Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

РНК-гидролизующие антитела из сыворотки крови больных системной красной волчанкой

Диссертация: РНК-гидролизующие антитела из сыворотки крови больных системной красной волчанкой
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Классической функцией иммуноглобулинов, основных специфических факторов гуморального иммунного ответа организма на различные агенты с признаками чужеродной генетической информации, является способность к образованию прочных комплексов с антигеном, являющимся причиной их возникновения. Полингом Л. (1948 г.), а позднее Дженксом В. (1969 г.) была высказана гипотеза, согласно которой антитела… Читать ещё >

РНК-гидролизующие антитела из сыворотки крови больных системной красной волчанкой (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
    • 1. 1. Каталитически активные антитела
      • 1. 1. 1. Актитела к стабильным аналогам комплекса переходного состояния химических реакций
      • 1. 1. 2. Природные абзимы
        • 1. 1. 2. 1. Антитела с протеолитической функцией
        • 1. 1. 2. 2. ДНК-гидролизующие иммуноглобулины
        • 1. 1. 2. 3. Роль природных абзимов в патогенезе заболеваний
        • 1. 1. 2. 4. Природные абзимы человеческого молока
        • 1. 1. 2. 5. Возможные механизмы возникновения природных абзимов
    • 1. 2. Нуклеазы человека
      • 1. 2. 1. Внеклеточные ДНКазы человека
        • 1. 2. 1. 1. Классификация и биологические функции
        • 1. 2. 1. 2. ДНКаза I человека
        • 1. 2. 1. 3. ДНКаза II человека
      • 1. 2. 2. Внеклеточные РНКазы человека '
        • 1. 2. 2. 1. Классификация РНКаз человека суперсемейства РНКазы А
        • 1. 2. 2. 2. Механизм реакции гидролиза РНК
        • 1. 2. 2. 3. Субстратная специфичность
        • 1. 2. 2. 4. Взаимодействие с ро1у (А) и дцРНК
        • 1. 2. 2. 5. Эффективность катализа
        • 1. 2. 2. 6. Взаимодействие с низкомолекулярными субстратами
        • 1. 2. 2. 7. Влияние ионной силы и катионов на активность РНКаз
        • 1. 2. 2. 8. Взаимодействие РНКаз с ингибитором
        • 1. 2. 2. 9. Филогенез семейства РНКазы А
      • 1. 2. 3. Лактоферрин
  • 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТ
    • 2. 1. Реактивы и материалы
    • 2. 2. Методы
      • 2. 2. 1. Выделение иммуноглобулинов
        • 2. 2. 1. 1. Выделение ДО
        • 2. 2. 1. 2. Выделение ^М
      • 2. 2. 2. Аффинная хроматография ^ на ДНК-целлюлозе
      • 2. 2. 3. Определение концентрации белков 5 О
      • 2. 2. 4. Электрофоретический анализ белков
      • 2. 2. 5. Анализ препаратов АТ методом двойной радиальной иммунодиффузии
      • 2. 2. 6. Получение РаЬ-фрагментов иммуноглобулинов
      • 2. 2. 7. Получение и очистка [5'-32Р] олигонуклеотидов
      • 2. 2. 8. Синтез [3Н] олигодезоксирибоаденилатов
      • 2. 2. 9. Выделение рибонуклеаз из сыворотки крови человека
      • 2. 2. 10. Методы определения нуклеазной активности АТ и РНКаз
        • 2. 2. 10. 1. Определение активности АТ в реакции гидролиза ДНК рВЛ
        • 2. 2. 10. 2. Определение активности АТ и РНКаз в реакции гидролиза 54 полирибонуклеотидов
        • 2. 2. 10. 3. Определение нуклеазной активности препаратов АТ по гидролизу 55 олигонуклеотидов
      • 2. 2. 11. Определение субстратной специфичности АТ
      • 2. 2. 12. Определение оптимальных условий гидролиза
      • 2. 2. 13. Определение кинетических параметров реакции гидролиза
      • 2. 2. 14. Определение термостабильности абзимов и РНКаз сыворотки
      • 2. 2. 15. Тестирование нуклеазной активности в геле
  • 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
    • 3. 1. Выделение каталитически активных иммуноглобулинов из сыворотки крови человека
    • 3. 2. Связывание каталитически активных антител аффинными сорбентами
    • 3. 3. Рибонуклеазная активность РаЬ-фрагментов антител
    • 3. 4. Тестирование РНК- и ДНК-гидролитических активностей препаратов 77 иммуноглобулинов в геле после электрофоретического разделения
    • 3. 5. Субстратная специфичность антител и РНКаз сывортки крови человека
    • 3. 6. Оптимальные условия гидролиза субстратов антителами и РНКазами 86 сывортки крови
    • 3. 7. Сравнение термостабильности абзимов и РНКаз сыворотки крови
    • 3. 8. Кинетические характеристики реакции гидролиза ON иммуноглобулинами 95 классаМ
    • 3. 9. Кинетические характеристики взаимодействия РНКаз сыворотки крови 100 человека с олигорибонуклеотидами
    • 3. 10. Взаимодействие моноклональных мышиных СКВ-антител с 101 олигонуклеотидами

Классической функцией иммуноглобулинов, основных специфических факторов гуморального иммунного ответа организма на различные агенты с признаками чужеродной генетической информации, является способность к образованию прочных комплексов с антигеном, являющимся причиной их возникновения. Полингом Л. (1948 г.), а позднее Дженксом В. (1969 г.) [1] была высказана гипотеза, согласно которой антитела, комплементарные структуре переходного состояния химической реакции, должны катализировать эту реакцию, ускоряя достижение переходного состояния. Экспериментальное подтверждение эта гипотеза получила в 1986 году, когда двумя группами исследователей [2, 3] при иммунизации животных стабильными аналогами переходных состояний химических реакций были получены антитела, катализирующие эти реакции. В настоящее время абзимология является интенсивно развивающимся направлением науки, известны более 60 примеров каталитически активных антител (абзимов), способных катализировать химические превращения, для многих из которых не существует природных ферментативных аналогов [4]. Субстратная специфичность абзимов выше, чем ферментов, и в ряде случаев эффективность катализа приближается к ферментативной. Получение антител с заданной каталитической специфичностью имеет огромный практический потенциал в биотехнологии и медицине.

