Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Определение видовой принадлежности клеточных культур методами молекулярно-генетического анализа

Диссертация: Определение видовой принадлежности клеточных культур методами молекулярно-генетического анализа
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Результаты диссертационной работы доложены и обсуждены на Международной конференции «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных: роль нанотехнологий в реализации приоритетных задач биотехнологии» (Дубровицы, 2008 г.) — Школе-конференции молодых ученых «Методы культивирования клеток» (Санкт-Петербург, октябрь 2008 г.) — Секции «Ветеринарная биотехнология… Читать ещё >

Определение видовой принадлежности клеточных культур методами молекулярно-генетического анализа (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Список условных сокращений
  • Глава 1. Обзор литературы
    • 1. 1. Проблема межвидовой контаминации клеточных культур. >,, |
    • 1. 2. Традиционные методы определения видовой принадлежности клеток в культуре
      • 1. 2. 1. Изоферментный анализ клеточных культур
      • 1. 2. 2. Кариологический анализ
        • 1. 2. 2. 1. Закономерности изменения кариотипа клеток длительно-культивируемых in vitro
    • 1. 3. Молекулярно-генетические методы видовой идентификации
      • 1. 3. 1. Полиморфизм длин рестрикционных фрагментов ДНК (ПДРФ)
      • 1. 3. 2. ПЦР с использованием произвольных праймеров
      • 1. 3. 3. Полиморфизм длин амплифицированных фрагментов
      • 1. 3. 4. ПЦР-ПДРФ анализ
      • 1. 3. 5. Видоспецифичная ПЦР
      • 1. 3. 6. Секвенирование маркерных последовательностей
  • Глава 2. Собственные исследования
    • 2. 1. Материалы и методы исследования
      • 2. 1. 1. Материалы
        • 2. 1. 1. 1. Реактивы, препараты и оборудование
        • 2. 1. 1. 2. Клеточные культуры
        • 2. 1. 1. 3. Образцы тканей
      • 2. 2. 1. Методы
        • 2. 2. 1. 1. Культивирование и криоконсервация клеточных культур
        • 2. 2. 1. 2. Кариологический анализ клеточных культур
        • 2. 2. 1. 2. 1. Приготовление кариологических препаратов
        • 2. 2. 1. 2. 2. Рутинная окраска препаратов
        • 2. 2. 1. 2. 3. Окраска на G-полосы
        • 2. 2. 1. 2. 4. Анализ хромосомных препаратов
        • 2. 2. 1. 3. Молекулярно-генетический анализ видовой принадлежности клеточных культур
        • 2. 2. 1. 3. 1. Выделение ДНК
        • 2. 2. 1. 3. 2. Определение нуклеотидной последовательности участков мтДНК
        • 2. 2. 1. 3. 3. Видоспецифичная ПЦР
        • 2. 2. 1. 3. 4. Электрофорез продуктов ПЦР в агарозном геле
  • Глава 3. Результаты исследований
    • 3. 1. Кариологический анализ клеточных культур
      • 3. 1. 1. Клетки линии К562 промиелоцентарного лейкоза человека
      • 3. 1. 2. Клетки почки кролика, линия RK
      • 3. 1. 3. Соматический гибрид свиных клеток, линия А4ХС
      • 3. 1. 4. Соматический гибрид клеток свиньи и лошади, линия A4xL
      • 3. 1. 5. Клетки кожи лошади, линия ЭКЛ
      • 3. 1. 6. Клетки почки коровы, линия MDBK
      • 3. 1. 7. Клетки легкого коровы, линия ЛЭК
      • 3. 1. 8. Клетки почки собаки, линия MDCK
    • 3. 2. Оценка изменчивости и информативности участков генов cytb и COI в клеточных культурах
    • 3. 3. Разработка методики определения видовой принадлежности культур клеток на основе вПЦР-РВ
      • 3. 3. 1. Выбор диагностической мишени, конструирование видоспецифичных праймеров и зондов
      • 3. 3. 2. Первичная оценка сконструированных олигонуклеотидов и оптимизация условий проведения вПЦР-РВ
      • 3. 3. 3. Разработка и оптимизация мультиплексной вПЦР-РВ
      • 3. 3. 3. Изучение чувствительности разработанной вПЦР-РВ
      • 3. 3. 4. Изучение специфичности разработанной вПЦР-РВ
    • 3. 4. Видовая идентификация культур клеток с использованием вПЦР-РВ и анализа нуклеотидных последовательностей участков генов cytb и COI
  • Обсуждение результатов исследований
  • Выводы
  • Практические предложения

Актуальность темы

.

Культуры клеток получили широкое распространение и применение в самых разнообразных областях экспериментальной биологии и медицины для изучения и решения кардинальных проблем общей и частной вирусологии, онкологии, биохимии, биотехнологии и т. д. Чистота и точная характеристика используемой модели, которой во многих случаях служат постоянные клеточные культуры, являются абсолютно необходимым условием работы и требуют их надежной идентификации. Разработка методов идентификации клеточных культур предполагает определение и изучение стабильных клеточных признаков.

Проблема идентификации клеток в культуре стала очевидной еще в 5060-е годы XX века, когда при анализе хромосомных наборов и видоспецифических антигенов ряда клеточных линий человека и животных были выявлены случаи межвидовой клеточной контаминации. В большинстве случаев контаминация происходила клетками HeLa и L (Gartier, 1968).

Для решения данной проблемы разработан ряд методов, основанных на кариологическом анализе, изучении полиморфизма изоферментов и иммунологическом исследовании клеточных культур (Nelson-Rees et al., 1974; O’Brien et al., 1980; Stulberg et al., 1976). С использованием предложенных подходов было показано широкое распространение явления межвидовой и внутривидовой клеточной контаминации во многих лабораториях (Drexler et al., 1999; Freshney, 2008; Mowles and Doyle, 1990; Novokhatskii et al., 1980; Rojas et al., 2008; Stacey, 2000; Stacey et al., 1991).

Однако длительность проведения анализа и необходимость глубоких профессиональных навыков при исследовании кариотипа и спектра изоферментов клеточной линии делают эти методы анализа трудоемкими и сложными для интерпретации. Невозможность стандартизации этапов анализа и последующего сравнения результатов между лабораториями затрудняет их применение в повседневной практике.

В последнее десятилетие широкое распространение получили молекулярно-генетические методы идентификации биологических объектов. Наиболее известным и эффективным стал метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Принцип ПНР основан на многократном умножении исследуемой части генома с последующей детекцией продукта с использованием различных методик. Время анализа снижается до одного дня, а эффективность превосходит традиционные методы идентификации клеток в культуре.

