После тщательной проверки правильности упаковки и маркировки препарата, проверяют его внешний вид: его соответствие описанию в инструкции, которая приложена к ЛП, а также полное соответствие фармакопейным требованиям по лекарственным формам. 4.2 Качественный анализ
Химическиесвойстваиреакцииподлинности.Наиболеелабильнойчастьюмолекулыпенициллинаявляетсяβ-лактамноекольцо, котороеподвергаетсягидролитическомурасщеплениюподдействиемщелочей, кислот, ферментапенициллиназыспотерейбиологическойактивности. Реакциящелочногогидролизапенициллиновиспользуетсявгидроксамовойреакции, вколичественномйодометрическомопределениипенициллинов. Щелочиипениниллиназагидролизуютβ-лактамноекольцособразованиемнеактивнойпенициллоиновой кислоты.Гидроксамоваяреакция.Гидроксамоваярекцияоснованананаличииβ-лактомногокольцавмолекулепенициллина.Привзаимодействиипинициллиновсощелочнымрастворомгидроксиламинагидрохлоридапроисходитреакциягидроксиламинолизасобразованиемгидроксамовойкислоты, котораяпослеподкисленияобразуетокрашенныекомплексныесолиссолямитяжелыхметаллов:
ссолямижелеза (Ш)фиолетовогоцветарастворгидроксаматажелеза (III)изеленогоцветаосадокгидроксаматамеди (II):Образованиепенилловойипенициленовойкислот, ихиспользованиеванализе. Поддействиемкислотпенициллиныинактивируютсясобразованиемпенилловой (прир
Н2,0)ипеницилленовой (прир
Н5,0)кислот.Вобоихслучаяхна1-мэтаперасщепляетсяβ-лактамныйциклсобразованиемпенициллоиновойкислоты.Затемпроисходитконденсациякарбоксильнойилиамиднойгруппысгидроксильнойгруппойацильногорадикала:
Реакциясреактивом
Марки.Пенициллинысреактивом
Марки (растворформалинавконцентрированнойсернойкислоте)
образуютокрашенныепродукты.Наиболеехарактернойэтареакцияявляетсядляфеноксиметилпенициллина (красноеокрашиваниеприкомнатнойтемпературеиуглублениеокраскипринагревании).Реакцияпротекаетзасчетфеноксиуксуснойкислоты, котораяобразуетсяизфеноксиметилпенициллинапридействииконцентрированнойсернойкислоты. Фенолсреактивом
Маркиобразуетауриновыйкрасителькрасногоцвета.Ампициллиниамоксициллинзасчетостаткааминокислотывацильнойчастимолекулыдаютреакциюснингидриномисолямимеди (II)(среактивом
Федингаилираствороммедисульфата).Испытанияначистоту.Пенициллинымогутлегкоизменятьсяполвлияниемвнешнихвоздействий, поэтомудлянихобязательнымявляетсяиспытаниенапрозрачностьицветность. Всепрепаратыоптическиактивны (правовращающие).УФ-спектрофотометрияиспользуетсядляопределенияпостороннихпримесей.Поглощениепри320нмобусловленообразованиемтиольнойформыпенициллоиновойкислоты.Цефалоспорины являются кислотами (за счет карбоксильной группы в 4-м положении); некоторые из них применяются в виде натриевых солей (цефадотин). Цефалексин обладает амфотерными свойствами: кроме карбоксильной группы, содержит основную группу. Общие химические свойства цефалексина и цефалотина обусловлены наличием в их составе молекул атома серы (способность к окислению) и β-лактамного кольца (гидроксамовая peaкция).Реакцию окисления проводят 80% раствором H2SО4, которая содержит 1% азотной кислоты. Цефалексин образует желтое окрашивание, цефалотина натриевая соль — зеленое, переходящее в красновато-коричневое.Гидроксамовая реакция проводится по методике для пенициллинов. Цефалотин, кроме того, дает гидроксамовуго реакцию и на сложноэфирную группу. Гидроксаматы железа (III) красно-фиолетового цвета
Цефалексин (как и ампициллин, амоксициллин) содержит в ацильной части молекулы остаток α-фениламиноуксусной кислоты и поэтому дает реакцию с нингидрином (вишневое окрашивание) и сульфатом меди после нейтрализации раствором гидроксида натрия (оливково-зеленое окрашивание).Водные растворы цефалоспоринов дают в УФ области характерную полосу поглощения с максимумом при длине волны около 260 нм.
4.3 Количественный анализ
Методыколичественногоопределения.Количественноеопределениепенициллиновпроводятйодометрическимметодом.Солибензилпенициллинарастворяютвводе, афеноксиметилпенициллин—вфосфатномбуфереср
Н7,0.Затемдобавляютрастворгидроксиданатрияиоставляютна20мин.Послещелочногогидролизаксмесиприбавляютсолянуюкислоту, растворацетатногобуфера (рН4,5)иизбыток0,01н.
растворайода.Оставляютна20минвтемномместеититруютизбыток0,01н.
растворайода0,01и.
растворомнатриятиосульфата.Параллельнопроводятконтрольныйопытстакимжеколичествомпрепарата, нобезщелочногогидролиза. Прищелочномгидролизепроисходитраскрытиеβ-лактамногокольцасобразованиемпенициллоиновойкислотывоткрытойтиольнойформе.Пенициллоиноваякислотаприр
Н4,5гидролизуетеявприсутствииокислителя (йод)
допенальдиновойкислотыипеницилламина, которыеокисляютсярастворомйодасоответственнодо дегидропенальдиновойипеницилламиновой кислоты. Природныепениииллины:
грамположительныеиграмотрицательныекокки (заисключениемпенициллиназообразующихштаммовэпидермальногоизолотистогостафилококков, энтерококков), палочки (листерии, дифтерийная, сибиреязвеннаяпалочки), спирохеты (бледнаяспирохета, лептоспиры, боррелии), спорообразующиеанаэробы (клостридии), споронеобразующиеанаэробы (пептострептококки, фузобактерии), актиномицеты. Полусинтетические пенициллины:
пенициллиназоустойчивыепенициллиныимеютспектрпротивомикробногодействия, аналогичныйтаковомуприродныхпенициллинов, атакжевоздействуютнапенициллиназообразующиестафилококки. Ампициллиниамоксициллинимеютаналогичныйприроднымпенициллинамспектрдействия, атакжедополнительновлияютнаэнтерококки, сальмонеллы, шигеллы, протей, кишечнуюпалочку, гемофильнуюпалочку. Карбенициллин, тикарциллин (карбоксипенициллины), азлоциллин, пиперациллин (уреидопенициллины)
дополнительнодействуютнабактероиды (ввысокойконцентрации)
инекоторыештаммысинегнойнойпалочки.Для количественного определения цефалоспоринов используют следующие методы:
Определение активности микробиологическим методом с тест-культурой Bacillus subtilis в сравнении со стандартными образцами препаратов. Йодометрический метод так же, как для солей бензил пенициллина, с применением ацетатного буфера рН 4,7. Цефалоспорины согласно Европейской фармакопее определяют методом жидкостной хроматографии. Заключение
В данной работе была достигнута цель данного исследования, которая заключалась в изучении современных аналитических подходов к выявлению фальсифицированных лекарственных препаратов группы противомикробных средств из класса антибиотиков бета-лактамидов.Были решены следующие задачи данного исследования:
1)изучена проблема фальсификации лекарственных средств. Рассмотрели виды фальсификации, факторы, которые способствуют фальсификации;
2)рассмотрен класс антибиотиков — бета-лактамиды: понятие, представители;
Бета-лактамные антибиотики представляет собой группу антибиотиков, которых объединяет наличие в структуре β-лактамного кольца. К бета-лактамам относятся подгруппы пенициллинов, цефалоспоринов, карбапенемов, монобактамов.
3) изучены современные аналитические методы выявления фальсифицированных лекарственных средств;
Наиболее важными методами анализа чистоты лекарственных субстанций и препаратов в фармацевтическом анализе являются высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) и газожидкостная хроматография (ГЖХ).К экспресс-методам, в основном относятся: простые качественные реакции (окраска, осадок), ТСХ: сравнение со свидетелем; ИК спектроскопия в области 4000−400 см-1 (сравнение со стандартным ИК спектром)
4) рассмотрены подходы к выявлению фальсифицированных лекарственных препаратовкласса антибиотиков бета-лактамидов. Изучили важные показатели упаковки и маркировки, потому что именно здесь обычно наблюдаются несоответствия упаковку, маркировку. Рассмотрели методы качественного и количественного анализа.
Список литературы
Арзамасцев А.П. «Фармацевтическая химия», Москва, «Гэотра-Мед», 2004 г. Арзамасцев А. П., Дорофеев В. Л. Выявления фальсифицированных лекарственных средств с использованием современных аналитических методов// Химико-фармацевтический журнал, т.38, 2004. № 3.Арзамасцев А. П. Экспресс-анализ с целью выявления фальсифицированных лекарственных средств. Практическое руководство. М.: 2003
Арзамасцев А. П. Анализ лекарственных веществ из группы беталактамидов и аминогликозидов. М.: ММА, 2003
Беликов В.Г. «Фармацевтическая химия», Москва, Мед
Пресс-Информ, 2007 г. Государственная фармакопея СССР — 10 изд. — М: Медицина, 1968 г. Государственная фармакопея СССР- 11изд, Вып 2, 1989 г. Государственная фармакопея РФ — 12 изд., вып.
1, 2007 г. Максимов С. В. «Фальсификация лекарственных средств в России», Юрайт, 2008 г. Ушкалова Е. А. Проблема фальсификации лекарственных средств: фокус на антимикробные препараты // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. т. 7. 2005. № 2.
