Определение микробной обсемененности готовых лекарств

Жидкие лекарственные формы разводят стерильным физиологическим раствором 1:10 (или 1:100) и засевают в объеме 0,5 мл на МПА в чашке Петри. 1 г порошка или таблеток помещают в пробирку с 10 мл физиологического раствора и после растворения проводят посев на МПА.

Мягкие лекарственные формы (мази, пасты) в количестве 1 г взвешивают в асептических условиях, переносят в пробирки с 10 мл стерильного 1,4% раствора натрия гидрокарбоната и 0,5 мл полученного раствора засевают на МПА в чашках Петри. Чашки с посевами помещают в термостат на 48 ч, затем подсчитывают число колоний и определяют количество бактерий в 1 мл или 1 г образца.

Определение общего количества грибов

Определение общего количества грибов проводят на твердой среде Сабуро, на которое засевают 0,5 мл цельного или разведенного 1:10 препарата. Посевы инкубируют при 24 °C в течение 5 суток, затем подсчитывают число выросших колоний и определяют количество грибов в 1 мл (1 г) препарата .

Качественное определение условно — патогенных и патогенных микроорганизмов:

• 1) Определение бактерий семейства Enterobacteriaceae
• (роды Escherichia, Salmonella, Shigella). Посев лекарственных средств проводят на среду Эндо и висмут-сульфитный агар. Идентификацию энтеробактерий осуществляют следующим образом: если в образце обнаружены грамотрицательные неспорообразующие палочки, которые дают отрицательную реакцию на цитохромоксидазу, ферментируют глюкозу и восстанавливают нитраты в нитриты, исследуемый препарат содержит бактерии семейства Enterobacteriaceae.
• 2) Определение патогенных стафилококков. Определение патогенных стафилококков проводят посевом на желточно-солевой агар. На этой среде патогенные стафилококки вызывают расщепление лецитина, проявляющееся в просветлении вокруг колоний зоны помутнения с радужным венчиком по периферии. Выделенную чистую культуру исследуют на наличие плазмокоагулазы.
• 3) Выявление Pseudomonas aeruginosa. Осуществляют на среде с глицерином. Синегнойная палочка в этой среде образует зеленоватые флуоресцирующие колонии, выделяющие в среду сине-зеленый пигмент.
• 4) Выявление протеи. Проводят посевом на МПА по Шукевичу. Наличие условно-патогенных и патогенных микроорганизмов в лекарственных препаратах недопустимо.