Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Новые методы получения высокоочищенных нуклеаз и нуклеотидов из животного и микробиального сырья

Диссертация: Новые методы получения высокоочищенных нуклеаз и нуклеотидов из животного и микробиального сырья
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

В связи с интенсивным развитием молекулярной биологии и генной инженерии, в настоящее время остро возникла проблема получения нуклеотидов, которые являются основными реагентами для проведения исследований в данных областях. Нуклеотиды являются к тому же основными реагентами в медицинских диагностических тест-системах, широко использующихся для диагностики бактериальных, вирусных, онкологических… Читать ещё >

Новые методы получения высокоочищенных нуклеаз и нуклеотидов из животного и микробиального сырья (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Список сокращений
  • ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Ферменты, содержащиеся в поджелудочной железе животных и методы их выделения
      • 1. 1. 1. Рибонуклеаза (РНКаза)
        • 1. 1. 1. 1. Получение рибонуклеазы (РНКазы)
      • 1. 1. 2. Дезоксирибонуклеаза (ДНКаза)
        • 1. 1. 2. 1. Получение дезоксирибонуклеазы (ДНКазы). ф 1.1.3. Фермент холестеролэстераза
        • 1. 1. 3. 1. Получение холестеролэстеразы
      • 1. 1. 4. Фермент трипсин
        • 1. 1. 4. 1. Получение трипсина
    • 1. ^.Использование ферментов нуклеазного действия для получения рибо- и дезоксирибонуклеозид-5-монофосфатов и биосинтез их полифосфатов
      • 1. 2. 1. Перспективные микробные нуклеазы
        • 1. 2. 1. 1. Перспективный фермент нуклеазного действия — S'-нуклеаза и ф технология его выделения
        • 1. 2. 2. Синтез рибо- и дезоксирибонуклеозид-5 — трифосфатов
        • 1. 2. 3. Иммобилизация ферментов
        • 1. 2. 4. Методы модификации сорбентов
  • ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
  • ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Разработка методов получения РНКазы, ДНКазы, трипсина и холестеролэстеразы из поджелудочной железы крупного рогатого скота. ф 3.1.1. Получение «грубых» экстрактов ферментов: РНКазы, ДНКазы, трипсина и холестеролэстеразы.

3.1.2. Фракционирование ферментов экстракта поджелудочной железы сульфатом аммония.

3.1.2.1. Выделение и анализ холестеролэстеразы.

3.1.2.2. Выделение и анализ трипсина.

3.1.2.3. Выделение и анализ ДНКазы.

3.1.2.4. Получение РНКазы высокой очистки.

3.1.2.5. Получение субстрата (РНК) для анализа активности фермента рибонуклеазы.

3.1.2.6. Эффективность предлагаемого метода получения ферментов РНКазы, Щ ДНК-азы, трипсина и холестеролэстеразы из поджелудочной железы крупного рогатого скота.

3.2. Новые подходы к синтезу дезоксирибо- и рибонуклеозид-5/-монофосфатов и их трифосфатов.

3.2.1. Получение субстрата ДНК для получения нуклеотидов.

3.2.2. Выделение Б'-нуклеазы из микробиологической субстанции — амилоризина.

3.2.3.Иммобилизация S'-нуклеазы.

3.2.3.1. Адсорбционная иммобилизация S'-нуклеазы на углерод минеральных ф неорганических носителях.

3.2.3.2. Исследование ковалентной иммобилизации S'-нуклеазы на силикатных носителях.

3.2.4. Гидролиз нуклеиновых кислот ферментом Б'-нуклеазой.

3.2.5. Получение и анализ ацетилфосфата лития.

3.2.6. Ферментативное фосфорилирование индивидуальных NMP.

3.2.7. Получение dNTP и NTP сопряжённым фосфорилированием продуктов гидролиза РНК и ДНК.

ГЛАВА 4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

4.1. Получение ферментов РНКазы, ДНКазы, трипсина и хол естеролэстеразы.

4.1.1. Получение субстрата (РНК) для анализа активности фермента рибонуклеазы.

4.1.2. Очистка ферментов РНКазы, ДНКазы, трипсина и хол естеролэстеразы.

4.1.3. Электрофоретический анализ чистоты ДНКазы и РНКазы.

4.1.4. Определение удельной активности ферментов.

4.1.5. Стерилизация, розлив и лиофильная сушка.

4.2. Новые подходы к синтезу дезоксирибо- и рибонуклеозид-б'-монофосфатов и их трифосфатов.

4.2.1. Получение субстрата (ДНК) для ферментов ДНКазы и S1-нуклеазы.

4.2.2. Выделение ферментного препарата 8!-нуклеазы из амилоризина.

4.2.3. Определение активности З^нуклеазы.

4.2.4. Иммобилизация З'-нуклеазы.

4.2.5. Гидролиз ДНК ферментом Б'-нуклеазой.

4.2.6. Гидролиз РНК Б^нуклеазой в растворе.

4.2.7. Гидролиз РНК иммобилизованной З^нуклеазой.

4.2.8. Последовательный гидролиз ДНК ферментами ДНК-азой и иммобилизованной Б^нуклеазой.

4.2.9. Последовательный гидролиз ДНК ферментами ДНКазой и не иммобилизованной З'-нуклеазой.

4.2.10. Получение и анализ ацетилфосфата лития.

4.2.11. Выделение суммарного препарата нуклеотидилкиназ с ацетокиназой.

4.2.12. Ферментативное фосфорилирование индивидуальных NMP.

4.2.13. Ферментативное фосфорилирование NMP и dNMP в смеси.

Постоянное расширение спектра работ по химико-ферментативному синтезу генетического материала, исследований в области молекулярной биологии, генной диагностики ставит задачу создания новых высоко эффективных методов получения ферментов обмена нуклеиновых кислот, предшественников и создание на их основе нуклеотидной базы.

Анализ известных методов получения ферментов вообще, и ферментов биосинтеза нуклеиновых кислот и их предшественников в частности, показал, что практически все методы чаще всего направлены на получение одного реже двух индивидуальных ферментов. Огромные же количества так называемого «балластного» белка или «примесных» активностей, не содержащие целевого фермента отбрасываются. Кроме того, методы очистки ферментов биосинтеза нуклеиновых кислот чрезвычайно разнообразны. Всё это создаёт ряд трудностей при организации производства данных ферментов в промышленных масштабах, приводит к нерациональному использованию материальных и трудовых ресурсов.

Одним из перспективных направлений, позволяющих успешно решить поставленные задачи по созданию экономичного, эффективного и надёжного промышленного подхода к получению ферментных препаратов, является унификация процедур фракционирования клеточных экстрактов и комплексное использование микробиологического и животного сырья, позволяющая получать несколько ферментных препаратов из одного образца биомассы.

