Характеристика метода исследования
Определение фруктозы основано на реакции Селиванова изображенной на рисунке 3.3.
Рис. 3.3 Схема реакции Селиванова
В опыт брали по 5 г очищенных от кожуры фруктов (яблоки, груши, апельсины, мандарины). Материал гомогенизировали с дистиллированной водой. В результате получали 100 мл экстракта, который фильтровали: 5 мл фильтрата разводили в мерной колбе на 500 мл. Эти пробы брали в опыт.
К 2 мл испытуемой пробы в пробирке с пришлифованным обратным воздушным холодильником добавляли 2 мл раствора резорцина и 6 мл 30%-ного раствора соляной кислоты, перемешивали и нагревали 8 мин на водяной бане при 80 °C. Одновременно с опытом ставили контроль. Для этого брали пипеткой 5 мл стандартного раствора фруктозы (0,25 г фруктозы в 100 мл воды) в мерную колбу на 500 мл и доливали водой до метки. К 2 мл этого раствора, содержащего 50 мкг фруктозы, прибавляли далее все остальные реактивы, как в опытной пробе. После нагревания растворы охлаждали и колориметрировали с фильтром, характеризующимся максимумом пропускания при 490 нм. Экстинкцию измеряли против реактивов, заменяя фруктозу 1 мл воды [40].
Содержание фруктозы в пробе, взятой в анализ, вычисляли по формуле (в мкг):
С= (3.3).
где, а — количество фруктозы в пробе стандартного раствора (в мкг); Е — экстинкция исследуемого раствора; Е1 — экстинкция стандартного раствора.
Затем проводили пересчет на 100 г продукта.