Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Принципы конструирования биокаталитических систем на основе полиэлектролитов в среде органических растворителей

Диссертация: Принципы конструирования биокаталитических систем на основе полиэлектролитов в среде органических растворителей
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Наряду с перечисленными выше прикладными аспектами биокатализа в органических средах, следует отметить и большое фундаментальное значение неводной энзимологии. Присутствие в среде органических растворителей создает предпосылки для прояснения роли воды в биокатализе, а также расширяет массив данных о взаимосвязи структуры и функциональных свойств ферментов путем перехода к различным формам… Читать ещё >

Принципы конструирования биокаталитических систем на основе полиэлектролитов в среде органических растворителей (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Список сокращений
  • 1. Введение
  • 2. Обзор литературы
    • 2. 1. Понятие стабильности ферментов
    • 2. 2. Стабильность ферментов в органических средах
    • 2. 3. Подходы к стабилизации ферментов в органических 37 средах
    • 2. 4. Обращенные мицеллы полимерных ПАВ
      • 2. 4. 1. Выбор полимера, способного к мицеллообразованию
      • 2. 4. 2. Получение и свойства полимерных ПАВ
      • 2. 4. 3. Системы обращенных мицелл полимерного ПАВ
    • 2. 5. Нековалентные комплексы полиэлектролитов
      • 2. 5. 1. Интерполиэлектролитные комплексы
      • 2. 5. 2. Белок-полиэлектролитные комплексы
      • 2. 5. 3. Каталитические свойства и стабильность ферментов в 73 комплексе с полиэлектролитом
  • 3. Постановка задачи
  • 4. Выбор объектов исследования
  • 5. Основные методы
    • 5. 1. Синтез полимерного ПАВ (ЦЭПЭИ)
    • 5. 2. Определение кислотности цэпэи и ее регуляция
    • 5. 3. Приготовление раствора обращенных мицелл 84 полимерного ПАВ
    • 5. 4. Измерение размеров обращенных мицелл полимерного 85 ПАВ
    • 5. 5. Измерение каталитической активности ферментов
    • 5. 6. Стабильность ферментов в системе обращенных мицелл 86 полимерного ПАВ
    • 5. 7. «Сухой комплекс» фермента с полимером
    • 5. 8. Ферментативный гидролиз бтна в мембранном реакторе
    • 5. 9. Приготовление комплексов ферментов с 89 полиэлектролитами для использования в гомогенных биокаталитических системах
    • 5. 10. Изучение комплекса ХТ с ПБ методом флуоресцентной 91 спектроскопии с использованием эозина
    • 5. 11. Седиментационный анализ комплексов ХТ и ПВП
    • 5. 12. Каталитическая активность препаратов хт в гомогенных 92 водно-органических смесях
    • 5. 13. Каталитическая активность препаратов трипсина в 95 гомогенных водно-органических смесях
    • 5. 14. Каталитическая активность препаратов ПРХ в 96 гомогенных водно-органических смесях
    • 5. 15. Ацилирование аминогрупп ХТ
    • 5. 16. Восстановительное алкилирование аминогрупп ХТ 99 глицериновым альдегидом
    • 5. 17. Определение степени модификации препаратов ХТ
    • 5. 18. Определение концентрации активных центров в 100 препаратах ХТ
    • 5. 19. Флуоресцентная спектроскопия
    • 5. 20. Спектроскопия кругового дихроизма
    • 5. 21. Вторая производная уф спектров белка
    • 5. 22. Твердофазный иммуноферментный анализ в водно- 102 органических средах
    • 5. 23. Приготовление и исследование биосенсора на этанол
    • 5. 24. Приготовление суспензий препаратов ферментов
    • 5. 25. Приготовление растворов для проведения реакции 104 пептидного синтеза Ы-ацетил-Ь-тирозин-Ь-лизинамида
    • 5. 26. Приготовление растворов для проведения реакции 105 пептидного синтеза этилового эфира Ы-ацетил-Ь-тирозил-Ь-лейцина
    • 5. 27. Определение каталитической активности суспензий 105 препаратов ХТ в средах с высоким содержанием органического растворителя
  • 6. Результаты и обсуждение
    • 6. 1. Обращенные мицеллы полимерного ПАВ
      • 6. 1. 1. Синтез полимерного ПАВ и оптимизация системы
      • 6. 1. 2. Свойства ферментов, включенных в обращенные 114 мицеллы полимерного ПАВ
        • 6. 1. 2. 1. Влияние рН на каталитические параметры 114 ферментов
        • 6. 1. 2. 2. Влияние концентрации воды на каталитические 118 параметры ферментов
        • 6. 1. 2. 3. Стабильность ферментов в системе обращенных 119 мицелл полимерного ПАВ
      • 6. 1. 3. «Сухой комплекс» ХТ-ЦЭПЭИ
      • 6. 1. 4. Катализ ХТ, включенным в обращенные мицеллы 124 полимерного ПАВ, в мембранном реакторе
    • 6. 2. Гомогенные биокаталитические системы
      • 6. 2. 1. Кинетические эффекты комплексообразования
      • 6. 2. 2. Область существования фёрмент-полиэлектролитных 131 комплексов в гомогенных водно-органических смесях
        • 6. 2. 2. 1. Метод скоростной седиментации
        • 6. 2. 2. 2. Метод флуоресцентной спектроскопии
      • 6. 2. 3. Природа взаимодействий фермента с 136 полиэлектролитом в водно-органических смесях
      • 6. 2. 4. Факторы, определяющие наличие и величину 137 кинетических эффектов комплексообразования
        • 6. 2. 4. 1. Природа органического растворителя
        • 6. 2. 4. 2. Состав и свойства водной фазы
        • 6. 2. 4. 3. pH-Эффекты
        • 6. 2. 4. 4. Природа полиэлектролита и его содержание в 140 системе
        • 6. 2. 4. 5. Природа фермента
        • 6. 2. 4. 6. Природа субстрата
      • 6. 2. 5. Молекулярные причины кинетических эффектов 162 комплексообразования
        • 6. 2. 5. 1. Флуоресцентная спектроскопия
        • 6. 2. 5. 2. Спектроскопия кругового дихроизма
        • 6. 2. 5. 3. Вторая производная УФ спектра белка 168 6.3. Гетерогенные белок-содержащие системы
      • 6. 3. 1. Стабилизация антител
      • 6. 3. 2. Оптимизация фермент-содержащего покрытия 176 электрода
      • 6. 3. 3. Фермент-полиэлектролитные комплексы как 178 катализаторы пептидного синтеза
        • 6. 3. 3. 1. Комплексы ХТ с полиэлектролитами как 179 катализаторы синтеза этилового эфира М-ацетил-L-тирозил-1-лейцина
        • 6. 3. 3. 2. Двойные комплексы ХТ с полиэлектролитами как 187 катализаторы синтеза М-ацетил-1-тирозил-1-лизинамида
  • Выводы
  • Список литературы

Список сокращений

АДГ — алкогольдегидрогеназа

БАНА — /7-нитроанилид Ы-бензоил-Ь-аргинина

БТЭЭ — этиловый эфир Ы-бензоил-Ь-тирозина

БТНА — п-нитроанилид Ы-бензоил-1-тирозина

ДМСО — диметилсульфоксид

ДМФА — Ы. Ы-диметилформамид

ГЛБ — гидрофильно-липофильный баланс глиц-ХТ — сс-химотрипсин, ковалентно модифицированный глицериновым альдегидом КД — спектроскопия кругового дихроизма МУТМАК — 4-метилумбеллиферил п-триметилциннамат хлорид аммония ПА — полианион

ПАВ — поверхностно активное вещество

ПАК — полиакриловая кислота

ПАС — полианетолсульфат

ПВП — N-алкилированный поли-4-винилпиридин

ПВС — поливинилсульфат

ПБ — полибрен (3,6-ионен) пир-XT — а-химотрипсин, ковалентно модифицированный пиромеллитовым ангидридом ПК — поликатион ПРХ — пероксидаза хрена ПЭ — полиэлектролит ПЭИ — полиэтиленимин трис-ХТ — а-химотрипсин, ковалентно модифицированный трис (гидроксиэтил)аминометаном УФ — ультрафиолетовый XT — а-химотрипсин

ЦЭПЭИ — полиэтиленимин, модифицированный цетил- и этилбромидом янт-ХТ — а-химотрипсин, ковалентно модифицированный янтарным ангидридом

CHES — 2-[М-циклогексиламино]-этансульфоновая кислота CsA — циклоспорин А

MOPS — 3-[Ы-морфолино]-пропансульфоновая кислота

В настоящее время биокаталитические системы, содержащие органические растворители, уже едва ли можно рассматривать как нетрадиционные, поскольку они широко используются в химическом анализе, тонком органическом синтезе, медицине, пищевой и фармацевтической промышленности. К основным преимуществам таких систем следует отнести возможность осуществления реакций с гидрофобными субстратами и эффекторами, ограниченно или вообще нерастворимыми в воде, сдвиг термодинамического равновесия в сторону продуктов синтеза в реакциях конденсации, повышение выхода целевых продуктов реакции в кинетически контролируемом синтезе.

