ΠŸΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ Π² написании студСнчСских Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚
АнтистрСссовый сСрвис

Π‘Ρ‚Ρ€ΡƒΠΊΡ‚ΡƒΡ€Π½ΠΎ-Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ΅ исслСдованиС транспортно-ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ‡Π½ΠΎΠΉ РНК Escherichia coli

Π”ΠΈΡΡΠ΅Ρ€Ρ‚Π°Ρ†ΠΈΡΠŸΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ Π² Π½Π°ΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΈΠΈΠ£Π·Π½Π°Ρ‚ΡŒ ΡΡ‚ΠΎΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒΠΌΠΎΠ΅ΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹

Π Π°Π·Π½ΠΎΠΎΠ±Ρ€Π°Π·Π½Ρ‹Π΅ РНК ΠΈ Π ΠΠš-Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹Π΅ комплСксы Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΡ‹ для протСкания большого числа ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Ρ… процСссов. Π’Π°ΠΊ, Π½Π°ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€, биосинтСз Π±Π΅Π»ΠΊΠ° происходит Π½Π° Ρ€ΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠΌΠ΅ большом Ρ€ΠΈΠ±ΠΎΠ½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅ΠΈΠ΄Π½ΠΎΠΌ комплСксС. Π’ ΡΡ‚ΠΎΠΌ процСссС ΠΏΡ€ΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°ΡŽΡ‚ участиС Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ мРНК ΠΈ Ρ‚Π ΠΠš, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ ΠΏΠΎ Ρ…ΠΎΠ΄Ρƒ дСйствия Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ комплСксы с Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹ΠΌΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½Ρ‚Π°ΠΌΠΈ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ°Ρ†ΠΈΠ»-Ρ‚Π ΠΠš-синтСтазами, Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Π°ΠΌΠΈ трансляции… Π§ΠΈΡ‚Π°Ρ‚ΡŒ Π΅Ρ‰Ρ‘ >

Π‘Ρ‚Ρ€ΡƒΠΊΡ‚ΡƒΡ€Π½ΠΎ-Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ΅ исслСдованиС транспортно-ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ‡Π½ΠΎΠΉ РНК Escherichia coli (Ρ€Π΅Ρ„Π΅Ρ€Π°Ρ‚, курсовая, Π΄ΠΈΠΏΠ»ΠΎΠΌ, ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒΠ½Π°Ρ)

