Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Гемоглобин как индикатор реакционной способности доноров NO и редуктаза в модельных NO-генерирующих системах in vitro

Диссертация: Гемоглобин как индикатор реакционной способности доноров NO и редуктаза в модельных NO-генерирующих системах in vitro
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Далее нитрит-ион превращается в N0 путём реакции с восстановителями, например, различными гемсодержащими белками, ксантиноксидоредукта-зой, а также тиол-содержащими ферментами. Недавно была показана нитрит-редуктазная активность гемоглобина — белка, выполняющего функцию переноса кислорода. При этом максимальная скорость взаимодействия его с нитритом наблюдается в условиях гипоксии — при 50%-ном… Читать ещё >

Гемоглобин как индикатор реакционной способности доноров NO и редуктаза в модельных NO-генерирующих системах in vitro (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Актуальность работы
  • Цели и задачи работы
  • Научная новизна
  • Научно-практическая значимость исследования
  • Личный вклад автора
  • Апробация работы
  • Публикации
  • Структура и объём диссертации
  • Краткое содержание глав диссертации
  • Список принятых сокращений
  • ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
    • 1. 1. Монооксид азота
      • 1. 1. 1. Биосинтез монооксида азота
      • 1. 1. 2. Биологические эффекты монооксида азота
      • 1. 1. 3. Методы определения монооксида азота
      • 1. 1. 4. Доноры монооксида азота
    • 1. 2. Органические нитраты
      • 1. 2. 1. Пути биотрансформации органических нитратов
      • 1. 2. 2. Абсолютная необходимость тиолов и толерантность
    • 1. 3. Гемоглобин
      • 1. 3. 1. Структура и свойства гемоглобина
      • 1. 3. 2. Конформационные состояния гемоглобина
      • 1. 3. 3. Взаимодействие гемоглобина с GTN
      • 1. 3. 4. Свойства гемоглобина как нитритредуктазы
      • 1. 3. 5. Диоксигенация и нитрозилирование гемоглобина
      • 1. 3. 6. Гипотеза сохранения активности монооксида азота в организме через образование S-нитрозогемоглобина
  • ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
  • ГЛАВА 3. ГЕМОГЛОБИН КАК ИНДИКАТОР РЕАКЦИОННОЙ СПОСОБНОСТИ ДОНОРОВ N
    • 3. 1. Разработка методики определения монооксида азота
    • 3. 2. Использование гемоглобина в качестве индикатора NO-донорной способности железонитрозильных комплексов в протонных средах
  • ГЛАВА 4. ГЕМОГЛОБИН КАК РЕДУКТАЗА В РЕАКЦИЯХ С ОРГАНИЧЕСКИМИ НИТРАТАМИ
    • 4. 1. Кинетика образования нитрит-иона в системе «нитратвосстановитель»
    • 4. 2. Кинетика образования монооксида азота в системе «нитрат-цистеин-гемоглобин»
  • ВЫВОДЫ

Многообразие биологических эффектов монооксида азота (N0) можно разделить на три типа: регуляторное, защитное и повреждающее. Уникальные свойства N0 проявляются во всех аспектах функционирования живого организма — от регулирования нейротрансмиссии и иммунитета до ингибирования агрегации тромбоцитов и их адгезии на стенках кровеносных сосудов. Эти свойства стали предметом интересов многих ученых и породили огромную волну исследований в биологии и химии монооксида азота.

Данные о многофункциональной биологической активности NO in vivo используются при разработке фундаментальных основ создания нового поколения лекарственных препаратов, в первую очередь применяемых в терапии сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний. Практически все используемые в медицине препараты такого спектра действия (к ним не относятся, например, NO-стимуляторы) представляют собой экзогенные источники или доноры N0, из которых монооксид азота может высвобождаться по механизмам различных типов.

Ярким предметом регуляторного действия N0 является его вазодилата-торная активность. Сосудорасширяющее действие N0 связано с активацией растворимой формы фермента гуанилатциклазы. Как и все остальные физиологические эффекты N0, вазодилатация проявляется при очень низких, почти исчезающих концентрациях монооксида азота. А его чрезвычайно высокая ре-акционоспособность (время полужизни 2−5 с in vivo), затрудняет его определение. Обычно для детектирования N0 используются три основных метода: электрохимический, люминесцентный и метод ЭПР. Все они относятся к методам прямого определения N0. Но у каждого из них есть свои недостатки, не позволяющие применять их в кинетических исследованиях. Кроме этих трех, существует еще множество косвенных методов, но все они в основном обладают низкой чувствительностью. Их применение сопряжено со сложной про-боподготовкой и с большим числом мешающих компонентов.

Органические нитраты — это наиболее известный класс вазодилататоров.