Наряду с перечисленными выше прикладными аспектами биокатализа в органических средах, следует отметить и большое фундаментальное значение неводной энзимологии. Присутствие в среде органических растворителей создает предпосылки для прояснения роли воды в биокатализе, а также расширяет массив данных о взаимосвязи структуры и функциональных свойств ферментов путем перехода к различным формам надмолекулярной организации биокатализаторов, не реализующимся в водных растворах.

Суммируя накопленный материал, можно заключить, что основными требованиями, предъявляемыми к биокаталитическим системам в органических средах, являются:

• высокая каталитическая активность и специфичность биокатализатора;

• высокая стабильность биокатализатора в условиях эксперимента и при длительном хранении;

• универсальность с точки зрения органического растворителя;

• легкость выделения продукта биокаталитической реакции в чистом виде и регенерации биокатализатора;

• простота методик, используемых для приготовления системы;

• невысокая стоимость компонентов биокаталитической системы.

Несмотря на интенсивные исследования в области неводной энзимологии и многообразие описанных в литературе систем, можно констатировать, что еще далеко не все резервы исчерпаны. Таким образом, представляется актуальным конструирование новых биокаталитических систем в среде органических растворителей.

Системы, содержащие глобулярные белки и полиэлектролиты, подробно изучены лишь в водной среде, и установлено, что полимеры данного класса обладают рядом уникальных свойств. Так, полиэлектролиты способны образовывать надмолекулярные комплексы с белками благодаря электростатическому взаимодействию противоположно заряженных групп компонентов комплекса. Многоточечный характер такого взаимодействия обеспечивает фиксацию белковой глобулы, что проявляется в повышении стабильности белков в различных условиях. Кроме того, многие природные и синтетические полиэлектролиты способны вступать в разнообразные химические реакции, что позволяет модифицировать системы, не затрагивая напрямую сами белки. Учитывая упрочение электростатических взаимодействий при переходе от водных растворов к системам с органическими растворителями, характеризующимся пониженным значением диэлектрической константы, мы предположили, что использование полиэлектролитов в таких средах будет исключительно эффективным.

Таким образом, цель настоящей работы — на основании анализа и классификации биокаталитических систем в среде органических растворителей разработать принципы конструирования и охарактеризовать биокаталитические системы на основе полиэлектролитов.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Центральным объектом любой биокаталитической системы, в том числе и на основе органических растворителей, является фермент, а главными требованиями, предъявляемыми к таким системам, являются высокая каталитическая активность фермента и стабильность ее проявления в условиях проведения процесса. Вопросы каталитической активности и стабильности ферментов в присутствии органических растворителей в последние десятилетия привлекают повышенное внимание исследователей (см., например, обзоры [1−8]). В настоящее время выявлены многие закономерности протекания ферментативных реакций в таких средах. Представляется целесообразным вести разработку принципов конструирования новых биокаталитических систем с учетом накопленных знаний. Однако этому препятствует недостаточная систематизация экспериментального материала. В связи с этим ниже, на основании классификации биокаталитических систем, будут рассмотрены основные закономерности ферментативного катализа в органических средах и подходы к повышению стабильности белков. Но для этого сначала необходимо определить базовые положения, без четкого представления о которых невозможен анализ стабильности белков в системах с органическими растворителями.

выводы.

1. Предложена классификация биокаталитических систем в органических средах, в основу которой положено фазовое состояние системы. Выявленные закономерности использованы в качестве базы при разработке новых биокаталитических систем.

2. Впервые предложено использовать полиэлектролиты для создания биокаталитических систем различного типа (гомогенных, гетерогенных, микрогетерогенных) в среде органических растворителей.

3. Получены обращенные мицеллы полимерного поверхностно-активного вещества в среде неполярных органических растворителей, способные солюбилизовать водные растворы ферментов с сохранением высокой каталитической активности и стабильности. Разработанную систему отличает простота выделения продукта реакции л регенерации биокатализатора, а также возможность приготовления высокостабильной готовой формы биокатализатора.

4. Разработан эффективный и методически простой подход к стабилизации фермейтов против инактивации полярными органическими растворителями, заключающийся в предварительном комплексообразовании с полиэлектролитами. Системы, созданные на основании данного подхода, характеризуются значительно расширенным (вплоть до 40 об.%) интервалом концентраций органического растворителя, доступным для проведения биокаталитических реакций.

5. Найдены параметры системы, определяющие величину кинетических эффектов комплексообразования. Выявлена ключевая роль доступности белковой части фермента и установлена универсальность разработанного подхода с точки зрения природы полиэлектролита.

6. Из совместно анализа кинетических данных и результатов структурных исследований установлено, что основными молекулярными причинами стабилизационного эффекта являются: поддержание полиэлектролитом каталитически активной конформации ферментов в результате многоточечного взаимодействия между компонентами комплексаподавление бимолекулярных инактивационных процессов, в первую очередь, агрегации, в результате электростатического отталкивания одноименно заряженных частиц комплекса.

7. Продемонстрирована перспективность гетерогенных биокаталитических систем с полиэлектролитами для практического использования в пептидном сйнтезе, биоэлектрохимическом и иммунохимическом анализе.