Π‘ΠΎΠ΄Π΅Ρ€ΠΆΠ°Π½ΠΈΠ΅

  • 1. БПИБОК ПРИНЯВЫΠ₯ Π‘ΠžΠšΠ ΠΠ©Π•ΠΠ˜Π™
  • 2. Π’Π’Π•Π”Π•ΠΠ˜Π•
  • 3. ВСрминация трансляции ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΡ†Π΅ΡΡΡ‹, ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡƒΡ€ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ с Π½Π΅ΠΉ /ΠžΠ±Π·ΠΎΡ€ Π»ΠΈΡ‚Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹/
    • 3. 1. ВСрминация трансляции
      • 3. 1. 1. Π˜ΡΡ‚ΠΎΡ€ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΠ°Ρ справка
      • 3. 1. 2. ВСрминация трансляции. ΠžΠ±Ρ‰ΠΈΠ΅ свСдСния
      • 3. 1. 3. Π”Π΅ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ
      • 3. 1. 4. ΠšΠΎΠ½Ρ†Π΅ΠΏΡ†ΠΈΡ &bdquo-молСкулярной ΠΌΠΈΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΈΠΈ"
        • 3. 1. 4. 1. ΠŸΡ€Π΅Π΄ΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°Π΅ΠΌΠ°Ρ &bdquo-антикодоновая мимикрия"
      • 3. 1. 5. ОсвобоТдСниС синтСзированного ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ΄Π° с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ² Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ
      • 3. 1. 6. Диссоциация пост-Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΠ³ΠΎ комплСкса
      • 3. 1. 7. Диссоциация рибосом Π½Π° ΡΡƒΠ±Ρ‡Π°ΡΡ‚ΠΈΡ†Ρ‹ для ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… Ρ€Π°ΡƒΠ½Π΄ΠΎΠ² трансляции
    • 3. 2. ΠŸΡ€ΠΎΡ†Π΅ΡΡΡ‹, ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡƒΡ€ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ с Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ трансляции
      • 3. 2. 1. Π Π΅ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ стоп-ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½ΠΎΠ²
        • 3. 2. 1. 1. ΠŸΡ€ΠΎΠ³Ρ€Π°ΠΌΠΌΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹ΠΉ трансляционный сдвиг Ρ€Π°ΠΌΠΊΠΈ считывания ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠ³Ρ€Π°ΠΌΠΌΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ΅ ΠΏΡ€ΠΎΡ‡Ρ‚Π΅Π½ΠΈΠ΅ стоп-ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½ΠΎΠ²
        • 3. 2. 1. 2. Π Π΅ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ стоп-ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½Π° Π³Π΅Π½Π° 60 Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° Π’4 (translational hopping)
        • 3. 2. 1. 3. Π’ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ сСлСноцистСина Π½Π° ΡΡ‚ΠΎΠΏ-ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½Π΅ UGA
      • 3. 2. 2. ΠšΠΎΠ½ΠΊΡƒΡ€Π΅Π½Ρ†ΠΈΡ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ трансляции ΠΈ Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš
      • 3. 2. 3. ΠšΠΎΠ½ΠΊΡƒΡ€Π΅Π½Ρ†ΠΈΡ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ трансляции ΠΈ Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΌ токсином RelE
      • 3. 2. 4. Π’Ρ€ΠΈΠΏΡ‚ΠΎΡ„Π°Π½ ΠΊΠ°ΠΊ эффСктивный ΠΈΠ½Π³ΠΈΠ±ΠΈΡ‚ΠΎΡ€ Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ трансляции
      • 3. 2. 5. ДСградация мРНК, содСрТащих ΠΏΡ€Π΅ΠΆΠ΄Π΅Π²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½Π½Ρ‹ΠΉ стоп-ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½ (nonsense-mediated decay) Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠ°Ρ… эукариот
  • 4. Π Π΅Π·ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ‚Ρ‹ ΠΈ ΠžΠ±ΡΡƒΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΠ΅
    • 4. 1. НСканоничСский комплСкс ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš ΠΈ EF-Tu
    • 4. 2. МодСль взаимодСйствия Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš с Ρ€ΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠΌΠΎΠΉ
    • 4. 3. Поиск элСмСнта Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš, ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅Ρ‡ΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ ΡƒΠ·Π½Π°Π²Π°Π½ΠΈΠ΅, А ΡƒΡ‡Π°ΡΡ‚ΠΊΠΎΠΌ рибосомы
    • 4. 4. ИсслСдованиС Ρ€ΠΎΠ»ΠΈ Π½Π΅ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Ρ… консСрвативных Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΎΡ‚ΠΈΠ΄ΠΎΠ² Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš
    • 4. 5. Поиск интрамолСкулярных супрСссоров для Π»Π΅Ρ‚Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… ΠΌΡƒΡ‚Π°Ρ†ΠΈΠΉ 85−86UA-+CC ΠΈ 300−301UA—CC
    • 4. 6. ΠœΡƒΡ‚Π°Ρ†ΠΈΠΈ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΎΡ‚ΠΈΠ΄ΠΎΠ² Ρ‚Π ΠΠš-ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ±Π½ΠΎΠΉ части, Π·Π°Ρ‚Ρ€Π°Π³ΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš
    • 4. 7. Π Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΊΠ° ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π° выдСлСния комплСкса транспортно-ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ‡Π½ΠΎΠΉ РНК с Ρ€ΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠΌΠΎΠΉ
  • ΠœΠΠ’Π•Π Π˜ΠΠ›Π« И ΠœΠ•Π’ΠžΠ”Π«
    • 5. 1. Π Π΅Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Ρ‹, Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Ρ‹ ΠΈ Ρ€Π°ΡΡ‚Π²ΠΎΡ€Ρ‹
    • 5. 2. Π‘ΠΈΠΎΠΏΡ€Π΅ΠΏΠ°Ρ€Π°Ρ‚Ρ‹
    • 6. 3. Врансформация ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ Escherichia col
      • 5. 3. 1. ΠŸΡ€ΠΈΠ³ΠΎΡ‚ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ΅Ρ‚Π΅Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ для трансформации с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ Ρ‚Π΅ΠΏΠ»ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ шока
      • 5. 3. 2. ΠŸΡ€ΠΈΠ³ΠΎΡ‚ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ΅Ρ‚Π΅Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ для элСктротрансформации
    • 5. 4. Врансформация
      • 5. 4. 1. ЭлСктротрансформация ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ Π• col
      • 5. 4. 2. Врансформация с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ Ρ‚Π΅ΠΏΠ»ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ шока
    • 5. 5. ΠšΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π³Π΅Π½Π°, ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš
    • 5. 6. Π‘ΠΎΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΠ΅ гСнСтичСской систСмы
    • 5. 7. ΠšΠΎΠ½ΡΡ‚Ρ€ΡƒΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄Ρ‹ pStr
    • 5. 8. Π’Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΌΡƒΡ‚Π°Ρ†ΠΈΠΉ Π² Π³Π΅Π½, ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠΉ Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš
      • 5. 8. 1. Π‘Π°ΠΉΡ‚-Π½Π°ΠΏΡ€Π°Π²Π»Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΉ ΠΌΡƒΡ‚Π°Π³Π΅Π½Π΅Π·
      • 5. 8. 2. Π‘Π»ΡƒΡ‡Π°ΠΉΠ½Ρ‹ΠΉ ΠΌΡƒΡ‚Π°Π³Π΅Π½Π΅Π· Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš in vivo ΠΈ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚ΠΎΠ²
    • 5. 9. ΠžΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠ΅Ρ€Π²ΠΈΡ‡Π½ΠΎΠΉ структуры Π”ΠΠš ΠΏΠΎ Π‘энгСру
    • 5. 10. Анализ активности ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ» Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš
      • 5. 10. 1. Анализ активности ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ» Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ &bdquo-гСнСтичСской систСмы"
      • 5. 10. 2. ΠžΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ активности ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ» Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ Π³ΠΈΠ±Ρ€ΠΈΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ„Π°Π³Π° ΠœΡ‚Ρ‚Π 
      • 5. 10. 3. АминоацилированиС Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš
    • 5. 11. ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ S30 экстракта
    • 5. 12. Π’Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ комплСкса Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš, Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰Π΅ΠΉ с Ρ€ΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠΌΠΎΠΉ
      • 5. 12. 1. Π’Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ комплСкса Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš, Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰Π΅ΠΉ с Ρ€ΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠΌΠΎΠΉ
      • 5. 12. 2. Π’Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ суммарной РНК комплСкса
      • 5. 12. 3. Π’Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ суммарных Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² комплСкса
    • 5. 13. Π€ΠΎΡ‚ΠΎΠ°Ρ„Ρ„ΠΈΠ½Π½ΠΎΠ΅ химичСскоС сшиваниС Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš
      • 5. 13. 1. Π‘ΠΈΠ½Ρ‚Π΅Π· Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ Π’7-РНК-ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π°Π·Ρ‹
      • 5. 13. 2. Π‘ΠΈΠ½Ρ‚Π΅Π· 4-Ρ‚ΠΈΠΎΡƒΡ€ΠΈΠ΄ΠΈΠ½ содСрТащСй Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ Π’7-РНК-ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π°Π·Ρ‹
      • 5. 13. 3. Π€ΠΎΡ‚ΠΎΠ°Ρ„Ρ„ΠΈΠ½Π½ΠΎΠ΅ химичСскоС сшиваниС Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš с Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΌ элонгации Π’ΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ с S100 экстрактом
      • 5. 13. 4. ВнутримолСкулярноС Ρ„ΠΎΡ‚ΠΎΠ°Ρ„Ρ„ΠΈΠ½Π½ΠΎΠ΅ химичСскоС сшиваниС Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš .95 5.14. Анализ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ΠΎΠ² сшивания
      • 5. 14. 1. Анализ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½Ρ‚Π° сшивки.95'
      • 5. 14. 2. Анализ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ΠΎΠ² сшивания с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ†ΠΈΠΈ ΠΎΠ±Ρ€Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΉ транскрипции
      • 5. 14. 3. Π“ΠΈΠ΄Ρ€ΠΎΠ»ΠΈΠ· Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ Π ΠΠšΠ°Π·Ρ‹ Н
  • Π’Π«Π’ΠžΠ”Π«

