Правильность. 
Основные критерии оценки аналитической надежности методов лабораторных исследований

Правильность результатов — соответствие среднего значения результатов повторных определений одного и того же материала с должной величиной. Правильность не имеет числовой величины, она определяется неправильностью. Правильность метода определяется правильностью результатов, полученных этим методом.

Правильность зависит от наличия систематических погрешностей метода. Систематическая погрешность метода может быть обусловлена рядом причин: неспецифичностью метода, и тогда она определяется как постоянная систематическая погрешность; или неправильным способом построения калибровочной кривой, использованием калибровочного материала недостаточной степени чистоты, неправильной постановкой холостой пробы, и тогда она определяется как пропорциональная систематическая погрешность метода.

Постоянная и пропорциональная погрешности составляют общую систематическую погрешность метода.

Статистическим критерием правильности является средняя арифметическая (Х) и степень ее отклонения от истинного (номинального) значения мю. Способами определения правильности могут быть:

способ добавки — внесение в биологическую жидкость точно.

взвешенного количества анализируемого вещества и определение его с.

помощью исследуемого метода;

способ смешивания проб — биологическая жидкость с низкой и с.

высокой концентрацией исследуемого вещества смешивается в.

различных соотношениях.

Способ добавки и смешивания проб (последний может быть применим в методах определения активности ферментов, где невозможно использовать способ добавки) позволяют определить только пропорциональную систематическую погрешность метода. Например, добавленное количество креатинина, определенное по реакции Яффе, может дать хороший процент выявления, однако методы, основанные на реакции Яффе, дают неправильные результаты за счет низкой специфичности метода. Процент выявления вещества, равный 90−110%, считается удовлетворительным для клинических лабораторных методов исследования. Исследование контрольного материала с известным содержанием компонентов — наиболее простой способ оценки правильности. Однако, он может быть использован только для быстрой ориентировочной оценки правильности метода. Обязательным условием, ограничивающим возможности этого способа является использование метода, который указан в аннотации к контрольному материалу. Процедура изготовления контрольного материала, хранение его, вид используемой сыворотки могут в значительной степени изменить истинное содержание компонента. Особенно большим изменениям могут подвергнуться ферменты.

Сравнение методов. Наиболее информативным способом является способ сравнения методов. Данный способ позволяет определять общую систематическую погрешность метода. Смысл сравнения методов состоит в сравнении результатов, которые получены методом — кандидатом (т.е. методом, правильность которого исследуется) и сравнительным методом, который должен давать правильные результаты. Поэтому крайне важным является правильность сравнительного метода. Международной федерацией клинической химии и Рабочей группой экспертов стран — членов СЭВ (Компендиум методорум по лабораторной диагностике) введено понятие — референтный метод.

Референтный метод — это метод, обладающий максимальной специфичностью, правильностью и воспроизводимостью результатов измерения. Он служит главным образом для сравнения методов при оценке аналитической надежности унифицированных и других методов. Однако, референтные методы могут быть недоступны лабораториям, и для ряда компонентов они еще не разработаны. Поэтому в качестве сравнительных могут использоваться методы, правильность которых исследована, и которые не дают существенного отклонения от истинных величин.

Для более точной оценки правильности предлагаемого метода сравнение методов следует проводить в соответствии с правилами сравнения методов.

Правила сравнения методов предусматривают:

• 1) точное соблюдение всех письменных указаний по применению метода;
• 2) проведение исследований под контролем качества с применением единого контрольного материала для гарантии стабильности условий исследования за время всего периода сравнения методов;
• 3) в сравниваемых методах должны быть проверены точность и линейность калибровочных кривых;
• 4) за время всего периода сравнения методов должны, по возможности, применяться одни и те же реактивы, приборы; работа проводится одними и теми же лаборантами;
• 5) правильность метода должна оцениваться на всем диапазоне измеряемых концентраций; поэтому должны быть исследованы образцы с низкими, нормальными и повышенными концентрациями вещества;
• 6) сравнение методов проводится на контрольном материале и на биологическом материале, полученном от больных и здоровых лиц;
• 7) очень важным является выбор метода для сравнения.

Статистическая обработка результатов состоит в оценке степени совпадения результатов, полученных методом — кандидатом и сравнительным методом.

В отличие от воспроизводимости, оценка правильности результатов — значительно более сложная задача. Для статистической обработки результатов могут применятся различные статистические тесты. Ниже приводится статистический способ оценки результатов сравниваемых методов, не требующий специальной вычислительной техники и позволяющий судить о правильности метода — кандидата.

Статистическая оценка правильности результатов сравниваемых методов. Для оценки правильности определяются: достоверность различий результатов и наличие статистической связи.

Определение достоверности различий результатов.

Определить достоверность различий результатов можно с помощью теста Стьюдента. Наиболее достоверные результаты тест Стьюдента дает при нормальном распределении результатов. Поэтому в тех случаях, когда распределение результатов не является нормальным, или вид распределения невозможно определить из-за малого числа наблюдений, рекомендуется использовать непараметрические критерии — критерий знаков, тест Вилкоксона. Преимуществом непараметрических критериев является их независимость от вида распределения результатов и простота расчета. Критерий знаков эффективен при большом числе определений. Он учитывает не степень различий в каждой паре, а лишь их направленность (знак) и основан на подсчете числа разностей между результатами X и Y со знаком + или -.Если число наблюдений невелико, и критерий знаков не выявил различий, целесообразно применить критерий Т — парный критерий Вилкоксона. Критерий Т более чувствителен, он основан на следующем приеме: вычисленным разностям между двумя рядами результатов (X и Y) дают ранговые номера в порядке возрастания абсолютных значений разности (без учета ее знака). Совпадающим значениям дают ранговые номера, равные средним из их порядковых значений. Например, одинаковые разности, стоящие на 3-м и 4-м местах, получают ранг 3,5. Далее вычисляется величина Т, равная сумме ранговых номеров разностей, имеющих отрицательное значение (т.е. разностей, противоположных наблюдаемым в большинстве).

Пример расчета критерия Т-Вилкоксона.

Т = 1 + 3 = 4.

Заключения строятся на достигнутом уровне значимости. Для целей лабораторной диагностики достаточным является уровень значимости Р = 0,05. Полученные значения сравнивают с табличными. Если Р 0,05, то различия на достигнутом уровне значимости не достоверны, т. е. метод — кандидат может быть правильным. Дальнейшая обработка результатов состоит в оценке статистической связи.

Оценка статистической связи.

Для оценки статистической связи можно использовать корреляционный метод и метод регрессии. Корреляционный метод менее информативен, чем метод регрессии.

Корреляционный метод. Корреляция указывает на степень связи двух рядов чисел, т. е. изучается зависимость между результатами X и Y двух методов. Для определения корреляции рассчитывают обычный коэффициент корреляции r и коэффициент ранговой корреляции ро, при расчете которого результаты оцениваются порядковыми номерами — рангами от меньших результатов к большим. Порядковый номер каждого результата является его рангом.

Формулы расчета коэффициента корреляции 9 и 10.

Коэффициенты корреляции могут колебаться от 0 до +1 при положительной корреляции и от 0 до -1 — при отрицательной корреляции. Если имеется хорошее совпадение результатов сравниваемых методов, то значение r будет около 1,0 (0,9 — 0,99). Чем ниже величина коэффициента корреляции, тем меньше степень совпадения результатов сравниваемых методов. При отсутствии связи между результатами r = 0. При отрицательной корреляции, при изменении результатов группы «Х», результаты группы «Y» будут изменяться в противоположном направлении: r = -1. Метод регрессии. Если корреляция указывает на степень связи, то регрессия позволяет определить, как количественно меняется один результат по мере изменения другого. Для построения эмпирической линии регрессии на диаграмму наносят парные результаты в виде точек: на оси абсцисс — сравнительного метода, а на оси ординат — метода — кандидата. Диаграмма дает первое впечатление о типе связи между двумя методами. При линейности регрессии точки располагаются вокруг прямой линии.

Если регрессия нелинейна, то требуется дальнейшая доработкаметода — кандидата, т. е. он не пригоден для целей лабораторной диагностики. Линейная регрессия рассчитывается по формуле 11. Если «а» статистически отличается от 0, то метод — кандидат имеет систематическую погрешность по отношению к сравнительному методу. Эта ошибка может быть приемлемой и неприемлемой.