Но в связи с тем, что отбор материала для анализа и последующие особенности лабораторной диагностики в значительной степени могут различаться в зависимости от конкретного вирусного заболевания, необходимо на основании имеющихся данных предположить этиологический агент и поставить предварительный диагноз.
Постановка предварительного диагноза на основании анализа:
эпизоотологических данных:
болеют свиньи, молодняк: поросята-сосуны и отъемыши, массовый охват. Летальность среди поросят высокая (до 60%). Все взрослые свиньи выздоравливали.
клинических признаков:
У молодняка — угнетение, сонливость, повышение температуры тела до 41−42°С, слизистые истечения из носа и глаз, кашель, одышка, изменения в ЦНС: возбуждение, манежные движения, судорожные движения конечностями, судороги шейных и жевательных мышц, затем паралич мышц конечностей. Течение острое.
У взрослых свиней — признаки ринита и конъюнктивита, повышение температуры тела.
патологоанатомических изменений:
Слизистые оболочки носовой полости и гортани гиперемированы, отечны, отек легких, очаги острой катаральной бронхопневмонии, гастроэнтерит. Оболочки головного и спинного мозга воспалены, с кровоизлияниями.
Предварительный диагноз: болезнь Тешена, болезнь Ауески.
Имеющиеся данные говорят о возможном заболевании описанной группы свиней болезнью Тешена. Но высокая летальность в описанном случае и ряд нехарактерных для болезни Тешена клинических и патологоанатомических признаков позволяют предположить либо другую этиологию, полиэтиологичность заболевания. Так, можно предположить у описанной группы свиней заболевание болезнью Ауески. За это говорят такие особенности течения, как высокая летальность в группе поросят-сосунов и отъемышей, и, напротив, — инфлюэнцеподобное доброкачественное течение у взрослого поголовья. Также характерны в этом случае кровоизлияния на слизистой тонкого кишечника.
Отбор патматериала:
В этой связи с особенностями предварительного диагноза необходимо отобрать материал для исследования с учетом возможности обоих заболеваний.
от больных животных: кровь на парные сыворотки, фекалии, мазки со слизистой прямой кишки;
павших животных: головной и спинной мозг, кусочки слизистой ободочной кишки; головной мозг, миндалины, легкие, паренхиматозные органы, абортированные плоды.
Патматериал в термосе с охлаждающей жидкостью и сопроводительным письмом доставляется в ветлабораторию для проведения лабораторных исследований.
Лабораторное исследование патологического материала:
Из доставленного патматериала готовят вируссодержащую суспензию и мазки-отпечатки.
I этап.
Проводят индикацию вируса методами: РИФ, ПЦР, ИФА, РНГА, биопроба на кроликах.
II этап.
Проводят изоляцию вируса методом биологической пробы: на культуре клеток (+ЦПД); на культуре клеток почек и щитовидной железы свиней, семенников телят, перевиваемые: РК-15, ВНК-21. Положительные биопробы определяют по положительной РГАд и ЦПД методом световой микроскопии.
III этап Проводят идентификацию выделенного вируса методами ИФА, РН ПЦР, РИФ, РДП, РНГА
IV этап Некоторые вирусы могут персистировать в организме животных, не вызывая клинических проявлений болезни. После выделения вирусов в некоторых случаях бывает необходимым жоказать его роль в этиологии данного заболевания. Для этого необходимо использовать методы ИФА, РН ПЦР, РИФ, РДП, РНГА, но теперь — с парными сыворотками крови и выделенным вирусом.
V этап Проводят ретроспективную диагностику с помощью методов ИФА, РН, РНГА, РСК, РДП, РЛА.
Если титр антител во второй пробе больше, чем в первой, в 4 и более раз, это свидетельствует об активном инфекционном процессе в организме животного в период взятия крови. При этом болезнь была вызвана тем возбудителем, к которму был установлен прирост титра антител в парных сыворотках.
Список литературы
Борисов
Л. Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М.: Медицинское информационное агентство. — 2001, 736 с.
Кадымов Р.А., Мамедов И. Б., Джульфаев С. А. Частная эпизоотология. Баку: Изд-во Бакин. гос. ун-та. — 1990, 499 с.
Кузьмин В.А., Святковский А. В., ред. Эпизоотология с микробиологией. М.: Академия. — 2005, 429 с.
Пашкина Ю.В. и др. Экологическая и эпизоотологическая безопасность в современном животноводстве (ветеринарная дезинфекция, дезинсекция и дератизация): Т. I и II (учебно-методическое пособие).- Н.Новгород. — 2004, 128 с.
Справочник ветеринарного врача. Под ред. В. Г. Гавриша и И. И. Калюжного. — РостовнаДону: Феникс. — 1999, 608с.
Эпизоотология с микробиологией: (Учеб. и практикум). И. А. Бакулов, В. А. Ведерников, А.
Л. Семенихин; Под ред. И. А. Бакулова. М.: Колос. — 1997, 480 с.