Существует ряд аналитических систем для видовой идентификации биологического материала на основе ПЦР. Но их высокая стоимость и узкий спектр идентифицируемых видов животных являются существенным препятствием для широкого применения в области сертификации клеточных культур. В связи с этим становится актуальным и необходимым разрабатывать новые и адаптировать уже имеющиеся методики определения видовой принадлежности длительно-перевиваемых клеточных культур.

Цель и задачи исследования

.

Целью работы являлось совершенствование методов определения видовой принадлежности клеточных культур.

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи:

1. Оценить стабильность и информативность участков генов цитохрома b (cytb) и субъединицы I цитохром-с-оксидазы (COI) митохондриальной ДНК (мтДНК) клеточных культур с целью последующего использования их в качестве основной мишени в видоспецифичной ПЦР.

2. Сконструировать видоспецифичные олигонуклеотидные праймеры и зонды к нуклеотидным последовательностям генов cytb и COI для идентификации видов животных, клеточные культуры от которых наиболее распространены в специализированных коллекциях.

3. На основе сконструированных праймеров и зондов разработать методику видоспецифичной ПЦР в реальном времени (вПЦР-РВ) с использованием мультиплексного формата реакции. Оценить специфичность и чувствительность разработанной вПЦР-РВ.

4. Провести цитогенетический анализ клеточных культур разного видового происхождения и сравнить с данными молекулярно-генетического анализа.

5. С помощью вПЦР-РВ и секвенирования участков генов суЛ и С01 провести видовую идентификацию клеточных культур в специализированных коллекциях клеточных культур.

Научная новизна.

1. Впервые разработана методика на основе ПЦР в режиме реального времени для идентификации 13-ти видов млекопитающих, клеточные культуры от которых наиболее распространены в различных специализированных коллекциях и научно-исследовательских институтах.

2. Адаптирована методика на основе секвенирования участков генов цитохрома Ь (суШ) и субъединицы I цитохром-с-оксидазы (С01) митохондриальной ДНК (мтДНК) для паспортизации и сертификации культур клеток, полученных от экзотических видов животных.

3. Впервые методами вПЦР-РВ проведен анализ видовой принадлежности 52-х клеточных культур полученных от 20-ти различных видов животных, депонированных в двух специализированных коллекциях: «Коллекция перевиваемых соматических клеточных культур сельскохозяйственных и промысловых животных» Всероссийского НИИ экспериментальной ветеринарии им. Я. Р. Коваленко РАСХН и «Коллекция перевиваемых соматических клеток позвоночных» НИИ Вирусологии им. Д. И. Ивановского РАМН.

Практическая значимость работы.

1. Методика вПЦР-РВ предложена в качестве наиболее эффективного подхода для периодического контроля клеточных культур на предмет соответствия исходной видовой принадлежности и возможной контаминации клетками другого вида.

2. Высокая аналитическая чувствительность, специфичность и универсальность по отношению к анализируемому материалу позволяет расширить область применения и использовать данную методику для видовой идентификации широкого спектра биологических объектов.

3. Дополнительное использование подхода на основе секвенирования участков мтДНК при помощи универсальных праймеров, позволяет значительно расширить спектр идентифицируемых видов животных.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Стабильность и сохранение информативности участков генов cytb и COI мтДНК в условиях длительного культивирования in vitro и использования их в целях видовой идентификации клеточных культур.

2. Разработка методики видовой идентификации клеточных культур с использованием ПЦР с детекцией продукта амплификации в режиме реального времени.

3. Сравнительная оценка результатов кариологического анализа и вПЦР-РВ.

4. Использование вПЦР-РВ и секвенирования участков мтДНК для мониторинга и скрининга на видовую принадлежность клеточных культур, полученных от разных видов животных.

Апробация.

Результаты диссертационной работы доложены и обсуждены на Международной конференции «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных: роль нанотехнологий в реализации приоритетных задач биотехнологии» (Дубровицы, 2008 г.) — Школе-конференции молодых ученых «Методы культивирования клеток» (Санкт-Петербург, октябрь 2008 г.) — Секции «Ветеринарная биотехнология» Отделения ветеринарной медицины РАСХН, 2008; 12-ой Пущинской международной школе-конференции молодых ученых (Пущино, 2008 г.) — межлабораторном совещании научных сотрудников ВИЭВ (2009 г.).

Публикации.

По теме диссертационной работы опубликовано 6 научных работ, в том числе 2 публикации в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура работы.

Выводы.

1. Доказана стабильность и информативность участков генов цитохрома b (cytb) и субъединицы I цитохром-с-оксидазы (COI) мтДНК в качестве генетического маркера для определения видовой принадлежности клеточных культур, полученных от разных видов животных и длительно-культивируемых in vitro.

2. Сконструированы видоспецифичные олигонуклеотидные праймеры и зонды для идентификации 13-ти видов млекопитающих на основании анализа около 600 нуклеотидных последовательностей участков генов cytb и COI.

3. На основе сконструированных праймеров и зондов для идентификации 13-ти видов животных разработано 7 мультиплексных тест-систем, с использованием каждой из которых возможна одновременная идентификация 2-х видов животных. Показана специфичность праймеров и зондов на панели специфичных и гетерологичных экстрактов ДНК, полученных как непосредственно из тканей животных, так и перевиваемых клеточных культур. Чувствительность метода составляла не менее 10 кл/мл. В случае идентификации примеси клеток методика способна детектировать 10 — 100 клеток определяемого вида животного в присутствии 100 000 клеток посторонней культуры.

4. Проведен цитогенетический анализ клеточных культур: человека (К562), кролика (RK-13), лошади (ЭКЛ), КРС (MDBK и ЛЭК), собаки (MDCK), соматических межи внутривидовых гибридов клеток лошадь х свинья (A4xL) и свинья х свинья (А4хС2), реконструирован кариотип каждой клеточной культуры и подтверждена видовая принадлежность. Показано, что для клеточных культур характерен высокий уровень гетерогенности и анеуплоидия различным парам хромосом. Выявлен высокий уровень робертсоновских транслокаций, в клеточных культурах ЛЭК и MDBK.

Сравнение результатов кариологического и молекулярно-генетического анализа показало совпадение в интерпретации видовой принадлежности всех исследованных клеточных культур.

