Сидельникова, 2006]. (Таблица 2 — Нормы показателей биохимического анализа крови).

Таблица 2 — Нормы показателей биохимического анализа крови [http://pomni.info/pomni/home/view/med_normi.html].

№.	Показатель.	Референтное значение.
	СРБ.	0−5 мг/л.
	Ревматоидный фактор	0−8 Ме/л.
	Серомукоид.	0,22−0,28 г/л.
	ЛДГ.	200−450 Ед/л.
	Фибриноген.	2−4 г/л.

Одной из методик определения фибриногена является хронометрический метод по Клауссу; Определяется время свертывания разбавленной цитратной плазмы избытком тромбина. Время свертывания при этом пропорционально концентрации фибриногена, которую определяют по калибровочному графику.

Для определения общей активности ЛДГ в сыворотке крови используют две группы методов:

Спектрофотометрические, основанные на прямом оптическом тесте Варбурга: различия в разности поглощения окисленной и восстановленной форм НАД.

Калориметрические:

Динитрофенилгидрозиновые, базирующиеся на исследовании содержания пирувата с помощью 2,4 — динитрофенилгидрозина; из методов этой группы наиболее точным и чувствительным является метод Нательсона, состоящий в определении концентрации непрориагировавшего в реакции пирувата. Однако вследствие нестабильности раствора пировиноградной кислоты метод не получил широкого распространения. Метод Севела и Товарена, заключающийся в определении количества образовавшегося пирувата.

Редоксиндикаторные методы — точны и просты технически, в них используется способность некоторых веществ (индикаторов) менять цвет в реакциях окисления-востановления. Для определения изоферментов лактатдегидрогеназы наиболее распространено электрофоретическое разделение на ацетате целлюлозы и агарозе. [http://biokhimiya/ru/enzymes/lactatdg.html].

Иммунологические исследования В ходе проведения иммунологического анализа крови комплексно оцениваются защитные функции организма. Оценивается количество и функция иммунных клеток крови, присутствие тех или иных антител. Иммунный статус — это комплексный показатель состояния иммунной системы, это количественная и качественная характеристика состояния функциональной активности органов иммунной системы и некоторых неспецифических механизмов противомикробной защиты.

Существуют скрининговые тесты оценки иммунного статуса, которые позволяют быстро оценить основные показатели работы иммунной системы. Стандартный скрининговый тест включает:

— Подсчет абсолютного количества лейкоцитов, нейтрофилов, лимфоцитов и тромбоцитов.

— Определение концентрации сывороточных иммуноглобулинов различных классов (IgG, IgA и IgM).

— Определение гемолитической активности системы комплемента CH50.

— Проведение кожных тестов гиперчувствительности замедленного типа.

Количественное определение сывороточных иммуноглобулинов — один из основных тестов в оценке гуморального звена иммунитета. Концентрация сывороточных иммуноглобулинов отражает функциональное состояние клеточного звена иммунитета.

Таблица 3 — Основные показатели иммунного статуса [http://pomni.info/pomni/home/view/med_normi.html].

показатель.	Содержание, мг/дл.	Показатель.	Содержание, %.
IgM.	40−230.	CD3+ (Т-лимфоциты).	48−80.
IgG.	700−1600.	CD4+ (Т-хелперы).	33−58.
IgA.	70−400.	CD8+ (цитотоксические Т-лимфоциты).	11−36.
С-3 комплемент.	90−180.	CD16+ (NK-клетки).	8−19.
С-4 комплемент.	10−40.	CD19+ (В-лимфоциты).	5−10.

Определение содержания иммуноглобулинов (IgG, IgA, IgM) по Манчини. Исследуемую сыворотку помещают в лунки агарового геля, который содержит антитела к иммуноглобулинам одного из классов IgG, IgA или IgM в известной концентрации. Иммуноглобулины, диффундирующие из лунок в агар, при взаимодействии с соответствующими антителами образуют кольца преципитации, размер которых прямо пропорционален содержанию иммуноглобулина. Референтные значения приведены в таблице 3.

Более детальное изучение иммунного статуса включает изучение количества и функциональной активности клеточного и гуморального звеньев иммунной системы:

• — Исследование фагоцитарной функции.
• — Исследование системы комплемента.

— Исследование Т-системы иммунитета.

— Исследование В-системы иммунитета.

Такое более подробное исследование иммунного статуса проводится в несколько этапов. Вначале делают ориентировочные исследования для выявления значительных дефектов иммунной системы (1 уровень), а затем может понадобиться и более подробное изучение (2 уровень), основываясь на данных предыдущего исследования. [Караулов А. В. 2002].

Статистическая обработка данных

Для обработки результатов мы использовали среднюю арифметическую величину () к каждой группе, стандартная ошибка (±m) проводилась программой Microsoft office Excel 2007. Показатель достоверности (Р), достоверность различий по критерию Стьюдента (t) для одноименных показателей подсчитывалась на сайте: [http://www/psycho-ok.ru/ statistics/ student/]. В полученных данных различия считались достоверными при Р ?0,05.