Π Π°Π·Π½ΠΎΠΎΠ±Ρ€Π°Π·Π½Ρ‹Π΅ РНК ΠΈ Π ΠΠš-Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹Π΅ комплСксы Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΡ‹ для протСкания большого числа ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Ρ… процСссов. Π’Π°ΠΊ, Π½Π°ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€, биосинтСз Π±Π΅Π»ΠΊΠ° происходит Π½Π° Ρ€ΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠΌΠ΅ большом Ρ€ΠΈΠ±ΠΎΠ½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅ΠΈΠ΄Π½ΠΎΠΌ комплСксС. Π’ ΡΡ‚ΠΎΠΌ процСссС ΠΏΡ€ΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°ΡŽΡ‚ участиС Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ мРНК ΠΈ Ρ‚Π ΠΠš, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ ΠΏΠΎ Ρ…ΠΎΠ΄Ρƒ дСйствия Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ комплСксы с Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹ΠΌΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½Ρ‚Π°ΠΌΠΈ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ°Ρ†ΠΈΠ»-Ρ‚Π ΠΠš-синтСтазами, Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Π°ΠΌΠΈ трансляции. Π’ 1996 Π³ΠΎΠ΄Ρƒ Π±Ρ‹Π»ΠΎ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΎ участиС Π² Ρ‚рансляции Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš ΡƒΠ½ΠΈΠΊΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ»Ρ‹, ΡΠΎΡ‡Π΅Ρ‚Π°ΡŽΡ‰Π΅ΠΉ Π² ΡΠ΅Π±Π΅ Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΊΠ°ΠΊ Ρ‚Π ΠΠš, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΈ ΠΌΠ ΠΠš. Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš основной участник процСсса транс-трансляции, Ρ‚. Π΅. ΠΏΠ΅Ρ€Π΅ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ синтСза Π±Π΅Π»ΠΊΠ° с ΠΌΠ ΠΠš Π½Π° ΠΌΠ ΠΠšΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ±Π½ΡƒΡŽ Ρ‡Π°ΡΡ‚ΡŒ Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš. ΠŸΠ΅Ρ€Π²ΠΎΠ½Π°Ρ‡Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎ ΡΡ‡ΠΈΡ‚Π°Π»ΠΎΡΡŒ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ этот ΠΌΠ΅Ρ…Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌ позволяСт ΠΎΡΠ²ΠΎΠ±ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ΡŒ рибосомы, &bdquo-арСстованныС" Π½Π° Π—-ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅ ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ‡Π½ΠΎΠΉ РНК, лишСнной стопкодона, ΠΈ Π²Π½Π΅ΡΡ‚ΠΈ Π½Π° Π‘-ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ† нСдосинтСзированных Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»ΡŒΠ½ΡƒΡŽ Ρ„Π΅Ρ€ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°ΠΌΠΈ процСссинга, ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ (Ρ‚Π°Π³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²), Ρ‚Π΅ΠΌ самым Π½Π°ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΈΡ… Π½Π° Π΄Π΅Π³Ρ€Π°Π΄Π°Ρ†ΠΈΡŽ с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ спСцифичСских ΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Π°Π· ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ. Однако дальнСйшиС исслСдования ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π»ΠΈ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠ°Ρ… транс-трансляция ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ ΠΏΡ€ΠΎΠΈΡΡ…ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈ Π²ΠΎΠ·Π½ΠΈΠΊΠ½ΠΎΠ²Π΅Π½ΠΈΠΈ ΠΏΠ°ΡƒΠ·Ρ‹ трансляции, Π½Π°ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€, ΠΏΡ€ΠΈ появлСнии Π², А ΡƒΡ‡Π°ΡΡ‚ΠΊΠ΅ рибосомы ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½Π°, ΡΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ Π°Π½Ρ‚ΠΈΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½Ρƒ Ρ€Π΅Π΄ΠΊΠΎΠΉ Ρ‚Π ΠΠš, ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠΉ эффСктивности Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ. Π’ Π½Π°ΡΡ‚оящСС врСмя Π΄Π΅Ρ‚Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠ°Ρ†ΠΈΠΈ ΠΎ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ»ΡΡ€Π½ΠΎΠΌ ΠΌΠ΅Ρ…Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ транстрансляции ΠΈ ΠΎ ΠΌΠ΅Ρ…Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ взаимодСйствия Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš с Ρ€ΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠΌΠΎΠΉ Π½Π΅ ΡΡƒΡ‰Π΅ΡΡ‚Π²ΡƒΠ΅Ρ‚. Данная Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π° посвящСна структурно-Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΌΡƒ исслСдованию транспортноматричной РНК Escherichia соН. ΠŸΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡŒΠΊΡƒ собствСнно Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš посвящСно нСсколько соврСмСнных ΠΎΠ±Π·ΠΎΡ€ΠΎΠ², ΠΌΡ‹ Ρ€Π΅ΡˆΠΈΠ»ΠΈ Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡ΠΈΡ‚ΡŒ Π² Π½Π°ΡΡ‚ΠΎΡΡ‰ΡƒΡŽ Π΄ΠΈΡΡΠ΅Ρ€Ρ‚Π°Ρ†ΠΈΡŽ ΠΎΠ±Π·ΠΎΡ€ Π»ΠΈΡ‚Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹, ΠΎΡ…Π²Π°Ρ‚Ρ‹Π²Π°ΡŽΡ‰ΠΈΠΉ Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Π΅ аспСкты Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ трансляции ΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡƒΡ€ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… с Π½Π΅ΠΉ процСссов. ВСрминация трансляции ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΡ†Π΅ΡΡΡ‹, ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡƒΡ€ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ с Π½Π΅ΠΉ /ΠžΠ±Π·ΠΎΡ€ Π»ΠΈΡ‚Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹/ 3.1.ВСрминация трансляции Врансляция это ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ ΠΈΠ· Ρ„ΡƒΠ½Π΄Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… процСссов, ΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅ΠΊΠ°ΡŽΡ‰ΠΈΡ… Π² ΠΆΠΈΠ²ΠΎΠΉ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠ΅. Π’ Ρ…ΠΎΠ΄Π΅ Π½Π΅Π³ΠΎ рибосома ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ Π³Π΅Π½Π΅Ρ‚ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΡƒΡŽ ΠΈΠ½Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠ°Ρ†ΠΈΡŽ, Π·Π°ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡƒΡŽ Π² ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΎΡ‚ΠΈΠ΄ΠΎΠ² мРНК, Π² ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ аминокислот. Π’ Ρ‚рансляции принято Π²Ρ‹Π΄Π΅Π»ΡΡ‚ΡŒ Ρ‚Ρ€ΠΈ стадии ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ†ΠΈΡŽ, ΡΠ»ΠΎΠ½Π³Π°Ρ†ΠΈΡŽ ΠΈ Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΡŽ, Π½Π° ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠΉ ΠΈΠ· ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Ρ… рибосома взаимодСйствуСт с ΠΎΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΌΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹ΠΌΠΈ Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Π°ΠΌΠΈ. Π’Π°ΠΊ тСрминация трансляции происходит благодаря совмСстной Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π΅ Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΈΡ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹Ρ… Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ². Π”ΠΎΠ»Π³ΠΎΠ΅ врСмя ΠΈΠ·ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎ стадии Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ трансляции Π±Ρ‹Π»ΠΎ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ· Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Ρ‚Ρ€ΡƒΠ΄Π½Ρ‹Ρ… Π·Π°Π΄Π°Ρ‡ Π² ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ»ΡΡ€Π½ΠΎΠΉ Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ. НСдавниС успСхи Π² ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡ‚ΠΈ кристаллографии, рСнтгСноструктурного Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° ΠΈ ΠΊΡ€ΠΈΠΎΡΠ»Π΅ΠΊΡ‚Ρ€ΠΎΠ½Π½ΠΎΠΉ микроскопии ΠΌΠ°ΠΊΡ€ΠΎΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ», ΡƒΡ‡Π°ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… Π² Ρ‚рансляции, смогли ΠΏΡ€ΠΈΠΎΡ‚ΠΊΡ€Ρ‹Ρ‚ΡŒ завСсу Π² ΠΏΠΎΠ½ΠΈΠΌΠ°Π½ΠΈΠΈ ΠΌΠ΅Ρ…Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ° Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ трансляции ΠΈ Π΄Π΅Ρ‚Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ Ρ€ΠΎΠ»ΠΈ Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ² Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ. 3.1.1. Π˜ΡΡ‚ΠΎΡ€ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΠ°Ρ справка БущСствованиС стопили нонсСнс-ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½ΠΎΠ² ΠΊΠ°ΠΊ &bdquo-носитСлСй ΠΈΠ½Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠ°Ρ†ΠΈΠΈ ΠΎ Π³Ρ€Π°Π½ΠΈΡ†Π°Ρ… Π³Π΅Π½ΠΎΠ²" постулировал ΠšΡ€ΠΈΠΊ Π² 1961 Π³ΠΎΠ΄Ρƒ [1]. Π­ΠΊΡΠΏΠ΅Ρ€ΠΈΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎ нонсСнс ΠΌΡƒΡ‚Π°Ρ†ΠΈΠΈ (появлСниС стоп-ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½ΠΎΠ²) ΠΈ ΠΈΡ… ΡΡƒΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΎΡ€Π½Ρ‹Π΅ ΠΌΡƒΡ‚Π°Ρ†ΠΈΠΈ Π²ΠΏΠ΅Ρ€Π²Ρ‹Π΅ ΠΎΠ±Π½Π°Ρ€ΡƒΠΆΠΈΠ»ΠΈ Π² ΡΠΈΡΡ‚Π΅ΠΌΠ΅ бактСрия-Ρ„Π°Π³ [2]. ПозТС всС Ρ‚Ρ€ΠΈ нонсСнс-ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½Π°: UAA, UAG [3] ΠΈ UGA [4] Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΈΠ΄Π΅Π½Ρ‚ΠΈΡ„ΠΈΡ†ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Ρ‹. Π”Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½Ρ‹ Π½Π΅ ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ аминокислот [5], Π° ΠΈΡ… ΠΏΡ€ΠΈΡΡƒΡ‚ствиС Π² ΠΌΠ ΠΠš слуТило сигналом для освобоТдСния ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ΄Π° ΠΈΠ· Ρ€ΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠΌΡ‹ Π² ΡΠΈΡΡ‚Π΅ΠΌΠ΅ трансляции in vitro [6]. ΠœΠ΅Ρ…Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌ узнавания стоп-ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½ΠΎΠ² ΠΈ ΡΠΎΠ±ΡΡ‚Π²Π΅Π½ΠΎΠΎ Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ трансляции Π΄ΠΎΠ»Π³ΠΎΠ΅ врСмя оставался нСпонятным. Π’ΠΏΠ΅Ρ€Π²Ρ‹Π΅ Π² 1965 Π³ΠΎΠ΄Ρƒ Π±Ρ‹Π»ΠΎ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΎ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ освобоТдСниС синтСзированнного ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ΄Π° ΠΈΠ· Ρ€ΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠΌΡ‹ происходит Π½Π΅ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ ΠΎΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰Π΅ΠΉ Ρ‚Π ΠΠš, Π° Ρ‚Ρ€Π΅Π±ΡƒΠ΅Ρ‚ участия ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½-спСцифичных Π΄Π΅ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹Ρ… Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ², Π½Π°Π·Π²Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΏΠΎΠ·Π΄Π½Π΅Π΅ Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Π°ΠΌΠΈ Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ. 8 бактСриях стоп-ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½Ρ‹ ΡƒΠ·Π½Π°ΡŽΡ‚ΡΡ спСцифичСскими Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹ΠΌΠΈ Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Π°ΠΌΠΈ Π½Π°Π·Π²Π°Π½Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΏΠΎΠ·Π΄Π½Π΅Π΅ Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Π°ΠΌΠΈ Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ трансляции I ΠΊΠ»Π°ΡΡΠ° [7], ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ ΠΈΠ· ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Ρ… ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ‚ ΡΠΏΠ΅Ρ†ΠΈΡ„ΠΈΡ‡Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΊ UAA ΠΈ UAG (RF1), Π° Π²Ρ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΉ ΠΊ UAA ΠΈ UGA (RF2) [8]. ПозднСС Π±Ρ‹Π» ΠΎΠ±Π½Π°Ρ€ΡƒΠΆΠ΅Π½ Ρ‚Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΉ Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ RF3 [9,10], ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ΠΉ Π½Π΅ ΠΈΠΌΠ΅Π» спСцифичности ΠΊ ΠΊΠ°ΠΊΠΎΠΌΡƒ-Π»ΠΈΠ±ΠΎ ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½Ρƒ, Π½ΠΎ ΡΡ‚ΠΈΠΌΡƒΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π» Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ² RF1 ΠΈ RF2 in vitro. 3.1.2. ВСрминация трансляции. ΠžΠ±Ρ‰ΠΈΠ΅ свСдСния. ВСрминация трансляции Ρ„ΠΈΠ½Π°Π»ΡŒΠ½Π°Ρ стадия биосинтСза Π±Π΅Π»ΠΊΠ° происходит Π² Ρ‚Ρ€ΠΈ этапа: (1) освобоТдСниС новосинтСзированного Π±Π΅Π»ΠΊΠ° Π² ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ Π½Π° ΠΏΠΎΡΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ стопсигнала Π², А ΡƒΡ‡Π°ΡΡ‚ΠΊΠ΅ рибосомы, (2) диссоциация Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ² Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ ΠΈΠ· ΠΏΠΎΡΡ‚Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΠ³ΠΎ комплСкса, ΠΈ (3) диссоциация рибосомы Π½Π° ΡΡƒΠ±Ρ‡Π°ΡΡ‚ΠΈΡ†Ρ‹ для ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ Ρ€Π°ΡƒΠ½Π΄Π° трансляции. Π­Ρ‚ΠΈ Ρ‚Ρ€ΠΈ этапа Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ ΠΎΡ‡Π΅Π½ΡŒ Ρ‡Π΅Ρ‚ΠΊΠΎ.