5. Проведен анализ 73-х образцов клеточных культур, полученных от 20-ти различных видов животных и человека, депонированных в «Коллекции перевиваемых соматических клеточных культур сельскохозяйственных и промысловых животных» Всероссийского НИИ экспериментальной ветеринарии им. Я. Р. Коваленко РАСХН и «Коллекции перевиваемых соматических клеток позвоночных» научно-исследовательского института вирусологии им. Д. И. Ивановского РАМН. В 9-ти наименованиях клеточных культур с использованием методов видоспецифичной ПЦР-РВ и секвенирования участков мтДНК выявлено несоответствие результатов молекулярно-генетического анализа паспортным данным.

Практические предложения.

Методические рекомендации по определению видовой принадлежности клеточных культур методом полимеразой цепной реакции с детекцией в реальном времени (ПЦР-РВ): утв. отделением ветеринарной медицины РАСХН 24.11.2008. М. — 19 с. автор: К. В. Кулешов.

Показать весь текст

Список литературы

  1. , Ю. П. Генетические процессы в популяциях: Учебное пособие. 3-е изд., перераб. и доп. / Ю. П. Алтухов- Отв. ред. JI. А. Животовский. М.: ИКЦ «Академкнига», 2003. — 431 с.
  2. , Ю. Б. Генетика соматических клеток. — Л.:Наука Ленингр. отд., 1974.-258 с.
  3. , Г. М. Кариологическое исследование мышиных В-клеточных гибридом / Г. М. Волгарева // Цитология. 1985. — Том. 27, № 12. — С. 1394 -1403.
  4. , А. С. Хромосомы сельскохозяйственных и лабораторных млекопитающих. Атлас/ А. С. Графодатский, С. И. Раджабли — Новосибирск.: Наука Сиб. отд-ние, 1988. 128 с.
  5. , С. Д. Хромосомы. Методы работы. Пер. с 6-го англ. издания / С. Д. Дарлингтон, Л. Ф. Ла Кур- под ред. д.б.н., проф. Н. Н. Воронцова. -М.: Атомиздат, 1980. 216 с.
  6. , В. Г. Контроль безопасности культуральных вирусных вакцин / В. Г. Добротворцева, Н. И. Миловидова // Вопросы вирусологии — 1980.-№ 6-С. 132−136.
  7. Животная клетка в культуре (Методы и применение в биотехнологии)/ под ред. проф. Л. П. Дьяконова, проф. В. И. Ситько. М.: Компания Спутник+, 2000. — 400 с.
  8. , Л. И. Получение и характеристика штаммов диплоидных клеток из тканей эмбриона коровы / Л. И. Калинина, Л. Г. Степанова, Э. Э. Розина, О. Г. Анджапаридзе // Вопросы вирусологии 1978. — № 4.- С. 152 156.
  9. Каталог Российской коллекции клеточных культур //С.-П., Омск: ОмГПУ, 1999.-226 с.
  10. , П. М. Цитогенетика животных/ В. А. Багиров, Н. А. Зиновьева, Ш. Н. Насибов, Б. С. Иолчиев. М.: РАСХН, 2007. — 81 с.
  11. , Т. Д. Создание аттестованных коллекций и банков культур клеток для научных исследований, производства препаратов, диагностики и лечения: Дис.. докт. биол. наук: 03.00.23/ Т. Д. Колокольцова- ГИСК. М., 2007. — 272 с.
  12. , С. Е. Цитогенетика клеток в культуре / С. Е. Мамаева // В. сб.: Биология клетки в культуре. Л.: Наука, 1984.-136 с.
  13. С. Е. Закономерности кариотипической эволюции клеток в культуре / С. Е. Мамаева // Цитология.- 1996. Том. 38, № 8. — С. 787−814.
  14. , С. Е. Характеристика кариотипа постоянных клеточных линий. II Изменчивость и сбалансированность хромосомного набора клеток М— HeLa. / С. Е. Мамаева, Л. Ф. Литвинчук, Г. П. Пинаев // Цитология 1986. — Том. 28, № 2.-С. 193−203.
  15. , С. Е. Атлас хромосом постоянных клеточных линий человека и животных. М.: Научный Мир, 2002. — 236 с.
  16. , Н. Н. Биология клетки в культуре/ Н. Н. Никольский, Ю. Б. Бахтин, Т. Н. Игнатова и др. Л.: Наука, 1984. — 280 с.
  17. , А. С.'Проблема контаминации клетками и новые подходы к контролю перевиваемых линий / А. С. Новохатский, Г. Р. Михайлова, А. А. Царева // Вопросы вирусологии.- 1976. -№ 7. С. 396−408.
  18. , A.C. Контаминация клеток перевиваемых линий / А. С. Новохатский, А. А. Царева, Г. Р. Михайлова, В. М. Жданов // Вопросы вирусологии 1979. -№ 8. — С. 432−439.
  19. , Г. Г. Влияние условий культивирования на кариотпическую структуру двух клеточных сублиний фибробластов кожи индийского мунтжака / Г. Г. Полянская // Цитология 1989. — Том. 31, № 7. — С. 807−817.
  20. , Г. Г. Закономерности кариотипической изменчивости в клеточных культурах при длительном культивировании в разных условиях: автореф. дис.. д-р биол. наук: 03.00.25 / Г. Г. Полянская. С.-П., 2000. — 38 с.
  21. , Г. Г. Кариотипическая изменчивость в длительно культивируемых клеточных линиях без маркерных хромосом. / Г. Г. Полянская, Т. Н. Ефремова, Г. А. Сакута // Тезисы II съезда ВОГиС 2000. № 1.-С. 246−247.
  22. , Е. П. Аналитические исследования в медицине, биологии и экологии: Учеб. пособие для вузовУ Е. П. Попечителев, О. Н. Старцева. М.: Высш. шк., 2003. — 279 с.
  23. Сингер- М. Гены и геномы: В 2-х т. Пер. с англ./ М. Сингер, П. Берг М.: Мир, 1998.-373 с.
  24. , Б.Т. Цито генетические методы оценки стабильности биотехнологйческих параметров перевиваемых клеточных линий/ Б. Т. Стегний, М. Ю. Стегний, А. А. Лаврик // Цитология. 2008. — Том. 50, № 9. -С. 823−824.
  25. , Л.В. Стабильность кариотипа двух постоянных клеточных линий клеток китайского хомячка — СНО-К1 и V—79 /Филатов Л.В., Мамаева С.Е.// Цитология.-1985.-Том. 27,№ 9.-С. 1031−1038.
