Мониторинг и совершенствование специфической профилактики сальмонеллеза свиней и птиц

Актуальность темы

.

Создание и возрождение крупных свиноводческих и птицеводческих комплексов сопровождается резким изменением эпизоотической ситуации по раду инфекционных заболеваний и активизацией условно патогенных микроорганизмов.

Большая плотность животных сопряжена с возможностью взаимного перезаражения, возникают идеальные условия для циркуляции возбудителей среди поголовья.

В последние годы ветеринарные службы наибольшее внимание уделяют профилактике вирусных инфекций и практически перестали контролировать бактериальные, что привело к увеличению процента заболеваемости сельскохозяйственных животных и птицы.

На первый план выдвинулись желудочно-кишечные заболевания (в том числе сальмонеллез) и инфекции с поражением дыхательных путей.

Возникновение и широкое распространение желудочно-кишечных болезней поросят обусловлено воздействием на их организм многих этиологических факторов.

По данным Шахова А. Г. (2003) при изучении этиологии желудочно-кишечных болезней поросят в 187 свиноводческих хозяйствах 10 областей России установлено: в 72% хозяйств диареи были вызваны бактериями, в 23% - вирусами, в 3% - простейшими, в 1% - патогенными грибами и лишь в 1% хозяйств возбудители из патологического материала не выделены.

Сальмонеллез относится к числу убиквитарных зооантропонозов. Экономический ущерб от сальмонеллеза складывается из падежа части заболевшего молодняка, отставания в росте и развитии переболевшего поголовья.

На сегодняшний день проблема профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний животных, в том числе и птицы, имеет не только экономическое, но и социальное значение. Свидетельством реального существования такой угрозы, по данным ВОЗ, являются участившиеся вспышки инфекций среди людей. Причину заболеваний связывают с поражением продуктов питания животного происхождения патогенными микроорганизмами. Адаптация штамма Salmonella enteritidis к организму птицы, повышение его устойчивости создали предпосылки для передачи возбудителя от птицы к человеку и обратно. По данным ВОЗ, заболеваемость людей сальмонеллезом за последнее десятилетие возросла шестикратно, а в странах СНГ — в семь раз. При этом этиологическая значимость S. enteritidis в заболевании людей возросла на 30%, животных — 75%, а число случаев обнаружения возбудителя в продуктах питания увеличилось на 50%.

Так, в Голландии — стране, где санитарно-гигиенические требования к качеству мяса наиболее жесткие, из тушек мяса выделяют сальмонеллы видов S. gallinarum, S. typhimurium, S. enteritidis, S. hodar, S. anatis, S. dublin и др., и список этот постоянно пополняется. Развитые экономически страны несут ощутимые потери от сальмонеллезов. Так, в США убытки такого рода оцениваются в 2 млрд. долларов, в Канаде — в 300 млн. долларов (В. Ли, 2003).

В настоящее время во всем мире уделяется большое внимание разработке различных препаратов и вакцин, направленных на борьбу с возбудителями этой инфекции.

Сложность борьбы с сальмонеллезом определяется быстрой адаптацией возбудителя как к антибиотикам, так и другим химиотерапевтическим препаратам. Наблюдается селекция и циркуляция штаммов, несущих R-факторы, формирующиеся под влиянием вышеуказанных препаратов.

Бесконтрольное применение антибиотиков усугубило ситуацию и способствовало селекции антибиотико-резистентных штаммов микроорганизмов. В ряде хозяйств обнаруживается 100% - ная устойчивость бактерий ко всем применяемым антибиотикам.

Таким образом, на сегодняшний день специфическая профилактика сальмонеллеза играет главную роль в создании эпизоотического благополучия и успешном развитии свиноводческих и птицеводческих хозяйств.

В настоящее время в птицеводстве в качестве профилактических и лечебных средств при сальмонеллезах применяют пробиотики и бактериофаги.

Для профилактики сальмонеллеза свиней в настоящее время широко используются как жидкие инактивированные вакцинные препараты на основе вирулентных штаммов S. choleraesuis и S. typhimurium, так и вакцины живые сухие из аттенуированных штаммов. Применение в ветеринарной практике и той и другой формы вакцины объясняется наличием у каждой своих преимуществ и недостатков.

Жидкие инактивированные вакцины часто не обеспечивают эффективной защиты иммунизированных животных. Они имеют более низкую иммуногенность за счет действия инактиванта, повреждающего антигенные структуры клеток микроорганизмов. К тому же сальмонеллезные антигены в организме иммунизированных животных не способны размножаться и реплицироваться, что ограничивает их циркуляцию и проявление клеточного иммунитета.

Одной из основных причин медленного внедрения в практику живых вакцин является минимальная возможность применения антибиотиков до и после иммунизации.

Для профилактики сальмонеллеза свиней существует вакцина живая сухая из штамма ТС-177, который представляет собой «дикий» мутант, не имеет генетических маркеров, кроме пониженной вирулентности. Известна также вакцина живая сухая из супрессорного ревертанта S. choleraesuis № 9. Штамм S. choleraesuis № 9 (ФГУ ВГНКИ) отличается от эпизоотических штаммов высокой частотой (50%) выделения стрептомицинозависимых мутантов, большая часть из которых остается вирулентной. Поэтому использование этих вакцин приводит к затруднению при дифференциации вакцинного штамма от полевого, из-за необходимости изучения большого количества мутантных клонов (Э.А. Светоч и др. 2003).

Анализируя выше сказанное, можно сделать вывод, что разработка и совершенствование средств специфической профилактики сальмонеллеза свиней и птиц остается актуальной задачей научных сотрудников, биотехнологов и практикующих врачей.

Цель и задачи исследования

.