— представляют собой экзогенные доноры N0. В процессе биотрансформации нитроэфиры в результате восстановления образуют N02 а затем N0. Образование нитрит-иона из органических нитратов может происходить под действием восстановителей, например тиолов. Интересен тот факт, что в отсутствие или при истощении запасов внутриклеточных тиолов наблюдается толерантность — снижение эффективности действия при повторных применениях. Кроме того, скорость образования нитрит-иона из нитратов под действием цис-теина коррелирует с их вазодилататорной активностью. Помимо этого факта накоплен большой материал, свидетельствующий о том, что NO2 присутствующий в крови в концентрации 3-Ю" 7 моль-л" 1, представляет собой самую большую форму хранения N0 в организме.

Далее нитрит-ион превращается в N0 путём реакции с восстановителями, например, различными гемсодержащими белками, ксантиноксидоредукта-зой, а также тиол-содержащими ферментами. Недавно была показана нитрит-редуктазная активность гемоглобина — белка, выполняющего функцию переноса кислорода. При этом максимальная скорость взаимодействия его с нитритом наблюдается в условиях гипоксии — при 50%-ном насыщении кислородом. Без сомнения гемоглобин является самым распространенным восстановителем нитрита, поскольку его концентрация (свободного и эритроцитарного) составляет ~ 12−10″ 3 моль-л" 1.

В отличие от органических нитратов и других синтетических N0-доноров (органических и неорганических) нитрозильные железосерные комплексы генерируют N0 без применения дополнительных активаторов — в результате гидролиза в протонной среде. Кроме того, что эти соединения могут выступать в роли «депо» эндогенного и экзогенного N0 (за счет реакций транснитрозилирования), они также являются удобным инструментом для исследований. В реакциях с НЬ эти соединения образуют нитрозилированный по железу комплекс HbNO, устойчивость которого зависит от концентрации кислорода in vivo.

Как становится ясно, роль гемоглобина в организме не ограничивается только функцией переноса кислорода. В последнее десятилетие активно разрабатывается гипотеза, что гемоглобин в составе эритроцитов является одним из важнейших элементов системы биологической трансформации доноров N0 и транспортировки N0 внутри организма. Но это предположение остается до конца не выясненным, оставляя поле деятельности для будущих исследований.

Актуальность работы.

Известно, что монооксид азота (N0) является уникальным биологическим регулятором. В первую очередь его функции связаны с регуляцией тонуса кровеносных сосудов. Определяющей стадией механизма действия N0 в этом процессе является координация с гемом гуанилатциклазы. Основная форма хранения монооксида азота в организме — нитрит-ион (N02~). Нитрит-редуктазная активность гемоглобина делает его самым распространенным восстановителем нитрита в организме (животных и человека). Метаболизм N0 также в значительной мере связан с образованием нитрозилированного по железу комплекса HbNO.

Понимание биохимии монооксида азота позволит прояснить механизмы действия различных лекарственных средств и облегчит возросший в последние годы поиск новых эффективных кардиопрепаратов.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Института проблем химической физики РАН при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проект № 06−03−32 381а), Программы фундаментальных исследований ОХНМ РАН «Биомолекулярная и медицинская химия» и Программы Президента РФ по поддержке Ведущих научных школ (грант НШ-4525.2006.3).

Цели и задачи работы.

Основной целью данной работы было исследование возможности участия гемоглобина в восстановлении органических нитратов в условиях, близких к физиологическим, а также изучение возможности его использования как индикатора реакционной способности NO-доноров. Для этого было необходимо разработать методику исследования кинетики образования N0, которая была бы универсальной для всех изучаемых соединений. Работа проводилась с двумя классами NO-доноров, для которых осуществлялось:

1. изучение условий, в которых генерируется монооксид азота;

2. исследование кинетики образования N0, расчет констант скоростей элементарных стадий;

3. сравнение эффективности NO-донирования изучаемыми соединениями.

В связи с этим были поставлены следующие задачи:

1. Разработать универсальную методику изучения кинетики образования монооксида азота.

2. Исследовать NO-донорную способность новых железосерных нитро-зильных комплексов в протонных средах.

3. Изучить кинетику образования нитрит-иона в системе «органический нитрат — цистеин (Cys)» и разработать метод оценки потенциальной вазодила-таторной активности органических нитратов.

4. Исследовать возможность участия гемоглобина в восстановлении органических нитратов в присутствии тиолов. Определить константы всех изучаемых реакций.

Научная новизна.

Разработана оригинальная методика исследования кинетики реакций, протекающих с образованием монооксида азота. Методика реализована с применением численных методов декомпозиции суммарных спектров поглощения НЬ и HbNO на индивидуальные составляющие. Разработанная методика была проверена на новых соединениях различных классов NO-доноров, способных выделять N0 самопроизвольно. Более того, с ее помощью удалось не только определить константы выделения N0, сравнив их с константами известных представителей данного класса, но и показать, что процесс выделения N0 может быть ассоциативным. Показано, что гемоглобин при больших концентрациях может влиять на процесс NO-донирования этими комплексами, стабилизируя их. Для NO-доноров, принадлежащих к классу органических нитратов, изучена тройная система «нитрат-цистеин-гемоглобин» на примере 3,3-бис (нитроксиметил)оксетана (NMO). Обнаружено взаимодействие гемоглобина с интермедиатом реакции цистеина и органического нитрата — тионитратом цистеина. Это взаимодействие приводит к образованию монооксида азота, что имеет большое значение для метаболизма органических нитратов.