В 1989 году Полом С. и соавт. [5] в сыворотке крови больных астмой были впервые обнаружены природные каталитически активные антитела, обладающие высокоселективной пептид-гидролизующей активностью. В 1991;92 гг. в сыворотке крови больных системной красной волчанкой (СКВ) были найдены антитела к ДНК с дезоксирибонуклеазной активностью [6]. Эти антитела проявляют уникальные каталитические свойства, отличные от свойств известных прои эукариотических ДНКзз.

Открытие каталитической активности антител существенно изменило традиционные представления о роли и функции иммуноглобулинов в иммунной системе организма, так как ранее считалось, что антитела не способны проявлять ферментативных функций.

Появление каталитических аутоантител у человека, как правило, связано с аутоиммуной патологией, что дает основание предполагать участие каталитически активных антител в патогенезе заболевания. В последнее время ДНК-гидролизующие антитела были обнаружены в сыворотке крови больных лейкемией, ВИЧ, при лучевой болезни [7], аутоиммунном тиреоидите, полиартрите, рассеянном склерозе [8−10]. Очевидно, что появление абзимов является общей тенденцией ответа иммунной системы организма при тяжелых поражениях.

Системная красная волчанка — заболевание, отличительной особенностью которого является продукция антител к нативной двуцепочечной ДНК, кроме этого в организме образуется широкий спектр антител к различным аутоантигенам: рибонуклеиновым кислотам, нуклеопротеидам, белково-нуклеиновым комплексам, ферментам, участвующим в нуклеиновом обмене, рецепторам клеточных мембран, факторам системы свертывания и т. д. Исчезновение иммунологической толерантности к аутоантигенам определяет огромное разнообразие клинических проявлений СКВ. Для СКВ характерна более высокая, по сравнению с другими аутоиммунными нарушениями, ДНКазная активность поликлональных АТ, опубликованы данные об обнаружении в препаратах поликлональных СКВ-^О протеолитической, гиалуронидазной, пероксидазной активностей [11]. На сегодняшний день крайне мало известно о роли каталитически активных антител в организме, об их участии в патогенезе аутоиммунных заболеваний, о механизмах их генерации. Исследование природных абзимов является актуальным с фундаментальной точки зрения, так как позволяет расширить представления о роли и функции антител в процессах жизнедеятельности человека в норме и при патологиях, а так же может иметь и практическую ценность, поскольку может привести к появлению новых методов диагностики и терапии аутоиммунных заболеваний.

Целью настоящей работы было исследование РНК-гидролизующих антител из сыворотки крови больных СКВ:

— доказательство наличия рибонуклеазной активности у.

— локализации расположения активного центра на молекуле иммуноглобулинов;

— определение субстратной специфичности и кинетических параметров реакции расщепления модельных субстратов;

— сравнение эффективности расщепления дезоксии рибоолигонуклеотидов, сравнение рибонуклеазной активности антител разных классов и РНКаз сыворотки крови человека.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

выводы.

1. Впервые показано, что электрофоретически гомогенные иммуноглобулины классов в и М из сыворотки крови больных системной красной волчанкой (СКВ) обладают РНК-гидролизующей активностью. Препараты поликлональных ДО иМ сохраняют рибонуклеазную и ДНКазную активности в процессе всех хроматографических стадий очистки, обработки кислыми буферами или хаотропными агентами, разрушающими нековалентные взаимодействия белков, а также после электрофореза в денатурирующих условиях.

Нуклеазные центры абзимов расположены на легких цепях антител (АТ), которые активны вне нативных молекул иммуноглобулинов.

2. Проведено сравнение субстратной специфичности, а также кинетических и термодинамических параметров взаимодействияМ-, абзимов, РНКаз сыворотки крови человека и панкреатической рибонуклеазы, А с олигои полирибонуклеотидами. Полученные данные свидетельствуют о существенных различиях этих характеристик в случае исследованных абзимов и рибонуклеаз. В то время, как сродство субстратов к АТ на 1−2 порядка выше, чем к рибонуклезам, отношение величин констант скорости реакции гидролиза РНК-субстратов абзимами к соответствующим величинам (кса0 рибонуклеаз варьирует в пределах 0.1 — 100.

3. Показано, что субстратная специфичность, кинетические параметры 1§-М и, а также диапазон рН-оптимума в реакциях гидролиза субстратов антителами являются индивидуальными характеристиками пациента. При этом, однако, сохраняется ряд общих закономерностей: изменение скорости расщепления в исследуемом ряду РНК-субстратов, влияние ионов однои двухвалентных металлов на нуклеазную активность абзимов и др.

4. Впервые показано, что моноклональные СКВ-иммуноглобулины класса в против В-ДНК различной последовательности способны гидролизовать как ДНК, так и РНК, в то время как антитела к 2-форме ДНК не обладают ни РНКазной, ни ДНКазной активностью. Несмотря на то, что эти абзимы являются АТ против ДНК, они гидролизуют рибо-субстраты на 1−2 порядка эффективнее, чем дезоксирибоолигонуклеотиды. г.

5. Анализ полученных результатов и литературных данных позволяет предположить, что при аутоиммунных заболеваниях могут реализоваться два пути образования ДНКи РНК-гидролизующих АТкак против нуклеиновых-кислот, так и-антиидиотипические (вторичные АТ к активным центрам ферментов), несущие «внутренний образ» активного центра.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

В данной работе впервые показано, чтоДНК-связывающие антитела из сыворотки крови больных СКВ обладают рибонуклеазной активностью. Это заключение сделано на основе следующих результатов:

1. НК-гидролизующие препараты АТ не содержали детектируемых примесей других белков и являлись электрофоретически чистыми согласно окраске коллоидным серебром.

2. Профиль гель-хроматографии АТ в условиях «кислого шока» и профиль каталитической активности совпадают, основные пики профилей соответствуют по времени выходаМ (М.м. 970 кДа) и (М.м. 150 кДа).

3. РНКазная активность абсорбируется из реакционной смеси аффинными сорбентами (иммобилизованными белком в, антикв-, анти-^Ми анти-Ьк-антителами, в зависимости от класса анализируемых АТ).

4. Согласно результатам ренатурации АТ в геле, препараты содержали только один белок с РНКи ДНК-гидролизующий активностью, соответствующими согласно молекулярной массе — 150 кДа (в невосстанавливающих условиях) или Ь-цепи — 20 кДа (в восстанавливающих условиях).

5. РаЬ-фрагменты иМ сохраняют рибонуклеазную активность, причем каталитическая функция ^ ассоциирована в основном с Ь-цепями к-типа.

6. Оптимальные условия (рН, ионная сила, концентрация Ме2+) и кинетические параметры реакции расщепления гОЫ антителами варьируют в широком диапазоне и часто являются индивидуальными характеристиками для каждого препарата СКВ-АТ.

7. АТ отличаются от РНКаз сыворотки крови человека по субстратной специфичности, термостабильности, оптимальным условиям проведения реакции и кинетическим параметрам каталитической реакции.

Следует отметить, что РНК-гидролизующая активность препаратов антител значительно варьировала и была специфичной для каждого донора, в некоторых случаях иммуноглобулины из сыворотки крови больных СКВ не обладали детектируемой рибонуклеазной активностью (из 9 обследованных доноров 2 препарата антител были неактивны в реакции гидролиза НК). Для всех активных препаратов АТ можно было отметить одну отличительную особенность: препаратыМ обладали большей удельной рибонуклеазной активностью по сравнению с одного и того же препарата сыворотки.

Препараты IgM содержали относительно меньшую фракцию высокоаффинных ДНК-связывающих AT по сравнению с IgG. Нуклеазная активность присутствовала в низкоаффинных фракциях как IgG, так и IgM при хроматографии на ДНК-целлюлозе. Этот факт представляет большой интерес, так как на первом этапе иммунного ответа на антиген образуются IgM, кроме того, известно, что V-области генов IgM не подвергаются соматическому мутагенезу и очень близки к фрагментам зародышевого генома, из которого они формируются.

Взаимодействие ДНК-связывающих СКВ-антител с ДНК на сегодняшний день представляет собой одну из хорошо изученных систем «антиген-антитело». Определено более 250 последовательностей анти-ДНК антител, проведено значительное количество иммунохимических и генетических исследований, ведутся работы по кристаллизации комплексов антител и их фрагментов с субстратами, исследуются механизмы потери толерантности и развития аутоиммунного ответа к ДНК.

Некоторые исследователи отмечают важную роль соматических мутаций в образовании аутоантител, например, в гипервариабельном участке тяжелой цепи мышиных моноклональных антител к фосфорилхолину была обнаружена спонтанная замена глутаминовой кислоты на остаток аланина, в результате замены антитела утратили специфичность к фосфорилхолину и приобрели специфичность к ДНК [179]. Согласно другой гипотезе, аутоантитела — это продукты немутировавших генов V-области, экспрессируемых неиммунными лимфоцитами. Мутации и отбор могут привести к переходу от синтеза аутоантител на синтез антител против чужеродного антигена. Ван Эс (van Es J. H) и соавт. проанализировали последовательность элементов VH и VL генов, экспрессирующих моноклональные IgG к оцДНК в линии клеток, полученных от пациентов с активной формой СКВ [180]. Оказалось, что легкая цепь, экспрессированная в этих аутоантителах являеся вариантом соматически мутировавшего зародышевого гена kv325, часто ассоциированного с аутореактивными Ig, продуцируемыми злокачественными В-клетками. Кроме того, DH-сегмент часто обнаруживается в мультиреактивных, низкоаффинных анти-ДНК ауто-IgM пациентов с СКВ, а так же здоровых доноров. По мнению авторов, патогенные анти-ДНК аутоIgG при СКВ могут возникать в результате антиген-управляемой селекции соматических мутаций зародышевых генетических элементов, кодирующих мультиреактивные низкоаффинные ауто-IgM [180]. Аналогичный вывод о роли антиген-управляемой селекции соматических мутаций зародышевых генетических элементов сделан и в некоторых других работах [181 185].

В настоящее время представляется вероятным, что в формировании аутоантител определенную роль играют как мутации в клетках зародышевой линии, так и соматические мутации. Исследователи разделяют анти-ДНК антитела на три качественно различающихся класса [186]. Первый класс — природные аутоантитела, относящиеся к изотипуМ, которые перекрестно реагируют с широким спектром антигенов и кодируются немутировавшими зародышевыми генами. Эти аутоантитела могут присутствовать как у нормальных индивидуумов, так и у пациентов с аутоиммунными заболеваниями. Этот класс антител может продуцироваться при активации поликлональных В-клеток. Второй класс — высокоаффинные узкоспецифичные аутоантитела ДО-изотипа, которые кодируются ^ У-генами, подвергшимися соматическим мутациям. Этот класс антител ассоциирован с аутоиммунными заболеваниями. Третий класс антител представлен высокопецифичными анти-ДНК последовательность которых кодируется немутировавшими генами зародышевой линии.

Можно предположить, что существуют фрагменты зародышевых генов вариабельных участков которые кодируют аминокислотные последовательности, имеющие в своем составе структурные мотивы, способные катализировать нуклеазные реакции. Более низкая нуклеазная активность по сравнению сМ может объясняться мутациями в фрагментах генов, кодирующих связывающие и каталитические участки иммуноглобулинов, при переключении синтеза изотипов. Более высокое сродство к субстрату (антигену), в направлении которого может идти антиген-направляемый отбор мутаций, в данном случае нивелирует наличие потенциальных нуклезных центров, так как эффективный катализ не может происходить в условиях высокоаффинного связывания, характерного для взаимодействий типа антиген-антитело (К$ ~ 10'9 — Ю" 10 М).

Показать весь текст

Список литературы

  1. Jencks W.P. Catalysis in chemistry and enzymology. N.Y.:McGraw-Hill. 1969. P. 289.
  2. PollackS. Т., Jacobs J. F., Schultz P. G. Selective chemical catalysis by an antibody. // Science. 1986. V. 234. P. 1570−1573. .
  3. Tramontano A., Janda K. D., Lerner R. A. Catalytic antibodies.'// Science. 1986. V. 234. P. 1566−1570.
  4. Thomas N.R. Hapten design for the generation of catalytic antibodies. // Appl. Biochem. Biotechn. 1994. V. 47. N. 2/3. P. 345−372.
  5. Paul S., Voile D. J., Beach C.M., Johnson D. R., Dowell M. J., Massey R. JCatalytic hydrolysis of vasoactive intestinal peptide by human autoantibody. // Science. 1989. V. 244. P. 1158−1162.
  6. Shuster A. M., Gololobov G. V., KvashukO. A., BogomolovaA. E., Smirnov I. V., Gabibov A. G. DNA hydrolizing autoantibodies. // Science. 1992. V. 256. P. 665−667.
  7. Gololobov G. V., Mikhalap S. V., Starov A. V., Kolesnikov A. F" Gabibov A. G. DNA-protein complexes. Natural targets for DNA-hydrolyzing antibodies. // Appl. Biochem. Biotechn. 1994. V.47. N.2/3.P. 305−315.
  8. А. Г., Матюшин В. Г., Власов А. В., Забара В. Г., Наумов В. А., Жъеже Р., Бунева В. Н, Невинский Г. А. ДНК- и РНК- гидролизующие антитела из крови больных различными формами вирусного гепатита. // Биохимия. 1997. 62. 1598−1607.
  9. Schultz P. G., Lerner R.A. From molecular diversity to catalyis: Lessons from the immune system. // Science. 1995. V. 269. N. 5232. P. 1835−1842.
  10. Д. В. Каталитические антитела. // Мол.биология. 1997. Т. 32. N. 1. С. 5−15.
  11. Paul S. Catalytic activity of anti-ground state antibodies, antibody subunits, and human autoantibodies. // Appl. Biochem. Bioteehn. 1994. V.47. N. 2/3. P. 241−255.
  12. Mei S., Mody В., Eklund S. Я, Paul S. Vasoactive intestinal peptide hydrolysis by antibody light chains. // J. Biol. Chem. 1991. V. 266. P. 15 571−15 574
  13. Sun M., Gao Q. S., Li L" Paul S. Proteolytic activity of an antibody light chain. // J. Immunol. 1994. V.153.N. 11. P. 5121−5126.
  14. Gao Q. S., Sun M" Tyutyutulkova S., Webster D., Rees A., Tramontano A., Tramontano A., Massey R. J., Paul S. Molecular cloning of proteolytic antibody light chain. // J. Biol. Chem. 1994. V. 269. N. 51. P. 32 389−32 393.
  15. Gao Q. S., Sun M., Rees A. R., Paul S. Site-directed mutagenesis of proteolytic antibody light chain. // J. Mol. Biol. 1995. V. 253. N. 5. P. 658−664.
  16. Paul S., Li L., Kalaga R., Wilkins-Stevens P., Stewens F. J., Solomon A. Natural catalytic antibodies: peptid-hydrolyzing activities of Bence Jones proteins and VL fragment. // J. Biol. Chem. 1995. V. 270. N. 25. P. 15 257−15 261.
  17. Li L., Paul S" Tyutyulkova S., Kazatchkin M. D., Kaven S. Catalytic activity of anti-thyroglobulin ahtibodies. // J. Immunol. 1995. V.154. P.3328−3329.
  18. Pisetsky D. S. The immunologic properties of DNA.// J. Immunol. 1996. V. 156. N. 2. P. 421 423.
  19. Д. В., Макаревич О. К, Лопаева О. А., Бунева В. К, Невинский Г. А., Габибов А. Г. Взаимодействие ДНК гидролизующих аутоантител с низкомолекулярными субстратами. //ДАН. 1994. Т. 337. С. 407−410.
  20. Kcmyshkova Т. G" Semenov D. V., Khlimankov D. Yu., Buneva V. N., Nevinsky G. A. DNA-hydrolyzing activity of the light chain of IgG antibodies from milk of healthy human mothers. // FEBS Lett. 1997. V. 416. P. 23−26.
  21. Кит Ю. Я., Семенов Д. В., Невинский Г. А. Существуют ли каталитически активные антитела у здоровых людей? (Протеинкиназная активность slgA из молока человека). // Молекуляр. биология. 1995. Т.29. Вып. 4. С. 893−905.
  22. Kit Yu. Ya., Semenov D. К, Nevinsky G. A. phosphorylation of different human milk proteins by human catalytic secretory immunoglobulin A. // Biochem. Mol. Biol. Int. 1996. V. 39. N. 3. P. 521−527.
  23. Friboulet A., IzadyarL., Avalle В., Thomas D. Abzyme generation using an anti-idiotypic antibody as the «internal image» of an enzyme active site. // Appl. Biochem. Biotechnol. 1994. V. 47. N. 2−3. P. 229−237.
  25. Puzzetti A., Madaio M. P., Bellese G., Migliorini P. Anti-DNA antibodies bind to DNase I. // J. Exp. Med. 1995. V. 181. P. 1797−1804.
  26. В. С. Нуклеазы. // Москва, Медицина, 1968, С. 72−87.
  27. Sorrentino S., Libonaty М. Structure-function relationships in human ribonucleases: main distinctive features of major RNase types. // FEBS Lett. 1997. V.404. N.l. P. 1−5.
  28. Shein С. H. From housekeeper to microsurgeon: the diagnostic and therapeutic potential of ribonucleases. //Nat. Biotechnol. 1997. V. 15. P. 529−536.
  29. Barry M. A., Eastman A. Identification of deoxyribonuclease II as an endonuclease involved in apoptosis. // Arch. Biochem. Biophys. 1993. V. 300. N. 1. P. 440−445.
  30. Yoshihara K., Ota K., Ide T., Tanaka Y. Anti-Ca, Mg -dependent endonuclease antibody detects specifically a class of chromatin-bound endonuclease.-// Biochem. Biophys. Res. Com. 1997. V. 236. P. 423−426.
  31. Glukhov B. N., Jerusalimasky A.P., Canter V. M., Salganic R. I. Ribonuclease treatment of tickborne encephalitis. // Arch. Neurol. 1976. V. 33. N. 9. P. 598−603.
  32. Shak S., Capon D. J., HellmissR., Marsters S. A., Baker C. L. Recombinant human DNase I reduces the viscosity of cystic fibrosis sputum. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. V.87. N. 23. P. 9188−9192.
  33. Linardou H., Deonarain M. P., Spooner R. .A., Epenetos A. A. Deoxyribonuclease I (DNase I). A novel approach for targeted cancer therapy. // Cell. Biophys. 1994. V.24. N. 25. P. 243−248.
  34. Sierakowska H., Shugar D. Mammalian nucleolytic enzymes.// Progr. Nucleic Acid Res. Mol. Biol. 1977. V. 20. P. 59−130.
  35. Funakoshi A., Tsubota Y., Wakasugi H, Ibayashi H, Takagi Y. Purification and properties of human pancreatic deoxyribonuclease I. // J. Biochem. 1977. V. 82. N. 6. P. 1771−1777.
  36. Love J. D., Hewitt R. R. The relationship between human serum and human pancreatic DNase I. //J. Biol. Chem. 1979. V.254. N. 24. P. 12 588−12 594.
  37. Pergolizzi R., Appierto V., Bosetti A., DeBellis G. L., Rovida E., Biunno I. Cloning of a gene encoding a DNase I-like endonuclease in the human Xq28 region. // Gene. 1996. V. 168. N. 2. P.267−270.
  38. Ito K., Minamiura N., Yamamoto T. Human urine DNase I: immunological identity with human pancreatic DNase I, and enzymic and proteochemical properties of the enzyme. // J. Biochem. 1984. V. 95. N. 5. P. 1399−1406.
  39. Yasuda T., Awazu S., Sato W., Iida R" Tanaka Y., Kishi K. Human genetically polymorphic deoxyribonuclease: purification, characterisation, and multiplicity of urine deoxyribonuclease I. //J. Biochem. 1990. V. 108. N. 3. P. 393−398.
  40. Nadano ?>., Yasuda T., Kishi K. Purification and caracterization of genetically polymorphic deoxyribonuclease 1 from human kidney. // J. Biochem. 1991. V. 110. N. 3. P. 321−323.
  41. Kishi K, Yasuda T" Awazu S., Mizuta K. Genetic polymorfism of human urine deoxyribonuclease I. // Hum. Genet. 1989. V. 81 N. 3. P. 295−297.
  42. Ulmer J. S., HerzkaA., Toy K. J., Baker D. L., Dodfge A. H., Sinicropi D., Shak S., Lazarus R. A. Engineering actin-resistant human DNase I for treatment of cystic fibrosis. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. V. 93. N. 16. P. 8225−8229.
  43. Jones S. J., Worrall A. F, Connolly B. A. Site-directed mutagenesis of the catalytic residues of bovine pancreatic deoxyribonuclease I. // J. Mol. Biol. 1996. V. 264. N. 5. P. 1154−1163.
  44. Doherty A. J., Worall A. F., Connolly B. A. The roles of arginine 41 and tyrosine 76 in the coupling of DNA recognition to phosphodiester bond cleavage by DNase I: a study using site-directed mutagenesis. //J. Mol. Biol. 1995. V. 251. N. 3. P. 366−377.
  45. Liao T. H, Ho H. S., Abe A. Chemical modification of bovine pancreatic deoxyribonuclease with phenilglyoxal the involvement of Arg-9 and Arg-41 in substrate binding. // Biochim. Biophys. Acta. 1991. V. 1079. N. 3. P. 335−342.
  46. Moore S. Pancreatic DNase. // In: The Enzymes (Boyer P. D., ed) New York, Academic Press. 1981. V. 14. P. 281−296.
  47. Suck D., Lahm A., Oefner C. Structure refined to 2A of nicked DNA octanucleotide complex with DNase I. //Nature. 1988. V. 332. N. 6163. P. 464−468.
  48. Suck D., Oejher C. Structure of DNase I at 2.0 A resolution suggest a mechanism for binding to and cutting DNA. //Nature. 1986. V.321. N. 6070. P.620−625.
  49. Worrall A. F., Connolly B. A. The chemical synthesis of gene coding for bovine pancreatic DNase I and its cloning and expression in Escherichia coli. II J. Biol. Chem. 1990. V. 265. N. 35. P. 21 889−21 895.
  50. Suck D. DNA recognition by DNase I. // J. Mol. Recognit. 1994. V. 7. N. 2. P. 65−70.
  51. Zeng Z, Par melee D., Ну aw H., Coleman T. A., Su K, Zhang J., Gentz R., Ruben S., Rosen C., Li К Cloning and characterisation of a novel human DNase. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1997. V. 231. N. 2. P.499−504.
  52. Rodriguez A. M, Rodin D., Nomura H., Morton С. С., Weremowicz S., Schneider M. C. Identification, localisation, and expression of two novel human genes similar to deoxyribonuclease I. // Genomics. 1997. V. 42. N.'3. P.507−513.
  53. Parrish J. F., Ciccodicola A., Wehhert M" Cox G. F., Chen E., Nelson D. L. A muscle-specific DNase I like gene in human Xq28. // Hum. Mol. Genet. 1995 V. 4. N. 9. P. 1557−1564.
  54. Pergolizzi R., Appierto V., Bosetti A., DeBellis G. L., Rovida E., Biunno I. Cloning of a gene encoding a DNase I-like endonuclease in the human Xq28 region. // Gene. 1996. V. 168. N. 2. P.267−270.
  55. Murai K, Yamanaka M" Akagi K" Anai M. Purification and characterisation of deoxyribonuclease II from human urine. // J. Biochem. 1980. V. 87. N. 4. P.1097−1103.
  56. Gottlieb R. A., Giesing H.A., Engler R.L., Babior KM. The acid deoxyribonuclease of neutrophils: a possible participant in apoptosis-associated genome destruction. // Blood. 1995. V. 86. N. 6. P. 2414−2418.
  57. Yasuda Т., Takeshita H, Iida R., Nakajima Т., Hosomi O., Nakashima Y, Kishi K. Molecular cloning of the cDNA encoding human deoxyribonuclease II. // J. Biol. Chem. 1998. V. 273. N. 5: P. 1610−2616.
  58. Beintema J. J., Wietzes P., Weickman J. L., Glitz D. G. Amino acid sequence of human pancreatic ribonuclease. // Anal. Biochem. 1984. V. 136. N. 1. P. 48−64.
  59. Beintema J. J., Hofsteenge J., Iwama M., Morita Т., Ohgi К, Irie M., Sugiyama R. H" Schieven G. L., Dekker C. A., Glitz D. G. Amino acid sequence of the nonsecretory ribonuclease of human urine. // Biochemistry. 1988. V. 27. N. 12. P. 4530−4538.
  60. E. Ю., Морозов H. Ю., Гаврюшов С. А., Ильин В. А., Байнтема Дж., Влодавер А., Карпейский М. Я. Структурно-функциональный анализ рибонуклеазы, А и родственных белков. //Мол. биология. 1993. Т. 27. вып. 2. С. 1315−1334.Г
  61. Hamann K. J., Barker R. L., Loegering D. A., Pease L.R., Gleich G. J. Sequence of human eosinophil-derived neurotoxin cDNA: identity of deduced amino acid sequence with human non-secretory ribonucleases. // Gene. 1989. V.83. P. 161−167. .——
  62. Schuller C, Nijssen H. M" Kok R., Beintema J. J. Evolution of nucleic acids coding for ribonucleases: the mRNA sequence of mouse pancreatic ribonuclease. // Mol. Biol. Evol. 1990. V. 7. N. 1. P. 29−44.
  63. Sorrentino S., Glitz D. G. Ribonuclease activity and substrate preference of human eosinophil cationic protein (ECP). // FEBS Lett. 1991. V.288. N. l/2. P. 23−26.
  64. Sorrentino S., Libonaty M. Human pancreatic-type and nonpancreatic-type ribonucleases: a direct side-by -side comparison of their catalytic properties. // Biochemistry. 1994. V.312. P. 340−348.
  65. Rosenberg H. F., Dyer K. D. Molecular cloning and characterisation of novel human ribonuclease (RNase k6): increasing diversity in the enlarging ribonuclease gene family. // Nucleic Acids Res. 1996. V. 24. N. 18. P. 3507−3513.
  66. Weickman J. L., Elson M, Glitz D. J. Purification and characterisation of human pancreatic ribonuclease. // Biochemistry. 1981. V. 20. N. 5. P. 1272−1278.
  67. Iwama M., Kunihiro M., Ohgi K., Irie M. Purification and properties of human urine ribonucleases.// J. Biochem. 1981. V. 89. N. 4. P. 1005−1016.
  68. Cranston J. W., Perini F., Crisp E. R., Hixson C. V. Purification and properties of ribonucleases from human urine. // Biochim. Biophys. Acta 1980. V. 616. P. 239−258.
  69. De Prisco R., Sorrentino S., Leone E.,. A ribonuclease from human seminal plasma active on double-stranded RNA. // Biochim. Biophys. Acta. 1984. V. 788. N. 3. P. 356−363.
  70. Sorrentino S., De Prisco R., Libonati M. Human seminal ribonuclease. Immunological quantitation of cross-reactive enzymes in serum, urine and seminal plasma. // Biochim Biophys Acta. 1989. V. 998. N. l.P. 97−101. ~ !
  71. Mizuta K, Awazu S., Yasuda T., Kishi K. Purification arid characterisation of three ribonucleases from human kidney: comparison with urine ribonucleases.// Arch. Biochem. Biophys. 1990. V.281. N.l. P.144−151.
  72. Yasuda T., NadanoD., Takeshita H., Kishi K. Two distinct secretory ribonucleases from human cerebrum: purification, characterisation and relationships to other ribonucleases. // Biochem J. 1993. V. 296. P. 617−625.
  73. Dalaly B. K, Eitenmiller R. R" Friend B. A., Shahani K M. Human milk ribonuclease. // Biochim. Biophys. Acta. 1980. V. 615. N. 2. P. 381−391.
  74. Akagi K, Yamanaka M., Murai K., Omae T. Purification and properties of acid ribonuclease from human serum and leucocytes. // Cancer. Res. 1978. V. 38. P. 2163−2167.
  75. Blank A., Dekker C. A. Ribonuclease of human serum, urine, cerebrospinal fluid, and leukocytes. Activity staining following electrophoresis in sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gels. // Biochemistry. 1981. V. 20. N. 8. P. 2261−2267.
  76. Seno M., Futami J., Tsushima Y., Acutagawa K, Kozaka M., Tada K, Yamada H. Molecular cloning and expression of human ribonuclease 1 cDNA. // Biochim. Biophys. Acta. 1995. V. 1261. N. 3. P. 424−426.
  77. BeintemaJ. J., Blank A., Schieven G. L., Dekker C. A., Sorrentino S., Libonati M. Differences in glycosilation pattern of human secretory ribonucleases. // Biochem. J. 1988. V. 255. N. 2. P. 501−505.
  78. Sorrentino S., Tucker G. K, Glitz D. G. Purification and characterisation of ribonuclease from human liver. //J. Biol. Chem. 1988. V. 263. N. 31. P. 16 125−16 131.
  79. Yasuda T., Mizuta K, Sato W., Kishi K. Purification and characterisation of ribonuclease from human spleen. Immunological and enzymological comparison with nonsecretory ribonuclease from human urine.// Eur. J. Biochem. 1990. V. 191. P. 523−529.
  80. Shapiro R., Vallee B. L. Interaction of human ribonuclease with placental ribonuclease inhibitor. // Biochemistry. 1991. V. 30. N. 8.~P. 2246−2255. ' >
  81. Rosenberg H. F., Tenen D. G., Ackerman S. J. Molecular cloning of the human eosinophil-derived neurotoxin: a member of the ribonuclease gene family. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. V. 86. P. 4460−4464.
  82. Barcer R. L" Loegering D. A, Ten R. M., Hamann K. J., Pease R. L., Gleich G.J. Eosinophil cationic protein cDNA. Comparison with other toxic proteins and ribonucleases. // J. Immunol. 1989. V. 143. N. 3. P. 952−955.
  83. Rosenberg H. F. Recombinant human eosinophil cationic protein. Ribonuclease activities not essential for cytotoxicity. // J. Biol. Chem. 1995. V. 270. P. 7876−7881.
  84. Young J. D.-E, Peterson C. G. B., Venge P., Cohn Z. A. Mechanism of membrane damage mediated by human eosinophil cationic protein. //Nature. 1986. V. 321. N. 6070. P. 613−616.
  85. Shapiro R., Fett J. W., Strydom D. J., Vallee D. L. Isolation and characterisation of human colon carcinoma-secreted enzyme with pancreatic ribonuclease-like activity. // Biochemistry. 1986. V. 25. P. 7255−7264.
  86. Rosenberg H. F., Dyer K. D. Human ribonuclease 4 (RNase 4): coding sequence, chromosomal localisation and identificationof two distinct transcripts in human somatic tissues. // Nucleic Acids Res. 1995. V. 23. n. 21. P. 4290−4295.
  87. Zhou H. M., Strydom D. J. The amino acid sequence of human ribonuclease 4, a highly conserved ribonuclease that cleaves specifically on the 3' side of uridine.// Eur. J. Biochem. 1993. V. 217. N. l.P. 401−410.r
  88. Hofsteenge J., Matthies R., Stone S. R. Primary structure of a ribonuclease from porcine liver, a new member of the ribonuclease superfamily. // Biochemistry. 1989. V. 28. N. 25. P. 98 069 813.
  89. FettJ. W., Strydom D. J., Lobb R. R., Alderman E. M" Bethune J. M., Riordan J. F, Vallee B. L. Isolation and characterisation of angiogenin, an angiogenic protein from human carcinoma cells. // Biochemistry. 1985. V. 24. P. 5480^5486.
  90. Shapiro R., Strydom D. J., Olson K. A., Vallee B. L. Isolation jf angiogenin from normal human plasma. // Biochemistry. 1987. V. 26. P. 5141−5146.
  91. H. П., Стефанович Л. E, Ангиогенин и механизм ангиогенеза. Новосибирск. Наука. 1997.
  92. S. К., RybakS. М., Davey R. Т., Youle R. J., Ackerman Е. J. Angiogenin is cytotoxic, tRNA-specific ribonuclease in the RNase A superfamily. // J. Biol. Chem. 1992. V. 267. N. 30. P. 21 982−21 986.
  93. Moroianu J., Riordan J. F. Nuclear translocation of angiogenin in proliferating endothelial cells is essential to its angiogenic activity. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1994. V. 91. N. 5. P. 1677−1681.
  94. Rosenberg H. F., Dyer K. D. Molecular cloning and characterisation of a novel human ribonuclease (RNase k6): increasing diversity in the enlarging ribonuclease gene family. // Nucleic Acids Res. 1996. V. 24. N. 18. P. 3507−3513.
  95. Richards F. M" Wickoff H. N. Bovine pancreatic ribonuclease. // The Ezymes. 1971. V. 4. P. 647−806.
  96. Llorens R., Arus C., Pares X., Cuchillo С. M. Chemical and computer graphics studies on the topography of ribonuclease A active site cleft. A model of the enzyme-pentanucleotide substrate complex. // Protein Eng. 1989. V. 2. N. 6. P. 417−429.
  97. Currant T. P., Shapiro R., Riordan J. F. Alteration of the enzymic specificity of human angiogenin by site-directed mutagenesis. // Biochemistry. 1993. V.33. P.2307−2313.
  98. G. ?>., Gilliland T. Alteration of the enzymic specificity of the ribonuclease superfamily.// Biochem, J. 1995. V.310. P.1317−1319.
  99. Mosimann S. C., Newton D. L., Youle R. J., James M. N. G. X-ray cristallographic structure of recombinant eosinophil-derived neurotoxin at 1. 83 A resolution. // J. Mol. Biol. 1996. V. 260. P. 540−552.mtf '
  100. Yakovlev G. I., Sorrentind S., Moiseyev G. P., Libonati M. Double-stranded RNA: the variables controlling its degradation by RNases. //Nucleic Acids Symp. Ser. 1995. V.33. P. 106−108.
  101. Pares X., Nogues M. V, de Llorens R., Cuchillo C. M. Structure and function of ribonuclease A binding subsites. // Essays. Biochem. 1991. V. 26. P. 89−103.
  102. Jermann T. M., Opitz J. G., Stackhous J., Benner S. A. Reconstructing the evolutionary history //Nature. 1995. V. 374.N. 6517. P.57−59.
  103. Acharya K. R., Shapiro R., Allen S. C., Riordan J. F" Vallee B. L. Crystal structure of human angiogenin reveals the structural basis for its functional divergence from ribonuclease. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. V. 91 P. 2915−2919.
  104. Russo N., Shapiro R., Acharya K. R., Riordan J. F., Vallee B. L. Role of glutamine-117 in the ribonucleolytic activity of human angiogenin. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. V. 91. P. 1920−2924.
  105. Harper J. W., Auld D. S., Riordan J. F, Vallee B. L. Enzymatically active angiogenin, ribonuclease A hybrids formed by peptide interchange. // Biochemistry. 1988. V. 27. P. 219 226.
  106. Devi A. S., Das M. R., Pandit M. W. Lactoferrin conteins structural motifs of ribonuclease. // Biochim. Biophys. Acta 1994. V.1205. P. 275−281.
  107. Kobe B" Deisenhofer J. A structural basis of the interactions between leucine-rich repeats and protein ligands. //Nature. 1995. V. 374. P. 183−186.
  108. Aisen P., Listowsky I. Iron transport and storage protein. // Ann. Rev. Biochem. 1980. V. 49. P. 357−393.
  109. Moguilevsky N., Retequi L., Mason P. Comparison of human lactoferrins from milk and human neutrophilic leukocytes. Relative molecular mass, isoelectric point, iron-binding properties and uptake by liver. // Biochem. J. 1985. V.229. P. 353−359.
  110. Bellamy W., Takase M., Yamauchi K., Wakabayashi H., Kawase K., Tomita M. Biochim. Biophys. Acta. 1992. V. 1121. P. 130−136.
  111. Zou S., Magura С. E., Hurley W. L. Heparin-binding properties of lactoferrin and lysozime. // Сотр. Biochem. Physiol. B. 1992. V. 103. P. 889−895.
  112. Zhao X.-Y., Hut cherts T. W. Proposed mechanisms for the involvment of lactoferrin in the hydrolysis of nucleic acids. // Adv. Exp. Med. Biol. 1994. V. 357. P. 271−278. <
  113. Watanabe Т., Nagura H., Watanabe K., Brown W. B. The binding of human milk lactoferrin to immunoglobulin A. // FEBS Letters. 1984. V. 168. P. 203−207.
  114. Boxer L. A., Haak R. A., Yang H. H, Wolach J. В., Whitcomb J. A., Butterick C. J., Baehner R. L. Membrane-bound lactoferrin alters the surface properties of polymorphonuclear leukocytes. // J. Clin. Invest. 1982. V. 127. P.1211−1216.
  115. Hammarstrom M. L., Mincheva-Nilson L., Hammarstrom S. Functional lactoferrin receptors on activated human lymphocytes. // Adv. Exp. Med. Biol. 1995. V. 371. P. 47−53.
  116. He J., Furmansky P. Sequence specificity and transcriptional activation in the binding of lactoferrin to DNA. //Nature. 1995. V.363. P. 721−724.