Π²Ρ‹Π²ΠΎΠ΄Ρ‹.

1. ББА-ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ† Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš Π½Π΅ ΡƒΡ‡Π°ΡΡ‚Π²ΡƒΠ΅Ρ‚ Π² Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ нСканоничСского комплСкса с EF-Tu-GDP.

2. Π Π΅Π·ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ‚Ρ‹ Ρ„ΠΎΡ‚ΠΎΠ°Ρ„Ρ„ΠΈΠ½Π½ΠΎΠ³ΠΎ внутримолСкулярного сшивания ΡΠ²ΠΈΠ΄Π΅Ρ‚Π΅Π»ΡŒΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‚ Π² ΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·Ρƒ сущСствования Π² ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ»Π΅ Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš Π΄Π²ΡƒΡ… структурных Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½ΠΎΠ².

3. ΠŸΡ€Π΅Π΄Π»ΠΎΠΆΠ΅Π½Π° гипотСтичСская схСма взаимодСйствия Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš с Ρ€ΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠΌΠΎΠΉ Π² ΠΏΡ€ΠΎΡ†Π΅ΡΡΠ΅ транс-трансляции.

4. ΠœΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ сайт-Π½Π°ΠΏΡ€Π°Π²Π»Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΡƒΡ‚Π°Π³Π΅Π½Π΅Π·Π° ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½Π° Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΎΡ‚ΠΈΠ΄ΠΎΠ² 85−86UA ΠΈ 300−301UA для функционирования Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš.

5. Π Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π° систСма сСлСкции /ΠΎ vivo Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎ Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½Ρ‹Ρ… ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ» Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš.

6. ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Ρ‹ комплСксы Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš с Ρ€ΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠΌΠΎΠΉ Π½Π° Ρ€Π°Π·Π½Ρ‹Ρ… этапах трансляции мРНК-ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ±Π½ΠΎΠΉ части Ρ‚ΠΌΠ ΠΠš.