Научно-практическая значимость исследования.

Разработанная методика может выступать в роли универсального инструмента в биохимии монооксида азота. Это позволит оценивать потенциальную вазодилататорную активность новых синтезированных препаратов еще на ранних стадиях исследований. Большой интерес полученные результаты представляют для исследователей, занимающихся вопросами биохимии монооксида азота, биотрансформации органических нитратов и проблемами толерантности.

Личный вклад автора.

Автором была разработана и успешно применена в исследованиях методика регистрации кинетики образования монооксида азота. Также в работе представлены результаты исследований, выполненных лично автором по ряду научно-исследовательских проектов, связанных с изучением различных классов NO-доноров. Автор непосредственно участвовал в обосновании и постановке основной части экспериментов, в их проведении и в обобщении результатов исследований. Математическое моделирование и расчет констант реакций в системе «NMO-Cys-НЬ» проведены к.ф.-м.н. Психой Б.Л.

Апробация работы.

Результаты исследований докладывались и обсуждались на Всероссийских и Международных симпозиумах и конференциях: Всероссийский симпозиум «Современная химическая физика» (Туапсе, 2004 и 2006) — Международная конференция «Биотехнологии: состояние и перспективы развития» (Москва, 2005) — Национальная научно-практическая конференция с международным участием «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека» (Смоленск, 2005) — Международная школа-конференция «Юность. Наука. Культура. — Физхимия» (Обнинск, 2005) — Всероссийская конференция-школа «Высокореакционные интермедиаты химических реакций» (Юность, 2006) — Международная конференция им. Воеводского В. В. «Physics and chemistry of elementary chemical processes» (Черноголовка, 2007), a также на научных семинарах и конкурсах научных работ в ИПХФ РАН.

Публикации.

По результатам работы опубликовано 9 тезисов докладов и 4 статьи.

Тезисы:

1. Малкова Е. С., Сырцова JI.A., Котельников А. И., Королев A.M. Новые свойства миоглобина как фермента. XVI Всероссийский Симпозиум «Современная химическая физика», Туапсе, 20 Сентября — 1 Октября, 2004, Тезисы докладов, Стр. 184−185.

2. Malkova E.S., Shkondina N.I., Syrtsova L.A., Sanina N.A., Rudneva T.N., Al-doshin S.M., Kotelnikov A.I. Use of myoglobin and hemoglobin for search of effec-, tive medical preparations. Third Moscow International congress «Biotechnology: state of the art and prospects of development» March 14−18, 2005, Congress Proceedings. Part 1. p. 135.

3. Котельников А. И., Санина H.A., Сырцова JI.A., Руднева Т. Н., Малкова Е. С., Алдошин С. М. Реакции органических и неорганических доноров монооксида азота с гемоглобином: кинетика образования HbNO. 4-ая национальная научно-практическая конференция с международным участием «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека» Смоленск, Сентябрь 26−30,2005, Сборник трудов, Стр. 47−48.

4. Малкова Е. С., Сырцова JI.A., Шкондина Н. И., Котельников А. И. Изучение NO — донирующей способности органических нитроэфиров в новой модельной системе. Международная школа-конференция «Юность. Наука. Культура. -Физхимия» Обнинск, Декабрь 5−7,2005, Тезисы докладов, 183−185.

5. Сырцова JI.A., Малкова Е. С., Психа Б. Л., Шкондина Н. И., Котельников А. И. Восстановление нитроэфиров — доноров N0 гемоглобином с участием цистеина через интермедиат нитритотиол. 1-ая Всероссийская конференция-школа «Высокореакционные интермедиаты химических реакций» Юность, Апрель, 9−12,2006, Тезисы докладов. Стр. 40.

6. Малкова Е. С., Сырцова JI.A., Шкондина Н. И., Котельников А. И. Модельные системы для подбора лекарственных препаратов на основе органических нитроэфиров. Альманах клинической медицины. Т. XII. II Троицкая конференция «Медицинская физика и инновации в медицине» Май 16−19, 2006, Стр. 121.

7. Шкондина Н. И., Санина Н. А., Сырцова Л. А., Малкова Е. С., Котельников А. И., Алдошин С. М. Гемоглобин как ловушка NO в реакциях гидролиза нит-розильных [IFe-S] И [2Fe-2S]-KOMroieKCOB. XVIII Всероссийский симпозиум «Современная химическая физика» Туапсе, Сентябрь 22−30, 2006, Тезисы докладов, с. 283.

8. Малкова Е. С., Психа Б. Л., Сырцова Л. А., Шкондина Н. И., Котельников А. И. Механизм реакции между органическими нитратами и сульфгидрильны-ми соединениями. XVIII Всероссийский симпозиум «Современная химическая физика» Туапсе, Сентябрь 22−30,2006, Тезисы докладов, с. 275.

9. Syrtsova L.A., Kotelnikov A.I., Psikha B.L., Malkova E.S., Shkondina N.I., Gainullina E.I. Kinetic modeling of reaction of nitroesters biotransformation with participation of hemoglobin. VII Voevodsky conference «Physics and chemistry of elementary chemical processes» Chernogolovka, June 24−28, 2007, Book of abstracts, p. 278−279.

Статьи:

1. Sanina N.A., Syrtsova L.A., Shkondina N.I., Rudneva T.N., Malkova E.S., Ba-zanov T.A., Kotelnikov A.I., Aldoshin S.M. Reaction of sulfur-nitrosyl iron complexes of «g=2,03» family with hemoglobin (Hb): Kinetics of Hb-NO formation in aqueous solutions I I Nitric Oxide: Biology and Chemistry, 2007, Vol. 16, No. 2, pp: 181−188.

2. Сырцова JI.A., Психа Б. Л., Малкова E.C., Шкондина Н. И., Котельников А. И. Экспресс-метод оценки потенциальной вазодилататорной активности органических нитратов «Прикладная биохимия и микробиология», том 43, № 3, 2007, с. 354−357.

3. Сырцова Л. А., А. И. Котельников, Б. Л. Психа, Е. С. Малкова, Н. И. Шкондина, Е. И. Гайнуллина Восстановление нитроэфиров — доноров N0 — гемоглобином с участием цистеина. Известия Академии наук, Серия химическая, 2007, № 4, с. 725−731.

4. Санина Н. А., Сырцова Л. А., Шкондина Н. И., Малкова Е. С., Котельников А. И., Алдошин С. М. Стабилизация гемоглобином тетранитрозильного биядер-ного комплекса железа с пиридин-2-тиолом в водных растворах. Известия Академии наук, Серия химическая, 2007, № 4, с. 732−736.

Структура и объём диссертации.

Диссертация изложена на 106-ти страницах, включает введение, литературный обзор, экспериментальную часть, результаты и обсуждения, выводы и список использованной литературы (121 наименование). В качестве иллюстраций использовано 22 рисунка, 6 таблиц и 8 схем.

выводы.

1. Разработана оригинальная методика изучения кинетики реакций, протекающих с образованием монооксида азота, основанная на регистрации спектра поглощения HbNO.

2. Показано, что все изученные сера-нитрозильные комплексы железа являются N0-донорами, выделяющими монооксид азота безактивационно в протонной среде. Определены константы скоростей распада семи новых железо-нитрозильных комплексов с выделением N0. Проведено сравнение с известными представителями класса железонитрозильных комплексов и NONOaroM. Установлено, что эффективные константы скоростей реакций псевдопервого порядка составляют (4.5−8.9)-103 с'1, что на два порядка выше, чем у N0-доноров сравнения. Показано, что при больших концентрациях гемоглобин может стабилизировать комплексы, замедляя процесс гидролиза.

3. Проведено сравнение природных восстановителей — цистеина, глутатио-на, аскорбата и NADH по скорости образования ими нитрит-иона из органического нитрата на примере NMO. Установлено, что лучшим восстановителем является цистеин.

4. Исследована кинетика образования N02~ из органических нитратов на примере NMO. Установлено, что реакция проходит в две стадии через интер-медиат тионитрат цистеина. Определены константы скоростей обеих стадий,.

Л | |.

3.3 ± 0.3 и (9.8 ± 1.6)-10″ моль-л" с", соответственно. Показано, что восстановителем является тиолат-ион цистеина. Сделан вывод о том, что снижение активности в ряду GTN > MPDD > NMO > DMPD > DIBD > NKR связано с количеством нитрогрупп и пространственной структурой молекулы.

5. Определены константы скорости взаимодействия гемоглобина с нитрит-ионом и метгемоглобина с цистеином. Обнаружена новая редуктазная активность НЬ, проявляющаяся в отношении тионитрата цистеина — промежуточного продукта реакции NMO и цистеина. Путем моделирования кинетики реакции системой уравнений, описывающей равновесие между всеми реагирующими компонентами системы, определены константы всех протекающих процессов.

Показать весь текст

Список литературы

  1. А.Ф. Оксид азота регулятор клеточного метаболизма // Соро-совский образовательный журнал, 2001, том 7, № 11, стр.7−12.
  2. Artz J.D., Yang K., Lock J., Sanchez C., Bennett B.M., Thatcher G.R.J. Reactivity of thionitrate esters: putative intermediates in nitro vasodilator activity // Journal of Chemical Communication, 1996, Vol. 73, pp: 927−928.
  3. K.H. Оксид азота (II): новые возможности давно известной молекулы // Соросовский образовательный журнал, 1997, № 10- стр.105−110.
  4. А. Основы биохимии. М.: Мир, 1985, стр. 590.
  5. А.А. Оксид азота как межклеточный посредник // Соросв-ский образовательный журнал, 2000, Том 6, № 12, стр: 27−34.
  6. Williams D.L.H. A chemist’s view of the nitric oxide story // Organic and biomolecular chemistry, 2003, Vol. 1, No. 13, pp: 441−449.
  7. Kuhn L.P. The Ionization of Ethyl Nitrate in Sulfuric Acid I I Journal of the American Chemical Society, 1947, Vol. 69, No. 8,1974−176.
  8. Я., Рём К.Г. Наглядная биохимия М., «Мир», 2000, стр. 347.
  9. В.Г., Григорьев Н. Б. Оксид азота (N0). Новый путь к поиску лекарств. Вузовская книга, М., 2004, стр. 59.
  10. Michel Т., Li G.K., Busconi L. Phosphorylation and Subcellular Translocation of Endothelial Nitric Oxide Synthase // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 1993, Vol. 90, No. 13, pp: 6252−6256
  11. Balbatun A., Louka F. R., Malinski T. Dynamics of nitric oxide release in the cardiovascular system // Acta biochimica polonica, 2003, Vol. 50, No. 1- pp: 6168.
  12. Wang P.G., Cai T.B., Taniguchi N. (Eds.) — Nitric Oxide Donors, WILEY-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, Weinheim, 2005,360 p., Germany.
  13. Yao D., Vlessidis A.G., Evmiridis N.P. Determination of nitric oxide in biological samples // Microchimica Acta, 2004, Vol. 147, No 1−2, pp: 1−20.
  14. Bedioui F., Villeneuve N. Electrochemical nitric oxide sensors for biological samples-principle, selected examples and applications // Electroanalysis, 2003, Vol. 15, pp: 5−18 *
  15. Fan C., Li G., Zhub J., Zhua D. A reagentless nitric oxide biosensor based on hemoglobin-DNA films // Analytica Chimica Acta, 2000, Vol. 423, pp: 95−100.
  16. Mitchell K.M., Michaelis E.K. Multimembrane Carbon Fiber Electrodes for Physiological Measurements of Nitric Oxide // Electroanalysis, 1998, Vol. 10, No 2, pp: 81−88.
  17. McMurtry M.S., Kim D.H., Dinh-Xuan Т., Archer S.L. Measurement of nitric oxide, nitrite and nitrate using a chemiluminescence assay: an update for the year 2000II Analysis, 2000, Vol. 28, pp: 455−465.
  18. Kang D., Vlessidis A.G., Evmiridis N.P. Dialysis membrane sampler for on-line flow injection analysis, chemiluminescence-detection of peroxynitrite in biological samples // Talanta, 2003, Vol. 59, pp: 55−65.
  19. Vanin A.F., Van Faassen E. (eds) Radicals for Life: The Various Forms of Nitric Oxide p. 1., Elsevier, Amsterdam 2007, p. 56.
  20. Mordvintcev P., Mtilsch A., Busse R., Vanin A. On-line detection of nitric oxide formation in liquid aqueous phase by electron paramagnetic resonance spectroscopy // Analytical Biochemistry, 1991, Vol. 199, No. 1, pp:142−146.
  21. Mikoian V.D., Kubrina L.N., Khachatrian G.N., Vanin A.F. Protonation of nitrite is an obligatory stage in the generation of nitric oxide from nitrite in biological systems // Biofizika, 2006, Vol. 51, No. 6, pp:968−975.
  22. Kubrina L.N., Caldwell W.S., Mordvintcev P.I., Malenkova I.V., Vanin A.F. EPR evidence for nitric oxide production from guanidino nitrogens of L-arginine in animal tissues in vivo II Biochimica et biophysica acta, 1992, Vol. 1099, No. 3, pp: 233−237.
  23. Kalyanaraman В., Detection of nitric oxide by electron spin resonance in chemical, photochemical, cellular, physiological, and pathophysiological systems // Methods in Enzymology, 1996, Vol. 268, pp: 168−187.
  24. В.Ф., Волынец М. П., Аналитическая химия азота, Наука, М., 1979, стр. 93.
  25. Miles A.M., Wink D.A., Cook J.C., Grisham M.B. Determination of nitric oxide using fluorescence spectroscopy // Methods of Enzymology, 1996, Vol. 268, 105−120.
  26. Химическая энциклопедия в пяти томах под. ред. Кнунянц И. Л., М. 1992, «Большая российская энциклопедия», том 2, стр. 613.
  27. Chen Z., Zhang J., Stamler J.S. Identification of the enzymatic mechanism of nitroglycerin bioactivation // Proceedings of the National Academy of Sciences of the U.S.A., 2002, Vol. 99, No. 12, pp: 8306−8311.
  28. Fiorucci S., Antonelli E., Burgaud J.L., Morelli A. Nitric Oxide-Releasing NSAIDs: a Review of There Current Status // Drug Safety, 2001, Vol. 24, No. 11, pp: 801−811.
  29. Fukuhara K., Kurihara M., Miyata N. Photochemical Generation of Nitric Oxide from 6-Nitrobenzoa.pyrene // Journal of the American Chemical Society, 2001, Vol. 123, No. 36, pp: 8662−8666.
  30. Feelisch M. The use of nitric oxide donors in pharmacological studies // Naunyn-Schmiedeberg's Arch Pharmacol, 1998, Vol. 358, pp: 113−122.
  31. Kowaluk E.A., Seth P., Fung H.L. Metabolic activation of sodium nitro-prusside to nitric oxide in vascular smooth muscle // The journal of pharmacology and experimental therapeutics, 1992,262, No. 3, pp: 916−922.
  32. Boese M., Mordvintcev P.I., Vanin A.F., Busse R., Miilsch A. S-nitrosation of serum albumin by dinitrosyl-iron complex // The Journal of Biological Chemistry, 1995, Vol. 270, No. 49, pp: 29 244−29 249.
  33. Gaston В., Reilly J., Drazen J.M., Fackler J., Ramdev P., Arnelle D., Mul-lins M.E., Sugarbaker D.J., Chee C., Singel D.J., Loscalzo J., Stamler J.S. Endogenous nitrogen oxides and bronchodilator S-nitrosothiols in human airways //
  34. Proceedings of the National Academy of Sciences of the U.S.A., 1993, Vol. 90, No. 23, pp: 10 957−10 961.
  35. Barnett J., Rios A., Williams D.L.H. NO-group transfer (transnitrosation) between S-nitrosothiols and thiols. Part 2. // Journal of Chemical Society. Perkin Trans., 1995, Vol. 2, pp: 1279−1282.
  36. Anthony A.R., Rhodes P. Chemistry, analysis, and biological roles of S-nitrosothiols II Analytical Biochemistry, 1997,249, No l, pp: 1−9.
  37. Doyle M.P., Pickering R.A., Conceicao J. Structural Effects in Alkyl Nitrite Oxidation of Human Hemoglobin // The Journal of Biological Chemistry, 1984, Vol. 259, No. 1, pp: 80−87.
  38. Doyle M.P., Pickering R.A., DeWeert T.M., Hoekstra J.W., Pater D. Kinetics and mechanism of the oxidation of human deoxyhemoglobin by nitrites // The Journal of Biological Chemistry, Vol. 256., No. 23, 1981, pp: 12 393−12 398.
  39. Williams D.L.H. Nitrosation Book Review., Cambrige university press, England, 1988, pp: 201−206.
  40. Yeates R.A., Laufen H., Leitold M. The reaction between Organic Nitrates and Sulfhydryl Compounds. A Possible Model System for the Activation of Organic Nitrates // Molecular Pharmacology, 1985, Vol. 28, pp: 555−559.
  41. Laustiola K., Vuorinen P., Vapaatalo H., Metsa-Ketela T. Effects of cysteine and nitroglycerin on bovine heart guanylate cyclase and on tissue cyclic GMP and lactate of rat atria // European Journal of Pharmacology, 1983, Vol. 91, No. 23, pp:301−304.
  42. Thatcher G.R.J., Weldon H. NO problem for nitroglycerin: organic nitrite chemistry and therapy // Chemical Society Reviews, 1998, Vol. 27, pp: 331−337.
  43. Mukerjee N., Pietruszko R. Inactivation of human aldehyde dehydrogenase by isosorbide dinitrate // The Journal of Biological Chemistry, 1994, Vol. 269, No. 34, pp: 21 664−21 669.
  44. Vallari R.C., Pietruszko R. Human aldehyde dehydrogenase: mechanism of inhibition of disulfiram // Science, 1982, Vol. 216, No. 4546, pp: 637−639.
  45. DeMaster E.G., Redfern В., Nagasawa H.T. Mechanisms of Inhibition of Aldehyde Dehydrogenase by Nitroxyl, the Active Metabolite of the Alcohol Deterrent Agent Cyanamide // Biochemical Pharmacology, 1998, Vol. 55, No. 12, pp: 2007−2015.
  46. Sakai K., Akima M., Saito K., Saitoh M., Matsubara, S. Nicorandil Metabolism in Rat Myocardial Mitochondria // Journal of Cardiovascular Pharmacology, 2000, Vol. 35, No. 5, pp: 723−728.
  47. В.Г., Григорьев Н. Б. Оксид азота (NO). Новый путь к поиску лекарств. Вузовская книга, М., 2004, стр. 95.
  48. Artz J.D., Toader V., Zavorin S.I., Bennett B.M. Thatcher G.R. In vitro activation of soluble guanylyl cyclase and nitric oxide release: a comparison of NO donors and NO mimetics // Biochemistry, 2001, Vol. 40, No. 31, pp: 9256−9264.
  49. Noack E. Investigation on structure-activity relationship in organic nitrates // Methods and findings in experimental and clinical pharmacology, 1984, Vol. 6, No. 10, pp: 583−586.
  50. Bennett B.M., Nakatsu K., Brein J.F., Marks G.S. Biotransformation of glyceryl trinitrate by human hemoglobin // Canadian Journal of Physiology and Pharmacology, 1984, Vol. 62, No. 6, pp: 704−706.
  51. А.Ф., Петрова Н. Э. Гемоглобины: эволюция, распространение и гетерогенность // Успехи биологической химии, 2001, т. 41, стр: 199−288.
  52. JI.A. Гемоглобин // Соросовский образовательный журнал, 1998, № 4,33−38.
  53. Wyman J.Jr. Linked functions of reciprocal effects in hemoglobin: a second look II Advances in Protein Chemistry, 1964, Vol. 19, pp: 224 286.
  54. А. Основы биохимии. М.: Мир, 1985, стр. 188.
  55. Antonini Е., Brunori М. Hemoglobin and myoglobin in the reactions with ligands, in. Neuberger A, Tatum E.L. (Eds.) // North-Holland research monographs. Fronties of biology. North-Holland Publishing company, Amsterdam-London. 1971, Vol. 21, P. 276.
  56. Roche C.J., Dantsker D., Samuni U., Friedman J.M. Nitrite reduktase activity of Sol-Gel-encapsulated deoxyhemoglobin // The journal of biological chemistry, 2006, Vol. 281, No. 48, pp: 36 874−36 882.
  57. Perutz M.F., Kilmartin J.V., Nagai K., Szabo A., Simon S.R. Influence of Globin Structures on the State of the Heme: Ferrous Low Spin Derivatives // Biochemistry, 1976, Vol. 15, No. 2, pp: 378−387.
  58. Perutz M.F., Ladner J.E., Simon S.R., Ho C. Influence of Globin Structure on the State of the Heme: Human Deoxyhemoglobin // Biochemistry, 1974, Vol. 13, No. 10, pp: 2163−2173.
  59. Starke D.W., Blisard K.S., Mieyal J.J. Substrate specificity of the monooxygenase activity of hemoglobin // Molecular Pharmacology, 1984, Vol. 25, No. 3, pp: 467−475.
  60. Noonan P.K., Benet L.Z. Formation of mono- and dinitrate metabolites of nitroglycerin following incubation with human blood // Archives of Biochemistry and Biophysics, 1958, Vol. 77, No. 2, pp: 478−492.
  61. Clark D.G., Litchfield M.H. Role of inorganic nitrite in methaemoglobin formation after nitrate ester administration to the rat // British Journal of Pharmacology, 1973, Vol. 48, No. 1, pp: 162−168.
  62. Keen J.H., Habig W.H., Jakoby W. B. Mechanism for the several activities of the glutathione S-transferases // The Journal of Biological Chemistry, 1976, Vol. 251, pp: 6183−6188.
  63. Mittal C.K., Arnold W.P., Murad F. Characterization of protein inhibitors of guanylate cyclase activation from rat-heart and bovine lung // Journal of Biological Chemistry, 1978- Vol. 253, No. 4, pp: 1266 -1271.
  64. Tsikas D., Frolich J.C. Is circulating nitrite a directly acting vasodilator? // Clinical Science, 2002, Vol. 103, part 1, pp: 107−108.
  65. Meier R. Studien uber methamoglobinbildung. VII. Nitrit. Arch. Exp. Path. Pharmakol., 1925, Vol. 110, pp: 241−264.
  66. Kiese M. The biochemical production of ferrihemoglobin-forming derivatives from aromatic amines and mechanisms of ferrihemogiobin formation // Pharmacological Reviews, 1966, Vol. 18, No. 3, pp: 1091−1161.
  67. Mansouri A. Oxidation of human hemoglobin by sodium nitrite-Effect of p-93 thiol groups // Biochemical and Biophysical Research Communications, 1979, Vol. 89, No. 2, pp: 441−447.
  68. Brooks J. The action of nitrite on haemoglobin in the absence of oxygen // Proceedings of the Royal Society of London. Series B, Biological Sciences, 1937, Vol. 123, No. 832, pp: 368−382.
  69. Kosaka H., Tyuma I. Mechanism of Autocatalytic Oxidation of Oxyhemoglobin by Nitrite // Environmental Health Perspectives, 1987, Vol. 73, pp: 147−151.
  70. Huang Z., Louderback J.G., Goyal M., Azizi F., King S.B., Kim-Shapiro D.B. Nitric oxide binding to oxygenated hemoglobin under physiological conditions // Biochimica et Biophysica Acta, 2001, Vol. 1568, No. 3, pp: 252−260.
  71. Dejam A., Hunter C.J., Pelletier M.M., Hsu L.L., Machado R.F., Shiva S., Power G.G., Kelm M., Gladwin M.T., Schechter A.N. Erythrocytes are the major intravascular storage sites of nitrite in human blood // Blood, 2005, Vol. 106, No 2, pp: 734−739.
  72. Gladwin M.T., Crawford J.H., Patel R.P. The biochemistry of nitric oxide, nitrite, and hemoglobin: role in blood flow regulation review. // Free Radical Bioogy and Medicine, 2004, Vol. 36, No. 6, pp: 707−717.
  73. Tocheva E.I., Rosell F.I., Mauk A.G., Murphy M. E, Side-on copper-nitrosyl coordination by nitrite reductase // Science, 2004, Vol. 304, No. 5672, pp: 867−870.
  74. Gladwin M.T., Schechter A.N., Kim-Shapiro D.B. et al. The emerging biology of nitrite anion // Nature Chemical Biology, 2005, Vol. 1, pp: 308−314.
  75. Kim-Shapiro D.B., Schechter A.N., Gladwin M.T. Unraveling the Reactions of Nitric Oxide, Nitrite, and Hemoglobin in Physiology and Therapeutics! I Arteriosclerosis, Thrombosis and Vascular Biology, 2006, Vol. 26, No. 4, pp: 697−705.
  76. Liu X.P., Miller M.J.S., Joshi M.S., Sadowska-Krowicka H., Clark D.A., Lancaster J.R. Diffusion-limited reaction of free nitric oxide with erythrocytes // The Journal of Biological Chemistry, 1998, Vol. 273, No. 30, pp:18 709−18 713.
  77. Moore E.G., Gibson Q.H. Cooperativity in dissociation of nitric-oxide from hemoglobin // The Journal of Biological Chemistry, 1976, Vol. 251, No. 9, pp: 2788 -2794.
  78. Stamler J.S., Jia L., Eu J.P., McMahon T.J., Demchenko I.T., Bonaventura J., Gernert K., Piantadosi C.A. Blood flow regulation by S-nitrosohemoglobin in the physiological oxygen gradient // Science, 1997, Vol. 276, No. 5321, pp:2034 -2037.
  79. K.B. Каким образом электрон движется по белку // Соросов-ский образовательный журнал, 1999, № 3, стр: 55−62.
  80. Winterbourn С.С., Carrell R.W. Oxidation of human haemoglobin by copper. Mechanism and suggested role of the thiol group of residue beta-93 // The Biochemical Journal, 1977, Vol. 165, No. 1, pp: 141−148.
  81. Kharitonov V.G., Sundquist A.R., Sharma V.S. Kinetics of Nitrosation’of Thiols by Nitric Oxide in the Presence of Oxygen // The Journal of Biological Chemistry, 1995, Vol. 270, No. 47, pp: 28 158−28 164.
  82. H.A., Алдошин C.M. Синетез, строение и свойства моделей нитрозильных 2Fe-2S., [lFe-2S] протеинов и перспективы применения их в биологии и медицине // Российский химический журнал, 2004, Том 48, № 4, стр: 12−19.
  83. Н.А., Филипенко О. С., Алдошин С. М., Ованесян Н. С. // Известия Академии Наук. Серия химическая, 2000, Том 49, № 6, стр: 1115−1118.
  84. О.А., Санина Н. А., Шилов Г. В., Шульга Ю. М., Мартыненко В. М., Ованесян Н. С. Алдошин С.М. Новый NO-донор: синтез, структура и некоторые свойства комплекса Fe2(n.-SC5H4N)2(NO)4. // Координационная химия, 2002, Том. 28, № 5, стр: 364−369.
  85. A.M., Еременко JI.T. Синтез динитрата изобутендиола и некоторых его производных // Известия академии Наук СССР, Серия химическая, 1972, № 3, стр: 663−665.
  86. A.M., Ерёменко JI.T., Мешихина JI.B., Ерёменко И. Л., Александров Г. Г., Коновалова Н. П., Лодыгина В. П. // Известия Академии Наук. Серия химическая, 2003, № 8, стр. 1763−167.
  87. Antonini Е., Brunori М. Hemoglobin and myoglobin in the reactions with ligands, in. Neuberger A, Tatum E.L. (Eds.) // North-Holland research monographs. Fronties of biology. North-Holland Publishing company, Amsterdam-London. 1971, Vol. 21, P. 2−3.
  88. Mayhew S.G. The redox potential of dithionite and SO-2 from equilibrium reactions with flavodoxins, methyl viologen and hydrogen plus hydrogenase // European Journal of Biochemistry, 1978, Vol. 85, No. 2, pp: 535−547.
  89. Ю.М. Сульфгидрильные и дисульфидные группы белков. М.: Наука, 1971, 229 с.
  90. S., Suruga К., Ogawa М., Наша Т., Satoh Т., Kawachi R., Nishio Т., Oku Т. Appearance of nitrite reducing activity of cytochrome с upon heat denaturation // Bioscience, Biotechnology and Biochemistry, 2002, Vol. 66, No. 10, pp: 2044−2051.
  91. Jiantao Pang J., Fan C., Liu X., Chen Т., Li G. A nitric oxide biosensor based on the multi-assembly of hemoglobin/montmorillonite/polyvinyl alcohol at a pyrolytic graphite electrode // Biosensors and Bioelectronics, 2003, Vol. 19, pp: 441 445.
  92. Я., Рём К.Г. Наглядная биохимия М., «Мир», 2000, с. 106 107.
  93. Я., Новакова О., Кунц К. Современная биохимия в схемах. Мир, Москва, 1981,215 с.
  94. В.Г., Григорьев Н. Б. Оксид азота (NO). Новый путь к поиску лекарств. Вузовская книга, М., 2004, стр. 64.
  95. Sakai К. Nicorandil: animal pharmacology // American Journal of Cardiology, 1989, Vol. 63, No. 21, pp: 2J-10J.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!