Одновременное выделение внутриклеточных ферментов из одного и того же образца сырья осуществляется пока крайне редко, изучение его началось, по сути дела, только в последнее время. Перспективность совмещённых методов выделения ферментных препаратов, позволяющая более рационально использовать сырьё, реагенты и оборудование бесспорна. Бесспорна также необходимость проведения в этом направлении серьёзных и систематических исследований, которые в настоящее время, к сожалению, проводятся недостаточно активно и в России и за рубежом.

В связи с интенсивным развитием молекулярной биологии и генной инженерии, в настоящее время остро возникла проблема получения нуклеотидов, которые являются основными реагентами для проведения исследований в данных областях. Нуклеотиды являются к тому же основными реагентами в медицинских диагностических тест-системах, широко использующихся для диагностики бактериальных, вирусных, онкологических и генетических заболеваний.

В настоящее время производство нуклеотидов в нашей стране практически прекращено, одной из причин этого стала высокая стоимость змеиного яда.

К числу путей снижения себестоимости дезоксии рибонуклеотидов относится поиск более дешевых и доступных ферментных препаратов, например, микробных, способных осуществлять гидролиз нуклеиновых кислот. Второй путь удешевления производства компонентов биосинтеза нуклеиновых кислот — применение в подходах получения иммобилизованных ферментов и создание на их основе биореакторов.

В связи с этим целью настоящей работы является получение высокоочищенных ферментных препаратов: РНКазы, ДНКазы, трипсина и холестеролэстеразы, а также создание нового простого и экономичного подхода к препаративному синтезу нуклеотидов и их полифосфатов.

Научная новизна.

1. Найден подход, позволяющий разработать метод одновременного получения РНКазы, ДНКазы, трипсина и холестеролэстеразы высокой чистоты, из одной животного партии сырья.

2. Впервые, для очистки белков использованы методы ультрафильтрации на установках с полыми волокнами и хроматографической очистки на ДЭАЭ-целлюлозе, позволяющие добиться высокой очистки фермента рибонуклеазы.

3. Создана ферментная база для получения нуклеотидов на основе доступного сырья: дезоксирибонуклеазы из поджелудочной железы крупного рогатого скота и S!-Hyjaiea3bi из амилоризина.

4. Впервые показано, что использование проточного биореактора с иммобилизованной S1-нуклеазой является перспективным общим подходом к получению рибои дезоксирибонуклеозид-З'-монофосфатов.

5. Разработаны новые процедуры сопряжённого фосфорилирования продуктов гидролиза РНК и ДНК до дезоксии рибонуклеозид-б'-трифосфатов с высокими выходами и высокой чистотой.

Цель исследования.

Разработка нового подхода, позволяющего получать высокоочищенные ферментные препараты: РНКазы, ДНКазы, трипсина и холестеролэстеразы.

Создание нового экономичного метода препаративного синтеза нуклеотидов и их полифосфатов.

Основные задачи исследования.

1. Предложить новый подход и разработать технологичный метод получения высокоочищенных и высокоактивных ферментных препаратов РНКазы, ДНКазы, холестеролэстеразы и трипсина из одной партии животного сырья.

2. Создать базу высокоочищенных субстратов РНК и ДНК для анализа ферментов нуклеазного действия.

3. Создать ферментную базу для получения нуклеотидов: ДНКазы из поджелудочной железы крупного рогатого скота (ПЖ КРС) и S1 -нуклеазы из амилоризина.

4. Получить с использованием собственной субстратной и ферментной базы высокоочищенные дезоксии рибонуклеозид-57- монофосфаты с высокими выходами.

5. Разработать новые процедуры сопряжённого фосфорилирования продуктов гидролиза РНК и ДНК до дезоксии рибонуклеозид трифосфатов.

Практическая значимость работы.

Разработанный подход получения ферментов (РНКазы, ДНКазы, трипсина и холестеролэстеразы) можно использовать в промышленном получении данных ферментов.

Разработанная процедура фосфорилирования продуктов гидролиза РНК и ДНК иммобилизованной Б'-нуклеазой до дезоксии рибонуклеозид-57-трифосфатов может быть использована в процессах промышленного производства данных веществ.

Разработанный эффективный метод ковалентной иммобилизации S1-нуклеазы на силикатных носителях и создание биореактора непрерывного действия на его основе позволяет упростить получение дезоксии рибонуклеозид-5/-монофосфатов.

Объём и структура диссертации.

Диссертационная работа изложена на 130 листах печатного текста и состоит из введения, обзора литературы, результатов и обсуждения, экспериментальной части, заключения и списка литературы. Диссертация иллюстрирована 15 рисунками и 12 таблицами.

Список литературы

содержит 209 источников, из которых 86 опубликованы в отечественных и 123 в зарубежных изданиях.

выводы.

1. Разработан новый комплексный подход выделения ферментов из поджелудочной железы крупного рогатого скота, позволяющий получать высокоочищенные и высокоактивные ферментные препараты РНКазы, ДНКазы, холестеролэстеразы и трипсина из одной партии сырья.

2. Создана база высокоочищенных субстратов (РНК и ДНК) для анализа ферментов нуклеазного действия.

3. Создана собственная ферментная база для получения нуклеотидов на основе доступного сырья {ДНКазы из поджелудочной железы КРС и S1-нуклеазы из амилоризина).

4. Получены с использованием собственной субстратной и ферментной базы высокоочищенные дезоксии рибонуклеозид-З7- монофосфаты с высокими выходами.

5. Разработаны новые процедуры сопряжённого фосфорилирования продуктов гидролиза РНК и ДНК до дезоксии рибонуклеозид трифосфатов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Анализ литературы, освещающей вопрос о получении ферментов из биологического сырья, показал, что практически все методы ограничены получением одного, реже двух индивидуальных ферментов. Большое количество так называемого «балластного» белка, не содержащего целевого фермента, отбрасываются. Между тем каждый вид биологического сырья содержит целый ряд ферментов, которые при надлежащем технологическом подходе можно извлекать, в том числе и промышленном масштабе.

В этой связи усовершенствование методов фракционирования клеточных экстрактов, направленных на разработку технологий, позволяющих получать несколько ферментных препаратов из одной партии сырья, является актуальным.

В настоящей работе изучена возможность совместного получения четырёх высокоочищенных ферментов: рибонуклеазы {РНКазы), дезоксирибонуклеазы {ДНКазы), трипсина и холестеролэстеразы из одной партии поджелудочной железы крупного рогатого скота (ПЖ КРС).

На основе полученных данных разработан лабораторный регламент получения вышеупомянутых ферментов из поджелудочной железы, который может быть положен в основу создания промышленной технологии.

Интенсивное развитие молекулярной биологии и генной инженерии вызвало возрастающую потребность в нуклеотидах, необходимых как для проведения исследований, так и для разработки медицинских диагностических тест-систем, используемых для диагностики бактериальных, вирусных, онкологических, генетических и других заболеваний.

Поэтому актуальной является разработка новых технологий получения дезоксии рибонуклеотидов, которые смогли бы обеспечить растущие потребности.

Известная промышленная технология получения дезоксии рибонуклеотидов, основанная на ферментативном гидролизе нуклеиновых кислот (ДНК, РНК соответственно) панкреатической дезоксирибонуклеазой.