Показать весь текст

Список литературы

  1. J. Tramper, М.Н. Vermue, Н. Н Beeftink, and U. von Stockar, eds. Biocatalysis in Non-Conventional Media. 1992, Elsevier, Amsterdam.
  2. Yu.L. Khmelnitsky, A.V. Levashov, N.L. Klyachko, and K. Martinek. Engineering biocatalytic systems in organic media with low water content. Enzyme Microb. Technol., 1988, v. 10, p. 710−723.
  3. A.M. Klibanov. Asymmetric transformations catalyzed by enzymes in organic solvents. Accounts Chem. Res., 1990, v. 23, p. 114−120.
  4. F.H. Arnold. Engineering enzymes for non-aqueous solvents. Trends Biotechnol., 1990, v. 8, p. 244−249.
  5. M.N. Gupta. Enzyme function in organic solvents. Eur. J. Biochem., 1992, v. 203, p. 25−32.
  6. J.S. Dordick. Designing enzymes for use in organic solvents. Biotechn. Prog., 1992, v. 8, p. 259−267.
  7. P.J. Hailing. Thermodynamic predictions for biocatalysis in nonconventional media: theory, tests, and recommendations for experimental design and analysis. Enzyme Microb. Technol., 1994, v. 16, p. 178−206.
  8. A.K. Гладилин, A.B. Левашов. Катализ надмолекулярными фермент-полимерными комплексами (ассоциатами) в органических средах, Успехи биол. химии, 1996, т.36, с. 141−161.
  9. V.V. Mozhaev, I.V. Berezin, K. Martinek. Structure-stability relationship in proteins: fundamental tasks and strategy for the development of stabilized enzyme catalysts for biotechnology. CRC Critical Reviews in Biochemistry, 1988, v. 23, p. 235−281.
  10. R. Jernigan, G. Rughunathan, I. Bahar. Characterization of interactions and metal ion binding sites in proteins. Current opinion in structural biology, 1994, v. 4, p. 256−263
  11. Г. Шульц, Г. Ширмер. Принципы структурной организации белков. 1982, Мир, Москва, 354 с.
  12. Yu. L. Khmelnitsky, V.V. Mozhaev, А.В. Belova, M.V. Sergeeva, K. Martinek. Denaturation capacity: a new quantitative criterion for selection of organic solvents as reaction media in biocatalysis. Eur. J. Biochem., 1991, v. 198, p. 31−41.
  13. P.P. Wangikar, P.C. Michels, D.S. Clark, J.S. Dordick. Structure and function of subtilisin BPN solubilized in organic solvents. J. Am. Chem. Soc., 1997, v,. Щ, p. 70−76.
  14. Y. Yamamoto, H. Kise. Catalysis of enzyme aggregates in organic solvents. An attempt at evaluation of intrinsic activity of proteases in ethanol. Biotechnol. Lett., 1993, v. 15, p. 647- 652.
  15. Y. Izowa, M. Kakutani, M. Yaguchi. The influence of water content in organic solvents on. yields of peptide formation using proteases. In: Peptide Chemistry 1981 (Shiori, ed.), Protein Research Foundation, Osaka, 1981, p. 25−30: — 4
  16. H. Kise, Y. Tomiuchi. Unusual solvent effect on protease activity and effective optical resolution of amino acids by hydrolytic reactions in organic solvents. Biotechnol. Lett., 1991, v. 13, p. 317−322.
  17. T. Kijima, S. Yamamoto, H. Kise. Fluorescence spectroscopic study of subtilisins as relevant to catalytic activity in aqueous-organic media. Bull. Soc. Chem.Jpn., 1994, v. 67, p. 2821−2824.
  18. Y. Tomiuchi, T. Kijima, H. Kise. Fluorescence spectroscopic study of a-chymotrypsin as relevant to catalytic activity in aqueous-organic media. Bull. Chem. Soc. Jpn., 1993, v. 66, p. 1176−1181.
  19. G. Vig, D. Thomas. Enzyme-catalyzed synthesis of alkyl beta-D-glucosides in organic media. Tetrahedron Lett., 1992, v. 33, p. 45 674 570.
  20. H. Kise, H. Shirato. Enzymatic reactions in aqueous-organic media. V. Medium effects on the esterification of aromatic amino acids by a-chymotrypsin. Enzyme Microb. Technol., 1988, v. 10, p. 582−585.
  21. T. Kijima, S. Yamamoto, H. Kise. Study on tryptophan fluorescence and catalytic activity of a-chymotrypsin in aqueous-organic media. Enzyme Microb. Technol., 1996, v. 18, p. 2−6.
  22. V.V.Mozhaev, Yu.L. Khmelnitsky, M.V. Sergeeva, A.B. Belova, N.L. Klyachko, A.V. Levashov, K.Martinek. Catalytic activity and denaturation of enzymes in water/organic cosolvent mixtures, a
  23. Chymotrypsin and laccase in mixed water/alcohol, water/glycol and water/formamide solvents. Eur. J. Biochem. 1989, v. 184, p. 597 602.
  24. K.E. LeJeune, A.J. Mesiano, S B. Bower, J.K. Grimsley, J.R. Wild, A.J. Rassel. Dramatically stabilized phosphotriesterase-polymers for nerve agent degradation. Biotechnol. and Bioeng., 1997, v. 54, p. 105−114.
  25. C. Torres, C. Otero. Influence of the organic solvents on the activity in water and the conformation of Candida rugosa lipase: description of a lipase-activating pretreatment. Enzyme Microb. Technol., 1996, v. 19, p. 594−600.
  26. L. Faller, J.M. Sturtevant. The kinetics of the a-chymotrypsin-catalyzed hydrolysis of p-nitrophenyl acetate in organic solvent-water mixtures. J. Biol. Chem., 1966, v. 241, p. 4825−4834.
  27. H.F. Bundy, R.L. Moore. Chymotrypsin-catalyzed hydrolysis of m-, p- and o-nitroanilides of N-benzoyl-L-tyrosine. Biochemistry, 1966, v. 5, p. 808−811.
  28. F. Falcoz-Kelly, E-E. Baulieu, A. Alfsen. Studies on 5, 4−3-oxo steroid isomerases. 1. An extraction model for enzymatic activity. Biochemistry, 1968, v. 7, p. 4119−4125.
  29. M.J. Ruwart, C.H. Suelter. Activation of yeast pyruvate kinase by natural and artificial cryoprotectants. J. Biol. Chem., 1971, v. 246, p. 5990−5993.
  30. H. Sakurai, K. Shinohara, T. Hisabori, K. Shinohara. Enhancement of adenosine triphosphatase activity of purified chloroplast coupling factor 1 in an aqueous organic solvent. J. Biochem., 1981, v. 90, p. 95−102.
  31. S. Minato, A. Hirai. Characterization of ustilago ribonuclease U2. Effects of chemical modification, of glutamic acid-61 and cystine-1 and of organic solvents on the enzymatic activity. J. Biochem., 1979, v. 85, p. 327−334.
  32. P. Maurel P. Relevance of dielectric constant and solvent hydrophobicity to the organic solvent effect in enzymology. J. Biol. Chem., 1978, v. 253, p. <1677−1683.
  33. A.L. Fink. The effect of dimethyl sulfoxide on the interaction of proflavine with a-chymotrypsin. Biochemistry, 1974, v. 13, p. 277 280.
  34. T.T. Herkovits, H. JaUet. Structural stability and solvent denaturation of mioglobin. Science, 1969, v. 165, p. 282−285.
  35. T.T. Herkovits, B. Gadegbeku, H. Jallet. On structural stability and solvent denaturation of proteins. I. Denaturation by the alcohols and glycols. J. Biol. Chem., 1970, v. 245, p. 2588−2598.
  36. B. Lubas, M. Soltysik-Rasek. Mechanism of interactions of aliphatic alcohols with bovine serum albumine in ternary systems n.m.r. study: 2. Aqueous solutions BSA-alcohols-sulphonamides. Int. J. Biol. Macromol., 1985, v. 7, p. 242−247.
  37. A. Zaks, A.M. Klibanov. The effect of water on enzyme action in organic media. J. Biol. Chem., 1988, v. 263, p. 8017−8021.
  38. P. Kuhl, P.J. Hailing. Salt hydrates buffer water activity during chymotrypsin-catalysed peptide synthesis. Biochim. Biophis. Acta, 1991. v. 1078. p.326−334.
  39. S. Mitaku, K. Ikuta, H. Iton, R. Katoka, M. Naka, M. Yamada, M. Suwa. Denaturation of bacteriorhodopsin by organic solvents. Biophys. Chem., 1988, v. 30, p. 69−79.
  40. M. Eisenbach, S. R. Caplan, G. Tanny. Interaction of purple membrane with solvents. 1. Applicability of solubility parameter mapping. Biochim. Biophys. Acta, 1979, v. 554, p. 269.
  41. J-M. Glandieres, P. Calmettes, P. Martel, Ch. Zentz, A. Massat, J. Ramstein, B. Alpert. Solvent-induced structural distortions of horse metmyoglobin. Eur. J. Biochem., 1995, v. 227, p. 241−248.