ΠŸΠΎΠΊΠ°Π·Π°Ρ‚ΡŒ вСсь тСкст

Бписок Π»ΠΈΡ‚Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹

  1. Crick, F.H., Barnett, L., Brenner, S. & Watts-Tobin, R.J. General nature of the genetic code for proteins. Nauchni Tr. Vissh. Med. Inst. Sofiia. 192, 1227−1232 (1961).
  2. Brenner, S., Stretton, A.O.W. & Kaplan, S. Genetic code: the 'nonsense' triplets for chain termination and their suppression. Nature 206, 994−998 (1965).
  3. , M.G. & Garen, A. Base composition of non-sense codons in E.coli. Nature 206, 992(1965).
  4. Brenner, S., Barnett, L., Katz, E.R. & Crick, F.H.C. UGA: A third nonsense triplet in the genetic code. Nature 213, 449−450 (1967).
  5. Khorana, H.G. et al. Polynucleotide synthesis and the genetic code, in Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology, Vol. XXXI 39−49 (Cold Spring Harbour Laboratory of Quantitative Biology, New York, 1966).
  6. , M. & Yan, Y. The release of polypeptide chains from ribosomes in cell-free amino acid-incorporating systems by specific combinations of bases in synthetic polyribonucleotides. Proc. N.A.S. 54, 1450−1458 (1965).
  7. Capecchi, M.R. Polypeptide chain termination in vitro: isolation of a release factor. Proc. Natl. Acad. Sci., USA 58,1144−1151 (1967).
  8. Scolnick, E., Tompkins, R., Caskey, T. & Nirenberg, M. Release factors differing in specificity for terminator codons. Proc. Nat. Acad. Sci., USA. 61, 768−774 (1968).
  9. Milman, G., Goldstein, J., Scolnick, E. & Caskey, T. Peptide chain termination. III. Stimulation of in vitro termination. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 63, 183−190 (1969).
  10. , J.L. & Caskey, C.T. Peptide chain termination: effect of protein S on ribosomal binding of RFs. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 67, 537-?. (1970).
  11. Arkov, A.L., Mankin, A. & Murgola, E.J. An rRNA Fragment and Its Antisense Can Alter Decoding of Genetic Information. J. Bacteriol. 180, 2744−2748 (1998).
  12. , A.L. & Murgola, E.J. Ribosomal RNAs in translation termination: facts and hypotheses. Biochemistry (Mosc) 64, 1354−9 (1999).
  13. , R. & Noller, H.F. Ribosomes and translation. Annu. Rev. Biochem. 66, 679−716(1997).
  14. Velichutina, I.V., Hong, J.Y., Mesecar, A.D., Chernoff, Y.O. & Liebman, S.W. Genetic interaction between yeast Saccharomyces cerevisiae release factors and the decoding region of 18 S rRNA. J. Mot. Biol. 305, 715−727 (2001).
  15. , E. & Tate, W. Release factors and their role as decoding proteins: specificity and fidelity for termination of protein synthesis. Biochim Biophys Acta 1493, 1 -11 (2000).
  16. Chavatte, L., Frolova, L., Kisselev, L. & Favre, A. The polypeptide chain release factor eRF1 specifically contacts the s (4)UGA stop codon located in the A site of eukaryotic ribosomes. Eur. J. Biochem. 268, 2896−904 (2001).
  17. Chavatte, L., Seit-Nebi, A., Dubovaya, V. & Favre, A. The invariant uridine of stop codons contacts the conserved NIKSR loop of human eRF1 in the ribosome. EMBO J 21, 5302−5311 (2002).
  18. Ivanov V, Beniaminov A, Mikheyev A & E, M. Hypothesis A mechanism for stop codon recognition by the ribosome: A bioinformatic approach. RNA 7, 1683−1692 (2001).
  19. Kisselev, L., Ehrenberg, M. & Frolova, L. Termination of translation: interplay of mRNA, rRNAs and release factors? EMBO J. 22, 175−182. (2003).
  20. Moffat, J.G., Timms, K.M., Trotman, C.N.A. & Tate, W.P. Interaction of the Release Factors with the Escherichia co/i Ribosome Structurally and Functionally-Important Domains. Biochimie 73, 1113−1120 (1991).
  21. Moffat, J.G., Donly, B.C., Mccaughan, K.K. & Tate, W.P. Functional Domains in the Escherichia coli Release Factors Activities of Hybrids Between RF-1 and RF-2. Eur. J. Biochem. 213, 749−756 (1993).
  22. , J.G. & Tate, W.P. A single proteolytic cleavage in release factor 2 stabilizes ribosome binding and abolishes peptidyl-tRNA hydrolysis activity. J. Biol. Chem. 269, 18 899−18903(1994).
  23. Nakamura, Y., Ito, K. & Isaksson, L.A. Emerging understanding of translation termination. Cell 87, 147−150 (1996).
  24. Bulygin, K.N. et al. Positioning of the mRNA stop signal with respect to polypeptide chain release factors and ribosomal proteins in 80S ribosomes. FEBS Lett. 514, 96 101 (2002).
  25. , Y. & Ito, К. How protein reads the stop codon and terminates translation. Genes Cells 3, 265−278. (1998).
  26. Bertram, G., Bell, H.A., Ritchie, D.W., Fullerton, G. & Stansfield, I. Terminating eukaryote translation: domain 1 of release factor eRF1 functions in stop codon recognition. RNA 6, 1236−47. (2000).
  27. Frolova, L., Seit-Nebi, A. & Kisselev, L. Highly conserved NIKS tetrapeptide is functionally essential in eukaryotic translation termination factor eRF1. RNA 8, 129 136 (2002).
  28. Seit-Nebi, A., Frolova, L. & Kisselev, L. Conversion of omnipotent translation termination factor eRF1 into ciliate-like UGA-only unipotent eRF1. EMBO Rep. 3, 881−886 (2002).
  29. Ogle, J.M. et al. Recognition of cognate transfer RNA by the 30S ribosomal subunit. Science 292, 897−902 (2001).
  30. Velichutina, I.V. et al. Mutations in helix 27 of the yeast Saccharomyces cerevisiae 18S rRNA affect the function of the decoding center of the ribosome. RNA 6, 11 741 184 (2000).
  31. Fraser, C.M. et al. The minimal gene complement of Mycoplasma genitalium. Science 270, 397−403(1995).
  32. , J.M., К. Ho, S. Loechel & Hu, P. Evidence that UGA is read as tryptophan rather than stop by Mycoplasma pneumoniae, Mycoplasma genitalium, Mycoplasma gallisepticum. J. Bacteriol. 172, 504−506 (1990).
  33. Caskey, C.T., Forrester, W.C., Tate, W. & Ward, C.D. Cloning of the Escherichia coli release factor 2 gene. J. Bacteriol. 158, 365−168 (1984).
  34. Weiss, R.B., Murphy, J.P. & Gallant, J.A. Genetic screen for cloned release factor genes. J. Bacteriol. 158, 362−364 (1984).
  35. Frolova, L. et al. A highly conserved eukaryotic protein family possessing properties of polypeptide chain release factor. Nature 372, 701−703 (1994).
  36. Bult, C.J. et al. Complete genome sequence of the methanogenic archaeon, Methanococcusjannaschii. Science 273, 1058−1073 (1996).