  117. Ramaswamy H, Swamy Ch. V. В., Das M.R. Purification and characterisation of a high molecular weight ribonuclease from human milk. // J. Biol. Chem. 1993 V. 268. N. 6. P. 4181−4187.
  118. Devi A. S., Das M. R., Pandit M. W. Lactoferrin contains structural motifs of ribonuclease. //' Biochim. Biophys. Acta. 1994. V. 1205. P. 275−281.
  119. В. H., Щербаков Д. Ю., Рихтер В. А., Рабинов И. В. Способ получения меченных тритием органических соединений. А. С. N. 631 943. 1990.
  120. В. Ф., Иванова Е. М., Романенко В. П. Синтез олигонуклеотидов в хлороформе триэфирным методом. // Биоорг. химия. 1985. Т. 11. N.6. С. 815−820.
  121. А. Г., Горн В. В., Зенкова М. А., Комарова Н. И., Репкова М. И. Автоматический Н-фосфонатный синтез олигорибонуклеотидов с использованием 2'-тетрагидропиранильной группы. // Биоорг. Хим. 1990. Т. 16.-С.941−950. «-----
  122. А. В., Ямковой В. И. Препаративное получение гомоолигорибонуклеотидов, терминированных 5'-фосфатом. // Ферменты микроорганизмов и деградация биополимеров. М.: ВНИИСЭТИ. 1990. С. 199−206.
  123. Handbook of Biochemistry and Molecular Biology. Nucleic Acides. V. 1. N. Y.: CRC Press, 1975. P. 589.
  124. Иммунологические методы. Под ред. Фриммеля. М.: Медицина. 1987. С. 406−407.
  125. Р., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. Справочник биохимика. М.: Мир. 1991. С. 464−465.
  126. Layne Е. Spectrophotometry and turbidimetric method for measuring proteins. // Method Enzymol. 1957. V. III. P. 447−454.
  127. Laemmli U. K. Cleavage of structural proteins during the assembly of head of bacteriophage T4. // Nature. 1970. V.227. P.680−685.
  128. Merril C.R., Goldman, D., Van Keuren, M. L. // Electrophiresis. 1982. V. 33. P. 17−26.
  129. Suelter С. H. A practical guide to enzymology. // Biochemistry: A series of monographs. 1985. P. 164−166.
  130. Lee J. S., Dombroski D. S., Mosmann T. R. Specificity of autoimmune monoclonal Fab fragments binding to single-stranded deoxyribonucleic acid. // Biochemistry. 1982. V. 21. N. 20. P. 4940−4945.
  131. Т., Фрич Э., Сэмбрук Д. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование. М.: Мир, 1984. С. 132.
  132. Г. Е. Разработка способов получения гомополи- и олиго- дезоксинуклеотидов с использованием иммобилизованных ферментов.: Диссертация на соискание ученой степени к. б. н. Новосибирск. 1990.
  133. Т. П Основы ферментативной кинетики. М.: Мир. 1990. С. 131−135.
  134. Rosental A. L., Lacks S. A. Nuclease detection in SDS-polyacrylamide gelelectrophoresis. // Anal. Biochem. 1977. V. 80. N. 1. P. 76−90.
  135. Sasso E. H., Silverman G. J., Mannik M. Human IgM molecules that bind staphylococcal protein A contain VHIIIH chains. // J. Immunol. 1989. V. 142. N. 8. P. 2778−2783.
  136. Hillson J. L., Karr N. S., Oppliger 1. R., Mannik M, Sasso E. H. The structural basis of germline-encoded VH3 immunoglobulin binding to staphylococcal protein A. // J. Exp. Med. 1993. V. 178. N. 1. P. 331−336.
  137. Hakoda M., Hayashimoto S., Yamanaka H, Terai C., Kamaiani N., Kashiwazaki S. Molecular basis for the interaction between human IgM and staphylococcal protein A. // Clin. Immunol. Immunopathol. 1994. V. 72. N. 3. P. 394−401. i
  138. О. Г. Физико-химические особенности IgA, IgM и IgG сыворотки крови здоровых людей. // Иммунология 1991. N.l. С.21−23.
  139. А.В., Андриевская О. А., Канъшкова Т. Г., Барановский А. Г., Наумов В. А., Бреусов А. А., Жъеже Р., Бунева В.Н, Невинский Г. А. РНК-гидролизующие антитела из крови больных системной красной волчанкой. //Биохимия. 1997. Т. 62. С. 556−562.
  140. Breslow R., Huang D.-L., Anslyn E. On the mechanism of action of ribonucleases: dinucleotid cleavage catalysed by imidazole and Zn2+. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1989. V. 86. P. 17 461 750.
  141. Irie M., Mikami F., Monma K, Ohgi K, Watanabe H, Yamaguchi R., Nagase H. Kinetic studies on the cleavage of oligouridilic acids and poly U by bovine pancreatic ribonuclease A. // J. Biochem. 1984. V. 96. P. 89−96.
  142. Абрамова 3. В., Дудкин С. М., Карабашян Л. В. Кинетическое изучение деполимеризации полиадениловой кислоты, катализируемой рибоуклеазой А. // Молекуляр. биол. 1974. Т. 8. Вып. 4. С. 501−506.
  143. В. Принципы структурной организации нуклеиновых кислот. М.: Мир. 1987. С. 324.
  144. С. W., Houck J. С. The kinetics of ribonucleic acid depolimerization by ribonuclease. // Biochim. Biophys. Acta. 1963. V. 89. N. 1. P. 90−94.
  145. Rosental A. L., Lacks S. A. Nuclease detection in SDS-poIyacrylamicte gelelectrophoresis. 11 Anal. Biochem. 1977. V. 80. N. 1. P. 76−90.
  146. E. Ю. Взаимодействие олигонуклеотидов с белками сыворотки крови. Изучение условий образования и свойств олигонуклеотид-белковых комплексов .: Диссертация на соискание ученой степени к. б. н. Новосибирск. 1994.
  147. Иммуногенетика человека. М.: Мир, 1994. Т. 1.
  148. Taki S., Hirose S., Kinoshita K., Nishimura H., Shimamura Т., Hamuro J., Shirai T. Somatically mutated IgG anti-DNA antibody clonally related to germ-line encoded IgM anti-DNA antibody. // Eur. J. Immunol. 1992. V. 22. N. 4. P. 987−992.
  149. Demaison C, Ravirajan C. T., Isenberg D. A., Zouali M. Analysis of variable region genes encoding anti-Sm and anti-cardiolipin antibodies from a systemic lupus erythematosus patient.
  150. Immunology. 1995. V. 86. N. 3- P. 487−494. ------------------
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!