Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Каталитические свойства глутамин (аспарагин) азы из Рseudomonas Aurantiаca BKM-548

Диссертация: Каталитические свойства глутамин (аспарагин) азы из Рseudomonas Aurantiаca BKM-548
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Глутамин (аспарагин)аза (ьглутамин-(ьаспарагин) амидо-гидролаза, КФ 3.5.1.38)?TJ является перспективным антиопухолевым ферментом и представляет большой интерес для клинической онкологии. Предварительная положительная оценка пригодности фермента для клинических испытаний предполагает знание особенностей его каталитического действия. Изучение глутамин (аспарагин)азы имеет поэтому не только важное… Читать ещё >

Каталитические свойства глутамин (аспарагин) азы из Рseudomonas Aurantiаca BKM-548 (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Список сокращений и обозначений
  • ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
  • ГЛАВА I. Общие сведения о глутамин (аспарагин) азах
    • 1. 1. Методы выделения и очистки глутамин-(аспарагин)аз.II
    • 1. 2. Влияние физико-химических факторов на активность и стабильность дезамидаз
  • ГЛАВА 2. Исследования структуры дезамидаз
    • 2. 1. Молекулярная масса и субъединичное строение
    • 2. 2. Аминокислотный состав и первичная структура
    • 2. 3. функциональные группы активного центра и их модификация
  • ГЛАВА 3. Субстратная специфичность и ингибиторы глутамин (аспарагин)аз
    • 3. 1. Реакции, катализируемые глутамин (ас-парагин)азами
    • 3. 2. Константы Михаэлиса
    • 3. 3. Механизм действия
    • 3. 4. Аффинные метки
    • 3. 5. Обратимые ингибиторы
  • МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
  • ГЛАВА 4. Соединения, использованные в работе
    • 4. 1. Реактивы и их очистка

    4.2. Очистка глутамин (аспарагин) азы. а) Источник выделения фермента. б) Культивирование микроорганизма в) Приготовление ацетонового порошка г) Выделение фермента. д) Доказательство гомогенности фермента с помощью диск-электрофореза.

    ГЛАВА 5. Методы определения белка и активности фермента

    5.1. Определение белка

    5.2. Определение активности с помощью реактива Несслера.

    5.3. Определение активности с помощью глутаматдегидрогеназы.

    5.4. Определение активности в реакциях гидролиза и синтеза гидроксаматов дикарбоновых аминокислот

    ГЛАВА 6. Исследование каталитических свойств глутамин (аспарагин)азы

    6.1. Субстратная специфичность.

    6.2. Влияние концентрации субстратов на скорость реакций гидролиза и гидро-ксиламинолиза.

    6.3. Влияние рН и температуры на активность и стабильность фермента

    6.4. Действие Ь-глутамата на процесс тепловой инактивации фермента

    6.5. Влияние катионов металлов и метаболитов на ферментативную активность.

    6.6. Ингибирование фермента дикарбоновыми аминокислотами.

    6.7. Кинетика инактивации глутамин (аспара-гин)азы под действием ДОН и азасерина.

    6.8. Влияние рН и температуры на инактивацию фермента под действием

    ДОН яр

    6.9. Влияние лигандов на ингибирование фермента ДОН.

    РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

    ГЛАВА 7. Исследование оптимальных условий функционирования глутамин (аспарагин)азы

    7.1. Влияние рН и температуры на активность и стабильность глутамин (аспарагин)азы ^ gg

    7.2. Регуляция активности глутамин (аспарагин) азы .QQ а) Влияние метаболитов на активность фермента. б) Влияние катионов металлов на активность фермента. gj

    ГЛАВА 8. Изучение взаимодействия фермента с эффекторами в условиях термоинактивации

    8.1. Кинетика инактивации фермента при

    50° в присутствии ь -глутамата

    8.2. Влияние структуры эффекторов на тепловую стабильность фермента. .. юо

    ГЛАВА 9. Субстратная специфичность глутамин (аспарагин) азы

    9.1. Реакции гидролиза. Определение для ь-глутамина и l -аспарагина

    9.2. Трансферазные реакции.

    9.3. Влияние рН на гидролиз и синтез гидроксамовых кислот

    9.4. Зависимость скорости трансферазной реакции от концентрации субстратов

    ГЛАВА 10. Исследование каталитических свойств глутамин (аспарагин)азы методами ингибиторного анализа

    10.1. Влияние аналогов субстратов и продуктов на ферментативную активность.

    10.2. Определение кинетики процесса ингибирования фермента ДОН и азасерином.

    10.3. Изучение взаимодействия фермента с L-аспартатом в условиях инактивации ДОН.

    10.4. Влияние структуры аналогов субстратов на инактивацию фермента под действием ДОН.

    10.5. Влияние температуры и рН на ингибирование фермента ДОН

    10.6. Влияние органических кислот и их аналогов на взаимодействие фермента с ДОН.

    10.7. Стабилизация фермента от инактивации при низких значениях рН

    ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

    ВЫВОДЫ.

Данная работа является частью исследования структуры и функций антиопухолевых ферментов, проводимого по заданию Госкомитета СССР по науке и технике и имеет номер государственной регистрации 01.830 062 362.

Глутамин (аспарагин)аза (ьглутамин-(ьаспарагин) амидо-гидролаза, КФ 3.5.1.38)?TJ является перспективным антиопухолевым ферментом и представляет большой интерес для клинической онкологии. Предварительная положительная оценка пригодности фермента для клинических испытаний предполагает знание особенностей его каталитического действия. Изучение глутамин (аспарагин)азы имеет поэтому не только важное теоретическое значение с точки зрения зависимости между структурой и функцией, а также с точки зрения эволюционной биохимии микроорганизмов, животных и растений, но и несомненное прикладное назначение.

Целью настоящей работы было изучение особенностей каталитического действия глутамин (аспарагин)азы, выделенной из отечественного продуцента Ps. aurantiaea ВКМ-548.

Поставленная цель определила следующие основные задачи:

1. Определение оптимальных условий функционирования фермента.

2. Исследование регуляции активности ферментапоиск специфических активаторов и ингибиторов.

3. Изучение условий стабилизации фермента при тепловой инактивации.

4. Изучение субстратной специфичности фермента.

В качестве объекта исследования использовали гомогенный препарат глутамин (аспарагин)азы, полученный по разработанному ранее в лаборатории методу из Ps. aurantiaca ВКМ-548 /" 34,357.

Научная новизна работы заключается в выяснении основных каталитических свойств глутамин (аспарагин)азы в соответствии с поставленными задачами, в том числе условий стабилизации и особенностей взаимодействия фермента с эффекторами. В работе приведены экспериментальные доказательства того, что ДОН и азасерин являются аффинными ингибиторами глутамин (аспарагин)азы. Установлено, что фермент удовлетворяет основным требованиям первичного отбора ферментов, пригодных для испытания на антиопухолевую активность: проявляет высокую каталитическую активность и стабильность при физиологических значениях рН, имеет низкие значения кт для ь-глу-тамина и lаспарагина и относительно невысокое сродство к продуктам реакции. К особенностям действия фермента относятся высокий температурный оптимум (55−70°), отсутствие активации ионами металлов и метаболитами цикла Кребса. Показано, что повышение термостабильности фермента, вызванное рядом аминокислот, обусловлено связыванием заряженныхаминои <хкарбоксильных групп эффекторов с молекулой фермента. Обнаружена способность глутамин (аспарагин) азы в кислой области рН связывать дикарбоновые оксикисло-ты (цитрат и dlмалат) — получены доказательства, что dl-ма-лат присоединяется к активному центру фермента.

Установление этих важнейших свойств фермента служит основой для дальнейшего изучения структуры и механизма действия глутамин-(аспарагин)азы. Выяснение механизмов регуляции активности глутамин (аспарагин) азы в присутствии субстратов, аналогов субстратов и продуктов реакции несомненно будет способствовать решению проблемы клинического применения фермента в терапии опухолей.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ВЫВОДЫ.

1. Установлено, что глутамин (аспарагин)аза из Pseudomonas aurantiaca ВКМ-548 проявляет максимальную активность и стабильность в области физиологических значений рНтемпературный оптимум действия фермента 55−70°.

2. Показано, что для субстратной специфичности фермента характерны следующие черты:

— фермент с высокой скоростью катализирует гидролиз ьглута-мина (к^а 5,3-Ю" 6 М) и L-аспарагина (Кт= 5,7-Ю" 6 М) и с несколько меньшей скоростью гидролиз их D-изомеров;

— субстратами фермента являются Lглутамил--моногидрокса-мовая кислота и ь-аспартилf>-гидроксамовая кислота;

— фермент с низкими скоростями катализирует гидролиз ь-^-глутамил-п-нитроанилида и 6-диазо-5-оксоь-норлейцина;

— фермент не катализирует гидролиз ряда Nкарбобензоксии n-бутилоксикарбонильных производных ь-глутамина и ь-аспарагина, а также N-ацетил-ь-глутамина;

— в присутствии гидроксиламина фермент функционирует как трансферазасубстратами трансферазной реакции являются дикарбо-новые аминокислоты и их амиды.

3. Испытано стабилизирующее действие дикарбоновых аминокислот и их аналогов на активность фермента в условиях тепловой инактивации. Показано, что структурной особенностью эффекторов, обуславливающей защитный эффект, является одновременное присутствие в молекуле o^-аминои оС-карбоксильной групп.

4. Определены параметры и показан конкурентный характер ингибирования глутамин (аспарагин)азы продуктами ферментативной реакции:

L-глутаматом и L-аспартатом.

5. Изучена кинетика и определены параметры необратимого ингибирования фермента 6-диазо-5-оксо-L-норлейцином и азасерином. Установлено, что взаимодействие фермента с ингибиторами цротека-ет через стадию обратимого связывания. Защитный эффект субстрата и продуктов, высокая степень сродства к ингибитору указывают на модификацию групп в районе активного центра.

6. Показано, что дикарбоновые оксикислоты, а тленно цитрат и dl-малат, эффективно защищают глутамин (аспарагин)азу от инактивации 6-диазо-5-оксо-ь-норлейцином цри рН 5,6. Защита dlмалат ом осуществляется по конкурентному типу.

7. Установлено, что фермент удовлетворяет первичным требованиям, цредъявляемым к лекарственным ферментным? препаратам и может быть рекомендован для испытаний на антиопухолевую активность. *.

Выражаю глубокую благодарность за постоянную помощь, оказанную мне цри выполнении и написании данной работы, своему научному руководителю — заведующему кафедрой биохимии медицинского факультета Университета дружбы народов им. П. Лумумбы, доктору медицинских наук, академику АМН СССР Т. Т. Березову и старшему научному сотруднику, кандидату химических наук З. И. Лебедевой.

Показать весь текст

Список литературы

  1. А.Х., Еременко В. В. Глютаминаза и изоглюта-миназа saccharamyces cerevisiae meyen KMY381. — Биохимия, 1967, т. 32, гё 2, с. 363−376.
  2. Т.Л., Генералова Т. Г., Полоцкая И. А., Полоцкий М. А., Свядищ И. Ф. Кинетические параметры глутаминазы пекарских дрожжей. Прикл. биохимия и микробиол., 1982, т. 18, № 4, с. 525−528.
  3. Т.Л., Карпиленко Г. П., Полоцкая М. В., Голубе-ва Л.И., Свядищ И. Ф. Выделение, очистка и некоторые кинетические свойства глутаминазы пекарских дрожжей. Прикл. биохимия и микробиология, 1984, т. 20, .1 3, с. 355−358.
  4. Т.Т. Ферментная терапия опухолей. Вестник АМН СССР, 1984, JG.8, с. 11−24.
  5. Т.Т., Занин В. А., Смирнова Й. П. Штамм Pseu-domonas aurantiaca ВКМВ-548 продуцент фермента глутаминазы-аспарагиназы. Авт. свидетельство В 739 096, 17.II.80 г.
  6. Л.Я., Шпрунка И. К., Бендерс Ю. А., Жагат Р. А. Химическая модификация ь -аспарагиназы е. coli, П. Тринитро-фенилирование. Биоорган, химия, 1980, т. 6, № 10, с. 15 491 553.
  7. Р.К., Вина И. А., Жагат Р. А. Химическая модификация остатков триптофана ь -аспарагиназы E.coli л -бром-сукцинимидов. Химия природа, соедин., 1975, № 2, с. 228−231.
  8. Р.К., Вина И. А., Жагат Р. А. Исследование каталитической роли карбоксильных групп L -аспарагиназы. Изв. АН Латв. ССР, Сер. хим., 1976, № I, с. 92−109.
  9. Р.К., Вина И. А., Кирстукас И. П., Милман И. А., Гейман И. И., Жагат Р. А. Химическая модификация ь-аспараги-назы I. Нитро- и аминотирозиласпарагиназы Е. coli. Биоорган. химия, 1978, т. 4, J& 9, с. I264-I27I.
  10. Вша И. А., Юшке виц Э. А, Блума Р. К., Жагат Р. А. Частичная модель пространственной структуры активного центра ъ-аспарагиназы. Тезисы Ш Всесоюз.симп. «Структура и функции активных центров ферментов» Путцино на Оке, 1976, с!3.
  11. .Д. Дезамидазы ь-глутамина и i-аспарагина из Pseudomonas и их противоопухолевое действие.
  12. Pseudomonas aurantiaea ИБФМ BrI4. Pseudomonas boreopolis. 526. Дис. канд. биол. наук — Москва, 1978.
  13. .Д., Чигалейчкк А. Г., Пириева Д. А., Ушаков В. М., Рылкин С.С. Образование дезамидаз L-аспарагина и
  14. Ь-глутамина из Pseudomonas aurantiaea I БФМ B-I4. Микробиология, 1976, т. 45, }Ь I, с. 23−27.
  15. Ю.В., Чуплыгина Е. Г., Клементьева Т. А. Иммобилизация Ъ-аспарагиназы из Citrobacter в полиакриламидном геле. Вопр. мед. химии, 1981, т. 27, № 4, с. 534−537.
  16. М.А., Степанян К. Р., Оганесян С.П. Очистка инекоторые физико-химические свойства аспарагиназы дрожжей
  17. Candida guilliermondii BKM- Y-42. «Айастани инсапанакан антес, Биол. ж. Армении», 1977, т. 30, J5 2, с. 14−19.
  18. М., Уэбб Э. Ферменты. М.- 1982.
  19. Л.П., Николаев А. Я., Еременко В. В., Мардашев G.P. Индуцированный синтез аспарагиназы и гшотаминазы у Pseudomonas sp . Биохимия, 1967, т. 32, В 4, с. 873−875.
  20. Р.А., Вша И.А., Блума Р. К., Платниеце Р. Ф. Некоторые аспекты строения активного центра фермента L -аспарагиназы. Химия природа. соедин., 1971, 16, с. 810−812.
  21. Р.А., Карсакевич А. С., Дауварте А. Ж. Новые формы противолейкозного ферментного препарата ь -аспарагиназы. -Тезисы Ш Всесоюзного съезда фармацевтов, Кишинев, 1980, с. 132 133.
  22. В.А., Смирнова И. П. Дезамидазы Pseudomonas fiuorescens 13. В сб.: Энзимология опухолей. М.- УДН, 1979, с. 37−44.
  23. Е.А., Смирнова И. П., Лебедева З. И. Штамм Ps . aurantiaca ВКМВ-548 продуцент бифункционального фермента глутамин (аспарагин) азы. В сб.: Энзимология опухолей. М.- УДН, 1979, с. 45−51.
  24. А.С., Жагат Р. А. Иммобилизация ь -аспарагиназы. Изв. АН Латв. ССР, 1977, 1 12, с. II8-I28.
  25. А.С., Шуличенко С. Н., Шилов Ю. И., Жагат Р. А. Иммобилизация фермента l -аспарагиназы е.coli на полисахаридах. Ш. Ковалентное связывание с 2-гидрокси-3-бромпропил- декс-траном. Химия природа, соедин., 1981, Л 2, с. 224−228.
  26. Каталог культур Всесоюзной коллекции непатогенных микроорганизмов. М.- 1976, с. 84.
  27. Н.А., Козлов Е. А., Герасимова А. В. Изменение активности глютаминазы Clostridium welchii SR -12 под влиянием некоторых аналогов глютамина и реактивов на сульфгидрильные группы. Биохимия, 1970, т. 35, № 4, и. 670−674.
  28. Н.А., Козлов Е. А., Герасимова А. В., Марда-шев С.Р. Кинетические свойства глутаминазы Clostridium welchii
  29. SR -12 и влияние некоторых ионов на ее активность. Биохимия, 1971, т. 36, № 6, с. II98-I203.
  30. Н.А., Цветкова Т. А., Николаев А. Я. Некоторые данные о субстратной специфичности ингибиторах и кинетике дез-амидазы АГ (аспарагиназы-глутаминазы) из Pseudomonas fluorescens AT. Вопр. мед. химии, 1977, т. 23, № 5, с. 618−622.
  31. Е.А., Коваленко Е. А. Глутаминазы. В сб.: Успехи биологической химии. ГЛ.- 1972, с. 49−79.
  32. Е.А., Коваленко, Е.А., Мардашев С. Р. Очистка и некоторые свойства глутаминазы Clostridium welchii SR -12. -Биохимия, 1972, т. 37, I I, с. 56−64.
  33. Е.А., Цветкова Т. А., Гребенщикова О. Г. Фотосен-сибилизированное окисление дезамидазы аспарагина-глутамина из Pseudomonas fluorescens «Бюл. эксперим. биологии и медицины, 1982, т. ХС1У, J5 9, с. 41−42.
  34. Корншп-Боуден Э. Основы ферментативной кинетики. М.-1979.
  35. Г. А. Практическое руководство по энзимологии. -М.- 1971, с. 325.
  36. З.И., Березов Т. Т., Орехович В. Н. Глутамин-(аспарагин)аза из Pseudomonas aurantiaea ВКМ-548. Биохимия, 1981, т. 46, JS I, с. 85−91.
  37. З.И., Кабанова Е. А., Зеленева Р. Н. Выделение и очистка глутамин(аспарагин)азы из Pseudomonas aurantiaca ВКМ-548. В сб.: Энзимология опухолей. М.- УДН, 1979, с. 68−72.
  38. З.Й., Орехович В. Н., Березов Т. Т. Исследование четвертичной структуры глутамин(аспарагин)азы из Pseudomonas aurantiaca •. Тезисы У1 Всесоюзного симпозиума по химии белков и пептидов, Рига, 1983, с. 202−203.
  39. В.И., Молодова Г. А., Беспалова Т. И., Денисов В. М. Влияние низких значений рН на активность и четвертичную структуру аспарагиназы в экстрактах Е. coli. Прикл. биох. и микробиол., 1975, т. II, №. 4, с. 539−545.
  40. С.Р., Николаев А. Я., Евсеев Л. П., Еременко В. В. Индукция аспарагиназной и глютаминазной активностей у Pseudomonas sp. аспарагиновой и глутаминовой кислота?.®-. Биохимия, 1867, т. 32, § 5, с. 1093−1098.
  41. С.Р., Николаев А. Я., Коваленко Н. А., Раков С. С., Цветкова Т. А. Очистка дезамидазы АГ (аспарагиназы-глутаминазы)из Pseudomonas fiuorescens AT и некоторые физико-химические свойства фермента. Вопр. мед. химии, 1975, т. 21, й I, с. 29−35.
  42. С.Р., Николаев А. Я., Соколов Н. Н., Козлов Е. А., Куцман М. Е. Выделение и свойства гомогенного препарата l -аспарагиназы из Pseudomonas fiuorescens АГ. Биохимия, 1975, т. 40, № 5, с. 984−989.
  43. С.Р., Соковнина Я. М. Синтез гидроксамовых кислот из дикарбоновых аминокислот и их амидов у Sac char omycescerevisiae . Микробиология, 1965, т. 34, $ I, с. 47−52.
  44. С.Р., Соколов Н. Н., Евсеев Л. П., Николаев А. Я. Влияние аминокислот на индуцированное образование аспарагиназы, глюташназы и глютаминсинтетазы у Pseudomonas sp • Биохимия, 1969, т. 34, 13, с. 529−534.
  45. Г. Диск-электрофорез. М.- 1971, с. 60−61.
  46. И.А., Гейман И. И., Пинка У. А., Кирстукас И. П., Славинская В. А., Жагат Р. А. рН-Зависимость кинетических параметров нйтротирозиласпарагиназы. Химия природа, соедин., 1978, Л 3−4, с. 364−367.
  47. Номенклатура ферментов. Приложение I: Исправления, добавления. М.- 1976.
  48. А.А., Жукова О. С., Иванова Т. П., Занин В. А., Березов Т. Т., Добрынин Я. В. Влияние препаратов глутамин(аспарагин) азы из микроорганизмов на синтез ДНК в опухолевых клетках. -Билл, экспер. биол., 1983, т. ХСУ1, й 9, с. 83−84.
  49. И.В. Глутаминаза пекарских дрогшей (выделение и свойства). Дис. канд. биол. наук. — М.- 1984.
  50. С.С., Прозоровский В. Н., Гребенщикова О. Г., Кондратьева Н. А. Физико-химические свойства дезашдазы из Pseudomonas fluorescens AT, обладающий противоопухолевой активное-тью. Вопр. мед. химии, 1977, т. 23, № 4, с. 503−508.
  51. А.И., Труш Г. П., Явилякова А. Микрометод определения аммиака и глютамина в тканевых трихлоруксусных экстрактах. Вопр. мед. химии, 1962, т. 8, № 5, с. 538−544.
  52. И.П., Лебедева З. И., Березов Т. Т. Зависимость между составом питательной среды и биосинтезом глутаминазы-ас-парагиназы Pseudomonas sp. В сб.: Проблемы злокачественного роста. М.- УДН, 1977, с. 80−84.
  53. ИЛ., Кабанова Е. А., Лебедева З. И., Березов Т. Т. Биосинтез бифункционального фермента глутаминазы-аспара-гиназы Pseudomonas aurantiaca ВКМ-548. Прикл. биох. И МИ-едобиол., 1979, т.15, № I, с.258−261.
  54. Н.Н., Николаев А. Я. Сульфгидрильные группы1.аспарагиназы, А из Pseudomonas fiuorescens AT. Биохимия, 1976, т.41, jft 4, с.727−731.
  55. Ю.М. Сера в бежах. М.- 1977.
  56. Я.Ф. Ордена Трудового Красного Знамени Институт Органического Синтеза: I957-I98I г. г. Рига- 1984
  57. А.Г., Виноградов Б. Д., Орлова B.C., Рылкин С. С. Биосинтез L-глутаминазы-аспарагиназы культурой Ps.boreopoiis526 в зависимости от условий культивирования. -Микробиология, 1978, т.47, № 3, с.409−413.
  58. Abe Т., Takenaka О., Inada Y. Reinvestigation of the Physicochemical and Enzymic Properties of L-Glutaminase from Pseudomonas. Biochim. Biophys. Acta, 1974, v.358, Жо1, p.113--116.
  59. Abe Т., Takenaka 0., Inada Y. Limited Proteolysis of Pseudomonas Glutaminase by Porcine Trypsin. FEBS Lett., 1975, v.55, Ko1, p.268−271.
  60. Akira I., Seizi I* Extracellular asparaginase-glutami-nase of Tilachlidium humicola. Такэда кэнкюсё XO, J* Takeda Res. Lab., 1973, v.32, Жо2, p.140−151.
  61. Arens A., Runenbusch E#, Irion E., Wayner 0., Bauer K., Kaufmann W» Isolation and Properties of L-Asparaginases from
  62. E. coli. Z" Physiol. Chem., 1970, v.351, No2, p.197−212.
  63. Boyd J*W., Phillips A.W. Purification and Properties of L-Asparaginase from Serratia marcescens. -J. Bacteriol., 1971, v.106,No2, p.578−587.
  64. Broome J.D. Evidence that L-asparaginase activity of guinea pig serum is responsible for its antilymphoma effects. Nature, 1961, v.191, Ho4793, p.1114−1115.
  65. Broome J.D. Antilymphoma Activity of L-Asparaginase in vivo: Clearance Rates of Enzyme Preparations Prom Guinea Pig Serum and Yeast in Relation to Their Effect on Tumor Growth. J. Natl. Cancer Inst., 1965, v.35, No6, p.967−979.
  66. Broome J.D., Schenkein I. Further studies on the tumor inhibitory activity of a bacterial glutaminase-asparaginase. -- Colloq. int. CURS, 1971, v.197, p.95−105.
  67. Cammack K.A., Marlborough D.I., Miller D.C. Physical Properties and Subunit Structure of L-Asparaginase Isolated from Erwinia carotovora. Biochem. J., 1972, v.126, No2, p.361−379.
  68. Campbell H.A., Mashburn L.T. L-Asparaginase EC-2 from Escherichia coli. Some Substrate Specificity Characteristics.- 154 — Biochemistry, 1969, v.8, No9, p.3768−3775.
  69. Charlson A.J., Coman A.J., Karossi F.A., Stephens F.S., Vagg R.S. The effect of metal ions on the hydrolysis of L-aspara-gine by L-asparaginase. Inorg. Chim. Acta, 1978, v.28, No2, p.217−222.
  70. Gitry N., Zyk N. Stereospecificity of the Catalytic Reaction of L-Asparaginase. Biochemistry, 1972, v.11, No11, p.2103−2109.
  71. Cooney D.A., Rosenbluth R.J. Enzyme as therapeutic agents.- Adv. Pharmacol. Chemother., 1974, v"12, p.185−289.
  72. Davidson L., Brear D.R., Wingard P., Hawkins J., Kitto G. B. Purification and Properties of an L-Glutaminase-L-Asparaginase from Pseudomonas acidovorans. J. Bacteriol., 1977, v.129, No3, p.1379−1386.
  73. Davidson L., Burkom M., Ahn S., Chang L-C., Kitto B. L-Asparaginases from Citrobacter frundii. Biochim. Biophys. Acta, 1977, v.480, No1, p.282−294.
  74. Distasio J.A., Niederman R.A., Kafkewitz D., Goodman D. Purification and Characterization of L-Asparaginase with Antilym-phoma Activity from Vibrio*succinogenes. J. Biol. Chem., 1976, v.251, No22, p.6929−6933.
  75. Esterhay R.J., Wiernik P.H., Grove W.R., Markus S.D., Wesley M.N. Moderate dose methotrexate, vincristine, asparaginase, and dexamethasone for treatment of adult acute lymphocytic leukemia. Blood, 1982, v.59, No2, p.334−345.
  76. Frank B.H., Pekar A.H., Veros A.J., Ho P.P.K. Crystalline L-Asparaginase from Escherichia coli В. II. Physical properties, subunits, and reconstitution behavior. J. Biol. Chem., 1970, v.245, No14, p.3716−3724.
  77. Glazer A.N., Smith E.L. Papain and Other Plant Sulfhydryl Proteolytic Enzymes. Enzymes, 1971, v.3, p.501−545″
  78. Greenquist A.C., Wriston J.C. Chemical Evidence for Identical Subunits in L-Asparaginase from Escherichia coli B. Arch, Biochem. Biophys., .1972, v.152, No1, p.280−286.
  79. Guy G.R., Daniel R.M. The purification and some properties of a stereospecific D-asparaginase from an extremely thermophilic bacterium Ihermus aquaticus. Biochem. J., 1982, v.203, No3, p.787−790.
  80. Handschumacher R.E. Active Site of L-Asparaginase: Reaction with Diazo-4-oxonorvaline. Methods in Enzymol., 1977, v.46, p.432−435.
  81. R.E., Bates C.J., Chang P.K., Andrews А.Т., Fisher G.A. 5-Diazo-4−0xo-L-Norvaline: Reactive Asparagine Analog with Biological Specificity. Science, 1968, v.161, Н0З8З6, p.62−63.
  82. Hanka L.J. Introduction: Possibilities for Biochemically '-. -Rational Chemotherapy for Some Malignancies with Depleting Enzymes and Antimetabolites of Specific Amino Acids. Cancer Treatment Reports, 1979, v.63, N06, p.1009−1011.
  83. Harris R.E., McCallister J.A., Provisor D.S., Weetman R.M., Baehner R.L. Methotrexate/L-asparaginase combination chemotherapy for patients with acute leukemia in relapse- a study of 36 children. Cancer, 1980, v.46, No9, p.2004−2008.
  84. Hartman S.C. The Interaction of 6-Diazo~5-oxo-L-norleucine with Phosphoribosyl Pyrophosphate Amidotransferase. J. Biol. Chem., 1963, v.238, Ho9, p.3036−3047.
  85. Hartman S.C. Glutaminase of. Escherichia coli. I. Purification and general catalytic properties. J. Biol. Chem., 1968, v.243, No5, p.853−863.
  86. Hartman S.C. Glutaminase of Escherichia coli. III. Studi- 157 es on the reaction mechanism" J, Biol. Chem., 1968, v.243″ No5, p. 870−878.
  87. Hartman S.C., McGrath T. Glutaminase A of Escherichia co-li.Reactions with the Substrate Analogue, 6-Diazo-5-oxonorleucine. J. Biol. Chem., 1973, v.248, No24, p. 506−8510.
  88. Hartman S.C., Stochaj E.M. Glutaminase A of Escherichia coli. Subunit Structure and Cooperative Behavior. J. Biol. Chem., 1973, v.248, Ho24, p.8511−8517.
  89. Herrmann V", Rohm K-H., Schneider P. On the substrate specificity ofasparaginase from E.coli. PEBS Lett., 1974, v.39,
  90. Hess G.P. Chymotrypsin Chemical Properties and Catalysis. — Enzymes, 1971, v.3, p.213−248.