  37. Smith, D.R. et al. Complete genome sequence of Methanobacterium thermoautotrophicum deltaH: functional analysis and comparative genomics. J. Bacteriol. 179, 7135−55. (1997).
  38. Klenk, H.P. et al. The complete genome sequence of the hyperthermophilic, sulphate-reducing archaeon Archaeoglobus fulgidus. Nature 390, 364−370 (1997).
  39. Dontsova, M. et al. Translation termination factor aRF1 from the archaeon Methanococcus jannaschii is active with eukaryotic ribosomes. FEBS Lett. 472, 213 216. (2000).
  40. Liu, D. et al. Solution structure of a TBP-TAF (11)230 complex: protein mimicry of the minor groove surface of the TATA box unwound by TBP. Cell 94, 573−583 (1998).
  41. , R. & Pearl, L.H. Nucleotide mimicry in the crystal structure of the uracil-DNA glycosylase-uracil glycosylase inhibitor protein complex. Nat. Struct. Biol. 2, 752−757 (1995).
  42. Mol, C.D. et al. Crystal structure of human uracil-DNA glycosylase in complex with a protein inhibitor: protein mimicry of DNA. Cell 82, 701−708 (1995).
  43. Nissen, P. et al. Crystal structure of the ternary complex of Phe-tRNAPhe, EF-Tu, anda GTP analog. Science 270, 1464−1472 (1995).
  44. Ito, K., Ebihara, K., Uno, M. & Nakamura, Y. Conserved motifs in prokaryotic and eukaryotic polypeptide release factors: tRNA-protein mimicry hypothesis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93, 5443−5448 (1996).
  45. , K.S. & Noller, H.F. Mapping the Position of Translational Elongation Factor EF-G in the Ribosome by Directed Hydroxyl Radical Probing. Cell 92, 131−139 (1998).
  46. Agrawal, R., Penczek, P., Grassucci, R. & Frank, J. Visualization of elongation factor
  47. G on The Escherichia coli 70S ribosome: The mechanism of translocation. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95, 6134 6138 (1998).
  48. Selmer, M., Al-Karadaghi, S., Hirakawa, G., Kaji, A. & Liljas, A. Crystal structure of Thermotoga maritima ribosome recycling factor: A tRNA mimic. Science 286, 23 492 352 (1999).
  49. Frolova, L. et al. Mutations in the highly conserved GGQ motif of class 1 polypeptide ^ release factors abolish the ability of human eRF1 to trigger peptidyl-tRNA hydrolysis.1. RNA 5, 1014−1020(1999).
  50. Ito, K., Uno, M. & Nakamura, Y. A tripeptide 'anticodon' deciphers stop codons in messenger RNA. Nature 403, 680−4. (2000).
  51. Kervestin, S., Frolova, L., Kisselev, L. & Jean-Jean, O. Stop codon recognition in ciliates: Euplotes release factor does not respond to reassigned UGA codon. EMBO Rep. 2, 680−684 (2001).
  52. Vestergaard, B. et al. Bacterial polypeptide release factor RF2 is structurally distinct from eukaryotic eRF1. Mol. Cell 8,1375−1382 (2001).
  53. Rawat, U.B. et al. A cryo-electron microscopic study of ribosome-bound termination factor RF2. Nature 421, 87−90 (2003).
  54. Caskey, C.T., Beaudet, A.L., Scolnick, E.M. & Rosman, M. Hydrolysis of f-Met-tRNA by peptidyl transferase. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 68, 3163−3167. (1971).
  55. Polacek, N. et al. The critical role of the universally conserved A2602 of 23S ribosomal RNA in the release of the nascent peptide during translation termination. Mol. Cell 11,103−112(2003).
  56. Freistroffer, D.V., Pavlov, M.Y., MacDougall, J., Buckingham, R.H. & Ehrenberg, M. Release factor RF3 in E. coli accelerates the dissociation of release factors RF1 and RF2 from the ribosome in a GTP-dependent manner. EMBO J. 16, 4126−4133 (1997).
  57. , P.G. & Cuthbertson, M.R. SUF12 suppressor protein in yeast, a fusion protein related to the EF-1 family of elongation factors. J. Mol. Biol. 199, 559−573 (1988).
  58. Zhouravleva, G. et al. Termination of translation in eukaryotes is governed by two interacting polypeptide chain release factors, eRF1 and eRF3. EMBO J14, 40 654 072 (1995).
  59. Stansfield, I. et al. The products of the SUP45 (eRF1) and SUP35 genes interact to mediate translation termination in Saccharomyces cerevisiae. EMBO J14, 4365−4373 (1995).
  60. Ito, K., Ebihara, K. & Nakamura, Y. The stretch of C-terminal acidic amino acids of translational release factor eRF1 is a primary binding site for eRF3 of fission yeast. RNA 4, 958−972 (1998).
  61. Merkulova, T.I., Frolova, L.Y., Lazar, M., Camonis, J. & Kisselev, L.L. C-terminal domains of human translation termination factors eRF1 and eRF3 mediate their in vivo interaction. FEBS Lett. 443, 41−47. (1999).
  62. Buckingham, R.H., Grentzmann, G. & Kisselev, L. Polypeptide chain release factors. Mol. Microbiol. 24, 449−456 (1997).
  63. , L.L. & Buckingham, R.H. Translational termination comes of age. Trends Biochem. Sci. 25, 561−566 (2000).
  64. Zavialov, A.V., Buckingham, R.H. & Ehrenberg, M. A posttermination ribosomal complex is the guanine nucleotide exchange factor for peptide release factor RF3. Cell 107, 115−124 (2001).
  65. Grentzmann, G., Brechemierbaey, D., Heurgue, V., Mora, L. & Buckingham, R.H. Localization and characterization of the gene encoding release factor RF3 in Escherichia coli. Proc. Nat. Acad. Sci. USA 91, 5848−5852 (1994).
  66. Mikuni, O. et al. Identification of the prfC gene, which encodes peptide-chain-release factor 3 of Escherichia coli. Proc. Natl. Acad .Sci. USA 91, 5798−5802 (1994).
  67. Kushnirov, V.V. et al. Nucleotide sequence of the SUP2 (SUP35) gene of Saccharomyces cerevisiae. Gene 66, 45−54 (1988).
  68. Grentzmann, G. et al. Release factor RF-3 GTPase activity acts in disassembly of the ribosome termination complex. RNA 4, 973−983 (1998).
  69. Frolova, L. et al. Eukaryotic polypeptide chain release factor eRF3 is an eRF1- and ribosome-dependent guanosine triphosphatase. RNA 2, 334−341 (1996).
  70. Hoshino, S. et al. Molecular cloning of a novel member of the eukaryotic polypeptide chain- releasing factors (eRF). Its identification as eRF3 interacting with eRF1. J. Biol. Chem. 273, 22 254−22 259. (1998).
  71. Jakobsen, C.G., Segaard, T.M., Jean-Jean, O., Frolova, L. & Justesen, J. Identification of a novel termination release factor eRF3b expressing the eRF3 activity in vitro and in vivo. Mol Biol (Mosk) 35, 672−681 (2001).
  72. Hoshino, S. et al. Novel function of the eukaryotic polypeptide-chain releasing factor 3 (eRF3/GSPT) in the mRNA degradation pathway. Biochemistry (Moscow) 64,136 772. (1999).