  26. , A.A. Идентификация линий клеток насекомых /Царева A.A., Колокольцова Т. Д., Немцов Ю. В., Исаенко A.A., Бочкова ТТЛ Вопросы вирусологии.- 1986. -№ 2. С. 87−95.
  27. Altschul, S. F Basic local alignment search tool /Altschul S.F., Gish W., Miller W., Myers E.W., Lipman D.J.// J Mol Biol.- 1990. Vol. 215, № 3. — P. 403−10.
  28. Anichkov, N.M. Specific chromosomal changes (aberrations) -supplementary marker of malignant degeneration in oncomorphologic studies /Anichkov N.M., Mamaev N.N., Mamaeva S.E., Skripnik S.V.// Arkh Patol.- 1986. Vol. 48, № 6. -P. 87−91.
  29. Araviashvili, D.E. The cytogenetic characteristics of human B-lymphoblastoid cell lines /Araviashvili D.E., Agrba V.Z., Timanovskaia V.V., Tsvileneva N.N., Mamaeva S.E.// Tsitologiia 1994. — Vol. 36, № 7. — P. 696 700.
  30. Bardakci, F. RAPD technique in tilapia fish: species and subspecies identification /Bardakci F., Skibinski D.O.// Heredity.- 1994. Vol. 73. — P. 11 723.
  31. Bataille, M. Multiplex amplification of mitochondrial DNA for human and species identification in forensic evaluation /Bataille M., Crainic K., Leterreux M., Durigon M., de Mazancourt P.// Forensic Sei Int.- 1999. Vol. 99, № 3. — P. 165— 70.
  32. Becak, M.L. Amphibia: new insights /Becak M.L., Becak W.// Cytogenet Cell Genet.- 1998. Vol. 80, № 1−4. — P. 28−33.
  33. Bellis, C. A molecular genetic approach for forensic animal species identification /Bellis C., Ashton K.J., Freney L., Blair B., Griffiths L.R.// Forensic Sei Int.-2003. Vol. 134, № 2−3. — P. 99−108.
  34. Benson, D.A. GenBank /Benson D.A., Karsch-Mizrachi I., Lipman D.J., Ostell J., Wheeler D.L.// Nucleic Acids Res 2008. — Vol. 36, № Database issue. -P. D25−30.
  35. Berman, L. Eight culture strains (Detroit) of human epithelial-like cells /Berman L., Stulberg C.S.// Proc Soc Exp Biol Med.- 1956. Vol. 92, № 4. — P. 730−5.
  36. Blaxter, M.L. The promise of a DNA taxonomy /Blaxter M.L.// Philosophical Transactions of the Royal Society B: Biological Sciences 2004. — Vol. 359, № 1444.- P. 669−679.
  37. Brand, K.G. Immunology of cultivated mammalian cells. I. Species specificity determined by hemagglutination /Brand K.G., Syverton J.T.// J Natl Cancer Inst-1960.-Vol. 24.-P. 1007−19.
  38. Brown, G.G. Structural conservation and variation in the D-loop-containing region of vertebrate mitochondrial DNA /Brown G.G., Gadaleta G., Pepe G., SacconeC., SbisaE.// J Mol Biol.- 1986.-Vol. 192, № 3.-P. 503−11.
  39. Buntjer, J.B. Mammalian species identification by interspersed repeat PCR fingerprinting /Buntjer J.B., Lenstra J. A.// Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology.- 1998. Vol. 21, № 3. — P. 121−127.
  40. Chang, R.S. Continuous subcultivation of epithelial-like cells from normal human tissues /Chang R.S.// Proc Soc Exp Biol Med.- 1954. Vol. 87, № 2. — P. 440−3.
  41. Chen, M.H. Polymorphism and heteroplasmy of mitochondrial DNA in the D-loop region in Taiwanese /Chen M.H., Lee H.M., Tzen C.Y.// J Formos Med Assoc.- 2002. Vol. 101, № 4. — P. 268−276.
  42. Chicago Conference: Standartization in Human Cytogenetic. Birth Defects: Original Article, Series 11:2, 1966. The N. Foundation, N.Y.
  43. Civera, T. Species identification and safety of fish products /Civera T.// Vet Res Commun.- 2003. -Vol. 27 Suppl l.-P. 481189.
  44. Clausen, J.J. Comparative chromosomal study of 31 cultured mammalian cell lines /Clausen J.J., Syverton J.T.// J Natl Cancer Inst 1962. — Vol. 28. — P. 117 145.
  45. Coombs, R.R. The mixed agglutination reactions in the study of normal and malignant cells /Coombs R.R.// Cancer Res.- 1961. Vol. 21. — P. 1198−1202.
  46. Cooper, J.K. Species identification in cell culture: a two-pronged molecular approach /Cooper J.K., Sykes G., King S., Cottrill K., Ivanova N.V., Hanner R., Ikonomi P.// In Vitro Cell Dev Biol Anim.- 2007. Vol. 43, № 10. — P. 344−351.
  47. Coriell, L.L. Detection and elimination of contaminating organisms /Coriell L.L.// Natl Cancer Inst Monogr- 1962. Vol. 7. — P. 33−53.
  48. Coriell, L.L. Common antigens in tissue culture cell lines /Coriell L.L., Tall M.G., Gaskill H.// Science.- 1958. Vol. 128, № 3317. — P. 198−9.
  49. Defendi, V. Immunological and karyological criteria for identification of cell lines /Defendi V., Billingham R.E., Silvers W.K., Moorhead P.// J Natl. Cancer. Inst.- 1960. Vol. 25. — P. 359−85.
  50. Deinhardt, F. Studies on the viral spectra of tissue culture lines of human cells /Deinhardt F., Henle G.// J Immunol.- 1957. Vol. 79, № 1. — P. 60−7.
  51. Dooley, J.J. Detection of meat species using TaqMan real-time PCR assays /Dooley J.J., Paine K.E., Garrett S.D., Brown H.M.// Meat Science.- 2004. Vol. 68, № 3.-P. 431−438.
  52. Drew, R.M. Isolation and propagation of rabbit kidney epithelialike cells /Drew R.M.// Science.- 1957. Vol. 126, № 3277. — P. 747−8.
  53. Drexler, H.G. False human hematopoietic cell lines: cross-contaminations and misinterpretations /Drexler H.G., Dirks W.G., MacLeod R.A.// Leukemia 1999. -Vol. 13, № 10.-P. 1601−7.
  54. Drexler, H.G. Cross-contamination: HS-Sultan is not a myeloma but a Burkitt lymphoma cell line /Drexler H.G., MacLeod R.A., Dirks W.G.II Blood.-2001. Vol. 98, № 12. — P. 3495−6.
  55. Drexler, H.G. DNA profiling and cytogenetic analysis of cell line WSU-CLL reveal cross-contamination with cell line REH (pre B-ALL) /Drexler H.G., Quentmeier H., Dirks W.G., Uphoff C.C., MacLeod R.A.// Leukemia.- 2002. -Vol. 16, № 9.-P. 1868−70.
  56. Eagle, H. Propagation in a fluid medium of a human epidermoid carcinoma, strain KB /Eagle H.// Proc Soc Exp Biol Med.- 1955. Vol. 89, № 3. — P. 362−4.
  57. Eledath, F.M. Detection of nucleotide variations in the D-loop region of bovine mitochondrial DNA using polymerase chain reaction-based methodologies /Eledath F.M., Hines H.C.// Anim Genet.- 1996. Vol. 27, № 5. — P. 333−6.
  58. Fitzgerald, P.H. Total aneuploidy and age-related sex chromosome aneuploidy in cultured lymphocytes of normal men and women /Fitzgerald P.H., McEwan C.M.// Hum Genet.- 1977. Vol. 39, № 3. — P. 329−37.
  59. Freshney, R.I. Authentication of cell lines: ignore at your peril! /Freshney R.I.// Expert Review of Anticancer Therapy 2008. — Vol. 8, № 3. — P. 311−314.
  60. Galloway, S.M. Aneuploidy and ageing: chromosome studies on a random sample of the population using G-banding /Galloway S.M., Buckton K.E.// Cytogenet Cell Genet.- 1978. Vol. 20, № 1−6. — P. 78−95.
  61. Gartier, S.M. Apparent Heia cell contamination of human heteroploid cell lines /Gartier S.M.// Nature.- 1968. Vol. 217, № 5130. -P. 750−1.
  62. Gibson, U.E. A novel method for real time quantitative RT-PCR /Gibson U.E., Heid C.A., Williams P.M.// Genome Res.- 1996. Vol. 6, № 10. — P. 9 951 001.
  63. Grasela, J.J. Application of inter-simple sequence repeats to insect cell lines: identification at the clonal and tissue-specific level /Grasela J.J., Mcintosh A.H.// In Vitro Cell Dev Biol Anim 2003. — Vol. 39, № 8−9. — P. 353−63.
  64. Guo, H.R. Analysis of three marine fish cell lines by rapd assay /Guo H.R., Zhang S.C., Tong S.L., Xiang J.H.// In Vitro Cell Dev Biol Anim.- 2001. Vol. 37, № 7.-P. 430−3.
  65. Halton, D.M. Cell culture quality control by rapid isoenzymatic characterization /Halton D.M., Peterson W.D., Jr., Hukku B.// In Vitro 1983. -Vol. 19, № l.-P. 16−24.
  66. Hay, RJ. Methods for authenticating cell lines /Hay R.J.// Dev Biol Stand.-1992.-Vol. 76.-P. 25−37.
  67. He, L. Identification of necrophagous fly species using IS SR and SCAR markers /He L., Wang S., Miao X., Wu H., Huang Y.// Forensic Sei Int.- 2007. -Vol. 168, № 2−3.-P. 148−53.
  68. Heath, D.D. PCR primed with VNTR core sequences yields species specific patterns and hypervariable probes /Heath D.D., Iwama G.K., Devlin R.H.// Nucleic Acids Res.- 1993. Vol. 21, № 24. — P. 5782−5.
  69. Hebert, P.D. Barcoding animal life: cytochrome c oxidase subunit 1 divergences among closely related species /Hebert P.D., Ratnasingham S., deWaard J.R.// Proc Biol Sei.- 2003. Vol. 270 Suppl 1. — P. S96−9.
  70. Heid, C.A. Real time quantitative PCR /Heid C.A., Stevens J., Livak K.J., Williams P.M.// Genome Res.- 1996. Vol. 6, № 10. — P. 986−94.
  71. Hershfield, B. A polymerase chain reaction-based method for the identification of DNA samples from common vertebrate species /Hershfield B., Chader G., Aguirre G.// Electrophoresis.- 1994. Vol. 15, № 7. — P. 880−4'.
  72. Higuchi, R. Kinetic PCR analysis: real-time monitoring of DNA amplification reactions /Higuchi R., Fockler C., Dollinger G., Watson R.// Biotechnology (N Y).- 1993. Vol. 11, № 9. — P. 1026−30.
  73. Hoelzel, A.R. Evolution of the cetacean mitochondrial D-loop region /Hoelzel A.R., Hancock J.M., Dover G.A.// Mol Biol Evol.- 1991. Vol. 8, № 4. -P. 475−93.
  74. Hsieh, H.M. Cytochrome b gene for species identification of the conservation, animals /Hsieh H.-M., Chiang H-L., Tsai L.-C., Lai S—Y., Huang N.-E., Linacre
  75. A., Lee J.C.-I.// Forensic Science International.- 2001. Vol. 122, № 1. — P. 718.
  76. Imaizumi, K. Development of species identification tests targeting the 16S ribosomal RNA coding region in mitochondrial DNA /Imaizumi K., Akutsu T., Miyasaka S., Yoshino M.// International Journal of Legal Medicine 2007. — Vol. 121, № 3.-P. 184−191.
  77. Irwin, D.M. Evolution of the cytochrome b gene of mammals /Irwin D.M., Kocher T.D., Wilson A.C.// J Mol Evol.-1991. Vol. 32, № 2.-P. 128−44.
  78. Jones, S.W. DNA assays for detection, identification, and individualization of select agent microorganisms /Jones S.W., Dobson M.E., Francesconi S.C., Schoske R., Crawford R.// Croat Med J.- 2005. Vol. 46, № 4. — P. 522−9.
  79. Jonker, K.M. Species identification in meat products using real-time PCR /Jonker K.M., Tilburg J.J., Hagele G.H., de Boer E.// Food Addit Contam Part A Chem Anal Control Expo Risk Assess 2008. — Vol. 25, № 5. — P. 527−33.
  80. Kang, H.W. Fingerprinting of diverse genomes using PCR with universal rice primers generated from repetitive sequence of Korean weedy rice /Kang H.W., Park D.S., Go S.J., Eun M.Y.// Mol Cells.-2002. Vol. 13, № 2.-P. 281−7.
  81. Kawai, Y. An insect cell line discrimination method by RAPD-PCR /Kawai Y., Mitsuhashi J.// In Vitro Cellular & Developmental Biology Animal — 1997. -Vol. 33, № 7.-P. 512−515.
  82. Kitano, T. Two universal primer sets for species identification among vertebrates /Kitano T., Umetsu K., Tian W., Osawa M.// Int J Legal Med.- 2007. -Vol. 121, № 5.-P. 423−7.
  83. Lee, J.C. Random amplified polymorphic DNA polymerase chain reaction (RAPD PCR) fingerprints in forensic species identification /Lee J.C., Chang J.G.// Forensic Sei Int.- 1994. Vol. 67, № 2. — P. 103−7.
  84. Lehman, J.M. Early chromosome changes in diploid Chinese hamster cells after infection with Simian virus 40 /Lehman J.M.// Int J Cancer- 1974. Vol. 13, № 2.-P. 164−72.
  85. Leighton, J. The similarity in histologic appearance of some human cancer and normal cell strains in sponge-matrix tissue culture /Leighton J., Kline I., Belkin M., Legallais F., Orr H.C.// Cancer Res.- 1957. Vol. 17, № 5. — P. 35 963.
  86. Linacre, A. Species determination: the role and use of the cytochrome b gene /Linacre A., Lee J.C.// Methods Mol Biol.- 2005. Vol. 297. — P. 45−52.
  87. Litvinchuk, L.F. Karyotype of continuous cell lines. I. The karyotype variability of M-HeLa cells cultured by static and roll—tube methods /Litvinchuk L.F., Mamaeva S.E., Kovtunova N.G., Pinaev G.P.// Tsitologiia- 1986. Vol. 28, № l.-P. 56−62.
  88. Liu, M.Y. Rapid identification and authentication of closely related animal cell culture by polymerase chain reaction /Liu M., Liu H., Tang X., Vafai A.// In Vitro Cell Dev Biol Anim.- 2008. Vol. 44, № 7. — P. 224−7.
  89. Liu, M.Y. A. Identification and authentication of animal cell culture by polymerase chain reaction amplification and DNA sequencing /Liu M.Y., Lin S.C., Liu H., Candal F., Vafai A.// In-Vitro Cell Dev Biol Anim.- 2003. Vol. 39, № 10.-P. 424−7.
  90. Lopez-Andreo, MJ. Identification and quantitation of species in complex DNA mixtures by real-time polymerase chain reaction /Lopez—Andreo M., Lugo L., Garrido-Pertierra A., Prieto M.I., Puyet A'.// Anal Biochem 2005. — Vol. 339, № l.-P. 73−82.
  91. Lopez-Pinon, M.J. Identification of four scallop species using PCR and restriction analysis of the ribosomal DNA internal transcribed spacer region /Lopez-Pinon M.J., Insua A., Mendez J.// Mar Biotechnol (NY).- 2002. Vol. 4, № 5.-P. 495−502.
  92. Luo, H.5 Species identification of biomaterials by amplifying 12S rRNA gene /Luo H., Lu H.L., Zhou X.C., Zhang Y.Q., Yao Y.N.// Fa. Yi Xue Za Zhi.- 2008. -Vol. 24, № 3.-P: 185−8, 193.
  93. Mamaeva, S.E. Karyotypic evolution- of cells- in culture: a new concept /Mamaeva S.E.// Int Rev Cytol.- 1998. Vol. 178. — P. 1−40.
  94. Matlashewski, G. Transformation of primary human fibroblast cells with-human, papillomavirus type 16 DNA and. EJ-ras /Matlashewski G., Osborn K., Banks L., Stanley M., Crawford L.// Int J Cancer.- 1988. Vol. 42, № 2. — P. 232−8.
  95. McClelland, E.K. A genetic linkage map for coho salmon-(Oncorhynchus kisutch) /McClelland E.K., Naish K.A.// Anim Genet.- 2008. Vol. 39, № 2. — P. 169−79.
  96. Meyer, R. Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism analysis: a simple method"for species identification in food
  97. R., Hofelein C., Luthy J., Candrian U.// J AOAC Int.- 1995. Vol. 78, № 6. — P. 1542−51.
  98. Moore, A.E. Culture characteristics of four permanent lines of human cancer cells /Moore A.E., Sabachewsky L., Toolan H.W.// Cancer Res.- 1955. Vol. 15, № 9. — P. 598−602.
  99. Moore, A.E. Neoplastic changes developing in epithelial cell lines derived from normal persons /Moore A.E., Southam C.M., Sternberg S.S.// Science-1956.-Vol. 124, № 3212.-P. 127−9.
  100. Moorhead, P. S. Choromosome preparations of leukocytes cultured from human peripheral blood /Moorhead P. S., Mellman W.J., Batteps D.M., Hungerford D.A.// Exp Cell Res.- 1960. Vol. 20, № 4. — P. 613−616.
  101. Mowles, J.M. Cell culture standards—time for a rethink? /Mowles J.M., Doyle A.// Cytotechnology.— 1990. Vol. 3, № 2. — P. 107−8.
  102. Mukherji, B. Spontaneous in vitro transformation of human fibroblasts /Mukherji B., MacAlister T.J., Guha A., Gillies C.G., Jeffers D.C., Slocum S.K.// J Natl Cancer Inst.- 1984. Vol. 73, № 3. — P. 583−93.
  103. Murray, B.W. Forensic identification of ungulate species using restriction digests of PCR-amplified mitochondrial DNA /Murray B.W., McClymont R.A., Strobeck CM J Forensic Sei.- 1995. Vol. 40, № 6. — P. 943−51.
  104. Naimuddin, M. Genome analysis technologies: towards species identification by genotype /Naimuddin M., Nishigaki K.// Brief Funct Genomic Proteomic — 2003.-Vol. 1,№ 4.-P. 356−71.
  105. Nelson-Rees, W.A. The identification and monitoring of cell line specificity /Nelson-Rees W.A.// Prog Clin Biol Res.- 1978. Vol. 26. — P. 25−79.140
  106. Nelson-Rees, W.A. Clonal derivatives of a bovine kidney cell line (MDBK) and continuing preservation of total chromosomal material /Nelson-Rees W.A., Darby N.B., Siegel S.T.// Chromosoma.- 1966. Vol. 18, № 1. — P. 70−78.
  107. Nelson-Rees, W.A. Banded marker chromosomes as indicators of intraspecies cellular contamination /Nelson-Rees W.A., Flandermeyer R.R., Hawthorne P.K.// Science.-1974.-Vol. 184, № 4141.-P. 1093−6.
  108. Nims, R.W. Sensitivity of isoenzyme analysis for the detection of interspecies cell line cross-contamination /Nims R.W., Shoemaker A.P., Bauernschub M.A., Rec L.J., Harbell J.W.// In Vitro Cell Dev Biol Anim.- 1998. Vol. 34, № 1. — P. 35−9.
  109. Novokhatskii, A.S. Contamination of continuous cell lines /Novokhatskii
  110. A.S., Tsareva A.A., Mikhailova G.R., Zhdanov V.M.// Vopr Virusol.- 1980.- № 4.-P. 432−9.
  111. O’Brien, S, J. A molecular approach to the identification and individualization., of human and animal cells in culture: isozyme and allozyme genetic signatures /O'Brien S.J., Shannon J.E., Gail M.H.// In Vitro.- 1980. Vol. 16, № 2. — P. 119−35.
  112. Ono, K. Species identification of animal cells by nested PCR targeted to mitochondrial DNA /Ono K., Satoh M., Yoshida T., Ozawa Y., Kohara A., Takeuchi M., Mizusawa H., Sawada H.// In Vitro Cell Dev Biol Anim 2007. -Vol. 43, № 5−6.-P. 168−75.
  113. Partis, L. Identification of fish species using random amplified polymorphic DNA (RAPD) /Partis L., Wells R.J.// Mol Cell Probes.- 1996. Vol. 10, № 6. -P. 435−41.
  114. Paul, D.N.H. Biological identifications through DNA barcodes /Paul D.N.H., Alina C., Shelley L.B., Jeremy R.d.// Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences.-2003. Vol. 270, № 1512. -P. 313−321.
  115. Pepe, T. Mitochondrial cytochrome b DNA sequence variations: an approach to fish species identification in processed fish products /Pepe T., Trotta M., di Marco I., Cennamo P., Anastasio A., Cortesi M.L.// J Food Prot 2005. — Vol. 68, № 2.-P. 421−5.
  116. Percifield, R.J. Genetic diversity in Hypericum and AFLP Markers for species-specific identification of H. perforatum L /Percifield R.J., Hawkins J.S., McCoy J.A., Widrlechner M.P., Wendel J.F.// Planta Med.- 2007. Vol. 73, № 15. -P. 1614−21.
  117. Pereira, F. Identification of species with DNA-based technology: current progress and challenges /Pereira F., Carneiro J., Amorim A.// Recent Pat DNA Gene Seq.-2008. Vol. 2, № 3. — P. 187−99.
  118. K37. Poljanskaya, G. G. The karyotypic structure of cell populations in vitro as integral system / G. G. Poljanskaya, Y. B. Vakhtin// Tsitologiya: 2003. — Vol. 45, № 2'.-P. 115−131.
  119. Rey, J.A. Serial cytogenetic study of a human glioma cellline /Rey JJ.A., Belloi M.J., Ramos, C., Benitez J., MuelasJ.M.// Cancer Genet Cytogenet- 1983. Vol. 8, № 4.-P. 287−95.
  120. Risterucci, A.M. Identificationt of QTLs related^to cocoa resistance to*three species of Phytophthorai/Risterucci A. M, Paulin Di, Ducamp M., N’Goran, J.A., Lanaud CM Theor Appl Genet.- 2003. Vol. 108, № 1. — P. 168−74.
  121. Rodrigo, A.G. Quantitation of target molecules from polymerase chain' reaction-based! limiting dilution assays /Rodrigo A.G., Goracke P.C., Rowhanian K., Mullins J.I.// AIDS Res Hum Retroviruses.- 1997. Vol. 13, № 9. — P. 73 742:
  122. Rojas, A. Cell line cross-contamination in biomedical- research: a call to prevent unawareness /Rojas A., Gonzalez L, Figueroa H.// Acta Pharmacol Sin.— 2008. Vol. 29, № 7. — P.1 877−80.
  123. Rothfels, K.H. The chromosome complement of the rhesus monkey (Macaca mulatta) determined in kidney cells cultivated in vitro /Rothfels K.H., Siminovitch L.// Chromosoma.- 1958. Vol. 9, № 2. — P. 163−75.
  124. Saitou, N. The neighbor-joining method: a new method for reconstructing phylogenetic trees /Saitou N., Nei M. II Mol Biol Evol.- 1987. Vol. 4, № 4. — P. 406−25.
  125. Salk, J.E. Some characteristics of a continuously propagating cell derived from monkey heart tissue /Salk J.E., Ward E.N.// Science 1957. — Vol. 126, № 3287.-P. 1338−9.
  126. Sarkar, P. Karyologic Studies on Cells From Rabbit Cornea and Other Tissues Grown in Vitro /Sarkar P., Basu P.K., Miller I.// Invest. Ophthalmol. Vis. Sci-1962.-Vol. 1, № 1. — P. 33—40.
  127. Seabright, M. A rapid banding technique for human chromosomes /Seabright MM Lancet.- 1971. Vol. 2, № 7731. — P. 971−2.
  128. Silva, L.M. Fingerprinting of cell lines by directed amplification of minisatellite-region DNA (DAMD) /Silva L.M., Monies de Oca H., Diniz C.R., Fortes-Dias C.L.// Braz J Med Biol Res.-2001.-Vol. 34, № 11.-P. 1405−10.
  129. Simpson, W.F. Species Identification of Animal Cell Strains by. Immunofluorescence /Simpson W.F., Stulberg C.S.// Nature.- 1963. Vol. 199.1. P. 616−7.
  130. Sotelo, C.G. Identification of flatfish (Pleuronectiforme) species using DNA—based techniques /Sotelo C.G., Calo-Mata P., Chapela M.J., Perez-Martin R.I., 144
  131. Rehbein H., Hold G.L., Russell V.J., Pryde S., Quinteiro J., Izquierdo M., Rey-Mendez M., Rosa C., Santos A.T.// J Agric Food Chem.- 2001. Vol. 49, № 10. -P. 4562−9.
  132. Sperling, F.A. A DNA-based approach to the identification of insect species used for postmortem interval estimation /Sperling F.A., Anderson G.S., Hickey D.A.// J Forensic Sci.- 1994. Vol. 39, № 2. — P. 418−27.
  133. Stacey, G.N. Cell contamination leads to inaccurate data: we must take action now /Stacey G.N.// Nature.- 2000. Vol. 403, № 6768. — P. 356.
  134. Stacey, G.N. The quality control of cell banks using DNA fingerprinting /Stacey G.N., Bolton B.J., Doyle A.// EXS.- 1991. Vol. 58. — P. 361−70.
  135. Stacey, G.N. DNA fingerprinting transforms the art of cell authentication /Stacey G.N., Bolton B.J., Doyle A.// Nature.- 1992. Vol. 357, № 6375. — P. 261−2.
  136. Stacey, G.N. Authentication of animal cell cultures by direct visualization of repetitive DNA, aldolase gene PCR and isoenzyme analysis /Stacey G.N., Hoelzl H., Stephenson J.R., Doyle A.// Biologicals.- 1997. Vol. 25, № 1. — P. 75−85.
  137. Stanley, S.E. Cytochrome b evolution in birds and mammals: an evaluation of the avian constraint hypothesis /Stanley S.E., Harrison R.G.// Mol Biol Evol-1999. Vol. 16, № 11.-P. 1575−1585.
  138. Steube, K. Identification and verification of rodent cell lines by polymerase chain reaction /Steube K., Koelz A.-L., Drexler H.// Cytotechnology.- 2008a. -Vol. 56, № l.-P. 49−56.
  139. Steube, K.G. Identification and verification of rodent cell lines by polymerase chain reaction /Steube K.G., Koelz A.L., Drexler H.G.// Cytotechnology.- 2008b. -Vol. 56, № l.-P. 49−56.
  140. Steuber, S. PCR-RFLP analysis: a promising technique for host species identification of blood meals from tsetse flies (Diptera: Glossinidae) /Steuber S., Abdel-Rady A., Clausen P.H.// Parasitol Res.- 2005. Vol. 97, № 3. — P. 247−54.
  141. Stulberg, C.S. Identification of cells in culture /Stulberg C.S., Peterson W.D., Jr., Simpson W.F.// Am J Hematol.- 1976. Vol. 1, № 2. — P. 237−42.
  142. Stulberg, C.S. Species-related antigens of mammalian cell strains as determined by immunofluorescence /Stulberg C.S., Simpson W.F., Berman L.// Proc Soc Exp Biol Med.- 1961. Vol. 108. — P. 434−9.
  143. Tamura, K. MEGA4: Molecular Evolutionary Genetics Analysis (MEGA) software version 4.0 /Tamura K., Dudley J., Nei M., Kumar S.// Mol Biol Evol.-2007. Vol. 24, № 8. — P. 1596−9.
  144. Thiel, G. Karyotypes in 90 human gliomas /Thiel G., Losanowa T., Kintzel D., Nisch G., Martin H., Vorpahl K., Witkowski R.// Cancer Genet Cytogenet-1992.-Vol. 58,№ 2.-P. 109−20.
  145. Tobe, S.S. Linacre A.M. A multiplex assay to identify 18 European mammal species from mixtures using the mitochondrial cytochrome b gene /Tobe S.S., Linacre A.M.// Electrophoresis 2008. — Vol. 29, № 2. — P. 340−7.
  146. Trewyn, R.W. Karyotype and tumorigenicity of 1-methylguanine-transformed Chinese hamster cells /Trewyn R.W., Kerr S.J., Lehman J.M.// J Natl Cancer Inst.- 1979. Vol. 62- № 3. — P. 633−8.
  147. Bokhoven, A. TSU-Prl and JCA-1 cells are derivatives of T24 bladder carcinoma cells and are not of prostatic origin /van Bokhoven A., Varella-Garcia M., Korch C., Miller G.J.// Cancer Res.-2001.-Vol. 61,№ 17.-P. 6340−4.
  148. Vaudano, E. Application of real-time RT-PCR to study gene expression-in active dry yeast (ADY) during the rehydration phase /Vaudano E., Costantini A., Cersosimo M., Del Prete V., Garcia-Moruno E.// Int J Food Microbiol.- 2009. -Vol. 129, № l.-P:30−6.
  149. Vos, P. AFLP: a new technique for DNA fingerprinting /Vos P., Hogers R., Bleeker M., Reijans M., van de Lee T., Homes M., Frijters A., Pot J., Peleman J., Kuiper MM Nucleic Acids Res.- 1995. Vol. 23, № 21. — P. 4407−14.
  150. Walker, J.A. Quantitative PCR for DNA identification based on genome-specific interspersed repetitive elements /Walker J.A., Hughes D.A., Hedges D.J.,
  151. Anders B.A., Laborde M.E., Shewale J., Sinha S.K., Batzer M.A.// Genomics — 2004.-Vol. 83, № 3.-P. 518−27.
  152. Waugh, J. DNA barcoding in animal species: progress, potential and pitfalls /Waugh J.// Bioessays.- 2007. Vol. 29, № 2. — P. 188−97.
  153. Westwood, J.C. Transformation of normal cells in tissue culture: its significance relative to malignancy and virus vaccine production /Westwood J.C., Macpherson I.A., Titmuss D.H.// Br J Exp Pathol.- 1957. Vol. 38, № 2. — P. 138−54.
  154. Wolf, C. PCR-RFLP analysis of mitochondrial DNA: a reliable method for species identification /Wolf C., Rentsch J., Hubner P.// J Agric Food Chem.-1999. Vol. 47, № 4. — P. 1350−5.
  155. Xuan, S.Y. Test for hepatitis B virus infection with radical immunoassay and real-time PCR: which method is the gold standard? /Xuan S.Y., Xin Y.N., Zhong Y.D., Zheng M.H., Guan U.S.// J Hepatol.- 2009. Vol. 50, № 1. — P. 211−2- author reply 213.
  156. Yan-chun, X. Molecular genetic strategies for species identification /Yan-chun X., Su-ying B., Yu J., Song-yan J.// Journal of Forestry Research 2000. — Vol. 11, № 4.-P. 249−251.
  157. Ye, Y. Multiple amplification of 16SrRNA gene and Cytb gene in mitochondrial DNA for species identification/Ye Y., Wu J., Luo H.B., Wang Z., Li Y.B.// Fa Yi Xue Za Zhi.- 2008. Vol. 24, № 4. — P. 259−61.
  158. Zaayman, D. A highly sensitive method for the detection and genotyping of West Nile virus by real-time PCR /Zaayman D., Human S., Venter M.// J Virol Methods 2009. -.
  159. Zuker, M. Mfold web server for nucleic acid folding and hybridization prediction /Zuker MM Nucleic Acids Res.- 2003. Vol. 31, № 13. — P. 3406−15.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!