Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Исследование антирадикальной активности плазмы крови и секретов желудочно-кишечного тракта

Диссертация: Исследование антирадикальной активности плазмы крови и секретов желудочно-кишечного тракта
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Нашими исследованиями установлено, что антиоксидантная активность плазмы крови в 5−6 раз выше антиоксидантной активности слизи желудка, а антирадикальная активность (соответственно) — в 3 раза. Эти данные подтверждают, что в исследуемых биологических субстратах существует два вида защиты от действия радикалов: антирадикальная и антиоксидантная активность. Соотношение… Читать ещё >

Исследование антирадикальной активности плазмы крови и секретов желудочно-кишечного тракта (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Активные формы кислорода и антиоксидантная система организма
      • 1. 1. 1. Виды активных форм кислорода и других молекул
      • 1. 1. 2. Физиологические функции и метаболизм активных форм кислорода в организме человека и животных
      • 1. 1. 3. Влияние активных форм кислорода на процессы перекисного окисления липидов в организме
      • 1. 1. 4. Антиоксидантная система организма и ее физиологическое значение
      • 1. 1. 5. Возрастные особенности антиоксидантной защиты организма человека и животных
      • 1. 1. 6. Методы изучения радикальных реакций
      • 1. 1. 7. Методы исследования антиоксидантной активности биологических образцов и экзогенных антиоксидантов
    • 1. 2. Структура и функции пристеночного слизистого слоя пищеварительного тракта
      • 1. 2. 1. Состав полимеризованных гликопротеинов и внеструктурные компоненты пристеночного слизистого слоя пищеварительного тракта
      • 1. 2. 2. Поступление экзогенных антиоксидантов через пищеварительный тракт
  • ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
    • 2. 1. Объекты исследования
    • 2. 2. Материалы исследования
    • 2. 3. Методы исследования
      • 2. 3. 1. Исследование антиоксидантной активности организма
      • 2. 3. 2. Разделение и биохимический анализ структурных и внеструк-турных компонентов пристеночного слизистого слоя желудочно-кишечного тракта у собак
      • 2. 3. 3. Методологические задачи определения антиоксидантной активности организма
        • 2. 3. 3. 1. Источники радикалов активных форм кислорода и других молекул
        • 2. 3. 3. 2. Влияние соотношения компонентов стандартного раствора на процессы реакции хемилюминесценции и степень ее ингибирования
        • 2. 3. 3. 3. Сохранение свойств нативных образцов исследуемого биологического материала
        • 2. 3. 3. 4. Спектрофотометрическое определение концентрации белковых растворов и степени их прозрачности
        • 2. 3. 3. 5. Исследование зависимости реакции хемилюминесценции от объема биологических образцов
      • 2. 3. 4. Ход определения антиоксидантной и антирадикальной активности
      • 2. 3. 5. Расчеты антиоксидантной и антирадикальной активности
      • 2. 3. 6. Статистические методы
  • ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
    • 3. 1. Исследование антиоксидантной и антирадикальной активности плазмы крови, гомогената слизи желудка, алкогольных напитков и их комплексов с плазмой крови или слизью желудка
    • 3. 2. Исследование антиоксидантной и антирадикальной активности хитозана
    • 3. 3. Видовые особенности антиоксидантной и антирадикальной активности плазмы крови у теплокровных животных
    • 3. 4. Возрастные особенности антиоксидантной и антирадикальной активности плазмы крови бройлеров породы кросс ИЗА
    • 3. 5. Исследование взаимоотношений биохимического состава пристеночного слизистого слоя и антирадикальной активности в различных отделах пищеварительного тракта у собак

Актуальность и постановка проблемы. Актуальность исследования определяется все возрастающим пониманием роли многокомпонентной антирадикальной системы для защиты организма от токсического действия радикалов внешней и внутренней среды. Многочисленными исследованиями показаны физиологические функции и метаболизм активных форм кислорода в организме человека и животных (Величковский Б.Т., 2000; Воейков В. Л., 2003; Капелько В. И., 2003; Владимиров Ю. А., 2004; Halliwell В., Gutteridge J.M.C., 1992; De Lamirande Е. et al. 1993; Levin G., Popov J. 1994; Sawyer D.T. et al., 1996; Xia Y., Zweier J.L., 1997; A M. Saran et al. 2000).

Установлено, что в основе канцерогенеза, атеросклероза, хронических воспалений, нервных дегенеративных заболеваний лежит токсичное действие вторичных радикалов, образовавшихся в результате метаболических процессов (Сучков В.П. и соавт., 1978; Владимиров Ю. А., 1998; Кольтовер В. К., 1998; Хавинсон В. Х. и соавт., 2003; Manning А. et al., 1984; Pacifici R.E., Davies К.J.A., 1991; Pierpaoli W. et al., 1994; Tokumaru S. et al., 1996).

В то же время еще очень многие стороны антиоксидантной защиты организма остаются малоизученными. Так, радикалы из внешней среды поступают через открытые системы организма (дыхательную, пищеварительную, мочеполовую), однако механизмы антирадикальной защиты этих систем почти неизвестны. Отсутствуют сравнительные данные о состоянии антирадикальной активности плазмы крови и других систем организма у разных видов.

В настоящее время установлена антиоксидантная активность многих ферментов (супероксиддисмутаза, каталаза, пероксидазы, глутатионредуктаза и др.), продуктов метаболизма (белки сыворотки крови, стероидные гормоны, женские половые гормоны, убихинон и др.), пищевых веществ и напитков (фрукты, овощи, зеленый чай, растительные масла и др.) (Клебанов Г. И. и соавт., 1988; Теселкин Ю. О., 1997; Frigg M. et al, 1983; Jenkins M.Y. et al, 1986; Yi O.S. et al" 1991; Meister A" 1992; Lissi E. et al, 1992; Li-Chag Lu et al, 2003; Huang D.-J. et al, 2004).

Однако для некоторых тканей и систем пока не установлены конкретные носители антиоксидантной активности, т. е. не определены прямые корреляции между уровнем антиоксидантной активности той или иной системы и ее структурными компонентами.

Реакции образования и удаления активных форм кислорода и других радикалов (гидроксильный радикал, супероксид, липоксильный радикал, пероксинитрит и другие) обеспечиваются различными механизмами, объединенными в антиоксидантную систему организма (Владимиров Ю. А, 2004; Carrell R.W. et al, 1975; Levin G, Popov J,. 1994).

Взаимодействия между отдельными звеньями антиоксидантной системы в настоящее время широко исследуются (Воейков B. J1, 2003; Капелько В. И, 2003; Poovaiah В.Р. et al, 1986; Pacifici R. E, Davies K.J.A, 1991; Yi O.S. et al, 1991), однако ясности в этом вопросе пока нет, что определяется сложностью и неоднозначностью интерпретации результатов (Levin G, Popov J,. 1994).

Поэтому особое значение приобретают методы исследования антиоксидантной активности биологических субстратов. Все существующие методы оценки радикальных реакций делятся на косвенные и прямые (Владимиров Ю. А, 1998; Vladimirov Y. A, Putvinsky A. V, 1992).

Наиболее информативными являются прямые методы исследования радикалов, к которым относятся метод электронного парамагнитного резонанса и метод хемилюминесценции. Хемилюминесцентный метод основан на механизме выделения фотонов в результате взаимодействия радикалов друг с другом. Интенсивность свечения пропорциональна скорости реакции в естественных условиях, без специальной подготовки исследуемого материала. Эти положительные стороны хемилюминесцентного метода объясняют его широкое применение в самых разных областях (Величковский Б.Т., 2000; Воейков B. JL, 2003; Владимиров Ю. А., 2004; Lissi Е. et al., 1992 Uotila J. et al., 1996; Smith R. et al., 1996; Cao G. et al., 2000). В настоящее время существует огромное количество модификаций хемилюминесцентного метода, предназначенного для конкретных субстратов (Клебанов Г. И. и соавт., 1988; Теселкин Ю. О. и соавт., 1997; Lissi Е. et al., 1992; Parejo J. et al., 2000; Akiyama Y. et al., 2001).

Именно большое количество модификаций затрудняет сравнительный анализ уровней антиоксидантной активности в разных субстратах.

Цель работы: Исследовать антирадикальную и антиоксидантную активность плазмы крови и слизи желудочно-кишечного тракта у теплокровных животных.

Задачи исследования:

1. Подобрать состав стандартного раствора и объем исследуемой пробы для хемилюминесцентного анализа, позволяющего проводить исследования в различных биологических субстратах;

2. Провести сравнительное исследование антиоксидантной и антирадикальной активности различных биологических субстратов и их комплексов;

3. Исследовать видовые особенности антиоксидантной и антирадикальной активности плазмы крови у млекопитающих (человек, собака, мышь) и птиц (бройлер);

4. Исследовать возрастные особенности антиоксидантной и антирадикальной активности плазмы крови бройлеров;

5. Исследовать корреляционные зависимости антирадикальной активности и биохимического состава компонентов пристеночного слизистого слоя различных отделов пищеварительного тракта у собак.

Научная новизна. Впервые установлено, что в биологических субстратах, таких, как плазма крови и слизь пищеварительного тракта, присутствует система защиты организма от действия радикалов внешней и внутренней среды, состоящая из двух частей: антиоксидантной активности (защита от действия активных форм кислорода) и антирадикальной активности (защита от действия радикалов различной природы). Причем уровень антирадикальной активности на два порядка выше, уровня антиоксидантной активности. Впервые установлены видовые особенности антиоксидантной и антирадикальной активности плазмы крови у разных видов теплокровных животных (человек, собака, мышь, бройлер). Впервые установлены некоторые механизмы, обуславливающие антирадикальную активность пищеварительного тракта.

Практическая значимость. Предложен модифицированный метод ингибирования люминолзависимой хемилюминесценции, который может быть использован для широкого круга исследований антирадикальной и антиоксидантной активности различных биологических субстратов. Установленные закономерности взаимодействия напитков, содержащих алкоголь, со слизью желудка и плазмой крови, могут стать физиологическим обоснованием здорового образа жизни.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Использование двух источников (дифенилпикрилгидразил и фитонцидная фракция), генерирующих радикалы, позволило установить два вида защиты организма от действия радикалов: антиоксидантная активность и антирадикальная активность;

2. Основными носителями антирадикальной активности пристеночного слизистого слоя пищеварительного тракта у собак являются белок, N-ацетилнейраминовая кислота полимеризованных гликопротеинов и гексо-замины деградированных молекул гликопротеинов слизи;

3. Метод позволяет проводить сравнительные исследования антиоксидантной и антирадикальной активности в различных биологических субстратах.

Апробация результатов. Результаты работы были представлены на International Symposium on Science and Technology (Tomsk, 2001) — IY Съезде физиологов Сибири (Новосибирск, 2002) — 7-th Korea-Russia International Symposium on Science and Technology (Ulsan, Korea, 2003) — I Съезде физиологов СНГ (Сочи, Дагомыс, 2005) — на Всероссийской научной конференции «Механизмы адаптации организма» (Томск, 2006).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 работ. Из них 5 статей в центральной печати.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов и обсуждения, заключения, выводов и списка цитируемой литературы, включающего 116 источников, из них 35 отечественных и 81 зарубежных. Работа изложена на 128 страницах машинописного текста, включает 15 таблиц и 16 рисунков.

ВЫВОДЫ.

1. Подобран состав стандартных растворов и соотношение объемов проб для хемилюминесцентного метода сравнительных исследований антиоксидантной (источник радикалов дифенилпикрилгидразил) и антирадикальной (источник радикалов — фитонцидная фракция) активности в различных биологических субстратах.

2. Установлено, что плазма крови и слизь пищеварительного тракта обладают способностью тушить люминозависимую хемилюминесценцию, индуцированную супероксид анионом и/или комплексом других радикалов.

3. Сравнительное исследование антиоксидантной и антирадикальной активности слизи желудочно-кишечного тракта и плазмы крови показало, что антиоксидантная активность этих субстратов составляет от 1% до 2% их антирадикальной активности.

4. Добавление напитков, содержащих алкоголь, к пробам желудочной слизи или плазмы крови, изменяет исходную антиоксидантную и антирадикальную активность этих субстратов. Добавление коньяка снижает, а добавление алкогольных настоек растительного сырья увеличивает исходную антиоксидантную и антирадикальную активность желудочной слизи или плазмы крови.

5. Установлены видовые различия уровня антиоксидантной и антирадикальной активности у человека, собак, мышей и цыплят бройлеров. Наиболее высокие значения антиоксидантной активности установлены у мышей, антирадикальной активностиу собак.

6. Установлены возрастные изменения антиоксидантной и антирадикальной активности плазмы крови у бройлеров: наибольшая антиоксидантная активность установлена у половозрелых бройлеров, наибольшая антирадикальная активность установлена у бройлеров в пубертатном периоде.

7. Антирадикальная активность пристеночного слизистого слоя определяется полимеризованными гликопротеинами и внеструктурными компонентами слизистого слоя. Антирадикальная активность прямо коррелирует с концентрацией белка (0,85) и с концентрацией Ы-ацетилнейраминовой кислоты (0,78) в полимеризованных гликопротеинах. Антирадикальная активность внеструктурных компонентов пристеночного слизистого слоя выше, чем антирадикальная активность полимеризованных гликопротеинов. Уровень антирадикальной активности отмывок, получаемых при выделении полимеризованных гликопротеинов, имеет коэффициент корреляции, равный 0,96, с содержанием в отмывках свободных гексозаминов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Проведенные исследования показали, что для сравнительного определения интегральных показателей антиоксидантной и антирадикальной активности биологических субстратов можно подобрать соответствующие составы стандартных растворов и соотношения объемов пробы. В наших исследованиях был использован принцип тушения пробой люминолзависимой хемилюминесценции (Хавинсон В.Х. и соавт, 2003; Lissi Е. et al, 1992; Popov J. N, Levin G, 1994 и мн. др.). Были заданы следующие условия:

1) Подобрать такой метод, который может быть использован для проведения сравнительных исследований активности как эндогенных антиоксидантов, содержащихся в биологических образцах (плазма крови, гомогенат слизи пищеварительного тракта), так и экзогенных, содержащихся в различных напитках и пищевых продуктах, биологически активных добавках, фармакологических препаратах;

2) Соотношение растворов (реагирующая смесь/исследуемый материал) должно быть таким, чтобы высокомолекулярные соединения плазмы крови и слизи пищеварительного тракта (белки и гликопротеины) не преципитировали и не подвергались расщеплению, что могло бы привести к значительному изменению их свойств;

3) Состав стандартного раствора реагирующей смеси должен обеспечивать стабильный уровень хемилюминесценции, так называемое плато максимальной хемилюменесценции стандартного раствора должно быть стабильным в течение как минимум 90 секунд;

4) Метод должен позволять использовать различные источники радикалов не только активных форм кислорода, но и других атомов и молекул что дало бы возможность сравнивать степень ингибирования радикалов, генерируемых этими источниками, эндогенными и экзогенными антиоксидантами;

5) Метод должен обладать высокой точностью и воспроизводимостью.

Проведенные многочисленные исследования показали, что подобраны варианты стандартных растворов для дефенилпикрилгидразила и фитонцидной фракции, удовлетворяющие вышеперечисленным условиям.

Достоверность наших результатов подтверждается тем, что:

— повторяемость максимального уровня хемилюминесценции для стандартных растворов, содержащих дифенилпикрилгидразил или фитонцидную фракцию, очень высока и колебания его для стандартных растворов, приготовленных в разное время, не превышают 10%;

— установлен диапазон соотношений объемов добавляемой пробы и концентрации компонентов стандартного раствора, в котором сохраняется прямая пропорциональность между концентрацией антиоксидантных или антирадикальных веществ в пробе и изменением уровня хемилюминесценции;

— при повторении измерения одной и той же пробы колебания показателей составляют менее 5%;

— доказано сохранение свойств нативных образцов исследуемого биологического материала путем минимальной обработки материала перед анализом и спектрофотометрически подтверждено отсутствие изменений оптических свойств исследуемой пробы в стандартном растворе.

Использование двух видов доноров радикалов в стандартном растворе (дифенилпикрилгидразила и фитонцидной фракции) позволило установить, что общая система защиты организма от действия радикалов внешней и внутренней среды состоит из двух частей (видов): антирадикальной активности, поскольку дифенилпикрилгидразил является источником единственной активной формы кислорода — супероксид аниона, и антирадикальной активности, поскольку фитонцидная фракция, по-видимому, является донором фенильных, метальных, этильных, бензильных, алкильных и других видов радикалов, и возможно, активных форм кислорода.

Антирадикальная активность слизи желудка в 150−160 раз выше ее антиоксидантной активности, а антирадикальная активность плазмы крови выше ее антиоксидантной активности в 75−80 раз. Вероятно, это объясняется тем, что слизь пищеварительного тракта является одним из первых барьеров на пути проникновения во внутреннюю среду организма токсических веществ (ксенобиотоков), метаболизм которых может сопровождаться образованием радикалов различной природы (активные формы кислорода, азота, водорода, хлора и др.).

В главе 3.5. показана возможность существования трех механизмов антирадикальной защиты слизи желудочно-кишечного тракта. Вероятно, эти механизмы и обеспечивают более высокий уровень соотношения антирадикальной/антиоксидантной активности слизи пищеварительного тракта по сравнению с плазмой крови.

На 93% кровь представлена плазмой — коллоидным раствором, в состав которого входят частицы от простейших ионов до сложно устроенных молекул, относящихся ко многим классам химических соединений. Многочисленными исследованиями (Кольтовер В.К., 1998; Хавинсон В. Х. и соавт., 2003; Владимиров Ю. А., 2004; Yi O.S. et al., 1991; Meister A., 1992; Levin G., Popov J., 1994) установлено, что антиоксидантная активность плазмы крови обусловлена макромолекулярными неферментативными антиоксидантами (трансферин, церулоплазмин, гаптоглобины и другие белки сыворотки крови) и низкомолекулярными компонентами (тироксин, флавоноиды, стероидные гормоны, убихинон, билирубин, витамины, низкомолекулярные S-H соединения). Однако установлено, что при определенных условиях иммуноглобулины плазмы крови могут продуцировать активные формы кислорода (Wentworth A.D. et а1., 2001; Wentworth Р. е1 а1., 2002). Исследованиями Сао в. е1 а1. (1999; 2000) показано, что антиоксидантная активность лиофилизированной сыворотки крови ниже плазмы крови. Также следует учитывать то, что плазма крови не содержит клеточные антиоксиданты.

Нашими исследованиями установлено, что антиоксидантная активность плазмы крови в 5−6 раз выше антиоксидантной активности слизи желудка, а антирадикальная активность (соответственно) — в 3 раза. Эти данные подтверждают, что в исследуемых биологических субстратах существует два вида защиты от действия радикалов: антирадикальная и антиоксидантная активность. Соотношение антирадикальная/антиок-сидантная активность в исследуемых биологических образцах различается в два раза. Снижение этого соотношения в плазме крови объясняется увеличением ее антиоксидантной активности по сравнению с пристеночным слизистым слоем. Вероятно, это объясняется разнообразием механизмов как антирадикальной, так и антиоксидантной активности плазмы крови и слизи желудочно-кишечного тракта.

С физиологической точки зрения особенно важно то, что использованные биологические субстраты — плазма крови и слизь пищеварительного тракта обладают способностью тушения индуцированной хемилюминесценции стандартных растворов, содержащих дифенилпикрилгидразил или фитонцидную фракцию. Это также свидетельствует о том, что в исследованных биологических субстратах присутствуют два вида системы защиты от токсического действия радикалов.

Учитывая, что антиоксидантная активность организма, уже достаточно хорошо изученная, представлена самыми разнообразными механизмами (ферментативные антиоксиданты клетки, макромолекулярными и низкомолекулярными неферментативными компонентами и др.), можно предполагать, что антирадикальная активность организма еще более многообразна и имеет еще более сложные взаимодействия между отдельными компонентами.

По-видимому, если общую систему защиты организма от разрушающего действия радикалов внешней и внутренней среды назвать антирадикальной системой, то антиоксидантная активность различных органов и тканей организма является составной частью этой системы.

Проведение сравнительных исследований антиоксидантной и антирадикальной активности отдельных биологических субстратов, таких, как содержащие алкоголь напитки, хитозан, плазма крови и гомогенат слизи желудка показало, что предлагаемый метод может быть использован для подобных исследований. Например, изучение нативной антиоксидантной и антирадикальной активности напитков, содержащих алкоголь, и их комплексов с гомогенатом слизи желудка или плазмой крови, моделирует in vitro пути поступления напитков в пищеварительный тракт и их трансформацию в организме. Следует отметить, что именно через пищеварительный тракт поступает большинство экзогенных радикалов и антиоксидантов, что часто используется в лечебных и профилактических целях. Однако ожидаемый профилактический эффект не всегда наблюдается. Многие из общепринятых антиоксидантов (витамины Е, С, А и др.) при более детальном изучении не обнаружили профилактического эффекта (Marchioli R. et al., 2001; Ness A.R. et al., 1996), или даже способствовали повышению риска развития рака легких у курильщиков (каротиноиды) (Pryor W.A. et al., 2000). Поэтому исследование механизмов взаимодействия экзогенных антиоксидантов и субстратов, с которыми они взаимодействуют при попадании в организм необходимо для понимания процесса влияния экзогенных антиоксидантов.

Одним из возможных этапов трансформации экзогенных антиоксидантов является их взаимодействие с содержимым полости пищеварительного тракта и, особенно, с его пристеночным слизистым слоем. Этот слизистый слой является обязательным этапом транспорта пищевых веществ в кровеносное русло (Морозов И.А., 1988). Он обладает собственной антиоксидантной активностью, сравнимой с активностью антиоксидантов плазмы крови (Бочкарева Н.В. и соавт., 1999; Кривова H.A. и соавт., 2001).

Проведенные нами исследования показали, что:

— при добавлении исследуемых алкогольсодержащих напитков происходят изменения антиоксидантной и антирадикальной активности желудочной слизи и плазмы крови;

— степень выраженности данных изменений не связана с процентным содержанием алкоголя;

— на антиоксидантную и антирадикальную активность желудочной слизи и плазмы крови добавление коньяка оказывает подавляющее действие;

— добавление алкогольных настоек растительного сырья — черносмородинового ликера, ГорноАлтайского бальзама, настойки золотого корня, значительно увеличивает антиоксидантную и антирадикальную активность их комплексов с желудочной слизью и плазмой крови.

Эти результаты наглядно демонстрируют влияние алкогольсодержащих напитков на слизь пищеварительного тракта и плазму крови, что может иметь существенное значение для понимания их влияния на организм в целом.

Показать весь текст

Список литературы

  1. O.A., Осипов А. Н., Савов В. М. //Биофизика. 1984. — Т.29, № 5.-С. 766−769.
  2. И.А. Физиологические механизмы и закономерности индивидуального развития /И.А. Аршавский. М.: Наука, 1986.
  3. М.М. Определение активности трипсина в сыворотке крови по Хэвербеку-Эрлантеру /М.М. Богер //Современные методы в биохимии. -1983.-С. 90−92.
  4. Н.В. Антиоксидантная система при предопухолевых заболеваниях и раке желудка /Н. В. Бочкарева, И. В. Кондакова, Л. А. Коломиец, A.B. Ситожевский, М. В. Вусик, И. В. Хавалкин, H.A. Кривова //Российский онкологический журнал. 1999. — № 1. — С. 14−17.
  5. Г. А. Определение белка в растениях с помощью амидо-черного /Г.А. Бузун, K.M. Джемухадзе, Л. Ф. Милешко //Физиология растений. -1982. Т.29, вып. 1. — С. 198−204.
  6. Е.Б., Храпова Н. Г. //Успехи химии. 1985. — Т.54, № 9. — С. 1540−1558.
  7. .Т. Молекулярные и клеточные основы экологической пульмонологии /Б.Т. Величковский //Пульмонология. -2000. -Т.10, № 3. С. 6−19.
  8. Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты /Ю.А. Владимиров //Вестник РАМН. 1998. — № 7. — С. 43−51.
  9. Ю.А. Свечение, сопровождающее биохимические реакции /Ю.А. Владимиров //Соровский Обозревательный журнал. 1999. — № 6. — С. 25−32.
  10. Ю.А. Активированная хемилюминесценция и биолюминесценция как инструмент в медико-биологических исследованиях /Ю.А. Владимиров //Соровский Обозревательный журнал: Биология.-2001.-№ 12.-С. 11−17.
  11. Ю.А. Антиоксиданты природные и синтезированные -Электронный ресурс. Электронный журнал. — 2004. — Режим доступа к журналу: http: //cmjournal. ru/lec/rp326.htm.
  12. В.JI. Регуляторные функции активных форм кислорода в крови и в водных модельных системах // Москва: МГУ им. М. В. Ломоносова. Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук. — 2003.
  13. Ю.М. Пищеварение и гомеостаз /Ю.М. Гальперин, П. И. Лазарев. М.: Наука, 1986. — 304 с.
  14. К.Г. Биология индивидуального развития животных /К.Г. Газарян, Л. В. Белоусов. М., 1983. — 312 с.
  15. H.A. Перекись водорода как сигнальная молекула /И.А. Гамалея, И. В. Клыбин //Цитология. 1996. — Т.38, № 12. — С. 1233−1247.
  16. В.И. Активные формы кислорода, антиоксиданты и профилактика заболеваний сердца /В.И. Капелько //Русский медицинский журнал. 2003. — T. l 1, № 21. — С. 3−18.
  17. Г. И. Оценка антиокислительной активности плазмы крови с применением желточных гликопротеинов /Г.И. Клебанов, И. В. Бабенкова, Ю. О. Теселкин, О. С. Комаров, Ю. А. Владимиров //Вопросы медицинской химии. 1988. — Т.34, № 6. — С. 59−62.
  18. В.К. Свободнорадикальная теория старения: современное состояние и перспективы /В.К. Кольтовер //Успехи геронтологии. 1998. -Т.2.-С. 37−42.
  19. H .Я. Биологическая активность светлой фракции экстракта пихты сибирской /Н.Я. Костеша, Е. С. Гулик, Г. А. Борило, Л. Н. Зибарева //Вестник ТГУ. Биология. 2007 (в печати).
  20. Кривова Н. А. Механизмы образования и деградации надэпителиаль-ного слизистого слоя пищеварительного тракта //Томск: ТГУ. -Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук. -1994.
  21. H.A. Развитие защитных функций пищеварительного тракта у свиней в онтогенезе /H.A. Кривова, Е. Г. Гвай, О. Б. Заева, Т. А. Лаптева //Российский физиологический журнал им. И. М. Сеченова. 2007. -Т.93,№ 1 .-С. 68−75.
  22. Г. А. Диагностика радиационного поражения по анализу нуклеиновых кислот крови /Г.А. Критс-кий, C.B. Александров //Биохимические методы. М.: Наука. — 1980. — С. 118−121.
  23. Кук Д. Методы анализа углеводов мембран //Биохимическое исследование мембран /под ред. Э. Мэдди. М.: Мир, 1979. С. 254−312.
  24. В.М. Биохимические анализы в клинике /В.М. Лившиц, В. И. Сидельникова. М.: МИА, 2001.-302 с.
  25. Ю.А. Надэпителиальный слизистый слой тонкой кишки и его роль в пищеварительном конвейере /Ю.А. Лысиков, И. А. Морозов,
  26. B.Ю. Ишкова //Тезисы докл. XY Всес. съезда ВФО. Л.: Наука, 1987. -Т.1.-С. 216−217.
  27. И.А. Всасывание и секреция в тонкой кишке: субмикроскопические аспекты /И.А. Морозов, Ю. А. Лысиков, Б. В. Питран,
  28. C.И. Хвыля. М.: Медицина, 1988. — 226 с.
  29. Д. Химия свободных радикалов /Д. Нонхибел, Д. Уолтон. М.: Мир, 1977.-320 с.
  30. Осипов А. Н, Якутова Э. Ш, Владимиров Ю. А. //Биофизика. 1993. -Т.38, № 3.-С. 390−396.
  31. .В. Сорбционные процессы на начальных этапах всасывания в тонкой кишке /Б.В. Питран, А. Б. Атлавин, М. Р. Апсите //Мембранное пищеварение и всасывание. Рига, 1986. — С. 107−109.
  32. .В. Структура и функции слизистого слоя тонкой кишки //Усвоение органических и неорганических соединений в организме животных. Рига, 1990. — С. 219−241.
  33. В.П. Биохимическая роль селена в организме животных /В.П. Сучков, Ц. М. Штутман, А. Г. Халмурадов //Украинский биохимический журнал. 1978. — Т.50, № 5. — С. 659−671.
  34. Ю.О. Ингибирование сывороточными антиоксидантами окисления люминола в присутствии гемоглобина и пероксида водорода /Ю.О. Теселкин, И. В. Бабенкова, О. Б. Любицкий, Г. И. Клебанов //Вопросы медицинской химии. 1997. — Т.43, № 2. — С. 87−93.
  35. К.Т. Активные формы кислорода и регуляция экспрессии генов /К.Т. Турпаев //Биохимия. 2002. — Т.67. — С. 281−292.
  36. A.M. Исследование пищеварительного аппарата у человека /A.M. Уголев, Н. Н. Иезуитова, Ц. Г. Масевич, Н. М. Тимофеева, Т. Я. Надирова. Л.: Наука, 1969. — 250 с.
  37. В.Х. Влияние эпиталамина на свободнорадикальные процессы у человека и животных /В.Х. Хавинсон, В. Г. Морозов, В. Н. Анисимов //Успехи геронтологии. 2003. — Т.4. — С. 128−133.
  38. Akiyama Y. Screening of chemiluminescence constituents of cereal and DPPH radical scavenging activity of gamma-oryzanol /Y. Akiyama, K. Hori, K. Hata, M. Kawane, Y. Kawamura, Y. Yoshiki, K. Okubo //Luminescence. -2001. V.16, № 3. — P. 237−241.
  39. Allen A. Structure of gastrointestinal mucus glycoproteins and the viscosity and gel-formation properties of mucus /А. Allen //Brit. Med. Bull. -1978.-V.34.-P. 28−33.
  40. Allen A. The structure and physiology of gastrointestinal mucus /A. Allen, A. Bell, M. Mantle, J.P. Pearson //Mucus Health and Disease. 1982. -P. 115−133.
  41. Allen A. Studies of gastrointestinal mucus /A. Allen, W.J. Cunliffe, J.P. Pearson, L.A. Sellers, R. Ward //Scand. J. Gastroenterol. 1984. — V. 19. — P. 101−114.
  42. Allen R.G. Oxidative stress and gene regulation /R.G. Allen, M. Tresini //Free Radic. Biol. Med. 2000. — V.28, № 3. — P. 463−499.
  43. Ames B.N. Oxidants, antioxidants and the degenerative diseases of aging / B.N. Ames, M.K. Shigenaga, T.M. Hagen //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1993.-V.90.-P. 7915−7922.
  44. Blix G. The determination of hexosamines according to Elson and Morgan /G. Blix //Acta Chemica Scand. 1948. — V.2, № 5. — P. 467−473.
  45. Bulatti E. Chemoprevention in Cancer Control /E. Bulatti, N. Munoz //Eds. Lyon. 1996. — № 136. — P. 35−39.
  46. Cao G. Hyperoxia-induced changes in antioxidant capacity and the effect of dietary antioxidants /G. Cao, B. Shukitt-Hale, P.C. Bickford, J.A. Joseph, J. McEwen, R.L. Prior //Journal of Applied Physiology. 1999. — V.86. — P. 18 171 822.
  47. Cao G. Postprandial increases in serum antioxidant capacity in older women /G. Cao, R.L. Prior //Journal of Applied Physiology. 2000. — V.89. -P. 877−883.
  48. Carrell R.W. Activated oxygen and hemolysis /R.W. Carrel), C.C. Winterbourn, E.A. Rachmilewitz //Br. J. Haemotol. 1975. — V.30. — P. 259 264.
  49. Chappie L.C., Mason G.J., Garner J., Mattews J.B., Thorpe G.H., Maxwell R.S.J., Whitehead T.P. //Amer. Clin. Biochem. 1997. — № 34. — P. 412−421.
  50. Clement M.V. Reactive oxygen intermediates regulate cellular response to apoptotic stimuli: a hypothesis of disorders of leukocyte oxidative metabolism: role of myeloperoxidase /M.V. Clement, S. Pervais //Clin. Chem. -1999.-V.29,№ 3.-P. 513−515.
  51. Costagliola C. Vitamin E and red blood cell glutathione //C. Costagliola, T. Libondi, M. Menzione //Metabolism. 1985. — V.34. — P. 712−714.
  52. Davies K.J.A. Intracellular proteolytic systems may function as secondary antioxidant defenses: an hypothesis /K.J.A. Davies //J. Free Rad. Biol. Med. 1986.-№ 2.-P. 155−173.
  53. De Lamirande E. Human sperm huperactivation and capacitation as parts of an oxidative process /E. De Lamirande, C. Gagnon //Free Radic. Biol. Med. 1993. — V.14, № 2. — P. 157−166.
  54. De Waziers J. The effect of vitamin A. Nutri-tional status on glutathione, glutathione transferase activities in rat intestine /J. De Waziers, R. Albrecht //Experientia. 1987. — V.43. — P. 394−395.
  55. Dische Z. A specific color reaction of methylpentoses and a spectrophotometric micromethod for their determination /Z. Dische, L.B. Shettles //J. of Biol. Chemistry. 1948. — V.175, № 2. — P. 595−603.
  56. Edwards P.A. Is mucus a selective barrier to macromolecules? /P.A. Edwards //Brit. Med. Bull. 1978. — V.34. — P. 55−57.
  57. Forssell H. Gastric mucosal defence mechanisms: a brief review /H. Forssell //Scand. J. Gastroenterol. Suppl. 1988. — V.23, № 155. — P. 23−28.
  58. Frigg M. Relationships between vitamin A and vitamin E in the chik /M. Frigg, J. Broz //Int. J. Vitam. Nutr. Res. 1983. — V.54. — P. 125−134.
  59. Gad A. Pathophysiology of gastrointestinal mucins /A. Gad //Adv. Physiol.Sci. 1981. — V.29. — P. 161 -184.
  60. J. //Acta chem. Scand. 1963. — V. 17. — P. 1635.
  61. Goeptar A.R. Oxygen and xenobiotic reductase activities of cytochrome P450 /A.R. Goeptar, H. Scheerens, N.P. Vermeulen //Crit. Rev. Toxicol. 1995. -V.25.-P. 25−65.
  62. Halliwell B. Biologically revelant ion-dependent hydroxyl radical generation. An update /B. Halli-well, J.M.C. Gutteridge //Febs Letters. 1992. -V.307.-P. 108−112.
  63. Halliwell B. The gastrointestinal tract: a major site of antioxidant action? In Process Citation. /B. Halliwell, K. Zhao, M. Whiteman //Free Radic. Res. -2000. V.33, № 6. — P. 819−830.
  64. Hancock J.T. Role of reactive oxygen species in cell signaling pathways /J.T. Hancock, R. Desican, S.J. Neill //Biochem. Soc. Trans May. 2001. -V.29, Pt.2. — P. 345−350.
  65. Handel D.U. Vergleichende untersuchug zur metodik der bestimmung des eiwei gedundenen zuckers /D.U. Handel, W. Kittlak //Z. Med. Labor. Techn. 1963. — № 4. — S. 163−169.
  66. Hills B.A. Gastric mucosal barrier: hydropho-bicity of stretched stomach lining /B.A. Hills, L.M. Lichtenberger //Amer. J. Physiol. 1985. — V.248, № 6, Pt.l. -P.643−647.
  67. Hiroyuki H. Antioxidative and Superoxide Scavenging Activities of Retrochalcones in Glycyrrhiza inflate /H. Hiroyuki, I. Harumi, M. Kenji,
  68. T.Yukiyoshi, K. Takeshi //Bioorganic and Medicinal Chemistry. 1997. -№ 6. — P. 339−347.
  69. Huang D.-J. Antioxidant and antiproliferative activities of sweet potato (Ipomoea batatas L. Lam 'Tainong 57') constituents /D.-J. Huang, C.-D. Lin, H.-J. Chen, Y.-H. Lin //Bot. Bull. Acad. Sin. 2004. — V.45. — P. 179−186.
  70. Jenkins M.Y. Influence of excess vitamin E on vitamin A toxicity in rats /M.Y. Jenkins, G.V. Mitchell //J. Nutr. 1975. — V.105. — P. 1600−1606.
  71. Jenkins M.Y. Effect of dietary protein on growth and on plasma and liver vitamin A and E levels in young rats /M.Y. Jenkins, G.V. Mitchell //Nutr. Res. -1986.-№ 6.-P. 1083−1094.
  72. Jentiens T. Quantitative aspects of mucus glycoprotein biosynthesis in rat gastric mucosa /T. Jentiens, G.J. Strous //Biochem. J. 1985. — V.228, № 1. — P. 227−232.
  73. Jentiens T. Biosynthesis, processing and secretion of mucus glycoprotein of the rat stomach /T. Jentiens, A. Van de Kamp, R. Spee-Brand, G.J. Strous //Biochem. et Biophys. Acta: Mol. Cell Res. 1986. — V.887, № 2. — P. 133−141.
  74. Kaur C. Antioxidants in fruits and vegetables the millenium’s health /C. Kaur, H.C. Kapoor //International and Journal of Food Science and Technology -2001.-V.36.-P. 703−725.
  75. Kondakova I. Total reactive antioxidant potential in human saliva of smokers and non-smokers /1. Kondakova, E.A. Lissi, M. Pizarro //Biochem. Mol. Biol. Int. 1999. — V.47, № 6. — P. 911 -920.
  76. Krishnamurthy S. Effect of dietary coconut oil and caseine and megadoses of vitamin A or C on tissue lipid peroxidation and hemolysis in vitamin E deficiency /S. Krishnamurthy, T. George, N.J. Bai //Acta Vitaminol. Enzymol. 1983. — № 5. — P. 165−170.
  77. Levin G. The antioxidant system of the organism. Theoretical basis and practical consequences /G. Levin, J. Popov //Med. Hypotheses 1994. — V.42, № 4. — P. 269−275.
  78. Lissi E.A. Is spontaneous urinary visible chemiluminescence a reflection of in vivo oxidative stress? /E.A. Lissi, M. Salim-Hanna, T. Sir, L.A. Videla //Free Radic. Biol. Med. 1992. — V. 12, № 4. — P. 317−322.
  79. Lissi E. Luminol luminescence induced by 2,2'-Azo bis (2-amidinopropane) thermolysis /E. Lissi, C. Pascual, M.D. Del Castillo //Free Radic. Res. Commun — 1992. — V. 17, № 5. — P. 299−311.
  80. Lu L.-C. Antibacterial and DPPH Free Radical-scavenging Activities of the Ethanol Extract of Propolis Collected in Taiwan /L.-C. Lu, Y.-W. Chen, C.-C. Chou //Journal of Food and Drug Analysis. 2003. — V. l 1, № 4. — P. 277 282.
  81. A., Hearse D. //J. Molec. Cell. Cardiol. 1984. — V. l6, № 6. -P. 497−518.
  82. Marchioli R. Antioxidant vitamins and prevention of cardiovascular disease: epidemiological and clinical trial data /R. Marchioli, C. Schweiger, G. Levantesi, L. Tavazzi, F. Valagussa //Lipids. 2001. — № 36. — P. 53−63.
  83. Meister A. On the antioxidant effect of ascorbic acid and glytatione /A. Meister//Biochem. Pharmacol. 1992.-V.44,№ 10.-P. 1095−1105.
  84. Mozsic G. Interrelationships between the gastric cytoprotective effect of vitamin A and (3-carotene and the gastric mucosal superoxide dismutase activity in rats /G. Mozsic, T. Javor, G. Toth //Acta Physiol. Hung. 1984. — V.64. — P. 315−318.
  85. Napoli C. Multiple role of reactive oxygen species in the arterial wall /C. Napoli, F. De Nigris, W. Palinski //J. Cell Biochem. 2001. — V.82, № 4. — P. 674−682.
  86. Ness A.R. Vitamin C and cardiovascular disease: a systematic review /A.R.Ness, J.W. Powles, K.T. Khaw //J. Cardiovasc. Risk. 1996. — V.3, № 6. -P. 513−521.
  87. Oates G. The composition of human gastric mucin /G. Oates, A.C. Rossbottom, A.J. Schrager//Mod. Probl. Paediat. 1977. — V. l9. — P. 11−21.
  88. Omaye S.T. Alteration of guinea pig erythrocyte superoxide dismutase activity by dietary antioxidants //S.T. Omaye, B.D. Fotter, H.P. Foovaian //Intern. J. Vit. Nutr. Res. 1986. — V.56. — P. 161−164.
  89. Orr W.C. Extension of life-span by over expression of superoxide dismutase and catalase in Drosophila melanogaster /W.C. Orr, R.S. Sonal //Science 1994. — V.263. — P. l 128−1130.
  90. Pacifici R.E. Protein lipid and DNA repair system in oxidative stress: free radical theory of aging revisited /R.E. Pacifici, K.J.A. Davies //Gerontology -1991.-V.37.-P. 166−180.
  91. Patty A.K. Interaction of flavonoids with 1,1-diphenyl -2- picrylhydrazyl free radical, liposomal membranes and soybean lipoxygenase -1 / A.K. Patty, I. Sunamoto, N.P. Das II Biochem Pharmacol 1988. — V. 37, № 6. — P. 989−995.
  92. Peltola V. Induction of lipid peroxidation during steroidogenesis in the rat testis. /V. Peltola, J. Huhtaniemi, T. Metsa-Ketela, M. Ahotupa //Endocrino-logy 1996. — V.137, № 1. -P. 105−112.
  93. Pierpaoli W. Pineal control of aging: effect of melatonin and pineal grafting on aging vice /W. Pierpaoli, W. Regelson //Proc. Natl. Acad. Sci. USA -1994.-V.91.-P. 787−791.
  94. Poovaiah B.P. Response of plasma retinol to dietary changes of ascorbic acid and selenium in the guinea pig /B.P. Poovaiah, S.T. Omaye //Nutr. Res. -1986.-№ 6.-P. 583−588.
  95. Popov I.N. Photochemiluminescent detection of antiradical activity: II. Testing of nonenzymic water soluble antioxidants / I.N. Popov, G. Levin // Free Radic. Biol. Med. — 1994. — V. 17, № 3. — P. 267−271.
  96. Pryor W.A. Beta carotene: from biochemistry to chinical trials /W.A. Pryor, W. Stahl, C.I.Rosk // Nutr.Rev. 2000. — V.58, pt. 1 .-P.39−53.
  97. Rhead W.J. Risks of long-term ascorbic acid overdosage /W.J. Rhead, G.N. Schrauzer//Nutr. Rev. 1971. — № 11. — P. 262−263.
  98. Sanchez-Moreno C. Review: Methods Used to Eva-luate the Free Radical Scavenging Activity in Foods and Biological Sistems. // Food Sci. Tech.Int. -2002.-vol. 8, № 3. P. 121−137.
  99. Saran A.M. Arguments against the significance of Fenton reaction contributing to signal pathways under in vivo conditions /A.M. Saran, C. Michel, K. Stettmaier, W. Bors //Free Rad. Res. 2000. — V.33. — P. 567−579.
  100. Sawyer D.T. Metal/hudroperoxideinduced activa-tion of dioxygen for the oxygenation of hydrocarbons: oxygenated Fenton chemistry /D.T. Sawyer, T. Sobkowiak, T. Matsushita //Accounts of Chemical Research 1996. — V.29. -P. 409−416.
  101. Shachter H. Glycoprotein biosynthesis //The glycoconjugates, V.2, Mammalian glycoproteins, glycolipids and proteoglycans //Academic Press, New York- 1978.-P. 87−181.
  102. Sevanian A. Phospholipase A2 dependent relase of fatty acids from peroxidized membranes /A. Sevanian, E. Kim //J. Free Rad. Biol. Med. 1985. -№ 1. — P. 263−271.
  103. Smith R. Total antioxidant capacity of human seminal plasma / Vantman D., Ponce I., Escobar I., Lissi E.A. // Reproduction 1996. — vol. 11,-P. 1655−1660.
  104. Sondergaard E. The influence of vitamin E on the expenditure of vitamin A from the liver /E. Sondergaard //Experientia 1972. — V.28. — P. 773 774.
  105. Stein H.B. Ascorbic acid-induced uricosuria. A consequence of megavitamin therapy /H.B. Stein, A. Hasan, J.H. Tor //Ann. Intern. Med. -1976.-V.84.-P. 385−388.
  106. Stocks I. The inhibition of lipiol autoxidation by human serum and its relationship to serum proteins and a tocopherol / Gitteridge I.M., Sharp R.I., Dormandy T.L. //Clin. Sci. Molec. Med. — 1974. vol.47, № 3. — P. 215−222.
  107. Stump D.D. The effect of dietary vitamin E supple-mentation on y-tocopherol levels of human plasma and red blood cells /D.D. Stump, H.S. Gilbert //Ann. New York Acad. Sci. 1986. — V.418. — P. 497−498.
  108. Tokumaru S. Change of the lipid hydroperoxide level on mouse organs on ageing /S. Tokumaru, H. Iquchi, S. Kojo //Mech. Ageing Dev. 1996. — V. 86. — P. 67−74.
  109. Uotila I.T., Kirkkola A.L., Rorarius M., Tuimala R.I., Metsa-Ketela T. // Free Radic. Biol. Med. 1996. — № 16. — P. 581−590.
  110. Yu.A., Putvinsky A.V. // I. Plys.Biol. Med. 1992.- vol. 1. -P. 10−18.
  111. Warren L. The thiobarbituric acid assay of sialic acid /L. Warren //J. of Biol. Chemistry 1959. — V.234, № 8. — P. 1971−1975.
  112. Wentworth A.D. Antibody catalysis of the oxidation of water /A.D. Wentworth, L.H. Jones, P. Wentworth, K.D. Janda, R.A. Lerner // Science -2001.-V.293 (5536).-P. 1806−181 1.
  113. Wentworth P. Evidence for ozone-catalyzed ozone formation in bacterial killing and inflammation /P. Wentworth, J.E. McDunn, A.D. Wentworth, J. Nieva, J.M. Riedi, R.A. Lerner //Science 2002. — V. 14. — P. 930−935.
  114. Xia Y. Superoxide and peroxynitrite generation from inducible nitric oxide synthase in macrophages /Y. Xia, J.L. Zweier //Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997. — V.94 (13). — P. 6954−6958.
  115. Yi O.S. Synergistic antioxidative effects of tocopherol and ascorbic acid in fish oil (lecitin)Avater system /O.S. Yi, D. Han, H.Q. Shin //J. Am. Oil. Chem. Soc. 1991.-V.5,№ 8.-P. 881−883.
  116. Zalewsky C. Mechanisms of mucus release in exposed canine gastric mucosa / C. Zalewsky, F. Moody //Gastroenterology 1979. — V.77. — P. 719−729.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!