  73. Cosson, Π’. et al. Poly (A)-binding protein and eRF3 are associated in vivo in human and Xenopus cells. Biol. Cell. 94, 205−216 (2002).
  74. Paulin, F.E., Campbell, L.E., O’Brien, K., Loughlin, J. & Proud, C.G. Eukaryotic translation initiation factor 5 (elF5) acts as a classical GTPase-activator protein. Curr. Biol. 11, 55−59 (2001).
  75. Scheffzek, K" Klebe, C., Fritzwolf, K., Kabsch, W. & Wittinghofer, A. Crystal structure of the nuclear Ras-related protein Ran in its GDP-bound form. Nature 374, 378−381 (1995).
  76. Scheffzek, K. et al. Structural analysis of the GAP-related domain from neurofibroma and its implications. EMBO J17, 4313−4327 (1998).
  77. Karimi, R., Pavlov, M., Buckingham, R. & Ehrenberg, M. Novel roles for classical factors at the interface between translation termination and initiation. Mol. Cell 3, 601−609(1999).
  78. Ishino, T. et al. Interaction of ribosome recycling factor and elongation factor EF-G with E. coli ribosomes studied by the surface plasmon resonance technique. Genes to Cells 5, 953−963. (2000).
  79. Schilling-Bartetzko, S., Franceschi, F., Sternbach, H. & Nierhaus, K.H. Apparent Association Constants of Transfer RNAs for the Ribosomal A-Site, P-Site, and E-Site. J. Biol. Chem. 267, 4693−4702 (1992).
  80. Brierley, I. Ribosomal frameshifting on viral RNAs. J. Gen. Virol. 76, 1885−18 921 995).
  81. Farabaugh, PJ. Programmed translational frameshifting. Microbiol. Rev. 60,103−1 341 996).
  82. Fbtterer, J., Kisslaszlo, Z. & Hohn, T. Nonlinear Ribosome Migration on Cauliflower Mosaic Virus-35S RNA. Cell 73, 789−802 (1993).
  83. Maia, I.G., Seron, K., Haenni, A.L. & Bernardi, F. Gene expression from viral RNA genomes. Plant Mol. Biol. 32, 367−391 (1996).
  84. , M. & Fayet, O. Translational Frameshifting in the Control of Transposition in Bacteria. Mol. Microbiol. 7, 497−503 (1993).
  85. Tsuchihashi, Z. Translational Frameshifting in the Escherichia-Coli dnaX Gene Invitro. Nucleic Acids Res 19, 2457−2462 (1991).-4:
  86. , Z. & Brown, P.O. Sequence Requirements for Efficient Translational Frameshifting in the Escherichia co//-dnaX Gene and the Role of an Unstable Interaction Between transfer RNA (Lys) and an AAG Lysine Codon. Gene Develop. 6, 511−519(1992).
  87. , T. & Varmus, H.E. Expression of the Rous Sarcoma virus pol gene by ribosomal frameshifting. Science 230,1237−1242. (1985).
  88. Jacks, Π’., Madhani, H.D., Masiarz, F.R. & Varmus, H.E. Signals for ribosomal frameshifting in the Rous Sarcoma virus gag pol region. Celi 55, 447−458. (1988).
  89. Weiss, R.B., Dunn, D.M., Shuh, M., Atkins, J.F. & Gesteland, R.F. E. coli ribosomes Re-phase on retroviral frameshift signals at rates ranging from 2 to 50 percent. The New Biologist 1, 159−169 (1989).
  90. Garcia, A., Vanduin, J. & Pleij, C.W.A. Differential Response to Frameshift Signals in Eukaryotic and Prokaryotic Translational Systems. Nucleic Acids Res 21, 401−406 (1993).
  91. Jacks, Π’., Townsley, K., Varmus, H.E. & Majors, J. Two efficient ribosomal frameshifting events are required for synthesis of mouse mammary tumor virus gag related polyproteins. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84, 4298−4302. (1987).
  92. Jacks, T. et al. Characterization of ribosomal frameshifting in HIV 1 gag pol expression. Nature 331, 280−283. (1988).
  93. , Y. & Ohtsubo, E. DNA sequences required for translational frameshifting in production of the transposase encoded by IS1. Mol Gen Genet 235, 325−32 (1992).
  94. Parkin, N.T., Chamorro, M. & Varmus, H.E. Human Immunodeficiency Virus Type-1 gag-pol Frameshifting Is Dependent on Downstream messenger RNA Secondary Structure Demonstration by Expression in vivo. J. Virol. 66, 5147−5151 (1992).
  95. Marczinke, Π’., Fisher, R., Vidakovic, M., Bloys, A.J. & Brierley, I. Secondary structure and mutational analysis of the ribosomal frameshift signal of rous sarcoma virus. J. Mol. Biol. 284, 205−225 (1998).
  96. Tu, C.L., Tzeng, Π’.Н. & Bruenn, J.A. Ribosomal Movement Impeded at a Pseudoknot Required for Frameshifting. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89, 34−38 (1992).
  97. Somogyi, P., Jenner, A.J., Brierley, I. & Inglis, S.C. Ribosomal Pausing During Translation of an RNA Pseudoknot. Mol. Cell. Biol. 13, 6931−6940 (1993).
  98. Hatfield, D.L., Levin, J.G., Rein, A. & Oroszalan, S. Translational Suppression in Retroviral Gene Expression. Advances in Virus Research 41, 193−239 (1992).
  99. Carlson, B.A. et al. Transfer RNA modification status influences retroviral ribosomal frameshifting. Virology 255, 2−8 (1999).
  100. Brierley, I., Meredith, M.R., Bloys, A.J. & Hagervall, T.G. Expression of a coronavirus ribosomal frameshift signal in Escherichia colt Influence of tRNA anticodon modification on frameshifting. J. Mol. Biol. 270, 360−373 (1997).
  101. Cassan, M., Delaunay, N., Vaquero, C. & Rousset, J.P. Translational Frameshifting at the GAG-Pol Junction of Human Immunodeficiency Virus Type 1 Is Not Increased in Infected T-Lymphoid Cells. J Virol 68, 1501−1508 (1994).
  102. Reil, H., Hoxter, M., Moosmayer, D., Pauli, G. & Hauser, H. CD4 expressing human 293 cells as a tool for studies in HIV-1 replication: The efficiency of translational frameshifting is not altered by HIV-1 infection. Virology 205, 371−375 (1994).
  103. , W.J. & Caskey, T. Expression of peptide chain release factor 2 requires a high efficiency frameshift. Nature 322, 273−275. (1986).
  104. , M.F. & Farabaugh, P.J. Ribosomal Frameshifting in the Yeast Retrotransposon Π’Ρƒ Transfer-RNAs Induce Slippage on a 7-Nucleotide Minimal Site. Cell 62, 339−352 (1990).
  105. Matsufuji, S. et al. Autoregulatory frameshifting in decoding mammalian ornithine decarboxylase antizyme. Cell 80, 51−60 (1995).
  106. Ivanov, I.P., Matsufuji, S., Murakami, Y., Gesteland, R.F. & Atkins, J.F. Conservation of polyamine regulation by translational frameshifting from yeast to mammals. EMBO J19, 1907−1917(2000).
Π—Π°ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡ‚ΡŒ Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΡƒ Ρ‚Π΅ΠΊΡƒΡ‰Π΅ΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΎΠΉ