Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Химически активные ДНК в исследовании белков репарации ДНК: идентификация Ku-антигена как белка, взаимодействующего с апуриновыми/апиримидиновыми сайтами

Диссертация: Химически активные ДНК в исследовании белков репарации ДНК: идентификация Ku-антигена как белка, взаимодействующего с апуриновыми/апиримидиновыми сайтами
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Ранее были синтезированы и охарактеризованы аналоги dNTP, содержащие фотоактивируемые группы, присоединенные по экзоциклической аминогруппе цитозина. Для этих аналогов были определены субстратные характеристики и/или проведена количественная оценка эффективности модификации ДНК-полимераз и ДНК в комплексе с ДНК-полимеразами, в модельных системах, состоящих из очищенных белков. Фотоаффинной… Читать ещё >

Химически активные ДНК в исследовании белков репарации ДНК: идентификация Ku-антигена как белка, взаимодействующего с апуриновыми/апиримидиновыми сайтами (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ
  • ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
    • 1. 1. ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Ku-АНТИГЕНА
      • 1. 1. 1. Структура Ки и функциональные особенности его доменов
      • 1. 1. 2. Свойства Ku-антигена
        • 1. 1. 2. 1. Димеризация и функции субъединиц
        • 1. 1. 2. 2. Взаимодействие с ДНК
    • 1. 2. ФУНКЦИИ Ки
      • 1. 2. 1. Репарация двухцепочечных разрывов ДНК
      • 1. 2. 2. Роль Ku-антигена в сохранении целостности теломерных участков
      • 1. 2. 3. Регуляция транскрипции генов
      • 1. 2. 4. АТР-азная и геликазная активности Ки
      • 1. 2. 5. Участие Ки в антиапоптотических процессах
      • 1. 2. 6. Роль мембранной формы Ки
        • 1. 2. 6. 1. Влияние мембранной формы Ku-антигена на адгезию и инвазию клеток
        • 1. 2. 6. 2. Роль Ku-антигена в проникновении Rickettsia conorii и парвовируса В19 в клетки человека
    • 1. 3. РОЛЬ Ки В КАНЦЕРОГЕНЕЗЕ
      • 1. 3. 1. Роль различных форм Ки
      • 1. 3. 2. Мутации Ки, приводящие к злокачественной трансформации клеток

ДНК каждой, клетки подвергается действию разнообразных эндогенных и экзогенных факторов^ вызывающих в ней различные повреждения. Повреждение ДНК. может провоцировать гибель клеток, их злокачественную трансформацию или вызывать мутации. Для* предотвращения таких последствий клетки располагают несколькими специализированными системами репарации ДНК с частично перекрывающимися функциями. Системы репарации ДНК различаются используемыми субстратами, механизмами и ансамблями белков. Эксцизионная репарация оснований^ (ЭРО) является одной из основных и наиболее важных систем репарации ДНК, поскольку ее действия направлены на исправление наиболее многочисленных повреждении, вызываемых эндогенными и экзогенными факторами, которые включают ионизирующее излучение, активные формы кислорода и некоторые противоопухолевые препараты [1]. В целомдля процесса ЭРО нехарактерно существование стабильного белкового ансамбля неизменного состава, который бы полностью проводил устранения повреждения-в ДНК. В ансамбле по мере протекания, репарации один из ферментов (факторов) заменяется белком, необходимым для следующей стадии процесса. Такой принцип организации процесса вносит ограничения в исследованиеструктурной организации репарационного ансамбля рентгеноструктурным анализом или другими физико-химическими методами.

Для изучения таких динамичных надмолекулярных ансамблей развиваются и широко используются методы направленной химической модификации. В качестве продуктивного метода исследования белок-нуклеиновых ' и белок-белковых взаимодействий может применяться аффинная модификация, несомненным достоинством которой является способность регистрировать даже относительно непрочные комплексы. — Этот метод базируется на формировании специфического нековалентного комплекса между мишенью (белок, нуклеиновая кислота) и реагентом (реакционноспособным аналогом биополимера или лиганда) с последующим образованием ковалентной связи между реагентом и связывающим ее центром мишени. Одним из параметров аффинной модификации является ее эффективность, под которой в данной работе понимается уровень образования ковалентных аддуктов аффинный реагент-биополимер.

В арсенале химически активных аффинных реагентов для исследования белокнуклеиновых взаимодействий значительное место принадлежит аналогам ДНК на основе ароматических азидов [2]. При активации УФ-светом арилазидной группы 6 генерируются высоко реакционноспособные частицы, которые могут атаковать t ближайшие атомы с образованием ковалентнойсвязи между контактирующими частями биополимеров. Такой метод называется фотоаффинной модификацией. Последующий анализ образовавшихся продуктов «фотосшивки» белок-ДНК позволяет получать информацию о структурной организации белково-нуклеиновых комплексов.

Ранее были синтезированы и охарактеризованы аналоги dNTP, содержащие фотоактивируемые группы, присоединенные по экзоциклической аминогруппе цитозина [3, 4]. Для этих аналогов были определены субстратные характеристики и/или проведена количественная оценка эффективности модификации ДНК-полимераз и ДНК в комплексе с ДНК-полимеразами, в модельных системах, состоящих из очищенных белков [4−8]. Фотоаффинной модификацией в сочетании с иммунохимическими методами при использовании ДНК-интермедиата длиннозаплаточного пути эксцизионной репарации оснований, полученного in situ при включении в ДНК фотоактивируемого аналога dCTP, в экстракте эмбриональных фибробластов мыши были выявлены белки, специфично взаимодействующие с такими ДНК [9]. Из тысяч белков, присутствующих в клетке, модификации подвергались только 6 белков. Среди них были идентифицированы известные участники этого процесса: ДНК-полимераза р (Роф), флэпэндонуклеаза 1 (FEN1) и апуриновая/апиримидиновая. эндонуклеаза 1 (АРЕ1), а также поли (АБР-рибозо)полимераза 1 (PARP1), участие которой в этом процессе не считалось достоверно установленным. Наиболее перспективным направлением развития фотоаффинной модификации является ее использование в сочетании с масс-спектрометрией при поиске и идентификации новых белков-участников процессов репарации ДНК. Несмотря на высокую чувствительность современных масс-спектрометрических методов для идентификации белков в составе ковалентных аддуктов с ДНК, требуются достаточно высокие количества таких продуктов, поэтому повышение эффективности пришивки ДНК к белкам остается актуальной задачей, и одно из возможных решений — создание новых фотоактивируемых производных dNTP.

Несмотря на достаточно широкое применение в исследованиях фотоактивируемых ДНК,(синтезированных непосредственно в экстрактах, эффективность включения аналогов dNTP в ДНК ДНК-полимеразами клеточных экстрактов и влияние этого параметра на модификацию белков экстрактов фотоактивируемыми ДНК количественно не была оценена. Следует отметить, что эффективность включения фотоактивируемых dNMP в состав ДНК в экстрактах может модулироваться присутствием белковых факторов, вклад которых не всегда можно учесть в системе, реконструированной из очищенных белков. В частности, модифицированные аналоги могут выщепляться за счет корректирующей активности ДНК-полимераз и/или специализированных экзонуклеаз. В связи с этим при характеризации аналогов dNTP, наилучшим является сравнение эффективности синтеза фотоактивируемых ДНК в клеточном экстракте, где присутствуют те же белки и в том же соотношении, что и в клетке. Это является принципиальным отличием экстрактов от реконструированных систем, где состав и соотношения белков задаются исследователем.

В качестве альтернативной химически активной группы, обеспечивающей образование ковалентных аддуктов нуклеиновых кислот с белками, могут использоваться апуриновые/апиримидиновые сайты (AP-сайты). Остатки дезоксирибозы в AP-сайтах находятся в равновесии циклической фуранозной и ациклической альдегидной форм. Благодаря присутствию альдегидных групп АР-ДНК реагируют с первичными аминогруппами белков, образуя основания Шиффа. Образование основания Шиффаобратимый процесс, однако связь белка с ДНК можно стабилизировать восстановлением боргидридом натрия [10−12]. Такой метод называется боргидридным треппингом. AP-сайты в качестве «сшивающей» группы обладают существенным преимуществом по сравнению с фотоактивируемыми группами — они являются интермедиатами в процессе ЭРО, т. е. одновременно играют роль «повреждения» в ДНК и химически активной функции «нулевой» длины.

AP-сайты — один из наиболее часто встречающихся типов нарушений в структуре ДНКони возникают в клетках млекопитающих с частотой 104 случаев в сутки из-за спонтанного или катализируемого ДНК-гликозилазами гидролиза jV-гликозидной связи между дезоксирибозой и основанием в эксцизионной репарации оснований ДНК [13]. Нерепарированные AP-сайты цитотоксичны и мутагенны [14], поэтому является важным идентифицировать белки, взаимодействующие с ними и, возможно, участвующие в регуляции их репарации.

Формирование основания Шиффа в процессе катализа характерно для некоторых ферментов ЭРО [1, 15−18]. В частности, некоторые бифункциональные ДНК-гликозилазы, помимо гидролиза JV-гликозидной связи, обладают лиазной активностью и расщепляют сахарофосфатный остов ДНК по механизму ß—элиминирования. При функционировании таких гликозилаз образуется два типа продуктов, способных формировать основание Шиффа: дуплекс, содержащий AP-сайт, и ДНК с одноцепочечным разрывом, содержащим 4-гидроксипентен-2-аль с 3'-стороны и фосфатную группу с 5'-стороны [15, 18]. При гидролизе AP-сайта АР-эндонуклеазой 1 образуется разрыв цепи ДНК, с гидроксильной группой на 3'-конце и дезоксирибозофосфатной группой на 5'-конце (5'-dRP). В короткозаплаточном пути ЭРО 5'-dRP-0CTaT0K удаляется лиазной активностью Pol?, и этот процесс также происходит с формированием основания Шиффа [19].

Формирование ковалентных сшивок белок-ДНК, опосредованных образованием основания Шиффа, широко используется исследователями при изучении механизмов * действия ферментов< [17]. Образование таких сшивок не означает, что белок обладает лиазной активностью, требуется дополнительное подтверждение механизма. Так, например, MutY, в отличие от других монофункциональных ДНК-гликозилаз, взаимодействует с AP-сайтами формируя оснований Шиффа, и при этом не обладает АР-лиазной активностью [20].

ДНК, содержащие AP-сайты (АР-ДНК) или продукты его расщепления с 4-гидроксипентен-2-алем на 3'-конце или с 5'-dRP, могут использоваться для поиска и идентификации белков, взаимодействующих с такими ДНК. Например, недавно, боргидридным треппингом в сочетании с масс-спектрометрией, было идентифицировано девять белков Escherichia coli и Saccharomyces cerevisiae, взаимодействующих с АР-сайтами [12]. Аналогичным методом в составе ковалентного аддукта с ДНК-дуплексом, содержащим разрыв с 5'-dRP, был также идентифицирован белок HMGB1 (high-mobility group box 1). Выделенный белок HMGB1 имеет слабую 5'-dRP-лиазную активность и при взаимодействии с белками ЭРО' стимулирует их активность [21]. Для другого представителя HMG-семейства — HMGA2, также была продемонстрирована способность взаимодействовать с AP-сайтами в геномной ДНК, а с использованием коротких ДНК-дуплексов' были обнаружены его АРи 5'-dRP-лиазные активности [22]. Не исключено существование еще неидентифицированных белков, взаимодействующих с АР-сайтами.

Целью данной работы являлось исследование взаимодействий белков экстрактов клеток человека с химически активными ДНК, имитирующими ДНК-интермедиаты различных этапов ЭРО. В качестве химически активных ДНК-зондов использовали 32-мерные ДНК-дуплексы, содержащие фотоактивируемые группы или AP-сайты. Однако следует иметь в виду, что ДНК, содержащие двухцепочечные (дц-) концы, являются интермедиатами другого пути репарации ДНК — репарации двухцепочечных разрывов ДНК. Основной путь репарации двухцепочечных разрывов ДНК в клетках млекопитающих — негомологичное соединение концов [23, 24]. Этот путь инициирует Ku-антиген, связывая двухцепочечные концы ДНК. Ku-антиген — это эукариотический гетеродимерный ДНК-связывающий комплекс, состоящий из двух субъединиц с молекулярными массами около 70 кДа (Ки70) и 83 кДа (Ки80) и обладающий высоким сродством к дц-концам [23, 24]. Во время репарации ДНК молекулы Ки, как тиски зажимают и удерживают рядом концы ДНК, помогая сборке комплекса, осуществляющего репарацию ДНК [24−26].

Основные объекты исследования: белки клеточных экстрактов опухолевых линий человека. Основные использованные методы: специфические функциональные тесты, аффинная модификация белков химически активными ДНК, иммунологические подходы и масс-спектрометрия.

В ходе исследования планировалось решить следующие задачи:

• охарактеризовать вновь синтезированный фотоактивируемый аналог с1СТР и в сравнении с ранее использованными аналогами выявить фотоактивируемые производные ёСТР, которые наиболее пригодны для исследований в клеточных экстрактах;

• в экстрактах клеток человека провести поиск белков, специфически взаимодействующих с апуриновыми/апиримидиновыми (АР-) сайтами;

• отработать подходы к идентификации белков в составе ковалентных аддуктов с модифицированными ДНК-интермедиатами репарации ДНК;

• с использованием аффинной модификации, функциональных тестов и других методов изучить характеристики и биологическую значимость взаимодействия белков с АР-ДНК;

• оценить перспективность использования АР-ДНК для оценки содержания в клеточных экстрактах белков, узнающих АР-сайты.

выводы.

1. Охарактеризован вновь синтезированный аналог с! СТР — экзо-Ы-{2-[М-(4-азидо-2,5-дифтор-3 -хлорпиридин-6-ил)-3 -аминопропионил] -аминоэтил } -2'-дезоксирибоцитидин-5'-трифосфат (РАР-сЮТР) в системах, содержащихДНК-полимеразу р или экстракт клеток НеЬа. При сравнительном анализе нового и двух ранее использованных аналогов с! СТР — экзо-Ы-[(4-азидо-2,3,5,6-тетрафторбензилиденаминоокси)-бутило-кси]-2'-дезоксирибоцитидин-5'-трифосфата и экзо-Ы-[2-(4-азидо-2,3,5,6-тетрафторбензилиденаминооксиметилкарбамоил)-этил]-2'-дезоксирибо-цитидин-5'-трифосфата — установлено, что БАР-ёСТР по эффективности включения в ДНК ДНК-полимеразами не уступает, а по уровню сшивки ЕАР-сЮМР-содержащих ДНК с белками, значительно превосходит ранее использованные арилазидные производные <1СТР.

2. В экстрактах клеток человека проведен поиск белков, взаимодействующих с апуриновыми/апиримидиновыми (АР-) сайтами с образованием основания Шиффаметодами иммуноферментного и масс-спектрометрического анализа основной белок-мишень АР-ДНК идентифицирован как Ки80-субъединица Ки-антигена.

3. Установлено, что Ки-антиген в экстрактах специфически узнает АР-ДНК и образует с ней долгоживущие ковалентные аддуктыКи-антиген в составе ДНК-зависимой протеинкиназы не расщепляет ДНК по положению АР-сайта и ингибирует АР-эндонуклеазную активность АР-эндонуклеазы 1 человека.

4. Сравнительный анализ модификации Ки-антигена в экстрактах клеток человека ДНК, содержащими АР-сайт или РАР-с1СМР в середине одной цепи и дополнительные повреждения в противоположной цепи ДНК, показал, что соотношение уровней модификации Ки70 и Ки80-субъединиц фотоактивируемыми ДНК и уровень модификации Ки80-субъединицы АР-ДНК зависят от типа дополнительного повреждениядля АР-ДНК эффективность сшивки, по-видимому, определяется взаимным положением реагирующих групп белка и ДНК.

5. Показано, что АР-ДНК можно применять для оценки относительного содержания Ки-антигена в экстрактах клеток человека и регистрации активных в связывании ДНК форм этого белка.

3.3.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

В настоящей работе впервые проведена количественная оценка эффективности вюноченияфотоактивируемых аналогов dNTP в ДНК ферментами клеточных экстрактов, а также использование полученных ДНК для фотоаффинной модификации белков экстрактов клеток человека. С учетом эффективности модификации белков и субстратных характеристик, наиболее перспективным для исследований в клеточных экстрактах, является экзо-Ы-{2-[Ъ1-(4-азидо-2,5-дифтор-3-хлорпиридин-6-ил)-3-аминопропионил]-аминоэтил}-2'-дезоксирибоцитидин-5'-трифосфат (FAP-dCTP), который обеспечивает максимальный выход продуктов модификации клеточных белков из всех синтезированных и исследованных до сих пор аналогов dNTP.

С использованием ДНК, содержащих АР-сайт в середине цепи, впервые установлена способность белка, не относящегося к системе эксцизионной" репарации оснований — Ки80-субъединицы Ku-антигена, взаимодействовать с ранними интермедиатами этого процесса — АР-сайтами — с образованием основания Шиффа. Согласно литературным данным, наличие АР-сайта в ДНК вызывает изгиб по его положению, причем угол изгиба ДНК по положению апуринового сайта выше, чем апиримидинового [229]. Возможно, изгиб в ДНК, вызванный наличием АР-сайта, способствует удачному расположению альдегидной группы дезоксирибозы АР-сайта и акцепторных групп в Ки. Это предположение согласуется с тем, что выход продуктов модификации Ки80 с использованием апуриновой ДНК в 1.4 раза выше, по сравнению с апиримидиновой.

Обнаруженное нами взаимодействие Ки80 с АР-сайтами не сопровождается расщеплением цепи по положению АР-сайтов, и ставит вопрос о биологической значимости таких взаимодействий. С одной стороны, возможно, что ковалентное, но обратимое присоединение белков к АР-ДНК через основание Шиффа, может служить для временной защиты АР-сайтов. Согласно литературным данным, АВН1 после расщепления АР-сайтов в ДНК по лиазному механизму остается ковалентно связанным со своим продуктом, и, по мнению авторов, тем самым защищает расщепленную ДНК от неправильной репарации [228]. Временная защита АР-сайтов особенно важна, когда они входят в состав кластерных повреждений, например, близко расположенных в комплементарной цепи разрывов или АР-сайтов, поскольку в результате «попытки» репарации могут образовываться двухцепочечные разрывы, которые более токсичны для клеток [235, 236]. Действительно, в настоящей работе обнаружено, что Ки80 ингибирует гидролиз АР-сайтов АРЕ1. С другой стороны, не исключено, что проявление АР-лиазной активности белками, образующими основания Шиффа,.зависит от структурных особенностей ДНК. Так, например, в недавно опубликованной работе [230] показано, что Ки-антиген проявляет слабую АР-лиазную активность, когда АР-сайт расположен непосредственно вблизи двухцепоченых концов (второе положение с 5'-конца в свисающей одноцепочечной части ДНК-дуплекса). Однакоесли АР-сайт расположен на расстоянии более одного витка спирали от конца АР-лиазная активность Ки-антигена не проявляется, как и в случае использованных в данной работе АР-ДНК. Кроме того, такая ковалентная фиксация белков на ДНК может вносить вклад в известную токсичность АР-сайтов.

Важно отметить, что АР-ДНК может использоваться для оценки содержания' Ки-антигена в клеточном экстракте. В настоящей работе показано, что предложенный подход, основанный на использовании АР-ДНК, обладает некоторыми преимуществами по сравнению с применяемыми на данный момент методами оценки содержания Ки-антигена. Этот метод позволяет оценивать в клеточных экстрактах содержание форм Ки-антигена, которые активны в связывании ДНК, в отличие от иммунохимических методов, определяющих только содержание той или иной полипептидной цепи. Оценка содержания Ки80 по количеству мРНК не позволяет учитывать возможность протеолиза Ки80. Кроме того, количество Ки80 оценивается-как доля АР-ДНК, ковалентно присоединенная к Ки80, что исключает необходимость контроля количества образца, нанесенного на гель, и контроля эффективности переноса белка на мембрану, что необходимо осуществлять, в белковом (вестерн) блоттинге. В целом, этот подход является менее затратным по времени и количеству использованных реактивов.

Еще одним перспективным направлением развития аффинной модификации белков оказалось использование модифицированных ДНК в сочетании с методами масс-спектрометрии для поиска и идентификации ранее неизвестных белков-участников •определенных процессов/стадий репарации ДНК. В данной работе этим подходом в1 составе конъюгата, образованного белком экстракта с ДНК, содержащими АР-сайты, была идентифицирована Ки80 субъединица Ки-антигена. Этот подход довольно универсален и может применяться для идентификации различных ДНК-связывающих белков с использованием ДНК, содержащих структурные элементы, специфически узнаваемыми белками. Предложенный подход был с успехом применен в нашей лаборатории для идентификации еще одного белка взаимодействующего с АР-сайтами — поли (АОР-рибозо)полимеразы 1 в составе коньюгата с ДНК [223, 244].

Показать весь текст

Список литературы

  1. Scharer O.D. Mechanisms of DNA Repair: Chemistry and Biology of DNA Repair И
  2. Angew. Chem. Int. Ed. 2003. V. 42. P. 2946−2974.
  3. Khodyreva S.N., Lavrik O.I. Photoaffinity labeling technique for studying DNA replicationand DNA repair II Curr. Med. Chem. 2005. V. 12. P. 641−655.
  4. Wlassoff W.A., Dobrikov M.I., Safronov I.V., Dudko R.Y., Bogachev V.S., Kandaurova
  5. V.V., Shishkin G.V., Dymshits G.M., Lavrik O.I. Synthesis and characterization of (d)NTP derivatives substituted with residues of different photoreagents II Bioconjugate Chem. 1995. V. 6. P. 352−360.
  6. И.В., Щербик H.B., Ходырева C.H., Власов В. А., Добриков М.И., Шишкин
  7. Г. В., Лаврик О. И. Новые фотоактивные N4−3aMeuewibie аналоги dCTP: получение, фотохимические и субстратные свойства при синтезе ДНК, катализируемом обратной транскриптазой ВИЧ-1II Биоорган, химия 1997. Т. 23. С. 576−585.
  8. Doronin S.V., Dobrikov M.I., Lavrik O.I. Photoaffinity labeling of DNA polymerase a
  9. DNA primase complex based on the catalytic competence of a dNTP reactive analog H FEBS Lett. 1992. V. 313. P. 31−33.
  10. Doronin S.V., Dobrikov M.I., Buckle M., Roux .P., Buc H., Lavrik O.I. Affinitymodification of human immunodeficiency virus reverse transcriptase and DNA template byphotoreactive dCTP analogs // FEBS Lett. 1994. V. 354. P. 200−202. ,
  11. Lavrik O. I, Prasad R., Beard W.A., Safronov I.V., Dobrikov M.I., Srivastava D.K.,
  12. Shishkin G.V., Wood T.G., Wilson- S.H. dNTP binding to HIV-1 reverse transcriptase' and mammalian DNA polymerase beta as revealed by affinity labeling with a photoreactive dNTP analog H J. Biol. Chem. 1996. V. 271. P. 21 891−21 897.
  13. И.А., Петрусева И. О., Сафронов И. В., Захаренко А. Л., Шишкин Г.В.,
  14. Lavrik O.I., Prasad R., Sobol R.W., Horton J.K., Ackerman E.J., Wilson S.H. Photoaffinitylabeling of mouse fibroblast enzymes by a base excision repair intermediate II J. Biol. Chem. 2001. V. 27. P. 25 541−25 548.
  15. Е., Бавыкин С., Шик В., Мирзабеков А. Взаимодействие гистонов с ДНК в хроматине. Новый метод ковалентного связывания гистонов с ДНК, удобный для их локализации на ДНК Н Биохимия 1980. Т. 45. С. 1133−1145.
  16. Haracska L., Prakash L., Prakash S. A mechanism for the exclusion of low-fidelity human Y-family DNA polymerases from base excision repair // Genes Dev. 2003. V. 17. P.2777−2785.
  17. Rieger R.A., Zaika V., Xie W., Johnson F., Grollman A.P., Iden C.R., Zharkov D.O. Proteomic approach to identification of proteins reactive for abasic sites in DNA II Mol. Cell. Proteomics 2006. V. 5. P. 858−867.
  18. Lindahl Т., Nyberg B. Rate of depurination of native deoxyribonucleic acid II Biochemistry 1972. V. 11. P. 3610−3618.
  19. Loeb L.A. Apurinic sites as mutagenic intermediates II Cell 1985. V. 40. P. 483−484.
  20. David S., Williams S.D. Chemistry of glycosylases and endonucleases involved in base-excision repair И Chem. Rev. 1998. V. 98. P. 1221−1261.
  21. Boiteux S., Guillet M. Abasic sites in DNA: repair and biological consequences in Saccharomyces cerevisiae II DNA Repair 2004. V. 3. P. 1−12.
  22. Piersen C.E., McCullough A.K., Lloyd R.S. AP lyases and dRPases: commonality of mechanism II Mutat. Res."2000. V. 459. P. 43−53.
  23. Hegde M.L., Hazra Т.К., Mitra S. Functions of disordered regions in mammalian early base excision repair proteins II Cell. Mol. Life Sci. 2010. V. 67. P. 3573−3587.
  24. Sobol R.W., Prasad R., Evenski A., Baker A., Yang X.P., Horton J.K., Wilson S.H. The lyase activity of the DNA repair protein /?-polymerase protects from DNA-damage-inducedcytotoxicity //Nature 2000. V. 405. P. 807−810.
  25. Zharkov D.O., Grollman A.P. MutY DNA glycosylase: base release and intermediate complex formation И Biochemistry 1998. V. 37. P. 12 384−12 394.
  26. Mahaney B.L., Meek K., Lees-Miller S.P. Repair of ionizing radiation-induced DNA double-strand breaks by non-homologous end-joining II Biochem. J. 2009. V. 417. P. 639−650.
  27. Gullo C., Au M., Feng G., Teoh G. The biology of Ku and its potential oncogenic role in cancer II Biochim. Biophys. Acta 2006. V. 1765. P. 223−234.
  28. Downs J.A., Jackson S.P. A means to a DNA end: the many roles of Ku II Nat. Rev. Mol. and Cell. Biol. 2004. V. 5. P. 367−378.
  29. Dynan W.S., Yoo S. Interaction of Ku protein and DNA-dependent protein kinase catalytic subunit with nucleic acids 11 Nucleic Acids Res. 1998. V. 26. P. 1551−1559.
  30. Muller C., Paupert J., Monferran S., Salles B. The double life of the Ku protein II Cell Cycle 2005. V. 4. P. 438−441.
  31. Myung K., He D.M., Lee S.E., Hendrickson E.A. KARP-1: a novel leucine zipper protein expressed from the Ku80 autoantigen locus is implicated in the control of DNA-dependent protein kinase activity IIEMBO J. 1997. V. 16. P. 3172−3184.
  32. Casellas R., Nussenzweig A., Wuerffel R., Pelanda R., Reichlin A., Suh H., Qin X.F., Besmer E., Kenter A., Rajewsky K.5 Nussenzweig M.C. Ku80 is required for immunoglobulin isotype switching II EMBO J. 1998. V. 17. P. 2404−2411.
  33. Daniel R., Katz R.A., Skalka A.M. A role for DNA-PK in retroviral DNA integration II Science 1999. V. 284. P. 644−647.
  34. Martinez J.J., Seveau S., Yeiga E., Matsuyama S., Cossart P. Ku70, a component of DNA-dependent protein kinase, is a mammalian receptor for Rickettsia conorii II Cell 2005. V.123. P. 1013−1023.
  35. Munakata Y., Saito-Ito T., Kumura-Ishii K., Huang J., Kodera T., Ishii T., Hirabayashi Y., Koyanagi Y., Sasaki T. Ku80 autoantigen as a cellular coreceptor for human parvovirus B19 infection II Blood 2005. V. 106. P. 3449−3456.
  36. Walker J.R., Corpina R.A., Goldberg J. Structure of the Ku heterodimer bound to DNA and its implications for double-strand break repair II Nature 2001. V. 412. P. 607−614.
  37. Nick McElhinny S.A., Snowden C.M., McCarville J., Ramsden D.A. Ku recruits the XRCC4-ligase IVcomplex to DNA ends II Mol. Cell. Biol. 2000. V. 20. P. 2996−3003*.
  38. Wu X., Lieber M.R. Protein-protein and protein-DNA interaction regions within the DNA end-bindingprotein Ku70-Ku80 II Mol. Cell. Biol. 1996. V. 16. P. 5186−5193.
  39. Li B., Comai L. Requirements for the nucleolytic processing of DNA ends by the Werner syndrome protein-Ku70/80 complex II J. Biol. Chem. 2001. V. 276. P. 9896−9902.
  40. Koike M., Awaji T., Kataoka M., Tsujimoto G., Kartasova T., Koike A., Shiomi T. Differential subcellular localization of DNA-dependent protein kinase components Ku and DNA-PKcs during mitosis II J. Cell Sei. 1999. V. 112. P. 4031−4039.
  41. Aravind L., Koonin E.V. SAP a putative DNA-binding motif involved in chromosomal organization II Trends Biochem Sei. 2000. V. 25. P. 112−114.
  42. Aravind L., Koonin E.V. Prokaryotic homologs of the eukaryotic DNA-end-binding protein Ku, novel domains in the Ku protein and prediction of a prokaryotic doublestrand break repair system II Genome Res. 2001. V. 11. P. 1365−1374.
  43. Bilaud T., Brun C., Ancelin K., Koering C.E., Laroche T., Gilson E. Telomeric localization of TRF2, a novel human telobox protein II Nat. Genet. 1997. V. 17. P. 236−239.
  44. Jin S., Weaver D.T. Double-strand break repair by Ku70 requires heterodimerization with Ku80 and DNA binding functions II EMBO J. 1997. V. 16. P. 6874−6885.
  45. Yoo S., Kimzey A., Dynan W. S. Photocross-linking of an oriented DNA repair complex. Ku boundat a single DNA end Iii. Biol. Chem. 1999. V. 274. P. 20 034−20 039.
  46. Singleton B.K., Priestley A., Steingrimsdottir H., Gell D., Blunt T., Jackson S.P., Lehmann A.R., Jeggo P.A. Molecular and biochemical characterization ofxrs mutants defective in Ku80 II Mol. Cell. Biol. 1997. V. 17. P. 1264−1273.
  47. Taccioli G.E., Gottlieb T.M., Blunt T., Priestley A., Demengeot J., Mizuta R., Lehmann A.R., Alt F.W., Jackson S.P., Jeggo P.A. Ku80: product of the XRCC5 gene and its role in DNA repair and V (D)J recombination II Science 1994. V. 265. P. 1442−1445.
  48. Ochem A.E., Skopac D., Costa M., Rabilloud T., Vuillard L., Simoncsits A., Giacca M., Falaschi A. Functional properties of the separate subunits of human DNA helicase II/Ku autoantigen II J. Biol. Chem. 1997. V. 272. P. 29 919−29 926.
  49. Tuteja R., Tuteja N. Ku autoantigen: a multifunctional DNA-binding protein II Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. 2000. V. 35. P. 1−33.
  50. Higashiura M., Shimizu Y., Tanimoto M., Morita T., Yagura T. Immunolocalization of Ku-proteins (p80/p70): localization of p70 to nucleoli and periphery of both interphase nuclei and metaphase chromosomes I I Exp. Cell Res. 1992. V. 201. P. 444−451.
  51. Yaneva M., Jhiang S. Expression of the Ku protein during cell proliferation II Biochim. Biophys. Acta 1991. V. 1090. P. 181−187.
  52. Yu E., Song K.} Moon H., Maul G.G., Lee I. Characteristic immunolocalization of Ku protein as nuclear matrix II Hybridoma 1998. V. 17. P. 413−420.
  53. Koike M., Ikuta T., Miyasaka T., Shiomi T. Ku80 can translocate to the nucleus independent of the translocation of Ku70 using its own nuclear localization signal II Oncogene 1999. V. 18. P. 7495−7505.
  54. Koike M., Shiomi T., Koike A. Dimerization and nuclear localization of Ku proteins II J. Biol. Chem. 2001. V. 276. P. 11 167−11 173.
  55. Bakalkin G., Yakovleva T., Hurd Y.L., Nussenzweig A., Li G.C., Terenius L. Autoantigen Ku in the brain. Developmentally regulated expression and subcellular localization II NeuroReport 1998. V. 9. P. 2147−2151.
  56. Dalziel R.G., Mendelson S.C., Quinn J.P. The nuclear autoimmune antigen Ku is also present on the cell surface II Autoimmunity 1992. V. 13. P. 265−267.
  57. Prabhakar B.S., Allaway G.P., Srinivasappa J., Notkins A.L. Cell surface expression of the 70-kD component of Ku, a DNA-binding nuclear autoantigen II J. Clin. Invest. 1990. V. 86. P. 1301−1305.
  58. Blier P.R., Griffith A.J., Craft J., Hardin J.A. Binding of Kuprotein to DNA. Measurement of affinity for ends and demonstration of binding to nicks II J. Biol. Chem. 1993. V. 268. P.7594−7601.
  59. Falzon M., Fewell J.W., Kuff E.L. EBP-80, a transcription factor closely resembling the human autoantigen Ku, recognizes single- to double-strand transitions in DNA II J. Biol. Chem. 1993. V. 268. P. 10 546−10 552.
  60. Bliss T.M., Lane D.P. Ku selectively transfers between DNA molecules with homologous ends Hi. Biol. Chem. 1997. V. 272. P. 5765−5773.
  61. Chiu C.F., Lin T.Y., Chou W.G. Direct transfer of Ku between DNA molecules with nonhomologous ends 11 Mutat. Res. 2001. V. 486. P. 185−194.
  62. Ruiz M.T., Matheos D., Price G.B., Zannis-Hadjopoulos M. OBA/Ku86: DNA binding specificity and involvement in mammalian DNA replication II Mol. Biol. Cell. 1999. V. 10. P. 567−580.
  63. Smith G.C., Jackson S.P. The DNA-dependent protein kinase II Genes Dev. 1999. V. 13. P. 916−934.
  64. Sutherland B.M., Bennett P.V., Saparbaev M., Sutherland J.C., Laval J. Clustered DNA damages as dosemeters for ionising radiation exposure and biological responses II Radiat. Prot. Dosimetry 2001. V. 97. P. 33−38.
  65. Doherty A.J., Jackson S.P. DNA repair: how Ku makes ends meet // Curr. Biol. 2001. V. 11. P. R920-R924.
  66. Rothkamm K., Kruger I. Thompson L.H., Lobrich M. Pathways of DNA double-strand break repair during the mammalian cell cycle II Mol. Cell. Biol. 2003. V. 16. P. 5706−5715.
  67. Branzei D., Foiani M. Regulation of DNA repair throughout the cell cycle II Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 2008. V. 9. P. 297−308.
  68. Morrison C., Wagner E. Extrachromosomal recombination occurs efficiently in cells defective in various DNA repair systems 11 Nucleic Acids Res. 1996. V. 24. P. 2053−2058
  69. Reliene R., Bishop A.J., Li G., Schiestl R.H. Ku86 deficiency leads to reduced intrachromosomal homologous recombination in vivo in mice II DNA Repair 2004. V. 3. P. 103−111.
  70. Audebert M., Salles B., Calsou P. Involvement of poly (ADP-ribose) polymerase-1 and XRCC1/DNA ligase III in an alternative route for DNA double-strand breaks rejoining I I J. Biol. Chem. 2004. V. 279. P. 55 117−55 126.
  71. Audebert M., Salles B., Weinfeld M., Calsou P. Involvement of polynucleotide kinase in a poly (ADP-ribose) polymerase-1-dependent DNA double-strand breaks rejoining pathway H J. Mol. Biol. 2006. V. 356. P. 257−265.
  72. Haber J.E. DNA repair. Gatekeepers of recombination II Nature 1999. V. 398. P. 665−667.
  73. Jones J.M., Geliert M., Yang W. A Ku bridge over broken DNA II Structure 2001. V. 9. P. 881−884.
  74. Gottlieb T.M., Jackson S.P. The DNA-dependent protein kinase- requirement for DNA ends and association with Ku antigen II Cell. 1993. V. 72. P. 131−142.
  75. Suwa A., Hirakata M., Takeda Y., Jesch S.A., Mimori T., Hardin J.A. DNA-dependent protein kinase (Ku protein-p350 complex) assembles on double-stranded DNA II Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1994. V. 91. P. 6904−6908.
  76. West R.B., Yaneva M., Lieber M.R. Productive and nonproductive complexes of Ku and DNA-dependent protein kinase at DNA termini II Mol. Cell. Biol. 1998. V. 18. P.5908−5920.
  77. Chan D.W., Ye R., Veillette C.J., Lees-Miller S.P. DNA-dependent protein kinase phosphorylation sites in Ku 70/80 heterodimer // Biochemistry 1999. V. 38. P. 1819−1828.
  78. Jackson S.P., Jeggo P.A. DNA double-strand break repair and V (D)J recombination: involvement ofDNA-PKII Trends Biochem. Sei. 1995. V. 20. P. 412−415.
  79. Anderson C.W. DNA damage and the DNA-activated protein kinase // Trends Biochem. Sei. 1993. V. 18. P. 433−437.
  80. Lees-Miller S.P. The DNA-dependent protein kinase, DNA-PK: 10 years and no ends in sight II Biochem. Cell. Biol. 1996. V. 74. P. 503−512.
  81. Critchlow S.E., Bowater R.P., Jackson S.P. Mammalian DNA double strand break repair protein XRCC4 interacts with DNA ligase IV11 Curr. Biol. 1997. V. 7. P. 588−598.
  82. Leber R., Wise T.W., Mizuta R., Meek K. The XRCC4 gene product is a target for and interacts with the DNA-dependent protein kinase II J. Biol. Chem. 1998. V. 273. P. 1794−1801.
  83. Ma Y., Pannicke U., Schwarz K., Lieber M.R. Hairpin opening and overhang processing by an Artemis/DNA-dependent protein kinase complex in nonhomologous end joining and V (D)J recombination II Cell 2002. V. 108. P. 781−794.
  84. Ma Y., Schwarz K., Lieber M.R. The Artemis: DNA-PKcs endonuclease cleaves DNA loops, flaps, and gaps II DNA Repair 2005. V. 4. P. 845−851.
  85. Povirk L.F., Zhou T., Zhou R., Cowan M.J., Yannone S.M. Processing of 5-phosphoglycolate-terminated DNA double strand breaks by Artemis nuclease II J. Biol. Chem. 2007. V. 282. P. 3547−3558.
  86. Nick McElhinny S.A., Ramsden D.A. Sibling rivalry: competition between Pol Xfamily members in V (D)J recombination ¦ and general double strand break repair II Immunol. Rev. 2004. V. 200. P. 156−164.
  87. Davis B.J., Havener J M., Ramsden D.A. End-bridging is required for pol /u to efficiently promote repair of noncomplementary ends by nonhomologous end joining II Nucleic Acids Res. 2008. V. 36. P. 3085−3094.
  88. Rasouli-Nia A., Karimi-Busheri F., Weinfeld M. Stable down-regulation of human polynucleotide kinase enhances spontaneous mutation frequency and sensitizes cells to genotoxic agents II Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2004. V. 101. P. 6905−6910.
  89. Karimi-Busheri F., Rasouli-Nia A., Allalunis-Turner J., Weinfeld M. Human polynucleotide kinase participates in ¦ repair of DNA double-strand breaks by nonhomologous end joining but not homologous recombination // Cancer Res. 2007. V. 67. P. 6619−6625.
  90. Iles N., Rulten S., El-Khamisy S.F., Caldecott K.W. APLF (C2orfl3) is a novel human protein involved in the cellular response to chromosomal DNA strand breaks II Mol. Cell. Biol. 2007. V. 27. P. 3793−3803.
  91. Macrae C.J., McCulloch R.D., Ylanko J., Durocher D., Koch C.A. APLF (C2orfl3) facilitates nonhomologous end-joining and undergoes ATM-dependent hyperphosphorylation following ionizing radiation II DNA Repair 2008. V. 7. P. 292−302.
  92. Ahel I., Ahel D., Matsusaka T., Clark A.J., Pines J., Boulton S.J., West S.C. Poly (ADP-ribose)-binding zinc finger motifs in DNA repair/checkpoint proteins II Nature 2008. V. 451. P. 81−85.
  93. Bekker-Jensen S., Fugger K., Danielsen J.R., Gromova I., Sehested M., Celis J., Bartek J., Lukas J., Mailand N. Human Xipl (C2orfl3) is a novel regulator of cellular responses to DNA strand breaks II J. Biol. Chem. 2007. V. 282. P. 19 638−19 643.
  94. Kanno S., Kuzuoka H., Sasao S., Hong Z., Lan L., Nakajima S., Yasui A. A novel human AP endonuclease with conserved zinc-finger-like motifs involved in DNA strand break responses IIEMBO J. 2007. V. 26. P. 2094−2103.
  95. Brosh Jr R.M., Bohr V.A. Human premature aging, DNA repair and RecQ helicases II Nucleic Acids Res. 2007. V. 35. P. 7527−7544.
  96. Li Z" Otevrel T., Gao Y., Cheng H.L., Seed B., Stamato T.D., Taccioli G. E., Alt F.W. The XRCC4 gene encodes a novel protein involved in DNA double-strand break repair and V (D) J recombination II Cell 1995. V. 83. P. 1079−1089.
  97. Junop M.S., Modesti M., Guarne A., Ghirlando R., Gellert M., Yang, W. Crystal structure of the Xrcc4 DNA repair protein and implications for end joining II EMBO J. 2000. V. 19. P. 5962−5970.
  98. Grawunder U., Wilm M., Wu X., Kulesza P., Wilson T.E., Mann M., Lieber M.R. Activity of DNA ligase IV stimulated by complex formation with XRCC4 protein in mammalian cells II Nature 1997. V. 388. P. 492−495.
  99. Grawunder U., Zimmer D., Leiber M.R. DNA ligase IV binds to XRCC4 via a motif located between rather than within its BRCT domains // Curr. Biol. 1998. V. 8. P. 873−876.
  100. Gu J., Lu H., Tippin B., Shimazaki N., Goodman M.F., Lieber M. R. XRCC4: DNA ligase IV can ligate incompatible DNA ends and can ligate across gaps II EMBO J. 2007. V. 26. P. 1010−1023.
  101. Yano K., Chen D.J. Live cell imaging ofXLF and XRCC4 reveals a novel view of protein assembly in the non-homologous end-joining pathway II Cell Cycle 2008. V. 7. P.1321−1325.
  102. Yano K., Morotomi-Yano K., Akiyama H. Cernunnos/XLF: a new player in DNA double-strand break repair 11 Int. J. Biochem. Cell. Biol. 2009. V. 41. P. 1237−1240.
  103. Ahnesorg P., Smith P., Jackson S.P. XLF interacts with the XRCC4-DNA ligase IV complex to promote DNA nonhomologous end-joining II Cell 2006. V. 124. P. 301−313.
  104. Sekiguchi J.M., Ferguson D.O. DNA double-strand break repair: a relentless hunt uncovers new prey II Cell 2006. V. 124. P. 260−262.
  105. Andres S.N., Modesti M., Tsai C.J., Chu G., Junop M.S. Crystal structure of human XLF: a twist in nonhomologous DNA end-joining II Mol. Cell 2007. V. 28. P. 1093−1101.
  106. Yano K., Morotomi-Yano K., Wang S.Y., Uematsu N., Lee K.J., Asaithamby A., Weterings E., Chen D.J. Ku recruits XLF to DNA double-strand breaks II EMBO Rep. 2008. V. 9. P. 91−96.
  107. Postow L., Ghenoiu C., Woo E.M., Krutchinsky A.N., Chait B.T., Funabiki H. Ku80 removal from DNA through double strand break-induced ubiquitylation II J. Cell Biol. 2008. V. 182. P. 467−479.
  108. Kurimasa A., Ouyang H., Dong L.J., Wang S., Li X., Cordon-Cardo C., Chen D.J., Li G.C. Catalytic subunit of DNA-dependent protein kinase: impact on lymphocyte development and tumorigenesis II Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1999. V. 96. P. 1403−1408.
  109. Nussenzweig A., Chen C., da Costa Soares V., Sanchez M., Sokol K., Nussenzweig M.C., Li G.C. Requirement for Ku80 in growth and immunoglobulin V (D)J recombination I I Nature 1996. V. 382. P. 551−555.
  110. Li G., Nelsen C., Hendrickson E.A. Ku86 is essential in human somatic cells // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2002. V. 99. P. 832−837.
  111. Cai Q.Q., Plet A., Imbert J., Lafage-Pochitaloff M., Cerdan C., Blanchard J.M. Chromosomal location and expression of the genes coding for Ku p70 and p80 in human cell lines and normal tissues II Cytogenet. Cell Genet. 1994. V. 65. P. 221−227.
  112. Casellas R., Nussenzweig A., Wuerffel R.,' Pelanda R., Reichlin A., Suh H., Qin X.F., Besmer E., Kenter A., Rajewsky K., Nussenzweig M.C. Ku80 is required for immunoglobulin isotype switching IIEMBO J. 1998. V. 17. P. 2404−2411.
  113. Manis J.P., Gu Y., Lansford R., Sonoda E., Ferrini R., Davidson L., Rajewsky K., Alt F.W. Ku70 is required for late B cell development and immunoglobulin heavy chain class switching II J. Exp. Med. 1998. V. 187. P. 2081−2089.
  114. Danska J.S., Pflumio F., Williams C.J., Huner O., Dick J.E., Guidos C.J. Rescue ofT cell-specific V (D)J recombination in SCID mice by DNA damaging agents II Science 1994. V. 266. P. 450−455.
  115. Strasser A., Harris A.W., Corcoran L.M., Cory S. Bcl-2 expression promotes B- but not T-lymphoid development in scidmice II Nature 1994. V. 368. P. 457−460.
  116. Blackburn E.H. Structure and function of telomeres //Nature 1991. V. 350. P. 569−573.
  117. Smogorzewska A., van Steensel B., Bianchi A., Oelmann S., Schaefer M.R., Schnapp G., de Lange T. Control of human. telomere length by TRF1 and TRF2 II Mol. Cell. Biol. 2000. V. 20. P. 1659−1668.
  118. Hsu H.L., Gilley D., Galande S.A., Hande M.P., Allen B., Kim S.H., Li G.C., Campisi J., Kohwi-Shigematsu T., Chen D.J. Ku acts in a unique way at the mammalian telomere to prevent end joining II Genes Dev. 2000. V. 14. P. 2807−2812.
  119. Song K., Jung D., Jung Y., Lee S.G., Lee I. Interaction of human Ku70 with TRF2 II FEBS Lett. 2000. V. 481. P. 81−85.
  120. Porter S.E., Greenwell P.W., Ritchie K.B., Petes T.D. The DNA-binding protein Hdflp (a putative Ku homologue) is required for maintaining normal telomere length in Saccharomyces cerevisiae // Nucleic Acids Res. 1996. V. 24. P. 582−585.
  121. Boulton S.J., Jackson S.P. Identification of a Saccharomyces cerevisiae Ku80 homologue: roles in DNA double strand break rejoining and in telomeric maintenance II Nucleic Acids Res. 1996. V. 24. P. 4639−4648.
  122. Bianchi A., de Lange T. Ku binds telomeric DNA in vitro II J. Biol. Chem. 1999. V. 274. P. 21 223−21 227.
  123. Hsu H.L., Gilley D., Blackburn E.H., Chen D.J. Ku is associated with the telomere in mammals II Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1999. V. 96. P. 12 454−12 458.
  124. Bailey S.M., Meyne J., Chen D.J., Kurimasa A., Li G.C., Lehnert B.E., Goodwin E.H. DNA double-strand break repair proteins are required to cap the ends of mammalian chromosomes II Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1999. V. 96. P. 14 899−14 904.
  125. Samper E., Goytisolo F.A., Slijepcevic P., van Buul P.P., Blasco M.A. Mammalian Ku80 protein prevents telomeric fusions independently of the length of TTAGGG repeats and the G-strand overhang II EMBO Rep. 2000. V. 1. P. 244−252.
  126. Chai W., Ford L.P., Lenertz L., Wright W.E., Shay J.W. Human Ku70/80 associates physically with telomerase through interaction with hTERT II J. Biol. Chem. 2002. V. 277. P. 47 242−47 247.
  127. Ting N.S., Yu Y., Pohorelic B., Lees-Miller S.P., Beattie T.L. Human Ku70/80 interacts directly with hTR, the RNA component of human telomerase II Nucleic Acids Res. 2005. V. 33. P. 2090−2098.
  128. Martin S.G., Laroche T., Suka N., Grunstein M., Gasser S.M. Relocalization of telomeric Ku and SIR proteins in response to DNA strand breaks in yeast II Cell 1999. V. 97. P. 621−633.
  129. Espejel S., Franco S., Rodriguez-Perales S., Bouffler S.D., Cigudosa J.C., Blasco M.A. Mammalian Ku80 mediates chromosomal fusions and apoptosis caused by critically short telomeres IIEMBO J. 2002. V. 21. P. 2207−2219.
  130. Jaco I., Munoz P., Blasco M.A. Role of human Ku86 in telomere length maintenance and telomere capping II Cancer Res. 2004. V. 64. P. 7271−7278.
  131. Giffin W., Torrance H., Rodda D.J., Prefontaine G.G., Pope L., Hache R.J. Sequence-specific DNA binding by Ku autoantigen and its effects on transcription II Nature 1996. V. 380. P. 265−268.
  132. Liu E.S., Lee A.S. Common sets of nuclear factors binding to the conserved promoter sequence motif of two coordinately regulated ER protein genes, GRP78 and GRP94 II Nucleic Acids Res. 1991. V. 19. P. 5425−5431.
  133. Li G.C., Yang S.H., Kim D., Nussenzweig A., Ouyang H., Wei J., Burgman P., Li L. Suppression of heat-induced hsp70 expression by the 70-kDa subunit of the human Ku autoantigen // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1995. V. 92. P. 4512−4516.
  134. Mo X., Dynan W.S. Subnuclear localization of Ku protein: functional association with RNA polymerase II elongation sites 11 Mol. Cell. Biol. 2002. V. 22. P. 8088−8099.
  135. Woodard R.L., Lee K.J., Huang J., Dynan W.S. Distinct roles for Ku protein in transcriptional reinitiation and DNA repair II J. Biol. Chem. 2001. V. 276. P. 15 423−15 433.
  136. Cao Q.P., Pitt S., Leszyk J., Baril E.F. DNA-dependent ATPase from HeLa cells is related to human Ku autoantigen II Biochemistry 1994. V. 33. P. 8548−8557.
  137. Shieh B., Schultz J., Guinness M., Lacy J. Regulation of the human IgE receptor (Fc epsilonRII/CD23) by Epstein-Barr virus (EBV): Ku autoantigen binds specifically to an EBV-responsive enhancer ofCD23 II Int. Immunol. 1997. V. 9. P. 1885−1895.
  138. Cohen H.Y., Lavu S, Bitterman K.J., Hekking B., Imahiyerobo T.A., Miller C., Frye R., Ploegh H., Kessler B.M., Sinclair D.A. Acetylation of the C terminus of Ku70 by CBP andPCAF controls Bax-mediated apoptosis II Mol. Cell. 2004. V. 13. P. 627−638.
  139. Amsel A.D., Rathaus M., Kronman N., Cohen H.Y. Regulation of the proapoptotic factor Bax by Ku70-dependent deubiquitylation II Proc. Natl. Acad. Sei. USA 2008. V. 105. P. 5117−5122.
  140. Iijima K., Muranaka C., Kobayashi J., Sakamoto S., Komatsu K., Matsuura S., KubotaN., Tauchi H. NBS1 regulates a novel apoptotic pathway through Bax activation II DNA Repair 2008. V. 7. P. 1705−1716.
  141. Lynch E.M., Moreland R.B., Ginis I., Perrine S.P., D. V. Faller D.V. Hypoxia-activated ligand HAL-1/13 is lupus autoantigen Ku80 and mediates lymphoid cell adhesion in vitro II Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2001. V. 280. P. 897−911.
  142. Monferran S., Muller C., Mourey L., Frit P., Salles B. The membrane-associate form of the DNA repair protein Ku is involved in cell adhesion to fibronectin II J. Mol. Biol. 2004. V. 337. P. 503−511.
  143. Ginis I., Faller D.V. Hypoxia affects tumor cell invasiveness in vitro: the role of hypoxia-activated ligandHAL1/13 Ku80 autoantigen II Cancer Lett. 2000. V. 154. P. 163−174.
  144. Monferran S., Paupert J., Dauvillier S., Salles B., Muller C. The membrane form of the DNA repair protein Ku interacts at the cell surface with metalloproteinase 9 II EMBO J. 2004. V. 23. P. 3758−3768.
  145. Tai Y.T., Podar K., Kraeft S.K., Wang F., Young G., Lin B., Gupta D., Chen L.B., Anderson K.C. Translocation of Ku80/Ku70 to the multiple myeloma cell membrane: functional implications II Exp. Hematol. 2002. V. 30. P. 212−220.
  146. Fewell J.W., Kuff E.L. Intracellular redistribution of Ku immunoreactivity in response to cell-cell contact and growth modulating components in the medium II J. Cell Sci. 1996. V. 109. P. 1937−1946.
  147. Walker D.H. Targeting rickettsia II N. Engl. J. Med. 2006. V. 354. P. 1418−1420.
  148. Muller C., Dusseau C., Calsou P., Salles B. Human normal peripheral blood B-lymphocytes are deficient in DNA-dependent protein kinase activity due to the expression of a variant form of the Ku80 protein 11 Oncogene 1998. V. 16. P. 1553−1560.
  149. Jeng Y.W., Chao H.C., Chiu C.F., Chou W.G. Senescent human fibroblasts have elevatedKu80proteolytic cleavage activity II Mutat. Res. 1999. V. 435. P. 225−232.
  150. Kato M., Iida S., Komatsu H., Ueda R. Lack of Ku80 alteration in multiple myeloma II Jpn. J. Cancer Res. 2002. V. 93. P. 359−362.
  151. Lanuszewska J., Widiak P. The truncation of Ku86 in human lymphocytes II Cancer Lett. 2004. V. 205. P. 197−205.
  152. Sallmyr A., Henriksson G., Fukushima S., Bredberg A. Ku protein in human T and B lymphocytes, full length functional form and signs of degradation II Biochim. Biophys. Acta 2001. V. 1538. P. 305−312.
  153. Sallmyr A., Du L., Bredberg A. An inducible Ku80-degrading serine protease in human cells II Biochim. Biophys. Acta 2002. V. 1593. P. 57−68.
  154. Khanna K.K., Jackson S.P. DNA double-strand breaks: signaling, repair and the cancer connection //Nat. Genet. 2001. V. 27. P. 247−254.
  155. Li G.C., Ouyang H., Li X., Nagasawa H., Little J.B., Chen D.J., Ling C.C., Fuks Z" Cordon-Cardo C. Ku70: a candidate tumor suppressor gene for murine T cell lymphoma II Mol. Cell 1998. V. 2. P. 1−8.
  156. Kinzler K.W., Vogelstein B. Cancer-susceptibility genes. Gatekeepers and caretakers II Nature 1997. V. 386. P. 761−763.
  157. Difilippantonio M.J., Zhu J., Chen H.T., Meffre E., Nussenzweig M.C., Max E.E., Ried T., Nussenzweig A. DNA repair protein Ku80 suppresses chromosomal aberrations and malignant transformation //Nature 2000. V. 404. P. 510−514.
  158. Gao Y., Ferguson D.O., Xie W., Manis J.P., Sekiguchi J., Frank K.M., Chaudhuri J., Horner J., DePinho R.A., Alt F.W. Interplay of p53 and DNA-repair protein XRCC4 in tumorigenesis, genomic stability and development II Nature 2000. V. 404. P. 897−900.
  159. Lindahl T., Satoh M.S., Poirier G.G., Klungland A. Post-translational modification of poly (ADP-ribose) polymerase induced by DNA strand breaks // Trends Biochem. Sci. 1995. V. 20. P. 405−411.
  160. Herceg Z., Wang Z.Q. Functions of poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) in DNA repair, genomic integrity and cell death II Mutat. Res. 2001. V. 477. P. 97−110.
  161. Tong W.M., Hande M.P., Lansdorp P.M., Wang Z.Q. DNA strand breaksensing molecule poly (ADP-ribose) polymerase cooperates with p53 in telomere function, chromosome stability, and tumor suppression II Mol. Cell. Biol. 2001. V. 21. P.4046−4054.
  162. Lim J.W., Kim H., Kim K.H. Expression of Ku70 and Ku80 mediated by NF-kappa B and cyclooxygenase-2 is related to proliferation of human gastric cancer cells II J. Biol. Chem. 2002. V. 277. P. 46 093−46 100.
  163. Lim J.W., Kim H., Kim K.H. Nuclear factor-kappaB regulates cyclooxygenase-2 expression and cell proliferation in human gastric cancer cells II Lab. Invest. 2001. V. 81. P. 349−360.
  164. Sheng H., Shao J., Morrow J.D., Beauchamp R.D., DuBois R.N. Modulation of apoptosis and Bcl-2 expression by prostaglandin E2 in human colon cancer cells II Cancer Res. 1998. V. 58. P. 362−366.
  165. Klein A., Miera O., Bauer O., Golfier S., Schriever F. Chemosensitivity ofB cell chronic lymphocytic leukemia and correlated expression of proteins regulating apoptosis, cell cycle and DNA repair II Leukemia 2000. V. 14. P. 40−46.
  166. Pucci S., Mazzarelli P., Rabitti C., Giai M., Gallucci M., Flammia G., Alcini A., Altomare V., Fazio V.M. Tumor specific modulation of KU70/80 DNA binding activity in breast and bladder human tumor biopsies 11 Oncogene 2001. V. 20. V. 739−747.
  167. Kim S.H., Kim D" Han J.S., Jeong C.S., Chung B.S., Kang C.D., Li G.C. Ku autoantigen affects the susceptibility to anticancer drugs II Cancer Res. 1999. V. 59. P. 4012−4017.
  168. Gabai V.L., Meriin A.B., Mosser D.D., Caron A.W., Rits S., Shifrin V.I., Sherman M.Y. HsplO prevents activation of stress kinases. A novel pathway of cellular thermotolerance II J. Biol. Chem. 1997. V. 272. V. 18 033−18 037.
  169. Samali A., Cotter T.G. Heat shock proteins increase resistance to apoptosis II Exp. Cell Res. 1996. V. 223. P. 163−170.
  170. Li G.C., He F., Shao X., Urano M., Shen L., Kim D., Borrelli M.,.Leibel S.A., GutinP.H., Ling C.C. Adenovirus-mediated heat-activated antisense Ku70 expression radiosensitizes tumor cells in vitro and in vivo II Cancer Res. 2003. V. 63. P. 3268−3274.
  171. Lebedeva N.A., Khodyreva S.N., Favre A, Lavrik O.I. AP endonuclease I has no biologically significant 3 '—>5'-exonuclease activity // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2003. V. 300. P. 182−187.
  172. M.B., Ходырева C.H., Лаврик О. И. Поли(АОР-рибоза)полимераза 1 ингибирует синтез ДНК с вытеснением цепи, катализируемый ДНК-полимеразой /3 И Биохимия 2004. Т. 69. С. 686−698.
  173. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Anal. Biochem. 1976. V. 72. P. 248−254.
  174. Biade S., Sobol R., Wilson S., Matsumoto Y. Impairment of proliferating cell nuclear antigen-dependent apurinic/apyrimidinic site repair on linear DNA II J. Biol. Chem. 1998. V. 273. P. 898−902.
  175. Lanuszewska J., Cudak A., Rzeszowska-Wolny J., Widlak P. Detection of damage-recognition proteins from human lymphocytes H Acta Biochim. Pol. 2000. V. 47. P. 443−450.
  176. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual II N. Y.: 2nd End. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, 1989.
  177. Wilm M., Shevchenko A., Houthaeve Т., Breit S., Schweigerer L., Fotsis Т., Mann M. Femtomole sequencing of proteins from polyacrylamide gels by nano-electrospray mass spectrometry II Nature 1996. V. 379. P. 466−469.ч
  178. Shevchenko A., Wilm M., Vorm O., Mann M. Mass Spectrometry Sequencing of Proteins from Silver-Stained Polyacrylamide Gels H Anal. Chem. 1996. V. 68. P. 850−858.
  179. Lebedeva N.A., Rechkunova N.I., Khodyreva S.N., Favre A, Lavrik O.I. Photoaffinity labeling of proteins in bovine testis nuclear extract II Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002. V. 297. P. 714−721.
  180. C.B., Ходырева C.H., Речкунова Н. И., Колпащиков Д. М., Лаврик О. И. Сравнительное изучение эффективности модификации ДНК-полимераз и ДНК-матрицы различными фотоактивными группами на 3'-конце ДНК-праймера И Биоорган, химия 2003. V. 29. Р. 74−81.
  181. Н.А., Речкунова Н. И., Дежуров С. В., Ходырева С. Н., Фавр А., Лаврик О. И. Новая бинарная система для фотосинсибилизированной модификации ДНК-полимераз в ядерном экстракте II Биохимия 2003. Т. 68. С. 584−591.
  182. Lavrik O.I., Kolpashchikov D.M., Prasad R., Sobol R.W., Wilson S.H. Binary system for selective photoaffinity labeling of base excision repair DNA polymerases II Nucleic Acids Res. 2002. V. 30. P. e73.
  183. Chagovetz A.M., Sweasy J.B., Preston B.D. Increased activity and fidelity of DNA polymerase beta on single-nucleotide gapped DNA II J. Biol. Chem. 1997. V. 272. P. 7501−27 504.
  184. Takeshita M., Chang C.N., Johnson F., Will S., Grollman A.P. Oligodeoxynucleotides containing synthetic abasic sites. Model substrates for DNA polymerases and apurinic/apyrimidinic endonucleases // J. Biol. Chem. 1987. V. 262. P. 10 171−10 179.
  185. C.B., Грин И. Р., Сафронов И. В., Шишкин Г. В., Лаврик О. И., Ходырева С. Н. Высокоэффективная модификация ДНК-полимеразы бета в условиях прямой и сенсибилизированной активации фотоактивных ДНК.
  186. Модификация белков клеточного экстракта // Известия Акад. наук. Серия хим. 2005. Т. 54. С. 1273−1283.
  187. Lindahl Т. Instability and decay of the primary structure of DNA II Nature 1993. V. 362. P. 709−715.
  188. McCullough A.K., Dodson M.L. Lloyd R.S. Initiation of base excision repair: glycosylase mechanisms and structures И Annu. Rev. Biochem. 1999. V. 68. P. 255−285.
  189. Atamna H., Cheung I., Ames B.N. A method for detecting abasic sites in living cells: age-dependent changes in base excision repair II Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2000. V. 97. P. 686−691.
  190. Loeb L.A., Preston B.D. Mutagenesis by apurinic/apyrimidinic sites II Annu Rev. Genet. 1986. V. 20. P. 201−230.
  191. Nazarkina Z.K., Khodyreva S.N., Marsin S., Lavrik O.I., Radicella J.P. XRCC1 interactions with base excision repair DNA intermediates // DNA Repair 2007. V. 6. P. 254−264.
  192. C.H., Ильина E.C., Суханова M.B., Кутузов М. М., Лаврик О. И. Взаимодействие поли(АОР-рибозо)полимеразы 1 с апуриновьши/апиримидиновыми сайтами II Докл. Акад. наук 2010. Т. 431. С. 132−135.
  193. Guggenheim E.R., Xu D., Zhang C.X., Chang P.V., Lippard S.J. Photoaffinity isolation and identification of proteins in cancer cell extracts that bind to platinum-modified DNA II Chembiochem 2009. V. 10. P. 141−157.
  194. Zhu G., Lippard S.J. Photoaffinity labeling reveals nuclear proteins that uniquely recognize cisplatin-DNA interstrand cross-links II Biochemistry 2009. V. 48. P.4916−4925.
  195. Hegde V., Wang M., Deutsch W.A. Human ribosomal protein S3 interacts with DNA base excision repair proteins hAPE/Ref-1 and hOGGl II Biochemistry 2004. V. 43. P. 14 211−14 217.
  196. Postel E.H., Abramczyk B.M., Levit M.N., Kyin S. Catalysis of DNA cleavage and nucleoside triphosphate synthesis by NM23-H2/NDP kinase share an active site that implies a DNA repair function // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2000. V. 97. P. 14 194−14 199.
  197. Muller T.A., Meek K., Hausinger R.P. Human AlkB homologue 1 (ABH1) exhibits DNA lyase activity at abasic sites // DNA Repair 2010. V. 9. P. 58−65.
  198. Roberts S.A., Strande N., Burkhalter M.D., Strom C., Havener J.M., Hasty P., RamsdenD.A. Ku is a 5'-dRP/AP lyase that excises nucleotide damage near broken ends //Nature 2010. V. 464. P. 1214−1217.
  199. Errami A., Finnie N.J., Morolli B., Jackson S.P., Lohman P.H., Zdzienicka M.Z. Molecular and biochemical characterization of new X-ray-sensitive hamster celbmutants defective in Ku8011 Nucleic Acids Res. 1998. V. 26. P. 4332−4338.
  200. Eot-Houllier G., Eon-Marchais S., Gasparutto D., Sage E. Processing of a complex multiply damaged DNA site by human cell extracts and purified repair proteins II Nucleic Acids Res. 2005. V. 33. P. 260−271.
  201. Tian K., McTigue M., de los Santos C. Sorting the consequences of ionizing radiation: processing of 8-oxoguanine/abasic site lesions II DNA Repair 2002. V. 1. P. 1039−1049.
  202. Georgakilas A.G., Bennett P.V., Wilson 3rd D.M., Sutherland B.M. Processing of bistranded abasic DNA clusters in gamma-irradiated human hematopoietic cells II Nucleic Acids Res. 2004. V. 32. P. 5609−5620.
  203. Gulston M., de Lara C., Jenner T., Davis E., O’Neill P. Processing of clustered DNA damage generates additional double-strand breaks in mammalian cells post-irradiation II Nucleic Acids Res. 2004. V. 32. P. 1602−1609.
  204. Yang N., Galick H., Wallace S.S. Attempted base excision repair of ionizing radiation damage in human lymphoblastoid cells produces lethal and mutagenic double strand breaks I I DNA Repair 2004. V. 10. P. 1323−1334.
  205. Hashimoto M., Donald C.D., Yannone S.M., Chen D.J., Roy R., Kow Y.W. A possible role of Ku in mediating sequential repair of closely opposed lesions II J. Biol. Chem. 2001. V. 276. P. 12 827−12 231.
  206. D.M. 3rd, Barsky D. The major human abasic endonuclease: formation, consequences and repair of abasic lesions in DNA I I Mutat. Res. 2001. V. 485. P. 283−307.
  207. Matheos D., Ruiz M.T., Price G.B., Zannis-Hadjopoulos M. Ku antigen, an origin-specific binding protein that associates with replication proteins, is required for mammalian DNA replication 11 Biochim. Biophys. Acta 2002. V. 1578. P. 59−72.
  208. Demple B., Herman T., Chen D.S. Cloning and expression of APE, the cDNA encoding the major human apurinic endonuclease: definition of a family of DNA repair enzymes II Proc. Natl. Acad. Sci. U S A 1991. V. 88. P. 11 450−11 454.
  209. Robson C.N., Hickson I.D. Isolation of cDNA clones encoding a human apurinic/apyrimidinic endonuclease that corrects DNA repair and mutagenesis defects in E. colixth (exonuclease III) mutants //Nucleic Acids Res. 1991. V. 19. P. 5519−5523.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!