Целью данной работы являлось проведение мониторинга сальмонеллезной инфекции в свиноводческих и птицеводческих хозяйствах и совершенствование профилактики этого заболевания с помощью специфических средств.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

— провести мониторинг сальмонеллеза свиней и птиц на территории Российской Федерации;

— разработать технологии производства, методы контроля и применения «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза свиней» и «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза птиц»;

— разработать нормативно-техническую документацию (технические условия и наставление по применению) на производство данных препаратов;

— испытать вакцины в лабораторных и производственных условиях;

— оценить протективную активность «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза свиней» в сравнении с другими существующими противосальмонеллезными вакцинами;

Научная новизна работы.

Получены новые данные по результатам мониторинга возбудителей сальмонеллеза свиней и птиц о роли S. choleraesuis, S. typhimurium, S. enteritidis, S. gallinarum-pullorum в развитии эпизоотической ситуации, складывающейся в неблагополучных по сальмонеллезу отдельно взятых хозяйствах.

Обоснована необходимость создания вакцинных препаратов для профилактики сальмонеллеза свиней на основе штаммов S. choleraesuis и S. typhimurium и сальмонеллеза птиц на основе штаммов S. enteritidis и S. gallinarum-pullorum.

Показана возможность использования питательной среды на основе ПГРМ вместо мясных переваров без потери урожайности при культивировании сальмонелл.

Бивалентная вакцина живая сухая против сальмонеллеза свиней" из аттенуированных штаммов S. choleraesuis SC230 и S. typhimurium № 3 по иммуногенным свойствам превосходит существующие противосальмонеллезные вакцины.

Практическая значимость работы.

Разработаны технологии изготовления, контроля и применения «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза свиней» и «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза птиц». Созданы проекты научно-технической документации (НД) на вакцинные препараты по изготовлению и контролю.

Предложена питательная среда для культивирования вакцинных штаммов S. choleraesuis SC230, S. typhimurium № 3, S. enteritidis SE204 и S. gallinarum-pullorum T10 на основе панкреатического гидролизата рыбной муки. Данная питательная среда позволяет снизить себестоимость вакцинных препаратов по сравнению с теми, которые получены на средах из мясных переваров.

Получены положительные результаты испытания вакцинных препаратов как на лабораторных, так и на естественно восприимчивых животных.

Публикация результатов исследований.

По теме диссертации опубликовано 5 научных работ. Зарегистрировано 2 отчета о.

НИОКР ГНЦ прикладной микробиологии по линии Министерства науки, промышленности и технологии РФ 2001;2002 (Раздел «Разработка образцов готовых форм препаратов и наработка опытных партий вакцин против сальмонеллеза птиц, гемофилеза свиней. Получение лабораторного образца вакцины против коксиеллеза крупного рогатого скота») и 2002;2003 гг. (Раздел «Разработка проекта нормативно-технической документации на приготовление «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза птиц»).

Апробация работы.

Материалы диссертации доложены:

— на международной конференции «Научные основы технологии производства ветеринарных биопрепаратов», Сб. докл. Межд. конф. молодых ученых 5−6 декабря 2002 г. -Щелково, 2002 г;

— на межлабораторном научном семинаре, ГНЦПМ — Оболенск, апрель 2004 г.

Основные положения диссертации выносимые на защиту.

1.Новые данные о роли полевых штаммов S. choleraesuis, S. typhimurium, S. enteritidis, S. gallinarum-pullorum в развитии эпизоотической ситуации в РФ на примере 21 свиноводческого и 36 птицеводческих хозяйств из 27 регионов России.

2.Питательная среда для культивирования сальмонелл на основе ПГРМ с содержанием ам. N > 600 мг%.

3."Бивалентная вакцина живая сухая против сальмонеллеза птиц", характеризующаяся крайне низкой остаточной реактогенностью и способностью формирования стойкого специфического иммунитета.

4."Бивалентная вакцина живая сухая против сальмонеллеза свиней", обладающая крайне низкой остаточной реактогенностью и высокими иммуногенными свойствами по сравнению с другими сальмонеллезными вакцинами.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 104 страницах машинописного текста и состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений и приложений. Диссертация иллюстрирована 15 таблицами и 11 рисунками.

Список литературы

включает 115 источников, из них 83 отечественных и 32 зарубежных.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Мониторинг возбудителей сальмонеллезов свиней и птиц показал, что в настоящее время 47,4% свиноводческих и 48,6% птицеводческих хозяйств являются эпизоотическими очагами сальмонеллезной инфекции. Лечение и профилактика сальмонеллеза могут быть результативными при условии определения лекарственной устойчивости выделенных штаммов сальмонелл.2. Использование БГРМ вместо мясных питательных сред при культивировании вакцинных штаммов сальмонелл не приводит к потере урожайности, бактериальные клетки сохраняют характерные для сальмонелл тинкгориальные и серологические свойства, себестоимость вакцинных препаратов снижается по сравнению с теми, которые получены на средах из мясных переваров.3. Разработана и освоена технология изготовления «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза свиней» и «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза птиц».4. Полученные экспериментальные серии вакцин прошли лабораторные и производственные испытания (в неблагополучных по данному заболеванию хозяйствах) с положительными результатами.5. Сравнительная оценка протективной активности используемых в практике сальмонеллезных вакцин и «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза свиней» из аттенуированных штаммов S. choleraesuis SC230 и S. typhimurium № 3 показала, что экспериментальная вакцина превосходит по иммуногенным свойствам как инактивированные, так и живые сухие аналоги.6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ Представлены для рассмотрения и согласования в Департамент ветеринарии Минсельхоза России технические условия и наставления по применению «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза свиней» и «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза птиц».