  91. Hill G.M., Loeb E., MacLellan A., Khan A., Roberts J., Shields W., Hill U. Response to highly purified L-asparaginase during therapy of acute leukemia. Cancer Res., 1969, v.29, Ho8,
  92. Holcenberg J.S. Enhanced effect of an L-glutamine antagonist, L-(S, 5S) — -amino-3-chloro-4,5-dihydro-5-iaoxazolacetic acid, by Acinetobacter L-glutaminase-L-asparaginase. Cancer Treat. Reports, 1979, v.63, N06, p.1109−1114.
  93. Holcenberg J.S. Enzyme therapy: problems and solutions.-Ann. Rev. Biochem., 1982, v.51, p.795−812.
  94. Holcenberg J.S., Borella L.D., Camitta B.M., Ring B.J. Human pharmacology and toxicology of succinylated Acinetobacter glutaminase-asparaginase. Cancer Res., 1979, v.39, N08, p.3145--3151.
  95. Holcenberg J. S*, Ericsson L., Roberts J. Amino Acid Sequence of the Diazooxonorleucine Binding Site of Acinetobacter and Pseudomonas 7A Glutaminase-Asparaginase Enzymes. Biochemistry, 1978, v.17, No3, p.411−417.
  96. Ю4. Holcenberg J.S., Roberts J. Enzymes as drugs. Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol., 1977, v.17,p.97−116.
  97. Holcenberg J.S., Roberts J., Dolowy W.C. Glutaminases as Antineoplastic Agents. In: Enzyme of Glutamine Metabolism.- New-York- 1973, p.227−292.
  98. Holcenberg J.S., Schmer G., Teller D.S., Roberts J. Biologic and Physical Properties of Succinylated and Glycosylated Acinetobacter Glutaminase-Asparaginase. J. Biol. Chem., 1975, v.250, No11, p.4165−4170.
  99. Holcenberg J.S., Teller D.S., Roberts J. Active enzyme sedimentation of antitumor asparaginase and glutaminase enzymes.- Arch. Biochem. Biophys., 1974, v.161, No1, p.306−312.
  100. Holcenberg J.S., Teller D.S., Roberts J. Physical Properties of Antitumor Glutaminase-Asparaginase from Pseudomonas 7A. -J. Biol. Chem., 1976, v.251, No17, p.5375−5380.
  101. Holcenberg J.S., Teller D.S., Roberts J., Dolowy W.C. Physical Poperties of Acinetobacter Glutaminase-Asparaginase with Antitumor Activily. J. Biol. Chem., 1972, v.247, No22, p.7750−7758.
  102. Ho P.P.K., Milikin E.B. Multiple forms of L-asparaginase.- Biochim. Biophys. Actab, 1970, v.206, No1t p.196−198.
  103. Ho P.P.K., Milikin E.B., Bobbit J.L., Grinnan E.L., v
  104. Burck P*J., Prank B.H., Boeck L.Y.D., Swuires R.W. Crystalline L-Asparaginase from Escherichia coli В. I. Purification and Chemical Characterization. J. Biol. Chem., 1970, v.245, No14, p.3708−3715.
  105. Howard J.B., Carpenter F.H. L-Asparaginase from Erwinia carotovora. Substrate Specificity and Enzymatic Properties.- J. Biol. Chem., 1972, v.247, No4, p.1020−1030.
  106. Jackson R.C., Handschumacher R.E. Escherichia coli L-as-paraginase. Catalytic Activity and Subunit Nature. Biochemistry, 1970, v.9, No18, p.3585−3590.
  107. Jayaram H.N., Ramakrishan Т., Vaidyanathan C.S. L-Aspara-ginases from Mycobacterium tuberculosis Strains H^R.^. and H^R^ -Arch. Biochem. Biophys., 1968, v.126, No1, p.165−174.
  108. Joner P.E. Purification and Properties of L-Asparaginase
  109. В from Acinetobacter calcoaceticus. Biochim. Biophys. Acta, 1976, v.438, No1, p.287−295.
  110. Joner P. E., Kristiansen Т., Einarsson M. Purification and properties of L-asparaginase A from Acinetobacter calcoaceticus. Biochim. Biophys. Acta, 1973, v.327, STo 1, p.146−156.
  111. Kamisaki У., Wada H., Yagura Т., Matsushima A., Inada Y. Reduction in immunogenicitу and clearance rate of Escherichia coli1. asp&raginase by modification with monomethoxypolyethylene glycol. J. Pharmacol, and Exp. Ther., 1981, v.216, No2, p.410−414.
  112. Katsumata H., Katsumata R., Abe Т., Takenaka 0., Inada Y. Purification and Physj-cochemical Properties of L-Glutaminase from Pseudomonas. Biochim. Biophys. Acta, 1972, v.289, No2, p.405−409.
  113. Kien C.L., Holcenberg J.S. Nitrogen utilization in mice bearing Ehrlich ascites tumor treated with Acinetobacter glutami-nase-asparaginase. Cancer Res., 1981, v.41, No6, p.2051−2055.
  114. Kien C.L., Holcenberg J.S. Amino acid utilization and urine protein excretion in children treated with succinylated Acinetobacter glutaminase-asparaginase. Cancer Res., 1981, v.41, No6, p.2056−2062.
  115. Lauinger C., Ressler C. Ji-Cyanoalanine as a Substrate for Asparaginase. Stoichiometry, Kinetics and Inhibition. Biochim. Biophys. Acta, 1970, v.198, ЕГо2, p.316−323.
  116. Law A.S., Wriston J.G. Purification and Properties of Bacillus coagulans L-Asparaginase. Arch. Biochem. Biophys., 1971, v. 147, No2, p.744−752.
  117. Lee В., Yang H.J. Crystallographic Studies on L-Asparaginase from Proteus vulgaris. I. Preliminary Crystal-Data. J.Biol.1. W?3
  118. Chem., Yv.248, No21, p.7620−7621.
  119. Lee В., Yang H.J., Henry G.M., Seymour J.P. Crystallographic Studies on L-Asparaginase from Proteus vulgaris. II. Symmetry and Location of the Tetrameric Molecule. J. Biol. Chem., 1975, v.250, H0I6, p.6228−6231.
  120. Liu F.S., Zajic J.E. Purification and properties of L-as-paraginase of Erwinia aroideae. Can. J. Microbiol., 1972, v.18,1. Ho12, p.1953−1957.
  121. Liu Y.P., Handschumacher R.E. Uitroasparaginase. Subunit cross-Linkage Land Altered Substrate Specificity. J. Biol.Chem., — 162 -1972, v.247, No1, p.66−69.
  122. Maita Т., Matsuda G. The Primary Structure of L-aspara-ginase from Escherichia coli. Z. Physiol. Chem., 1980, v.361, No2, p.105−117.
  123. Makino H., Inada Y. Photooxidation of histidine residues in asparaginase in relation to its enzymic activity. Biochim. Biophys. Acta, 1973, v.295, No2, p.543−548.
  124. Marlborough D.T., Miller D.S., Cammack K.A. Comparative study on conformational stability and subunit interaction of two bacterial asparaginases. Biochim. Biophys. Acta, 1975, v.386, Uo2, p.576−589.
  125. Martell A.E., Smith R.M. Crtical stability constants. V.1 Amino Acids. Hew York-London- 1974.
  126. Meister A., Levintow L., Greenfield R.E., Abendschein P.A. Hydrolysis and Transfer Reactions catalyzed by co-Amidase Preparations. J. Biol. Chem., 1955, v.215, No1, p.441−460.
  127. Murthy U.S., Knox J.R. Small-angle X-ray scattering studies of Escherichia coli L-Asparaginase. J. Mol. Biol., 1976, v.105, No4, p.567−575.
  128. Nagareyama Y.T., Takashi I., Mitsuharu P. Verfahren zur Herstellung eines Enzyms mit etwa gleich grober Glutaminase- und Asparaginase-Aktivitat. Patentschrift 2 051 945.
  129. Nakamura N. Effects of Acetylation with Acetic Anhydride.- Agr. Biol. Chem., 1973, v.37, No3, p.569−574.
  130. Nickle E.C., Solomon R.D., Torchia Т.Е., Wriston J.C.Jr. Chemical modifications of Escherichia coli L-asparaginase and their effect on plasma clearance rate and other properties.- Biochim. Biophys. Acta, 1982, v.704, No2, p.345−352.
  131. North A.C.P., Wade H.E., Cammack K.A. Physycochemical Studies of L-Asparaginase from Erwinia carotovora. Nature, 1969, v.224, No5219, p.594−595.
  132. Novak E.K., Phillips A.W. L-Glutamine as a Substrate for L-Asparaginase from Serratia marcescens. J. Bacterid., 1974, v.117, No2, p.593−600.
  133. Oettgen H.P., Old L.J., Boyse E.A., Campbell H.A., Philips P. S., Clarkson B.D., Tallal L., Leeper R.D., Schwartz M.K., Kim J.H. Inhibition of leukemias in man by L-asparaginase. Cancer Res., 1967, v.27, No12, p.2619−2631.
  134. Ohshima M., Yamamoto Т., Soda K. Further Characterizationof Glutaminase Isozymes from Pseudomonas aeruginosa, Agr. Biol, Chem, 1976, v.40, No11, p.2251−2256.
  135. Oki Т., Shirai M., Ohshima M. t Yamamoto Т., Soda K. Antitumor activities of bacterial leucine dehydrogenase and glutaminase A. PEBS Lett., 1973, v.33, ЖоЗ, p.286−288.
  136. Pastuszak I., Szymona M. Purification and properties of L-asparaginase from Mycobacterium phlei. Acta Biochim. Pol., 1976, v.23, No1, p.37−44.
  137. Paul J.H. Isolation and characterization of Chlamydomonas L-asparaginase. Biochem. J., 1982, v.203, No1, p.109−115.157″ Perrin D.D. Stability constants of Metal-ion Complexes: Part B. Organic Ligands. Oxford- 1979.
  138. Peterson R.G., Richards P.P., Handschumacher R.E. Structure of Peptide from Active Site Region of Escherichia coli L-as-paraginase* J. Biol. Chem., 1977, v.252, No6, p.2072−2076.
  139. Petz D., Loffler H.^G., Schneider P. Inhibition of E. coli
  140. Asparaginase by Reaction with 2,3-Butanedione. Chemical Modification of Arginine and Histidine Residues. Z. Naturforsch., 1979, v.34C, p.742−746.
  141. Pinkus L.M. Glutamine Binding Sites. Methods in Enzy-mol., 1977, v.46, p.414−427.
  142. Prusiner S., Davis J.П., Stadtman E. R, Regulation of Glutaminase В in Escherichia coli. I. Purification, Properties and Cold Lability. J. Biol. Chem., 1976, v.251, No11, p.3447−3456.
  143. Prusiner S., Stadtman E.R. Regulation of Glutaminase В in Escherichia coli. II. Modulation of Activity by Carboxilate and Borate Ions. J. Biol. Chem., 1976, v.251, Ho11, p.3457−3462.
  144. Prusiner S., Stadtman E.R. Regulation of Glutaminase В in Escherichia coli. III. Control by nucleotides and Divalent Cations. J. Biol. Chem., 1976, v.251, No11, p.3463−3469.
  145. Ramadan M.E.A., El Asmar P., Greenberg D.M. Purification and Properties of Glutaminase and Asparaginase from a Pseudomonad.
  146. Purification and Physical Chemical Properties. Arch. Biochem. Biophys., 1964, v.108, No1, p.143−149.
  147. Roberts J., Holcenberg J.S., Dolowy W.C. Isolation, Crystallization and Properties of Achromobacteraceae Glutaminase-As-paraginase with Antitumor Activity. J. Biol. Chem., 1972, v.247, Ho1, p.84−90.
  148. Roberts J., Schmid P.A., Rosenfeld H.J. Biologic and Antineoplastic Effects of Enzyme-mediated In Vivo Depletion of L-Glu-tamine, L-Tryptophane, and L-Histidine. Cancer Treat. Rep., 1979, v.69, No6, p. Ю45-Ю54.
  149. Rohm K.-H., Schneider P. Kinetische Untersuchangen zum Mechanismus der Asparaginase aus E. coli (E.C. 3.5.1*1). Z. Physiol. Chem., 1971, v.352, No12, p.1739−1743.
  150. Rohm K.-H., Schneider P. Modellreaktionen zum Mechanismus der Asparaginase aus E.coli. Chimia, 1972, v.26, No11, p.576−578.
  151. Rosenfeld H., Roberts J. Enhancement of antitumor activity of glutamine antagonists 6-diazo-5-oxo-L-norleucine and acivicin in cell culture by glutaminase-asparaginase. Cancer Res*, 19S1, v"41, No4, p.1324−1328.
  152. Sakamoto Т., Araki C., Beppu Т., Arima K. Partial purification and some properties of extracellular asparaginase from Candida utilis. Agr. and Biol. Chem., 1977, v.41, No8, p.1359−1364.
  153. Schmid P.A., Roberts J. Antineoplastic and toxic effects of Acinetobacter and Pseudomonas glutaminases. Cancer Chemother. Rep., 1974, v.58, No6, p.829−840.
  154. Schwartz J.H. Asparaginase II of Escherichia coli: bacterial physiology and enzymatic mechanism of action. Colloq. int CURS, 1971, ETo197, p.79−85.
  155. Shifrin S., Grochowski B.J. L-Asparaginase from Escherichia coli B. Succinylation and subunit interaction. J. Biol. Chem., 1972, v.247, Ho4, p.1048−1054.
  156. Shifrin S., Luborsky S.W., Grochowski B.J. L-Asparaginase from Escherichia coli B. Physicochemical Studies of the Dissociation Process. J. Biol. Chem., 1971, v.246, Uo24, p.7708−7714.
  157. Shifrin S., Parrot C.L., Luborsky S.W. Substrate Binding and Intersubunit Interactions in L-Asparaginase. J. Biol. Chem., 1974, v.249, No5, p.1335−1340.
  158. Shifrin S., Solis B.G. Reaction of U-Acetylimidazole with L-Asparaginase. Mol. Pharmacol., 1972, v.8, Uo5, p.561−564.
  159. Soda K., Ohshima M., Yamamoto T. Purification and Properties of Isozymes of Glutaminase from Pseudomonas aeruginosa. Bio- 167 chem, Biophys. Res. Communs., 1972, v.46, ВД, p.1278−1284.
  160. Soru E., Zaharia 0. Ь-Asparaginase from BCG-Strain of Mi-cobacterium bovis. Chemical Characterization. Rev. roum. biochim., 1973, v.10, Ho2, p.145−153.
  161. Steckel J., Roberts J., Philips P. S., Chou T-C. Kinetic Properties and Inhibition of Acinetobacter Glutaminase-Asparaginase. Biochem. Pharmacol., 1983, v.32, N06, p.971−977.
  162. Stern M.L., Phillips A.W., Gottlieb A.J. Physical Properties of L-Asparaginase from Serratia marcescens. Bacteriology, 1976, v.125, No2, p.719−727.
  163. Takenaka 0., Tamaura P., Nishimura Y., Inada Y. DL-Aspartic acid j3-p-nitroanilide as a substrate for the assay of asparaginase. J. Biochem., 1971, v.69, N06, p. 1139−11.41.
  164. Tioutrina G.V., Lebedeva Z.I., Berezov T.T. The active site of glutaminase (asparagine)ase from Pseudomonas aurantiaea BKMB-548. Abstr. of XII Intern. Congress of Biochemistry, Perth, 1982, p.837.
  165. Todokoro K., Saito Т., Obata M., Yamazaki S., Tamaura Y., Inada Y. Studies of Conformation and Antigenicity of Reduced S-Methylated Asparaginase. FEBS Lett., 1975, v"60, No2, p.259−262.
  166. Tosa T#, Sano R., Yamamoto K., Uakamura M., Chibata I. L-Asparaginase from Proteus vulgaris. Purification, Crystallizazation, and Enzymic Properties" Biochemistry, 1972, v.11, No2, p.217−222,
  167. Warrell R.P., Arlin Z.A., Gee T.S., Chou Т., Roberts J.,
  168. Young C. W. Clinical Evaluation of Succinilated Acinetobacter Glutaminase-Asparaginase in Adult Leukemia. Cancer Treat. Rep., 1982, v.66, Ho7, p.1479−1485.
  169. Weber K., Osborn M. The Reliability of Molecular Weight Determination by Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis. J. Biol. Chem., 1969, v.244, Ио1б, p.4406−4416.
  170. Westerik J. O'C., WQlfenden R. Aspartic--Semialdehyde:
  171. A Potent Inhibitor of Escherichia coli L-Asparaginase. J. Biol. Chem., 1974, v.249, No19, p.6351−6353.
  172. Whelan H.A., Wriston J.C. Purification and properties of asparaginase from E. coli B. Biochemistry, 1969, v.8, N06, p.2386−2393.
  173. Whelan H.A., Wriston J.C. Purification and properties of L-asparaginase from Serratia marcescens. Biochim.Biophys. Acta, 1974, v.365, No1, p.212−222.
  174. Wileman Т., Bennet M., Lilleyman J. Potential use of an asparaginase-dextran conjugate in acute lymphoblastic leukaemia.- J. Pharm. and Pharmacol., 1983, v.35, Fo11, p.762−764.
  175. Wlodawer A., Hodgson K.O., Bensch K. Studies of Two Crystal Forms of Glutaminase-Asparaginase from Acinetobacter glutaminasificans. J. Mol. Biol., 1975, v.99, No2, p.295−299.
  176. Wriston J.C.Jr. Asparaginase. Methods in Enzymol., 1970, v.17A, p.732−742.
  177. Wriston J.C.Jr., Yellin Т.О. L-Asparaginase: A rewiew.- Adv. Enzymol., 1973, v.39, p.185−248.
  178. Yamamoto S., Hirooka H. Partial purification and properties of glutaminase from Aspergillus sojae. Хакко когаку дзас-СИ, J. Ferment. Technol., 1974, v.52, No8, p.570−576.
  179. Zyk H. Modification of L-asparaginase EC-2 by homologous antibodies. Biochim. Biophys. Acta, 1973, v.302, Ho2, p.420−428,
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!