ДНКазой) (источник Ser. marcesens) и фосфодиэстеразой (источник змеиный яд), в настоящее время стала весьма неэкономичной из-за высокой стоимости ферментной базы.

Видимыми путями снижения себестоимости нуклеотидов являются:

— разработка и внедрение доступных ферментных препаратов, например, микробных, способных проводить гидролиз нуклеиновых кислот;

— создание биореакторов на основе иммобилизованных ферментов.

В настоящей работе найден путь снижения себестоимости нуклеотидов за счёт использования доступных ферментов нуклеазного действия, а именно панкреатической дезоксирибонуклеазы из поджелудочной железы крупного рогатого скота и S1-нуклеазы из амилоризина.

В данной работе изучена возможность использования панкреатической дезоксирибонуклеазы (ДНКазы) в качестве реагента для получения олигонуклеотидов ДНК. Кроме того, отражён новый подход к получению дезоксирибонуклеозид-б'-монофосфатов с использованием предгидролиза ДНК ДНКазой с последующим гидролизом полученных олигонуклеотидов ферментом S1 -нуклеазой.

Так же найдены оптимальные условия для иммобилизации фермента S1-нуклеазы на модифицированных силикатных носителях и возможность гидролиза нуклеиновых кислот (ДНК и РНК) иммобилизованной S1-нуклеазой с образованием соответственно дезоксии рибонуклеозид-5/-монофосфатов. В связи с этим, с применением метода ковалентной иммобилизации S1 -нуклеазы на силикатных носителях разработан биореактор непрерывного действия, перспективный для реализации экономичной технологии получения дезоксии рибонуклеозид-5/-монофосфатов.

Разработаны две процедуры фосфорилирования с помощью суммарного препарата нуклеотидилкиназы с ацетокиназой («киназная фракция») продуктов гидролиза ДНК и РНК до соответствующих дезоксии рибонуклеозид-57-трифосфатов, а именно, фосфорилирование индивидуальных дезоксии рибонуклеозид-5/-монофосфатов, так и в их смеси.

Было установлено, что совместное фосфорилирование продуктов гидролиза РНК или ДНК «киназной фракцией» приводит к уменьшению стадий, времени и экономии ферментов в проведения технологического процесса. Положительным моментом данного подхода является о бразование минимального количества дезоксии рибонуклеозид-5/-дифосфатов, которые в свою очередь также подвергаются фосфорилированию до соответствующих трифосфатов.

Разработанные схемы получения ферментов нуклеазного действия и нуклеотидов можно рекомендовать для использования в промышленных технологиях.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Я., Рем К. Г. Наглядная биохимия изд. Москва: Мир, 2000.- 469 с.
  2. G. D’Alessio, J.F. Riordan. Ribonucleases. Structures and Functions. // Academic Press, New York.-1997.-450 p.
  3. T.N. Plummer Jr, C.H.W. Hirs. On the structure of bovine pancreatic ribonuclease b. isolation of a glycopeptide. // J. Biol.Chem.-1964.-vol. 239.- P. 2530 2536.
  4. C.J. Liang, K. Yamashita, A. Kobata. Structural study of the carbohydrate moiety of bovine pancreatic ribonuclease B. // J. Biochem (Tokyo).-1980.- vol. 88.- P. 51 58.
  5. R.L. Williams, S.M. Greene, A. McPherson. The crystal structure of ribonuclease В at 2.5-A resolution. // J. Biol. Chem.-1987.- vol. 262.- P. 1602 -1610.
  6. Giancola C., Del Vecchio P., De Lorenzo C., Barone R., Piccoli R., D’Alessio G., Barone G. Thermodynamic stability of the two isoforms of bovine seminal ribonuclease. // Biochemistry.- 2000, — vol. 39.- P. 7964−7972.
  7. Ф. // Химия и функция белков. М: Мир, 1979.-360 с.
  8. Blackburn Р, Wilson G, Moore S. Ribonuclease inhibitor from human placenta. Purification and properties. // J Biol Chem. -1977, — vol. 252, — P. 5904−5910.
  9. Di Donato A., Cafaro V., D’Alessio G. Ribonuclease A can be transformed into a dimeric ribonuclease with antitumor activity. // J. Biol. Chem.-1994.- vol. 269.- P. 17 394 17 396.
  10. Di Donato A., Cafaro V., Romeo I., D’Alessio G. Hints on the evolutionary design of a dimeric RNase with special bioactions. // Protein Sci.-1995.- vol. 4.- P. 1470 1477.
  11. Kim J.-S., Soucek J., Matousek J., Raines R.T. Mechanism of ribonuclease cytotoxicity. // J. Biol. Chem.-1995.-vol. 270,-P. 31 097−31 102.
  12. С. И., Васильева-Танкова Е. С. // Прикладная биохимия и микробиология,-1986, — т 22.- № 4.- С. 117−121.
  13. Р. И., Трухачёв А. А., Баталина Т. А. Ингибиторы вирусной активности. Рига Зинатне, 1972, — С. 147 — 152.
  14. А. М., Серебренников В. М., Кабаева Н. Я. // Прикладная биохимия и микробиология.-1993.- Т. 29.-№ 2.-С.198−201.
  15. Г. Е., Варламов В. П. // Прикладная биохимия и микробиология.- 1994.- Т. 30, — № 3.-С. 379−384.
  16. С. И., Ермекбаева А. А., Шляпников С. В., Поляков К. М., Безбородое A.M. Рибонуклеаза Ар1 из Aspergillus pallidus. Очистка, первичная структура и кристаллизация. // Биохимия.-1988.- Т. 53.- № 6.- С. 965−973.
  17. С.Н., Гросс С., Де Пек Н.Б. // Биохимия, — 1963.- Т. 4, — № 3, — С. 647 652.
  18. R.M., Connrlly J.H., Esupta S. //Nature.- 1961, — № 189.- P. 817- 820.
  19. .М. // Вопросы патогенеза и терапии органосклерозов.- Новосибирск, 1967.1. C. 282−289.
  20. М.Б., Лисовская С. П., Парфёнова М. С. // Журнал микробиологии эпидимиологии и иммунологии.- 1974.- № 11.- С. 58 63.
  21. Liu Y.-Y., Liu Н.-С. Studies on infectious RNA of Japanese b encephalitis virus. II. Change of RNAse activity in mouse brains during virus and RNA infections. // Sci Sin.- 1963- P. 1553−1561.
  22. Williams M.V., Ablashi D.V., Salahuddin S.Z., Glaser K. Demonstration of the human herpesvirus 6-induced DNA polymerase and DNase. // AIDS Rts. And Hum. Retrovirus es.-1990.- vol. 6.-№ 1.-P. 151−155.
  23. Burke D.C. The mechanism of interferon production. // Tex. Repts. Biol. Med.- 1982.- vol. 42, — P. 13−18.
  24. Baron S., Howie V., Langford M., Macdonald E. M., Stanton G.L., Reitmeyer J., Weigent
  25. D.A. Induction of interferon by bacteria, protozoa, and viruses: defensive role. // Tex. Repts. Biol.Mrd.- 1982,-vol. 41.-P. 150- 157.
  26. Baglioni C., Maroney P., Nilsen T.W. Assay for (2'-5')-oligo (A)-dependent endonuclease activity. // Methods Enzymol.-1981, — vol. 79.- PtB.- P. 249 257.
  27. Colonno R.J., Pang R.H.L. Induction of unique mRNAs by human interferons. // J. Biol. Chem.- 1982, — vol. 257.- № 16.- P. 9234 9237.
  28. Lewis J.A., Falkoff R. Assay of double-stranded RNA-dependent endonuclease activity. // Methods Enzymol.-1981, — vol. 79.- P. 265.- 273.
  29. P. И., Баталина Т. А. Изучение механизмов действия рибонуклеазы на размножение вируса ящура. // Изв. СО АН СССР.- 1968- С. 71−75.
  30. В.И., Салганик Р. И., Талпацкий П. Л. Действие рибонуклеазы на вирус паралича пчёл. // Известия сибирского отделения академии наук СССР.- 1971.- С. 149 -152.
  31. И. С. // Изв. СО АН СССР. Серия биол.-мед наук. 1966, — № 4, — С. 78−81.
  32. Г. Н. Гемато-энцефалический барьер,— М.: Мир.- 1963.- 68 с.
  33. Д. А. Спинномозговая жидкость.- М.: Мир.- 1954.- 47 с.
  34. Л. С. Гематоэнцефалический барьер.- М.: Мир. 1935.- 25 с.
  35. Р. И., Ятель Т. П., Томсон В. М. // Изв. СОАН СССР.- 1961.- № 12.- С. 78 -80.
  36. В. С., Сичко Ж. В. // Лечение рибонуклеазой больных серозными менингитами. Ленинград: врачебное дело. -1969.- С. 69.
  37. М.Д. Лекарственные средства. Том 2. Издание 14 переработанное.-М: Медицина, 2001.- 608 с.
  38. McDonald M.R. Specificity of ribonuclease in hydrolyzing cytidine-2':3'-phosphate. // Biochim Biophys Acta. 1955, — vol. 18. — P. 138 — 139.
  39. Заявка 2 000 116 984/13 RU С12№ 9/22. Способ получения панкреатической рибонуклеазы / Красноштанова А. А., Баурина М. М., Кашкина Е. А., Крылов М. М Опубл. 03.27 2002- Бюл. № 7. Приоритет 2000.06.30, № 2 180 918 (RU).
  40. N. Nomura, N. Inokuchi, Н. Kobayashi, Т. Koyama, М. Iwama, К. Ohgi, М. Irie. Purification and primary structure of a new guanylic ribonuclease from Pleurotus ostreatus. II J. Biochem. (Tokyo).- 1994.- vol. 116.- C. 26 33.
  41. H.X. Wang, T.B. Ng, V.E.C. Ooi. A ribonuclease from sclerotia of the edible mushroom Pleurotus tuber-regium. II Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1998.- vol. 250.- C. 544 -546.
  42. H. Shimade, N. Inokuchi, H. Okugawa, T. Koyama, M. Irie. Purification and characterization of a base nonspecific and adenylic acid prefential ribonuclease from fruit bodi of Lentinus edodes. II Agr. Biol. Chem.- 1991.- vol. 55.- С. 1167 1169.
  43. H. Watanabe, F. Hamid, M. Iwami, T. Onda, K. Ohgi, M. Irie. Primary structure of RNase from Irpex lacteus. // Biosci. Biotechnol. Biochem.- 1995.- vol. 59, — P. 2092 2103.
  44. H.X. Wang, T.B. Ng. Isolation of a new ribonuclease from fresh fruiting bodies of the straw mushroom. // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1999.- vol. 264.- P. 714 718.
  45. H.X. Wang, T.B. Ng. Purification and characterization of a potent homodimeric guanine-specific ribonuclease from fresh mushroom (pleurotus tuber-regium) sclerotia. // Biochemistri Cell. Biol.- 2001.- vol. 33, — P. 483 490.
  46. M. // Arch. Biochem.- 1946, — vol 2, — P. 41−43.
  47. McCarty M. The inhibition of streptococcal desoxyribonuclease by rabbit and human antisera. // J. Exp Med.- 1949.- vol. 90.- P 543−553.
  48. Kunitz M. Crystalline desoxyribonuclease- isolation and general properties- spectrophotometric method for the measurement of desoxyribonuclease activity. // J. Gen Physiol.- 1950.- vol. 33.- P. 349 362.
  49. Г. А. // Изв. Сиб. отд. АН СССР.- 1982,-Вып. 1.- № 5, — С.116 120.
  50. А.А., Браун J1.A. // Научные труды Новосиб. мед. ин-та.-1976.- Т.83.- С. 112 -117.
  51. М. Д. Лекарственные средства. 1998.- изд. 13.- т.2 — С 116−117.
  52. Г. А., Лапик А. С., Павлова М. П., Салганик Р. И. // Изв. СО АН СССР,-1976.- вып. 2.- № 10, — С. 117−121.
  53. Г. А., Саблина О. В., Тимина Н. Ю. // Изв. СО АН СССР.- 1982, — вып. 1.- № 5.- С. 116−121.
  54. Г. А. // Изв. СО АН СССР, — 1984.- вып. 1.- № 6.- С. 114 117.
  55. А.С., Павлова М. П., Коваленко Г. А., Салганик Р. И. // Фармакология и токсикология.- 1974.- Т.37, — № 1, — С. 54 57.
  56. Л.П., Салганик Р. И. // Журнал невропатол. и психиатр.-1969.-№ 4.- С. 525 -529.
  57. Е.М. // Вопросы теоретической и клинической медицины.-Нальчик, 1973.-Вып.З.-С. 156−157.
  58. А.А., Салганик Р. И. // Изв. Сиб. отд. АН СССР.-1972.- № 5, — С. 151 152.
  59. А.А., Салганик Р. И. Терапевтический эффект дезоксирибонуклеазы при инфкции mononucleosis // Сов.мед.-1983.- № 8.- С. 91 92.
  60. Н.М. // Съезд офтальмологов, 4-ый.- Киев, 1973.- С. 140 142.
  61. Т., Фрич Э., Дж. Сэмбрук. Молекулярное клонирование. М.: Мир. -1986.390 с.
  62. Хомов В.В.|, Бочков Д. В., Толстикова Т. Г. // Новый подход к получению дезоксирибо-и рибонуклеозид-5/-монофосфатов и их трифосфатов. Доклады академии наук.- 2005.-Т.401.-№ 3.
  63. Baumgaarten W, Johnson R. F., Finger R. F., et. Al. The isolation and purification of pancreatic deoxyribonuclease. // Arch Biochem.- 1958.- vol. 77.- P. 206−208.
  64. Trinder P. The improved determination of iron in serum. // J. Clin Pathol.- 1956.- vol. 9.-P.170- 172.
  65. Trinder P. Determination of blood glucose using an oxidase-peroxidase system with a non-carcinogenic chromogen. // Annclin Biochem.- 1969.- P.320−323.
  66. Edvin A. Rudd, Nancy K. Mizuno, Howard L. Brockman. Isolation of two forms of carboxylester lipase (cholesterol esterase) from porcine pancreas. // Biochem. et Biophys. Acta.- 1987.-vol. 918.-P. 106−114.
  67. Chapus, C., Desneulle, P., Foglizzo, E. Stabilization of the C-terminal part of pig and horse colipase by carboxypeptidase and trypsin inhibitors. // Eur. J. Biochem.-1981.- vol. 115.- P. 99- 105.
  68. B.B. Протеолитические ферменты.- M.: Наука.-1971.- 414 с.
  69. Keil В. Tripsin // Enzymes. N. Y.- L.: Acad. Press. -1971. vol. 3.- P. 250−273.
  70. Walch K. A., Wilcox P. E. Serine proteases. // Methods in enzymol. -1970.- vol. 19.- P. 31 109.
  71. Zeindzain E.N., Barnard E.A. Distributions of pancreatic ribonuclease, chimotrypsin and trypsin in vertrbrates. // arch. Biochem. And Biophis.- 1967.- vol. 122.- № 3.- P. 699−713.
  72. Reek J. R., Winter W. P., Neurath H. Pancreatic enzymes of African lingfish Protopterus aethiopicus // Biochimistri.- 1970.- vol. 9.- № 6, — P. 1398−1403.
  73. Заявка 4 602 934/14 SU. C12N9/76. Способ получения трипсина / Ночевный В. Т. Осидзе Д.Ф. (SU). Опубл. 1994.06.30- Приоритет 1988.07.29., № 16 285 226 (SU).
  74. А.с.СССР N 336 989, МКИ С 07 F51/50,1970.
  75. И.В. Бактериальные нуклеазы.- Казань: ЮГУ. 1964. — С. 39−47.
  76. И.В. Методы и некоторые результаты изучения нуклеиновых кислот и ферментов нуклеинового обмена. Казань: КГУ. — 1967. — С. 47−52.
  77. Sato N., Egami F. The specificity of T1 ribonuclease. // J. Biochem.- 1957. vol. 44. — P. 1144−1150.
  78. А.И., Тяглов B.B. // Биотехнология. 1996. — № 1. — С. — 23−27.
  79. Tanaka К, Cantoni G.L. On the specificity of RNAse from streptomyces erythreus. // Biochem. Biophys. Acta. 1963. — vol. 72. — P. 641−650.
  80. Т.Н., Амбросимова-Амельянчук H.M., Татарская Р. И. // Междунар. Симпоз. По молек. Биол., вирус. И генетике. М., 1972. — С. 14.
  81. А. с. СССР N1321065, МКИ с 12 Р 19/38,1987.
  82. А. с. СССР N1552652, МКИ с 12 Р 19/40 А61 К 37/10 // (с 12 Р 19/34 с RI:645), 1990.
  83. А.А., Балдина А. В., Безбородов A.M. // Микробиология. 1967.- Т. 36. — С. 19−24.
  84. Ando Т. Nuclease specific for heat-denatured DNA isolated from a product of Aspergillus oryzae. // Biochim et Biophys. Acta. 1966. — vol. 144. — P. 158−163.
  85. Vogt V.M. Purification and further properties of single-strand-specific nuclease a product Aspergillus oryzae. // Eur. J. Biochem.- 1973.- vol. 33, — P. 192−200.
  86. С.Н., Камынина Т. П., Пустошилова Н. М., Ривкин М. Е. // Прикл. биохимия и микробиология.-1981.-Т. 17.- вып.1.-С.113−120
  87. Rashizky G.W., Shaternikov V.A., Mozejko J.H., Sober Н.A. S'-nuclease hydrolysis of zingle-stranded nucleic acids with partial double-stranded configuration. // Biochemistri.-1975,-vol. 14.-№ 19.-P. 4221.
  88. Slor H. Purification of S'-nuclease from tanadiastase by affinity chromatography on single-stranded DNA-acrylamide columns. // Nucl. Acids Res.- 1976.- vol. 2.- № 4.- P. 587.
  89. Hahn E.W., Jeffrey Van Ness. Elimentation of Double Strand Nuclease activity from S1-nuclease prepared from crude a-amylase. //Nucl. Acids Res.- 1976.- vol. 3, — № 5.- P. 1419.
  90. Gannon F., Jrltsch J.M., Perrin F. A detailed comparison of the 5'-end of the ovalbumin gene cloned from chicken oviduct and erythrocyte DNA. // Nucleic Acids Res.- 1980.- vol. 8,-P. 4405−4421.
  91. Burdon M.G., Lees J.H. Double-strand cleavage at a two-base deletion mismatch in a DNA heteroduplex by nuclease SI. // Biosci Rep.- 1985.- vol. 5.- P. 627 632.
  92. Silber J.R., Loeb L.A. SI nuclease does not cleave DNA at single-base mis-matches. // Biochim Biophys Acta.- 1981.- vol. 654.- P. 256 264.
  93. Serror P., Hetraud F., Heizmann P. Chloroplast DNA variability in the genus Helianthus: restriction analysis and SI nuclease mapping of DNA-DNA heteroduplexes. // Plant Mol. Biol.- 1990.-vol. 15.-P. 269 280.
  94. Barnes W.M. PCR amplification of up to 35-kb DNA with high fidelity and high yield from lambda bacteriophage templates. // Proc. Natl. Acad Sci USA.- 1994.- vol. 91.- P. 2216 -2220.
  95. Cheng S., Fockler C., Barnes W.M., Higouchi R. Effective amplification of long targets from cloned inserts and human genomic DNA. // Proc. Natl. Acad Sci USA.- 1994.- vol. 91.-P. 5695−5699.
  96. Lin J., Davis T.M. // Theor Appi Genet.- 2000.- vol. 101.- P. 415 420.
  97. Davidson J.N. Progress in nucleic acids // Cohn W.E.N.Y.: Acad. Press, 1963, — vol. 1.- P. 280.
  98. Maniatis Т., Kee S.G., Efstratiadis A., Kafatos F.C. Amplification and characterization of a p-globin gene synthesized in vitro. // Cell.- 1976.- vol. 8.- № 2, — P. 163.
  99. Crestfield A.M., Stein W.H. On the aggregation of bovine pancreatic ribonuclease. // J. Biol.Chem. -1962.- vol. 238.- P. 618.
  100. Nirenberg M.W., Matthaei J.N. The dependence of cell-free protein synthesis in E. coli upon naturally occurring or synthetic polyribonucleotides. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.-1961.-vol. 47.-P. 1588−1694.
  101. Hoard D.E., Ott D.G. Conversion of mono- and oligodeoxyribonucleotides to 5--triphosphates. // J. Amer. Chem. Soc.- 1965.- vol. 8.- №. 8, — P. 1785 1788.
  102. Mullis K.B., Faloona F.A. Specific synthesis of DNA in vitro via a polymerase-catalyzed chain reaction. // Methods. Enzymol.- 1987.- vol. 155.- P. 335−350.
  103. A. c. 395 082 опубл. Б.И. 1973. No 35.
  104. Японский патент No 17 634. 1966.
  105. Leloir L., Olavarria J. Biosynthesis of glycogen from uridine diphosphate glucose. // Arch. Biochem. Biophys.- 1952.- vol. 81.- P. 508 520.
  106. Kalkar H.M. The biological incorporation of purines and pyrimidines into nucleosides and nucleic acid. //J. Biol. Chem.- 1943.-vol. 142.-P. 127 137.
  107. M.H., Певзнер Д. О. // Биохимия.-1941.- Т. 6.- С. 178 183.
  108. С.У., Фирсов JI.M., Чернаенко В. М. // Прикл. Биохим. и микробиол.- 1974.Т. 10.- С. 80−85
  109. Заключительный отчет по теме БАВ 0274 / Разработка технологии получения рибонуклеозидполифосфатов. Новосибирск СКТБ БАВ. — 1978. — Т. 1.
  110. A.M., Todd A.R. // J. Chem Soc.- 1949.- P. 2487−2490.
  111. G., Todd A.R., Webb R.F., Weymouth F.J. // J. Chem Soc.- 1954, — P. 2288−2294.
  112. Khorana H.G. Pyrophosphorylation of ribose 5-phosphate in the enzymatic synthesis of 5-phosphorylribose 1-pyrophosphate. // J. Am. Chem. Soc.- 1954.- vol. 76.- P. 3517−3522.
  113. Ralph R.K., Smith R.A., Khorana H.G. Studies on polynucleotides. XV. Enzymic degradation. The mode of action of pancreatic deoxyribonuclease on thymidine, deoxycytidine, and deoxyadenosine polynucleotides. // Biochemistry. 1962.- vol. 1.- P. 131−137.
  114. Reiss J.R., Moffatt J.G. Dismutation reactions of nucleoside polyphosphates. 3. Thesynthesis of alpha, omega-dinucleoside 5'-polyphosphates. // J Org Chem.- 1965.- vol.30,-P. 3381−3387.
  115. Adam.A., Moffatt J.G. Dismutation reactions of nucleoside polyphosphates. VI. Chemicalsynthesis of gamma-32P.nucleoside 5'-triphosphates. // Biochemistry.- 1968.- vol. 7.- P.875.881.
  116. Michelson A.M. Synthesis of nucleotide anhydride by anion exchange. // Biochim. Biophys. Acta.-1964.- vol. 91.- P. 1−13.
  117. Cramer F., Fittler F., Kuentzel H., Schaefer E.A. The effect of ribonuclease andpolynucleotide phosporylase on cytidine-l-n-oxide derivative. //Naturforsch В.- 1963.-vol. 18.- P. 668−669.
  118. Hoard D.E., Ott D.G. Conversion of mono- and oligodeoxyribonucleotides to 5'-triphosphates. // J. Am. Chem. Soc.- 1965.- vol. 87.- P. 1785−1788.
  119. Symons R.H. Practical methods for the routine chemical synthesis of 32P-labellednucleoside di- and triphosphates. // Biochim. Biophys. Acta.- 1970.- vol. 209.- P. 296 305.
  120. Hata Т., Furusawa K., Sekine M. Studies on pyrophosphates. Part III. A new method forthe synthesis of nucleotide coenzymes by means of di-n-butylphosphiothioyl bromide. // J. Chem. Soc. Chem. Commun.- 1975.- P. 196−197.
  121. C.H., Зарытова В. Ф., Левина A.C., Позднякович С.А., Ярмолинская
  122. Е.В., Вершинина С. И., Рыбак В. К. // Изв. СО АН СССР. Сер. Хим. Наук.- 1978,-вып. 1.-С. 136−142.
  123. С.Н., Зарытова В. Ф., Левина А. С., Лубенец Э. Г., Хмельницкий А.Г.,
  124. С.М. // Изв. СО АН СССР. Сер. Хим. Наук.- 1978, — вып.2.- С. 143−147.
  125. Doombos J., den Hartog J.A., van. Boom J.H., Altona C. Conformational analysis of thenucleotides A2'-5'A, A2'-5'A2'-5IA and A2'-5'U from nuclear magnetic resonance and circular dichroism studies. // Eur J Biochem. -1981.- vol. 116.- P. 403−412.
  126. Bartlett D.L., King C.H., Poulter C.D. Purification of farnesylpyrophosphate synthetase byaffinity chromatography. // Methods Enzymol.- 1985.- vol. 110.- P. 171−184.
  127. B.E., Дяткина H.B., Краевский A.A., Турина О. В., Готтих В. П., Ажаев А.В.
  128. Биоорган, химия, — 1984.- Т. 10.- С. 670−680.
  129. М.П., Рукавишников М. Ю., Самуков В. В., Аммосов А. Д., Портнянко А.П.,
  130. В.Н. // I Всесоюз. совещ. «Биологически-активные соединения, меченные радиоактивными изотопами». Тез. докл. М., 1985.- С. 56.
  131. B.C. Синтез дезоксинуклеозид-5/-трифосфатов с использованием в качествеактивирующего реагента трифторуксусного ангидрида. // Биоорган, химия.- 1996.Т. 22.- № 9.- С. 699−705.
  132. N., Fujii Т., Minra Y. // J. Ferment Technol. 1971. — vol. 49. — P. 1310.
  133. T.A., Вонский B.E., Лейкин Ю. А. // Прикл. Биохимия и микробиология.-1991.- Т. 27.- вып. 6.- С. 809- 813.
  134. АЛ., Бенько Е. М., Вовченко Г. Д. // Журн. Физ. и химии.- 1973.- Т. 47.- С. 1310.
  135. Maeda Н., Suzuki Н., Sakimae A. Preparation of immobilized enzymes by N-vinylpyrrolidone and the general properties of the glucoamylase gel. // Biotechnol. Bioeng.-1974.-vol. 16.-P. 1517−1528.
  136. А.Л., Мардашев C.P. // Биохимия.-1961.- Т. 26.- С. 641 648.
  137. Sauerman G. Continuous flow system with immobilized nuclei. A method for kinetic studies on RNA metabolism. // Biochem. Biophys. Res. Comm.- 1970.- vol. 39.- P. 738 -742.
  138. Thang M.N., Graffe M., Grunberg-Manago M. Observations on the activity of enzymes after filtration on (and through) a nitrocellulose membrane. // Biochem. Biophys. Res. Comm.- 1968.-vol. 31.-P. 1 8.
  139. Kabamoto N., Lofroth G., Camp P., VanAmburg G., Augenstein L. Specificity of trypsin adsorption onto cellulose, glass, and quartz. // Biochem. Biophys. Res. Comm.- 1966.- vol. 22, — P. 622 627.
  140. Goldman R., Lenhoff H. Glucose-6-phosphate dehydrogenase adsorbed on collodion membranes // Biochemistry.-1971.- vol. 242.- P. 514−518.
  141. В.Б., Лахтин B.M., Ямсков И. А. // Прикл. Биохимия и микробиология.-1995.-Т. 31.-№ 4.-С. 400 405.
  142. Axen R., Porath J., Eruback S. Chemical coupling of peptides and proteins to polysaccharides by means of cyanogen halides. // Nature.- 1967.- vol. 214.- P. 1302 1304.
  143. Porath J., Axen R., Eruback S. Chemical coupling of proteins to agarose. // Nature.- 1967.-vol.215.-P. 1491−1492.
  144. Hoffman C.N., Harris Т., Chrodroff J. Polynucleotide phosphorylase covalently bound to cellulose and its use in the preparation of homopolynucleotides. // Biochim. Biophys. Res. Comm.-1970.- vol. 41.- P. 710 714.
  145. Smith J.C., Strafford I.J. Flexural fatigue tests of some denture base polymers. // FEBS Lett.- 1973.- vol. 30.- P. 246 248.
  146. Г. В., Амгелова B.A., Кощеенко K.A. // Прикл. Биохимия и микробиология.-1991.- вып. 5, — №. 27.- С. 701 711.
  147. Glassmeyer С.К., Ogle J.D. Properties of an insoluble form of trypsin. // Biochemistry.-1971.-vol. 10.-P. 784−792.
  148. Van-Leemputten E., Horisberger M. Letter: Immobilization of trypsin on partially oxidized cellulose. // Biotechnol. And BI-oeng.- 1974.- vol. 16.- P. 997 1003.
  149. Модифицированные кремнеземы в сорбции, катализе и хроматографии. / Под ред. Г. В. Лисичкина.- М.: Химия, 1986.- 248 с.
  150. Unger К.К. Porous silica, its properties and use as support in column liguid chromatography. // J. Cromatogr. Librari. Amsterdam: Elservier. 1979.- vol.16.- 336 p.
  151. X. Жидкостная хроматография при высоких давлениях.- М.: Мир, 1980.-С. 83−216.
  152. Е.Д., Никитин Ю. О., Ворошилова О. И. Макропористые кремнеземы в иммобилизации и хроматографий биополимеров. // Журнал Всесоюз. Хим. общ.-1989.-Т. 34,-№ 3.-С. 366 377.
  153. Химическая энциклопедия. М.: Советская энциклопедия, 1990.- Т. 2.- С. 443−444.
  154. Petro М., Berek D. Polymers immobilized on silica gels as stationary phases for liquid chromatography Review., // Chromatographia.- 1993.- vol. 37.- № 9 10.- P. 549 — 561.
  155. Leonard. M. New packing materials for protein chromatography. // J. Chromatogr. B: Biomed. Applicat.- 1997.- vol. 699, — № l 2.- P. 3 — 27.
  156. Mohr P., Pommtrening K. In: Affinity chromatography: Practical and Teoretical aspect. / Ed. Cazes J.N.Y.: Marcel Dekker, 1985.
  157. Mingalyov, P.G.- Fadeev, A.Y. Activated silica supports forpreparation of chromatographic sorbents. A comparative study of silicas containing attached epoxy, tosyloxy and halogen groups. //J. Chromatogr, A 1996.- vol. 719.-№ 2.- P. 291 -297.
  158. Ernst-Cabrera K., Wilchek M. Silica containing hydroxyl groups for Highperformance affinity chromatography. // Analit. Biochem.- 1986.- vol. 159.- № 2.- P. 267 272.
  159. Kinkel J.N., Anspach В., Unger K.K. Separation of plasma proteins of cultured human fibroplasts by affinity chromatography on bonded microparticulate silicas. // J. Chromatogr.-1984,-vol. 297.-№ 1.-P. 167−177.
  160. Jonsson U., Malmqvist N., Ronberg I. Immobilization of immunoglobulins on silica surface. I. Stability. // Biochem. J.- 1985.- vol. 227.- № 2.- P. 363 371.
  161. Jarret H.W. Development of n-hidroxysuccinimide ester silica, novel support for high-performance affinity chromatography. // J. Chromatogr.- 1987.- vol. 405.- № 1.- P. 179 — 189.
  162. Toyot J.-L., Holgrem L., Svennerholm L., Lindblad M., Tardy M. Receptot Specific large-scale purification of cholera toxin on silica beds derivatized with LysoGMi ganglioside. // Eur. J. Biochem.-1981, — vol. 113.- № 2.- P. 249 258.
  163. A.E., Жигис Л. С., Чеховский E.A., Решетов П. Д., Зубов В. П. Хлорангидрид содержащие композиционные носители для иммобилизации биоспецифических лигандов. // Биоорган. Химия.- 1986.- Т. 11, — № 11.- С. 1527 1532.
  164. JI.B., Сизой М. Н., Зинченко А. А., Иванов А. Е., Зубов В. П. Связывание и активация первого компонента комплемента человека на искусственных матрицах. // Биоорган, химия.- 1985.- Т. 10.- № 12.- С. 1629 1639.
  165. А.Е., Грин М. А., Жильцов В. В., Кизюн С. М., Афанасенко Г. А., Зубов В. П. Полимерно-модифицированные твердокаркасные носители для аффинной хроматографии. // Прикл. биохим. и микробиол.- 1990.- Т. 26.- вып. 6.- С. 840 847.
  166. Royer G.P., Green G.M., Sinka D.K. Rigid support materials for immobilization of enzymes. // J. Macromol. Sci. Chem.- 1976.- vol. A-10.- № 1 2.- P. 289 — 307.
  167. А. с. СССР Ns 1 061 828. Способ получения сорбентов для очистки белков / Кадушявичюс В. А., Суджювене О. Ф., Песлякас И.-Г.И. (СССР). Бюл. № 47., 1983.26 с.
  168. О.В., Ливанов В. А. Получение препарата дезоксирибонуклеазы // Медицинская промышленность СССР. М.: Медицина.-1965.- № 8.- С. 22−26.
  169. Грачева И. М. Технология ферментных препаратов.- М.:Элевар., 3-е изд., 2000.- 512 с.
  170. Заявка 5 046 854/14 СССР. Способ получения инсулина / Катруха С. П., Дебабов В. Г. Опубл. 08.05.95., бюл. № 3- Приоритет 08.05.92. № 2 027 444 (СССР).
  171. Патент 2 027 444 РФ, Способ получения инсулина / Катруха С. П., Дебабов В. Г. (СССР). Опубл. БИ № 3,1995.
  172. Фармакопейная статья /Рибонуклеаза аморфная / ФС 42−2673−89 от 27.04.2003.
  173. Р., Эллиот Д., Джонс К. Справочник биохимика. М.: Мир., 1991.- С. 464 467.
  174. Н.И. Портяная, В. Г. Оситенко. Биохимические исследования в токсикологическом эксперименте. / Под ред. М. Ф. Савченкова. Иркутск: иркутский ун-т, 1990.
  175. Хроматография. Практическое приложение метода. Под ред. Э.Хефтмана. М.: Мир., 1986.
  176. Hyun, J., Kolthari, И., Herm, Е., Vortenson, J., Treadwell, C. R, Vahouny, G.V. Purification and properties of pancreatic juice cholesterol esterase. // J. Biol. Chem.- 1969.-vol. 244, — C. 1937−1945.
  177. Г. А. Практическое руководство по энзимологии.- М.: Наука., 1989.
  178. Патент 2 090 195. РФ. Способ получения рибонуклеазы панкреатической / Хомов В. В., Сизов А. А., (СССР). Опубл. БИ № 26,1997.
  179. Фармакопейная статья / Трипсин кристаллический / ФС 3435 97 от 31.12.02.
  180. Фармакопейная статья / Дезоксирибонуклеаза / ФС 3452 97 от 31.12.02.
  181. С. Н., Moor S., Stein W. Н. A chromatographic investigation of pancreatic ribonuclease. // J. Biol. Chem. 1953. — vol. 200.- P. 493 — 506.
  182. Taborsky G. Inactivation of ribonuclease by phosphorylation. // J. Biol. Chem. 1959.-vol. 234,-P. 2915−2920.
  183. A.M. Crestfild, W.H. Stein, S. Moore. On the aggregation of bovine pancreatic ribonuclease. //Arch. Biochem. Biopfys. Suppl.- 1962.- vol. 1.- P. 217−222.
  184. R.G. Fruchter, A.M. Crestfild. Preparation and properties of two active forms of ribonuclease dimer. //J. Biol. Chem.- 1965.- vol. 240, — P. 3868 3874.
  185. R.G. Fruchter, A.M. Crestfild. On the structure of ribonuclease dimer. Isolation and identification of monomers derived from inactive carboxymethyl dimers. // J. Biol. Chem.-1965.-vol. 240.-P. 3875−3882.
  186. G. Gotte, L. Testolin, C. Costanzo, S. Sorrentino, U. Armato, M. Libonati. Cross-linked trimers of bovine ribonuclease A: activity on double-stranded RNA and antitumor action. // FEBSLett.- 1997.-vol.415.-P. 308−312.
  187. G. Gotte, M. Libonati. Two different forms of aggregated dimers of ribonuclease A. // Biochemica et Biophys. Acta.- 1998, — vol. 1386.- P. 106 112.
  188. M. Libonati, M. Bertoldi, S. Sorrentino. The activity on double-stranded RNA of aggregates of ribonuclease A higher than dimers increases as a function of the size of the aggregates. // Biochem. J.- 1996.- vol. 318.- P. 287 290.
  189. A. Nenci, G. Gotte, M. Bertoldi, M. Libonati. Structural properties of trimers and tetramers of ribonuclease A. // Protein Science.- 2001.- vol. 10.- P. 2017 2027.
  190. Rothwarf, D.M., Li, Y.-J., Scheraga, H. A. Regeneration of bovine pancreatic ribonuclease A: detailed kinetic analysis of two independent folding pathways. // Biochemistry.- 1998-vol. 37.-P. 3767−3776.
  191. Low, L. K., Shin H.-C., Scheraga, H.A. Oxidative folding of bovine pancreatic ribonuclease A: insight into the overall catalysis of the refolding pathway by phosphate // Journal of Protein Chemistry.- 2002.- vol. 21.- № 1.- P. 19 27.
  192. Crestfield A.M., Smith K.C., Allen F.W. The preparation and characterization of ribonucleic acids from yeast. // Biol. Chem.- 1955.- vol. 216.- P. 185−193.
  193. A. c. 1 197 462 СССР. Дужак А. Б., Подгорный В. Ф., Банина Л. И., Штань А. В., Пупкова В. И., Лобова Н. Н., Загребельный С. Н. (СССР). 1982.
  194. F., Tuttie L.C. //J.Biol.Chem.- 1944.- vol.153.- P.571.
  195. Lipmann F., Tuttie L.C. Lipase-catalysed condensation of fatty acids with hydroxylamine. // Biochim Biophys Acta. 1950.- vol.4.- P. 301−309.
  196. Hoard D.E., Ott D.G. Conversion of mono- and oligodeoxyribonucleotides to 5'-triphosphates. // J. Amer. Chem. Soc.- 1965.- vol. 8.- №. 8.- P. 1785 1788.
  197. Kornberg A., Aposhian H.V. Enzymatic synthesis of deoxyribonucleic acid. IX. The polymerase formed after T2 bacteriophage infection of Escherichia coli: a new enzyme. // J. Biol. Chem.- 1962.-vol.237.-№.2.-P.519−526.
  198. G., Christian W. // Biochem. Z.-1941.- vol. 310.- P. 384−392.
  199. T.B., Хомов B.B., Загребельный C.H., Ямковой В. И. Выделение суммарной РНК из пекарских дрожжей. // Прикл. биохимия и микробиология — принята в печать в 2004 г.
  200. JI.A. Хроматография белков и нуклеиновых кислот.- М.: Наука, 1985.- С. 109−145.
  201. U.K. Laemmli, М. Favre. Maturation of the head of bacteriophage T4.1. DNA packaging events. // J. Mol. Biol.- 1970.- vol. 80.- P. 575−599.
  202. C.Lee, A. Levin, D.Branton. Copper staining: a five-minute protein stain for sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gels. // A. Biochem.- 1987.- vol.166.- P.308−312.
  203. C.H., Камынина Т. П., Пустошилова Н. М., Ривкин М. Е. // Прикл. биохимия и микробиология.-1981.- Т.17.- вып.1.- С.113−120
  204. Christopherson R.I., Jones М.Е., Fich L.R. A simple centrifuge column for desalting protein solutions. // Anal. Biochem.- 1979, — vol. 100.- P. 184 187.
  205. B.B., Сизов A.A., Масычева В. И., Загребельный C.H. // Биотехнология.-1997.-вып. 3.-С. 29−34.
  206. Заключительный отчет по теме БАВ 0274 / Разработка технологии получения рибонуклеозидполифосфатов.- Новосибирск: СКТБ БАВ. — 1978. — Т. 1.
  207. Liberman J., Korncberg A., Simms Е. Enzymatic synthesis of pyrimidine nucleotides- orotidine-5'-phosphate and uridine-5'-phosphate. //J Biol Chem. 1955.- vol. 215.- P. 403 451.
  208. Florid A., Palmarini C.A., Fini C. Simultaneous analysis of bases, nucleosides and nucleoside mono- and polyphosphates by high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr.- 1977.- vol. 138.- P. 203 212.
  209. Hulbert R., Schmitz H., Brumm A. