При этом эритроциты, либо кусочки латекса с адсорбированными на них антигенами взаимодействуют с соответствующими антителами сыворотки. Если антитела есть, то на дно ячейки выпадает осадок в виде «зонтика». Если нет, то эритроциты оседают в виде «пуговки». Существуют промышленно изготавливаемые диагностикумы (рис. 4) [2, с. 211−212]. Рис. 4. ВВЕРХУ — реакция агглютинации (справа — отрицательная, слева — положительная), ВНИЗУ — РНГА (разведение 1:10—1:40 — реакцияотрицательная, разведение 1:80, 1:160 — положительная) Реакция коагглютинацииоснована на определении антител с помощью антительногодиагностикума, включающего в себя антитела, которые адсорбированы на белке, А клеток стафилококка.
В результате реакции образуются хлопья. Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) используется при диагностике вирусных инфекций, причем только инфекций, вызываемых гемагглютинирующими вирусами. Эти вирусы содержат на своей поверхности белок — гемагглютинин, который ответствен за реакцией гемагглютинации (РГА) при добавлении к вирусам эритроцитов. РТГА заключается в блокировании антителами вирусных антигенов, в результате чего вирусы теряют способность агглютинировать эритроциты [2, с. 212−213].
Вторая группа реакций — это реакции прецепитации (РП) основана на помутнении среды в результате реакции антиген-антитело. Реакция может быть поставлена в пробирке, в гелях, в спец. средах. В первом случае, например, используются специальные узкие пробирки. При взаимодействии сред с антигенами и антителами между ними образуется мутное кольцо (кольцо преципитата). Такой тип называется реакцией кольцепреципитации (рис. 5).
Рис. 5. Реакция кольцепреципитации (слева — отрицательная, справаположительная) Реакция радиальнойиммунодиффузии — одна из модификаций РП. При ее проведении в расплавленный агаровый гель добавляют антитела и наносят гель равномерным слоем на стекло. В геле вырезают лунки и вносят в них стандартный объем различных по концентрации растворов антигена.
Во время инкубации антигены радиально диффундируют из лунки и, встретившись с антителами, образуют кольцо преципитации. Иммуноэлектрофорез также является модификацией РП. При его проведении предварительно электрофоретически разделяют смесь антигенов, затем в канавку, идущую вдоль направления движения белков, вносят преципитирующуюантисыворотку. Антигены и антитела диффундируют в гель навстречу друг другу.
Взаимодействуя, они образуют дугообразные линии преципитации[2, с. 213−215]. Реакция связывания комплемента основана на том, что антитела при взаимодействии с соответствующим антигеном, связывают добавленный комплемент. Это первая система реакции.
В качестве индикатора связывания комплемента используются эритроциты, сенсибилизированные гемолитической сывороткой, т. е. антителами к эритроцитам. В этом заключается вторая система. В случае, когда комплемент не фиксируется в первой системе (нет реакции антиген-антитело), то во второй системе сенсибилизированные эритроциты полностью лизируются. Реакция считается отрицательной. Если комплемент связан, то во второй системе отсуствует гемолиз сенсибилизированных эритроцитов, т. е. реакция положительная. РСК используется для диагностики инфекционных болезней (гонореи, сифилиса, гриппа).
Реакция нейтрализации проводится на биологических объектах. Это могут быть как живые существа, так и культуры клеток, эмбрионы (например куриные). В организм животного или в клетки вводится смесь антиген-антитело. Если повреждающее действие токсинов не наблюдается, то реакция положительная [2, с. 215−216]. Реакции с использованием меченых антител или антигенов — еще одна распространенная группа серологических методов. При реакции иммунофлюоресценции мазок обрабатывается специальной сывороткой, в которой находятся меченые флюорохромом антитела.
Прореагировав с антигенами, антитела светятся в люминесцентном микроскопе. При иммуноферментном анализе для выявления антигенов используют меченые ферментами антитела. После того, как антиген соединяется с меченым ферментом антителом, в смесь добавляется субстрат/хромоген. Этот субстрат расщепляется ферментом и тем благодаря этому изменяется его цвет. Метод имеет массу модификаций и используется для выявления многих инфекций, в том числе ВИЧ, гепатитов.
Метод иммуноблоттинга представляет собой комплекс из метода иммуноэлектрофореза и ИФА. Сначала проводится эжлектрофорез смеси антигенов в геле. Затем проводят реакцию ИФА. Иммунная электронная микроскопиясхож с методом РИЯ, только здесь бактерии и вирусы обрабатываются с применением ферритина.
Такие бактерии и вирусы хорошо видны в электронный микроскоп [2, с. 216−218]. Бактериологические методы исследования применяются тогда, когда необходимо выявить и изучить представителей как нормальной микрофлоры половых путей человека, так и патогенов. Для этих целей, как мы уже упоминали, используются иммунологические методы, а также такие методы как: Бактериоскопический метод. Бактериологический метод;
Молекулярно-генетический метод [3, с. 7]. Бактериоскопический метод основан на изучении морфологических признаков микроорганизма. Он используется как при идентификации нативных микроорганизмов, так и окрашенных препаратов. Для микроскопического изучения микроорганизмов применяются такие методы как: Световая микроскопия — применение светового микроскопа с максимальной разрешающей способностью 0,2 мкм;Электронная микроскопия — использование электронного микроскопа с максимальной разрешающей способностью 0,2−2,0 нм[3, с.
7−11]. Плюсы метода заключаются в быстрых результатах, т.к. к идентификации микроорганизмов можно приступить максимально быстро. В числе минусов — необходимость использования персонала с высокой квалификацией, частые ложноотрицательные результаты в пробах с малым числом микроорганизмов. Бактериологический метод используется гораздо чаще. Он основан на культивировании микроорганизмов в специальных средах с последующей их идентификацией методами микроскопии. Методу присущи все плюсы и минусы бактериомикроскопии, кроме того, что часты ложноотрицательные результаты.
Т.к. при бактериологических исследованиях микроорганизмам позволяется вырасти до образования колоний, шанс их обнаружения значительно выше [3, с. 7]. Цитологические методы исследования — это важнейший метод изучения норм и патологий в строении половых органов человека. При данном методе используются как мазки с шейки матки, забор которых ведется рутинно в ежегодном порядке, а также трижды во время беременности женщины. Биоптаты, взятые во время осмотров, лапароскопий, гистероскопий также подвергаются цитологическому исследования с целью выявления характера изменений. Данный метод является ценным в качестве метода раннего выявления рака шейки матки. При этом препараты окрашивают несколькими способами, зависящими от материала, предлагаемого к исследованию (рис. 6).Биохимические методы исследования ввиду большой роли гормонов и прочих химических веществ в деятельности половых органов человека также являются одними из ведущих.
Для биохимического исследования используют различные методы среди которых фотометрия, нефелометрия, электрофорез, рефрактометрия, многочисленные иммунологические и другие методы. Развитие современной науки и техники дало возможность многие анализы проводить автоматически с помощью специальных анализаторов [12, с. 46−92]. Рис. 6. Препарат клеток шейки матки — плоскоклеточный рак из мелких клеток (справа) и умеоренно дифференцированна аденокарцинома [15, с.
96−97]Генетические методы исследования широко распространены ввиду того, что длявсе большего числа патологий вскрываются генетические факторы этиологии. Генетические методы исследования можно разделить следующим образом:
Плюсы данных методов заключатся в возможности выявить причины, например невынашивания беременности и прибегнуть к искусственным методам оплодотворения, при которых будут отобраны только те эмбрионы, которые жизнеспособны или у которых нет мутировавших генов, т. е. нет шанса заболеть. Минусы метода заключаются в его дороговизне, трудоемкости, требовательности к аппаратуре и условиях проведения исследования. Среди методов генетического исследования можно выделить следующие:
Генеалогический метод — построение родословной и анализ передачи признака в ряду поколений;
Цитогенетический — изучение кариотипа при помощи микроскопической техники и определение в ядрах соматических клеток телец Барра;
Молекулярно-генетический — изучение отдельных ДНК [8, с. 43−138; 13, с. 210−218].
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Мы рассмотрели основные аспекты методов исследования в области репродуктивной системы человека. На основании всего вышесказанного можно сделать ряд выводов:
Репродуктивно система человека — это сложный комплекс из органов и тканей, работа которых регулируется рядом желез внутренней секреции, а также нервной системой. Сложность репродуктивной системы человека предопределяет большое разнообразие методов ее исследования. Все методы исследования репродуктивной системы человека можно выделить физические, инструментальные и лабораторные методы. Все они имеют ряд отличий в зависимости опола испытуемого. К числу ведущих методов можно отнести инструментальные и лабораторные исследования, т.к. они дают более точный результат. Каждый метод диагностики имеет свои осложнения, показания и противопоказания.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Анатомия человека: Учебник для вузов/ М. М. Курепина, А. П. Ожигова, А. А. Никитина. — М.: Владос, 2003. — 384 c. Атлас по микробиологии, вирусологии и иммунологии: учебное пособие для студентов медицинских вузов/ под ред.
А.А. Воробьева, А. С. Быкова. — М.: Медицинское информационное агентство, 2003. — 236 с. Ворьбьев А. А. Медицинская и санитарная микробиология: Учебное пособие для студентов высших учебных заведений/ А. А. Воробьев, Ю. С. Кривошеин, В. П. Широбоков.
— М.: Издательский центр «Академия», 2003. — 464 с. Гайворонский И. В. Анатомия и физиология человека: учеб.
для студ. учреждений сред. проф. образования/ И. В. Гайворонский, Г. И. Ничипорук, А. И. Гайворонский. — 6-е изд., перераб.
и доп. — М.: Издательский центр «Академия», 2011. — 496 с. Гинекология: Учебник/ По д ред.
Г. М. Савельевой, В. Г. Бреусенко. — М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. — 480 с.
Калинченко С. Ю. Практическая андрология/ С. Ю. Калинченко, И. А. Тюзиков. — М.: Практическая медицина, 2009. — 399 с. Кукес В. Г., Маринин В. Ф., Реуцкий И. А., Сивков С. И. Врачебные методы диагностики: Учебное пособие.
— М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. — 720 с. Лабораторная диагностика мужского бесплодия/ В. В. Долгов, С. А. Луговская, Н. Д. Фанченко, И. И. Миронова, Е. К. Назарова, Н. Г. Ракова, С. С. Раков, Т. О. Селиванов, А. М. Щелков. — М.: ООО «Издательство «Триада», 2006. — 144 с.
Лучевая диагностика: Учебник. Т.
1. / Под ред. Труфанова Г. Е. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. — 416 с. Общий курс физиологии человека и животных: В 2-х кн.
Книга 2. Физиология висцеральных систем/ А. Д. Ноздрачев, Ю. И. Баженов, И. А. Баранникова и др. — М.: Высшая школа, 1991. — 522 c. Основные методы исследования и оперативные вмешательства в гинекологии: Учеб.
пособие/ Т. Н. Колгушкина, Р. Л. Коршикова, О.А. пересада и др. — Мн.: Выш. шк., 1999. — 124 с. Ройтберг Г. Е. Внутренние болезни. Лабораторная и инструментальная диагностика: учеб.
пособие/ Г. Е. Ройтберг, А. В. Струтынский. — 2-е изд., перераб. и доп. — М.
: МЕДпресс-информ, 2011. — 800 с. Сазанов А. А. Генетика: учеб.
пособие / А. А. Сазанов — СПб.: ЛГУ им. А. С. Пушкина, 2011. — 264 с. Неттер Ф.
Атлас анатомии человека: Учебное пособие-атлас/ Под ред. Н. О. Бартоша; Пер. с англ. А. П. Киясова. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2003. — 600 с. Шабалова И. П. Цитологический атлас.
Критерии диагностики заболеваний шейки матки. — М.: Триада, 2001. — 113 с. ПРИЛОЖЕНИЕ АСтроение мужской половой системы.
Рис. А1. Макроскопическое и микроскопическое строение яичка [14, рис. 362] ПРИЛОЖЕНИЕ БСтроение женской половой системы.
Рис. Б1. Строение внутренних половых органов женщины [14, рис. 346] Рис. Б2. Строение наружных половых органов женщины [14, рис. 350].