  42. E. Dufour, P. Robert, D" Bertrand, T. Haertle. Conformation Changes of (3-lactoglobulin: An ATR infrared spectroscopic study of the effect of pH and ethanol. J. Protein Chem., 1994, v. 13, p. 143 149.
  43. M. Jackson, H. H. Mantsch. Beware of proteins in DMSO. Biochim. Biophys. Acta, 1991, v. 1078, p. 231−235.
  44. G. Veluicelebi, J.M. Sturtevant. Thermodynamics of the denaturation of lysosyme in alcohol-water mixtures. Biochemistry, 1979, v. 18, p. 1180−1186.
  45. R.J. Uhing, A.M. Janski, D.J. Graves. The effect of solvents on nucleotide regulation of glycogen phosphorylase. J. Biol. Chem., 1979, v. 254, p. 3166−3169.
  46. R.E. Kneusel, S. Merchant, B.R. Selman. Properties of the solvent-stimulated ATPase activity of chloroplast coupling factor 1 from Chlamydomonas reinhardii. Biochim. Biophys. Acta, 1982, v. 681, p. 337−344.
  47. R.A. Wolosiuk, E. Corley, N.A. Crawford, B.B. Buchanan. Dual effects of organic solvents on chloroplast phosphoribulokinase an NADP-glyceraldehyde-3-P-dehydrogenase. FEBS Lett., 1985, v. 189, p. 212−216.
  48. M. Dreyfus, J. Fries, P., Tauc, G. Herve. Solvent effects on allosteric equilibria: Stabilization of T and R conformations of Escherichia coli aspartate transcarbamylase by organic solvents. Biochemistry, 1984, v. 23, p. 4852−4859.
  49. P. Lozano, Т. Diego, JiL. lborra. Effect of water-miscible aprotic solvents on kyotorphin synthesis catalyzed by immobilized a-chymotrypsin. Biotechnol. Lett, 1995, v. 17, p. 603−608.
  50. S.J. Singer. The properties of protein in nonaqueous solvents. Adv. Prot. Chem., 1962, v, 15, p. 168.
  51. M.-J. Gething, J. Sambrook. Protein folding in the cell. Nature, 1992, v. 355, p. 33−44.
  52. R. Hlodan, S. Craig, R.H. Pain. Protein folding and its implications for the production of' recombinant proteins. Biotechnology and Genetic Engineering Reviews, 1991, v. 9, p. 47−88.
  53. E. Miland, R.R. Smyth, and R.R. Fagain. Increased thermal and solvent tolerance of acylated horseradish-peroxidase. Enzyme Microb. Technol., 1996, v. 19, p. 63−67.
  54. A. Murphy, and C O. Fagain. Stability characteristics of chemically-modified soluble trypsin. J. Biotechnol. 1996, v. 49, p. 163−171.
  55. D.S. Clark, J.E. Bailey. Deactivation of a-chymotrypsin and a-chymotrypsin-CNBr-sepharose 4B conjugates in aliphatic alcohols. Biochim. Biophys. Acta, 1984, v. 788, p. 181−188.
  56. S. Shubhada, P.V. Sundaram. The role of pH change caused by the addition of water-miscible organic solvents in the destabilization of an enzyme. Enzyme. Microb. Technol., 1995, v. 17, p. 330−335.
  57. P.A. Fitzpatrick, A.M. Klibanov. How can the solvent affect enzyme action in organic solvents? J. Amer. Chem. Soc., 1991, v. 113, p. 3166−3171.
  58. T. Sakurai, A.L. Margolin, A.J. Rassel, A.M. Klibanov. Control of enzyme enantioselectivity by the reaction medium. J. Amer. Chem. Soc., 1988, v. 110, p. 7236−7237.
  59. S. Parida, J.S. Dordick. Substrate structure and solvent hydrophobicity control lipase catalysis and enantioselectivity in organic media. J. Amer. Chem. Soc., 1991, v. 113, p. 2253−2259.
  60. A.E.M. Janssen, A.M. Vaidya, P.J. Hailing. Substrate specificity and kinetics of Candida rugosa lipase in organic media. Enzyme Microb. Technol., 1996, v.18, p/340−346.:
  61. C. Ebert, L. Gardossi, P. Linda, R. Vesnaver, M. Bosco. Influence of organic solvents on enzyme chemoselectivity and their role in enzyme-substrate interaction. Tetrahedron, 1996, v. 52, p. 48 674 876.
  62. M. Tse, S. Kermasha, A. Ismail. Biocatalysis by tyrosinase in organic solvent media- a model system using catechin and vanillin as substrates. J. Mol. Catalysis B: Enzymatic, 1997, v. 2, p. 199−213.
  63. R.H. Valivety, P.J. Haiiing, A.R. Macrae. Reaction rate with lypase catalyst hows similar dependence on water activity in different organic solvents. Biochim. Biophys. Acta, 1992, v. 1118, p. 218−222.
  64. D.G. Rees, D.H. Jones. Activity of L-phenylalanine ammonia-iyase in organic solvents. Biochim. Biophys. Acta, 1997, v. 1338, p. 121 126.
  65. R Affleck, Z.-F. Xu, V. Suzava, K. Focht, D.S. Clark, J.S. Dordick. Enzymatic catalysis and dynamics in low-water environments. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A, 1992, v. 89, p. 1100−1104.
  66. A.S. Ghatorae, G. Bell, P.J. Hailing. Inactivation of enzymes by organic solvents new technique with well-defined interfacial area. Biotechnol. Bioeng., 1993, v.43, p. 331−336.
  67. H. Oste-Triantafyllou, E. Wehtje, P. Aldercreutz, B. Mattiasson. Calorimetric studies on solid a-chymotrypsin preparations in air and in organic solvents. Biochim. Biophys. Acta, 1996, v. 1295, p. 110 118.
  68. S. Bone. Time-domain reflectrometry studies of water binding and structural flexibility in chymotrypsin. Biochim. Biophys. Acta, 1987, v. 916, p. 128−134.
  69. S. Bone, R. Rethig. Dielectric studies of protein hydration and hydration-induced flexibility. J. Mpl. Biol., 1985, v. 181, p. 323−326.
  70. G. Bell, P.J. hailing, B.D. Moore, J. Partridge, D.G. Rees. Biocatalust behaviour in low-water systems. Tibtech., 1995, v. 13, p. 468−473.
  71. R. Blanco, J.L.L. Rakels, J.M. Guisan, P.J. Hailing. Effect of thermodynamic water activity on aminoacid ester synthesis catalyzed by agarose-chymotrypsin in 3-pentanone. Biochim. Biophys. Acta, 1992, v. 1156, p. 67−70.
  72. M. Goldberg, D. Nhomas, M.-D. Legoy. The control of lypase-catalysed transesterification and esterification reaction rates. Effect of substrate polarity, water activity and water molecules on enzyme activity. Eur. J. Biochem., 1990, v. 190, p. 603−609.
  73. Z. Yang, D. Robb. Use of salt hydrates for controlling activity of tyrosinase in organic solvents. Biotechnol. Tech., 1993, v. 7, p. 3742.
  74. P. Kuhl, U. Eichhorn, H.D. Jakubke. Alpha-chymotrypsin catalyzed synthesis of peptides in hexane using alt hydrates. Pharmazie, 1991, v. 46, p. 53.
  75. P.J. Hailing. Salt hydrates for water activity control with biocatalysts in organic media. Biotechnol. Tech., 1992, v. 6, p. 271−276.
  76. P.J. Hailing. High affinity binding of water by proteins is similar in air and in organic solvents. Biochim. Biophys. Acta, 1990, v. 1040, p. 225−228.
  77. G. Bell, A.E.M. Janssen, P.J. Hailing. Water activity fails to predict critical hydration level for enzyme activity in polar organic solvents: Interconversion. of water concentrations and activities. Enzyme Microb. Techno!., 1997: v. 20, p. 471−477.
  78. D.A. MacManus, E.N. Vulfson. Reversal of regioselectivity in the enzymatic acylation of secondary hydroxyl groups mediated by organic solvents. Enzyme Microb. Technol., 1997, v. 20, p. 225−228.
  79. L.S. Gorman, J, S. Dordick. Organic solvents strip water off enzymes. Biotechnoh Bioeng., 1992, v. 39, p. 392−397.
  80. M.G. Kim, S.B. Lee. Effect of organic solvents on penicillin acylase-catalyzed reactions: Interaction of organic solvents with enzymes. J. Molec. Catalysis B: Enzymatic, 1996, v. 1, p. 181−190.
  81. J.D. Dong, B.S. Meyer, M.C. Kendrick, J.F. Manning, Carpenter. Effect of secondary structure on the activity of enzymes suspended in organic solvents. Arch. Biochem. Biophys., 1996, v. 334, p. 406 414.
  82. Zaks, A.M. Klibanov. Enzymatic catalysis in nonaqueous solvents. J. Biol. Chem., 1988, v. 263, p. 3194−3201.
  83. Y.-J. Zheng, R.L. Ornstein. A molecular dynamics study of the effect of carbon tetrachloride on enzyme structure and dynamics: subtilisin. Protein Eng., 1996, v. 9, p. 485−492.
  84. D.G. Rees, D.H. Jones. Stability of L-phenylalanine ammonia-lyase in aqueous solution and as the solid state in air and organic solvents. Enzyme Microb. Technol., 1996, v. 19, p. 282−288.
  85. R. Affleck, C.A. Haynes, D.S. Clark. Solvent dielectric effects on protein dynamics. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1992, v. 89, p. 5167−5170.
  86. G.H. Peters, D.M.V. van Aalten, O. Edholm, R. Bywater. Dynamics of proteins in different solvent systems: analysis of essential motion in lypases. Biophys. J., 1996, v. 71, p. 2245−2255.
  87. K. Griebenow, A.M. Klibanov. Can conformational changes be responsible for solvent and excipient effects on the catalytic behavior of subtilisin Carsberg in organic solvents? Biotechnol. Bioeng., 1997, v. 53, p. 351−362.
  88. K. Griebenow, A.M. Klibanov. On protein denaturation in aqueous-organic mixtures but not in pure organic solvents. J. Am. Chem. Soc., 1996, v. 118, p. 11 696−11 700.
  89. J. Partridge, G.A. Hutcheeon, B.D. Moore, P.J. Hailing. Exploiting hydration hysteresis for high activity of cross-linked subtilisin crystals in acetonitrile. J. Am. Chem. Soc., 1996, v. 118, p. 12 873−12 877.
  90. H. Ooshima, H. Mori, Y. Harano. Synthesis of aspartam precursor by solid thermolysin in organic solvents. Biotechnol. Lett., 1985, v. 7, p. 789−792.
  91. M. Therisod, A.M. Klibanov. Facile enzymatic preparation of monoacylated sugars in piridine. J. Am. Chem. Soc., 1986, v. 108, p. 5638−5640.
  92. S. Riva, J. Chopineau, A.P.G. Kieboom, A.M. Klibanov. Protease-catalyzed regioseiective esterification of sugars and relatedcompounds in anhydrous dimethylforamide. J. Am. Chem. Soc., 1988, v. 110, p. 584−589.
  93. F. Bjorkling, S.E. Godtfredson, O. Kirk. A highly selective enzyme-catalyzed esterification of simple glycosides. J. Chem. Soc., Chem. Commun., 1989, p. 934−935.
  94. G. Carrea, S. Riva, F. Secundo, B. Daniel. Enzymatic synthesis of various 1'-0-sucrose and 1-O-fructose esters. J. Chem. Soc.: Perkin Trans., 1989, p. 1057−1061.
  95. D.R. Patil, D.G. Rethwisch, J.S. Dordick. Chemoenzymatic synthesis of novel sucrose-containing polymers. Mocromolecules, 1991, v. 24, p. 3462−3463.
  96. J.S. Wallace, C.J. Morrow. Biocatalytic synthesis of polymers. Synthesis of an optically active, epoxy-substituted polyester by lipase-catalyzed polymerization. J. Polym. Sci., Part A: Polym. Chem., 1989, v. 27. p. 2553−2567.
  97. A.L. Margolin, J.-Y. Crenne, A.M. Klibanov. Stereoselective oligomerization catalyzed by lipase in organic solvents. Tetrahedron Lett., 1987, v. 17, p. 1607−1610.
  98. S.J. Osborne, J. Leaver, M.K. Turner, P. Dunnill. Correlation of biocatalytic activity in an organic-aqueous two-liquid phase system with solvent concentration in the cell membrane. Enzyme Microb. Technol., 1990, v. 12, p. 281−291.
  99. P. Cremonesi, G. Carrea, G. Spartoletti, E. Antonini. Enzymatic dehydrogenation of steroids by beta-hydroxysteroid dehydrogenasein a two-phase system. Arch. Biochem. Biophys., 1973, v. 159, p. 710.
  100. R. Bar. Effect of interphase mixing on a water-organic solvent two-liquid phase microbial system. J. Chem. Technol. Biotechnol., 1988, v. 43, p. 49−62.
  101. R.K. Owusu, D.A. Crown. Correlation between microbial protein thermostability and resistance to denaturation in aqueous: organic solvent two-phase systems. Enzyme. Microb. Technol., 1989, v. 11, p. 568−574.
  102. M.D. MacNaughtan, A.J. Daugulis. Importance of enzyme and solvent physical properties for the biocompatibility relationship of alpha-amino-acid-ester hydrolase. Enzyme Microb. Technol., 1993, v. 15, p. 114−119.
  103. R.K. Owusu, D.A. Cowan. Correlation between microbial protein thermostability and resistance to denaturation in aqueous: organic solvent two-phase systems. Enzyme Microb. Technol., 1989, v. 11, p. 568−574.
  104. M.D. MacNaughtan, A.J. Daugulis. Importance of enzyme and solvent physical properties for the biocompatibility relationship of alpha-amino-acid-ester hydrolase. Enzyme Microb. Technol., 1993, v. 15, p. 114−119.
  105. Yu.L. Khmelnitsky, A. V- Kabanov, N.L.KIyachko, A.V. Levashov, and K. Martinek. Enzymatic catalysis in reverse micelles. In: Structure and Reactivity in Reverse Micelles (M.P. Pileni, ed.), Elsevier, Amsterdam, 1989, 230−261.
  106. A.V. Levashov, and N.L. Klyachko, Micellar enzymology for enzyme engineering. Ideas and realization. Annals N.Y. Acad. Sci.} 1995, v. 750, p. 80−84.
  107. J. H. Fendler. Membrane mimetic chemistry. New York, Wiley, 1982.
  108. Micellization, solubilization and microemulsions. Ed. K. L. Mittal. New York, Plenum Press, v. 1−2, 1977.
  109. Solution behaviour of surfactants. Theoretical and applied aspects. Eds. E.J. Fendler, K.L. Mittal. New York, Plenum Press, 1982.
  110. Surfactants in solution. Eds. K.L. Mittal, B. Lindman. New York, Plenum Press, 1984.
  111. Microemulsions. Ed. I.D. Robb. New York, Plenum Press, 1982.
  112. J.H. Fendler, E.J.Fendler. Catalysis in micellar and macromolecular systems. New York, Academic Press, 1975.
  113. K. Kon-no, A. Kitahara. Micelle formation of oil-soluble surfactants in nonaqueous solutions: effect of molecular structure of surfactants. J. Colloid Interface Sei., 1971, v. 35, p. 636−642.
  114. R.F. Ford, S. Kafman, O.D. Nichols. Ultracentrifugal studies of barium dinonylnaphtalene sulfonate benzene system. 1. Sedimentation velocity. J. Phys. Chem., 1966, v. 70, p. 3726−3732.
  115. R.A. Day, B.H. Robinson, J.H.R. Clarke, J.V. Doherty. Characterization of water-containing reversed micelles by viscosity and dynamic light scatening methods. J. Chem. Soc., Faraday Trans. I, 1979, v. 75, p. 132−139.
  116. U. Hermann, Z.A. Schelly. Aggregation of Alkylammonium carboxylates and Aerosol-OT in apolar solvents studied using absorption and fluorescence probes. J. Amer. Chem. Soc., 1979, v. 101, p. 1665−1669.
  117. N. Muller. A multiple-equilibrium model for the micellization of ionic surfactants in nonaqueous solvents. J. Phys. Chem., 1975, v. 79, p. 287−291.
  118. K. Tsujii, J. Sunamoto, F. Nome, J.H.Fendler. Concentration dependent ground and excited state behavior of dodecylammonium pyrene-1-butyrate in ethanol and benzene. J. Phys. Chem., 1978, v. 82, p. 423−429.
  119. J.H. Fendler. Interactions and reactions in reversed micellar systems. Acc. Chem. Rec., 1976, v. 9, p. 153−161.
  120. T. Yamashita, H. Yano, S. Harada, R. Yasunaga. Kinetic studies of the micelle system of octilammonium alkanoates in hexane solution by the ultrasonic absorbtion method. Bull. Chem. Soc. Japan, 1982, v. 55, p. 3403−3406.
  121. B. Lindman, P. Stilbs, M.E. Moseley. Fourier transform NMR self-diffusion and microemulsion structure. J. Colloid Interface Sci., 1981, v. 83, p. 569−582.
  122. H. Fabre, N. Kamenka, B. Lindman. Aggregation in three-component systems from self-diffusion studies. Reversed micelles, microemulsions, and reansition to normal micelles. J. Phys. Chem., 1981, v. 85, p. 3493−3501.
  123. C.A. Martin, L.J. Magid. Carbon-13 NMR investigations of Aerosol OT water-in-oil microemulsions. J. Phys. Chem., 1981, v. 85, p. 3938−3944.
  124. G.G. David, D.F. Morris, E.L. Short. Aggregation of a liquid cation exchanger. J. Colloid Interface Sci., 1981, v. 92, p. 226−232.
  125. R.K. Sharma, J.M.G. Cowie, A.F. Sirianni. J. Amer. Oil Chem. Soc., 1967, v. 44, p. 488−490.
  126. C.J. O’Connor, R. E: Ramage. The reactivity of the tris-(oxalato)chromate (II!) anion in reversed micellar systems. Aust. J. Chem., 1980, v. 33, p. 695−698.
  127. Cebula D. J., Myers 0. Y., Ottewill R. H. Studies of microemulsions. Part 1. Scattering studies of water-in-oil microemulsions Colloid Polym. Sci., 1982, v. 260, p. 96−107.
  128. P. Ekwall, L. Mandell, K. Fontell. Some observations on binary and ternary AOT systems. J. Colloid Interface Sci., 1970, v. 33, p. 215 235.
  129. M. Wong, J. K. Thomas, M. Gratzel. Fluorescence probing of inverted micelles. The state of solubilized water clusters in alkane/diisooctylsulphosuccinate (Aerosol ОТ) solution. J. Amer. Chem. Soc., 1976, v. 98, p. 2391−2397.
  130. P.E. Zinsli. Inhomogeneous interior of AOT microemulsions probed by fluorescence and polarization decay. J. Phys. Chem., 1979, v. 83, p. 3223−3231.
  131. F.M. Menger, K. Yamada. Enzyme catalysis in water pools. J. Amer. Chem. Soc., 1979, v. b1Q-1vp. 6731−6734.
  132. К. Мартинек, А. В. Левашов, Н. Л. Клячко, И. В. Березин. Катализ водорастворимыми ферментами в органических растворителях.
  133. Стабилизация фермента путем включения в обращенные мицеллы. Докл. Акад. Наук СССР, 1977, т. 236, с. 920−923.
  134. P.L. Luisi, F.J. Bonner, A. Pellegrini, P. Wiget, R. Wolf. Micellar solubilization of proteins in aprotic solvents and their spectroscopic characterization. Helv. Ctiim. Acta, 1979, v. 62, p.740−753.
  135. A.V. Levashov, Yu. L Khmelnitski, N.L. Klyachko, V.Ya. Chernyak, Лю Martinek. Enzymes entrapped into organic solvents. Sedimentation analysis of the protein AOT — water — octane system. J. Colloid Interface Sci., 1982, v. 88, p. 444−457.
  136. Н.Л. Клячко. Кинетические закономерности действия ферментов, солюбилизованных обращенными мицеллами поверхностно-активных веществ в органических растворителях. Дис. канд. хим: наук. М.: Московский государственный университет, 1983.
  137. А.В. Левашов, Н. Л. Клячко, В. И. Пантин, Ю. Л. Хмельницкий, К. Мартинек. Катализ водорастворимыми ферментами, включенными в обращенныемицеллы ПАВ в неводных растворителях. Биоорг. Хим., 1980, т. 6, с. 929−943.
  138. Ю.Л. Хмельницкий, А. В. Левашов, Н. Л. Клячко, К. Мартинек. Коллоидный раствор воды в органическом растворителе -микрогетерогенная среда для химических (ферментативных) реакций. Усп. Хим., 1984, т. 53, с. 545−565.
  139. А.В. Левашов, В. И. Пантин, К. Мартинек, И. В. Березин. Кинетическая теория реакций, катализируемых ферментами, солюбилизованными в органических растворителях с помощью ПАВ. Докл. Акад. Наук СССР, 1980, т. 252, с. 133−136.
  140. S. Barbaric, P.L. Luisi.: Micellar solubilization of biopolymers in organic solvents. 5. Activity and conformation of chymotrypsin in isooctane AOT reversed: micelles. J. Amer. Chem. Soc., 1981, v. 103, p. 4239−4244.
  141. P.D.I. Fletcher, R.B. Freedman, J, Mead, C. Oldfield, B.H. Robinson. Reactivity of chymotrypsin in water-in-oil microemulsions. Colloids Surf., 1984, v. 10, p. 193−203,
  142. C. Balny, G. Hui Bon Hoa, O. Douzou. Cryoenzymology in reversed micelles. Jurusalem Symp. Quant. Chem. Biochem., 1984, v. 12, p. 37−50.
  143. R.L. Misiorowski, M.A. Wells. Activity of phospholipase A2 in reversed micelles of phosphatidylcholine in diethyl ether. Effect of water and cations. Biochemistry, 1974, v. 13, p. 4921−4927.
  144. К. Мартинек, Ю. Л. Хмельницкий, А. В. Левашов, И. В. Березин. Субстратная специфичность алкогольдегидрогеназы в коллоидном растворе воды в органическом растворителе. Докл. Акад. Наук СССР, 1982, Т. 263, С. 737−741.
  145. К. Мартинек, Н. Д. Клячко, А. В. Левашов, И. В. Березин. Мицеллярная энзймология. Каталитическая активность пероксидазы в коллоидном растворе воды в органическом растворителе. Докл. Акад. Наук СССР, 1983, т. 269, с. 491−493.
  146. A.V. Kabanov, S.N. Nametkin, N.L. Klyachko, A.V. Levashov. Regulation of the catalytic activity and oligomeric composition of enzymes in reversed micelles of surfactants in organic solvents. FEBS Lett., 1991, v. 278, p. 143−146.
  147. R. Hilhorst, R. Spruijt, C. Laane, C. Veeger. Rules for the regulations of enzyme activity in reversed micelles as illustrated by the convertion of apolar steroids by 20-betahydroxysteroid dehydrogenase. Eur. J. Biochem., 1984, v. 144, p. 459−466.
  148. B.I. Kurganov, L.G. Tsetlin, E.A. Malakhova, V.Z. Lankin, A.V. Levashov, K. Martinek. A novel approach to study the action ofwater-insoluble inhibitors on enzymic reactions. J. Biochem. Biophys. Methods, 1985, v. 11, p. 177−184.
  149. A.V. Kabanov, S.N. Nametkin, N.L. Klyachko, A.V. Levashov. Regulation of the catalytic activity and oligomeric composition of enzymes in the reversed micelles of surfactants in organic silvents. FEBSLett., 1991, v. 278, p. 143−146.
  150. M. Otamiri, P. Adlercreutz, B. Mattiasson. Polymer-polymer organic solvent two-phase system: A new type of reaction medium for bioorganic synthesis. Biotechnol. Bioeng., 1994, v. 43., p. 987−994.
  151. Yu.L. Khmelnitsky, S.H. Welch, D.S. Clark, J.S. Dordick. Salts dramatically enhance activity of enzyme suspensions in organic solvents. J. Am. Chem. Soc., 1994, v. 116, p. 2647−2648.
  152. J. Broos. Enzymes in organic media. Effects of Crown Ethers and Other Organic Additives on the Activity and Selectivity. Thesis Enschede, Koninklijke biblioteek, Den Haag, 1994.
  153. J.O. Rich, J.S. Dordick. Controlling subtilisin activity in organic media by imprinting with nucleophilic substrate. J. Am. Chem. Soc., 1997, v. 119, p. 3245−3252.
  154. A.J. Russel, A.M. Klibanov. Inhibitor-induced enzyme activation in organic solvents. J. Biol. Chem., 1988, v. 263, p. 11 624−11 626.
  155. M. Stahl, M.-O. Mansson, K. Mosbach. The synthesis of a D-amino acid ester in an organic media with a-chymotrypsin modified by a bio-imprinting procedure. Biotechnol. Lett., 1990, v. 12, p. 161−166.
  156. J.E. Matsuura, M.E. Powers, M.C. Manning, E. Shefter. Structure and stability of insulin dissolved in 1-octanol. J. Am. Chem. Soc., 1993, v. 115, p. 1261−1264.
  157. M.E. Powers, J.E. Matsuura J. Brassell, M.C. Manning, E. Shefter. Enhanced solubility of proteins and peptides in nonpolar solvents through hydrophobic ion pairing. Biopolymers, 1993, v. 33, p. 927 932.
  158. J.D. Meyer, J.E. Matsuura, B.S. Kendrick, E.S. Evans, G.J. Evans, M.C. Manning. Solution behavior of a-chymotrypsin dissolved in nonpolar organic solvents via hydrophobic ion pairing. Biopolymers, 1995, v. 35, p. 451−456.
  159. J.D. Meyer, B.S. Kendrick, J.E. Matsuura, J.A. Ruth, P.N. Bryan, M.C. Manning. Generation of soluble and active subtilisin and a-chymotrypsin in organic solvents via hydrophobic ion pairing. Protein Res., 1996, v. 47, p. 177−181.
  160. Q. Jene, J.A. Pearson, C.R. Lowe. Surfactant modified enzymes: solubility and activity of surfactant-modified catalase in organic solvents. Enzyme Microb. Technol., 1997, v. 20, p. 69−74.
  161. M.V. Sergeeva, V.M. Paradkar, J.S. Dordick. Peptide synthesis using proteases dissolved in organic solvents. Enzyme Microb. Technol., 1997, v. 20, p. 623−628.
  162. T. Mori, Y. Okahata. A variety of lipid-coated glycoside hydrolases as effective glycosyl transfer catalysts in homogeneous organic solvents. Tetrahedron Lett, 1997, v. 38, p. 1971−1974.
  163. H. Samejumi, K. Kimura. In: Enzyme Engineering: Future Directions (L.B. Wingard, ed.). Plenum Press, New York, 1974,. p. 131−134.
  164. K. Kawashiro, H. Ishizaki, S. Sugiyama, H. Hayashi. Esterification of N-Benzyloxycarbonyldipeptides in Ethanol-water with immobibized papain. Biotechn. Bioeng., 1993, v. 42, p. 309−314.
  165. K. Nilsson, K. Mosbach. Peptide synthesis in aqueous-organic solvent mixtures of a-chymotrypsin immobilized to trsyl chloride-activated agarose. Biotechnol. Bioeng., 1984, v. 26, p. 1146−1154.
  166. K. Kawakami, T. Abe, T. Yoshida. Silicone-immobilized biocatalysts effective for bioconversions in nonaqueous media. Enzyme Microb. Technol., 1992, v. 14: p:c 371−375,
  167. D.J. Sheffield, T.R. Harry, A.J. Smith, L.J. Rogers. Immobilization of bromoperoxidase from Coralina officinalis. Biotechnol. Techn., 1994, v. 8, p. 579−582.
  168. A. Jonsson, E. Wehtje, P. Adlercreutz, B. Mattiasson. Temperature effects on protease catalyzed acyl transfer reactions in organic media. J. Molec. Catalysis B: Enzymatic, 1996, v. 2, p. 43−51.
  169. R. Vazquez-Duhalt, P.M. Fedorak, D.W.S. Westlake. Role of enzyme hydrophobicity in biocatalysis in organic solvents. Enzyme Microb. Techno!., 1992, v. 14, p. 837−841.
  170. S.A. Khan, P.J. Hailing, J.A. Bosley, A.H. Clark, A.D. Pielow, E.G. Pelan, D.W. Rowlands. Polyethylene glycole modified subtilisin forms microparticulate suspensions in organic solvents. Enzyme Microb. Techno!., 1992, v. 14, p. 96−100.
  171. Z. Yang, A.J. Mesiano, S, Venkatasubramanian, S.H. Gross, J.M. Harris, A.J. Russel. Activity and stability of enzymes incorporatedinto acrylic polymers. J. Am. Chem. Soc., 1995, v. 117, p. 48 434 850.
  172. V. Fulcrandrolland, T.D. Hua, R. Lazaro, P. Viallefont. Sono-enzymatic peptide synthesis in organic solvent. Biomed. Biophys. Acta, 1991, v. 50, p. S 213-S 216.
  173. Y. Kodera, M. Furukawa, I. Yokoi, H. Kuno, H. Matsushita, Y. Inada. Lactone synthesis from 16-hydroxyhexadecanoic acid ethyl ester in organic solvents catalyzed with polyethylene glycol-modified lipase. J. Biotechnol., 1993, v. 31, p. 219−224.
  174. T. Uemura, M. Furukawa, Y. Kodera, M. Hiroto, A. Matsushima, H. Kuno, H. Matshushita, K. Sakurai, Y. Inada. Polyethylene glycol-modified lipase catalyzed asymmetric alcoholysis of delta-decalactone in n-decanol. Biotechn. Lett., 1995, v. 17, p. 61−66.
  175. Z. Yang, D. Williams, A.J. Dordick. Synthesis of protein-containing polymers in organic solvents. Biotechn. Bioeng., 1995, v. 45, p. 1017.
  176. V. Roland-Fulcrand, N. May, P. Viallefont, R. Lozaro. Enzymatic peptide synthesis by new supported biocatalysts. Amino Acids, 1994, v. 6, p. 311−314.
  177. T. Sagawa, H. Ishida, K. Urabe, K. Yoshinaga, K. Ohkubo. Enzymatic tryptophan 2,3-dioxygenase-like activity of a manganase porphyrin bound to bovine serum albumin modofied with poly (ethylene glycol). J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2, 1993, p. 1−5.
  178. H. Matsushima, Y. Kodera, M. Hiroto, H. Nishimura, Y. Inada. Bioconjugates of proteins and polyethylene glycol: potent tools in biotechnological processes. J. Molecular Catalysis B: Enzymatic, 1996, v. 2, p. 1−17.
  179. M. Barsi, K. Ampon, W.M.Z. Warn Yunus, C.N.A. Rzak, A.B. Salleh. Enzymatic synthesis of fatty esters by alkylated lipase. J. Molec. Catalysis B: Enzymatic, 1977, v. 3, p. 171−176.
  180. A. Murphy, C, Fagain. Depeptide synthesis using acylated trypsin derivative. Biotechnol. Techn., 1997, v. 11, p. 13−16.
  181. A. Murphy, C, Fagain. Chtmically stabilized trypsin used in depeptide synthesis. Biotechnol. Bioeng., 1998, v. 58, p. 366−373.
  182. T. Ke, C.R. Wescott, A.M. Klibanov. Prediction of the solvent dependence of enzymatic prochiral selectivity by means of structure-based thermodynamic calculations. J. Am. Chem. Soc., 1996, v. 118, p. 3366−3374.
  183. Y.-F. Wang, K. Yakovlevsky, B. Zhang, A.L. Margolin. Cross-linked crystals of subtilisin: versatile catalyst for organic synthesis. J. Org. Chem., 1997, v. 62, p, 3488−3495.
  184. C.R. Wescott, H. Noritomi, A.M. Klibanov. Rational control of enzymatic enantioselectivity through solvation thermodynamics. J. Am. Chem. Soc., 1996,.v. .118, p. 10 365−10 370
  185. N. Khalaf, С.P. Govardhan, J.J. Lalonde, R.A. Persichetti, Y.-F. Wang, A.L. Margolin. Cross-linked enzyme crystals as highly active catalysts in organic solvents. J. Am. Chem. Soc., 1996, v. 118, p. 5494−5495.
  186. L. You, F.A. Arnold. Directed evolution of subtilisin E in Bacillus subtilis to enhance total activity in aqueous dimethylformamide. Protein Eng., 1994, v. 9, p. 77−83.
  187. J.C. Moore, F.H. Arnold. Directed evolution of a para-nitrobenzyl esterase for aqueous-organic solvents. Nature Biotechn., 1996, v. 14, p. 458−467.208. lilyp A. M. Высокомолекулярные соединения. Москва, Высшая школа, 1981, 656 с.
  188. F. Candau, F. Afchar-Taromi, Зю Rempp. Synthesiss and characterization of polystyrene-poly (ethylene pxide) graft copolymers. Polymer., 1977, v. 18, p. 1253−1257.
  189. F. Candau, J. Boutillier, F. Tripier, J.-C. Wittmann. Structure of colloidal particles in water oil mixtures stabilized by polymeric emulsifiers: 1. Phase diagrams and electron microsscope studies. Polymer, 1979, v. 20, p. .1221−1226.
  190. F. Ballet, F. Debeauvais, F. Candau. The effect of temperature and alcohol on the solubilization of water in nonaqueous solutions ofpolymeric emulsifiers. C&lloid & Polym. Sci., 1980, v. 258, p. 12 531 262.
  191. F. Candau, F. Ballet. Formation and structure of four-component systems containing polymeric surfactants. In Microemulssions (ed. I.D. Robb). New York, Plenum Press, 1982, p. 49−64.
  192. F. Candau, F. Ballet, F. Debeauvais, J.-C. Wittmann. Structural properties and topological defects of swollen polymeric mesophases: low angle X-ray diffraction and optical microscopic studies. J. Colloid Interface Sci., 1982, v. 87, p. 356−374.
  193. F. Ballet, F. Candau. Investigation of the structure of polymeric microemulsions by proton magnetic resonance. J. Polym. Sci., 1983, v. 21. p. 155−163.
  194. M.C. Barker, B. Vincent. The preparation and characterisation of polystyrene/poly (ethylene oxide) AB block copolymers. Colloids & Surf., 1984, v. 8, p. 289−296.
  195. M.C. Barker, B: Vincent. Micellar solutions and microemulsionsscontaining polystyrene/poly (ethylene oxide) AB block copolymers. Colloids & Surf., 1984, v. 8, p. 297−314.
  196. A. Sikora, Z. Tusar. Association of two-block copolymer polystyrene-block-poly (2-vinylpyridine) in toluene. Macromol. Chem., 1983, v. 184, p. 2049−2059.
  197. C. Price, K.D. Kendall, R.B. Stubbersfield, B. Wright. Phase separation in a micellar solution of a block copolymer in the region of a lower critical solution temperature. Polym. Commun., 1983, v. 24, p. 200−202.
  198. C. Price, K.D. Kendall, R.B. Stubbersfield, B. Wright. Thermodynamics of. micellization of a polystyrene-b-poly (ethylene/propylene) block copolymer in n-decane. Polym. Commun., 1983, v. 24, p. 326−328.
  199. A. Watanabe, M. Matsuda. Dilute sollution propertiess of a polystyrene-poly (methyl methacrylate) graft copolymer studied with the emition probe technique. Macromol., 1985, v. 18, p. 273−277.
  200. M. Moller, J. Omeis, E. Muhleisen. Association and gelation of polystyrenes via terminal sulfonate groups. In: Reversible polymeric gels and related systems. New York, Plenum Press, 1987, p. 87 105.
  201. K.A. Cogan, A.P. Gast. Effect of water on diblock copolymers in oil: large aggregates, micelles, and microemulsions. Macromol., 1990, v. 23, p. 745−753. /
  202. Th.F. Tadros, P.F. Luckham, C. Yanaranop. The formation and characterization of water in oil microemulsions stabilised by A-B-A block copolymers. ACSSymp. Ser., 1989, v. 389, p. 22−33.
  203. C. Price. Micelle formation by block copolymers in organic solvents. Pure & Appl. Chem., 1983, v. 55, p. 1563−1572.
  204. Y. Chujo, H. Samukawa, Y. Yamashita. Surface and solution prjperties of polysiloxane-poly (methyl mathacrylate) graft copolymer. J. Polym. Sci., 1989, v. 27, p. 1907−1913.
  205. K. Ito, Y. Masuda, T. Shintani, T. Kitano, Y. Yamashita. Synthesis and interfacial characterization of graft and random copolymers ofstyrene and 2-hydroxyethy! methacrylate. Polymer J., 1983, v. 15, p. 443−448.
  206. M.A. Winnik. Fluorescence in saturated media: a look at polymer colloids. Pure & Appl. Chem., 1984, v. 56, p. 1281−1288.
  207. J. Noolandi, K.M. Hong. Theory of block copolymer micelles in solution. Macromol., 1983, v. 16, p. 1443−1448.
  208. R. Nagarajan, K. Ganesh. Block copollymer self-assembly in selective solvents: spherical micelles with segregated cores. J. Chem. Phys., 1989, v. 90, p. 5843−5856.
  209. B.A. Кабанов, В. И. Мустафаев. Влияние ионной силы и рН среды на поведение БСА с поли-4-винил-М-этилпиридинийбромидом в водных растворах. ВМС. Л., 1981, т. 23, с. 255−260.
  210. В.А. Изумрудов, А. Б. Зезин, В. А. Кабанов. Макромолекулярный обмен в растворах комплексов глобулярных белков с неприродными полиэлектролитами. Докл. Акад. Наук СССР, 1984, т. 275, с. 1120−1123.
  211. М. Autalik, М. Bona, J. Bagelova. Effect of cytochrome-c-oxidase and polyions on the alkaline transition of ferricytochrome-c. Biochem. Int., 1992, v. 28, p. 675−682.
  212. B.A. Кабанов, И. М. Паписов. Комплексообразование между комплементарными синтетическими полимерами и олигомерами в разбавленных растворах. ВМС. А., 1979, т. 21, с. 243.
  213. В.А. Кабанов, A.B. Зезин, A.B. Харенко, Р. И. Калюжная. Водорастворимые полиэлектролитные комплексы. Докл. Акад. Наук СССР, 1976, т, 230, с. 139.
  214. В.А. Касаикин, A.B. Зезин, В. А. Кабанов. Принципы образования водорастворимых ПЭК. ВМС. Б., 1979, т. 21, с. 84.
  215. В.А. Изумрудов, В. А. Касаикин, A.B. Зезин. Конформация полиэлектролитов и реакции образования полиэлектролитных комплексов. ВМС. А., 1976, т. 18, с. 2488.
  216. O.A., Харенко A.B., Калюжная Р. И., Изумрудов В. А., Касаикин В. А., Зезин А. Б., Кабанов В. А. Нестехиометричные полиэлектролитные комплексы новые водорастворимые макромолекулярные соединения. ВМС. А., 1979, т. 21, с. 2719.
  217. В.А. Изумрудов, A.B. Зезин, В. А. Кабанов. Реакции образования нестехиометричных полиэлектролитных комплексов. ВМС. Д., 1983, т. 25, с. 1972−1978.
  218. В.А. Изумрудов, В. А. Касаикин. Поведение нестехиометричных ПЭК в водных растворах солей. ВМС. А., 1980, т. 22, с. 692.
  219. В.А. Изумрудов, В. А- Касаикин, А. Б. Зезин. Сопряженные физикохимические превращения в водно-солевых растворах НПЭК. Докл. Акад. Наук СССР, 1982, т. 262, с. 1419.
  220. К.Н. Бакеев, В. А. Изумрудов, В. А. Касаикин, А. Б. Зезин. Влияние низкомолекулярного электролита на тушение люминесценции в растворах НПЭК. ВМС. В., 1987, т. 29, с. 424−428.
  221. Ж.Г. Гуляева, O.A. Полетаева, A.A. Колачев, В. А. Касаикин, А. Б. Зезин. Исследование водорастворимых полиэлектролитных комплексов на основе полиакриловой кислоты и 5,6-ионена. ВМС. А., 1976, т. 18, с. 2800−2805.
  222. К.Н. Бакеев, В. А. Изумрудов, А. Б. Зезин, В. А. Кабанов. Кинетика имеханизм реакции образования полиэлектролитных комплексов. Докл. Акад. Наук СССР, 1987, т. 299, с. 1405−1408.
  223. В.А. Касаикин, А. Б. Зезин, В. А. Кабанов. Строение водорастворимых ПЭК. ВМС. А., 1979. т. 21, с. 2726.
  224. В.А. Изумрудов, А. П. Савицкий, А. Б. Зезин, В. А. Кабанов. Особенности кинетики и механизм интерполиэлектролитных реакций. ВМС. Б., 1983, т/25, с. 805−806.
  225. В.А. Кабанов, М. И. Мустафаев. В. Д. Блохина, B.C. Агафьева. Конкурентные взаимодействия фракций белков сыворотки в образовании комплексов с полиэлектролитами. Мол. Виол., 1980, т. 14, с. 64.
  226. В.А. Кабанов, В. П. Евдаков, М. И. Мустафаев, В. Д. Блохина, B.C. Агафьева. Кооперативное связывание сывороточного альбумина с кватернизованными поли-4-винилпиридинами и структура образующихся комплексов. Мол. Биол., 1977, т. 11, 3, с. 582
  227. A.B. Zezin, V.A. Izumpudov, V.A. Kabanov. Interpolyelectrolyte complexes as a new family of enzime carriers. Macromol. Chem. Macromol. Symp., 1989, v. 26, p. 249−64.
  228. P.L. Dubin, T.D. Ross, I. Sharma, B.E. Yegerlehner. Coacervation of polyelectrolyte-protein complex. ACS Symp. Ser., 1987, v. 342, p. 162−169.
  229. B.A. Изумрудов, A.Jl. Марголин, А. Б. Зезин, В. А. Кабанов. Свойства нестехиометричных полиэлектролитных комплексов, содержащих фермент. Докл. Акад. Наук СССР, 1982, т. 269, с. 1508.
  230. В.А. Изумрудов, А. Б. Зезин, В. А. Кабанов. Кинетика макромолекулярного обмена в растворах комплексов глобулярных белков с полиэлектролитами. Докл. Акад. Наук СССР, 1984, т. 291, с. 1150−1154.
  231. М. Mora, J. Pato. Effect of negative electric charges of polymers on the chimortipsin catalized hidrolysis of the side chains. J. Controlled Relase, 1992, v. 18.,.p, 153−158. .
  232. J.L. Benovic, W. Stone, M.G. Caron, R.J. Lefkovitz. Inhibition of the в-adrenergic receptor kinase by polyanions. J. Biol. Chem., 1989, v. 264, p. 6707−6710.
  233. R.A. Lopez, C.A. Arce, H.S. Barra. Effect of polyanions and polycations on detyrosination of tubulin and microtubules at steady state. Biochim. Biophys. Acta. 1990, v. 1039, p. 209−217.
  234. Ch.l. Mekras. Inhibition of pepsin by polyions and c.d. studies. Int. J. Biol. Macromol., 1989, v. 11, p 207.
  235. E. Holler, G. Achkammer, B. Angerer. Specific inhibition of Physarium polycephalurn DNA-polymerase-alpha-primase by poly (Lmalate) and related polyanions. Eur. J. Biochem., 1992, v. 206, p. 16.
  236. B. Angerer, E. Holler. Large complexes of beta-poly (L-malate) with DNA polymerase-alpha, gistones and other proteins in nuclei of growing Plasmodia of Physarium polycephalum. Biochemistry-US, 1995, v. 34, p. 14 741−14 751.
  237. C.S. Patrickios, S.D. Gadam, S.M. Cramer, W.R. Hertler, T.A. Hatton. Block methacrylic polyampholytes as protein displacers in ion-exchange chromatography. Biotechnol. Prog., 1995, v. 11, p. 3338.
  238. Y. Wang, J.Y. Gao, P.L. Dubbin. Protein separation via polyelectrolyte coacervation: selectivity and efficiency. Biotechnol. Prog., 1996, v. 12, p. 356−362.
  239. T.D. Gibson, J.R. Woodward. Protein stability in biosensor systems. ACS SYM SER., 1992, v. 487, p. 45−55.
  240. Lawton J.В., Mekras Ch.l. Complexes of polyelectrolytes with enzyme pepsin and atpha-chymotrypsin. Makromol. Chem., 1985, v. 186, p. 2397−2405.
  241. A.A. Шевченко, OA. Кост. Метод расчета доступности растворителя к ароматическим аминокислотным остаткам белков в водно-органических смесях. Биохимия, 1996, т. 61, с. 1502−1507.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!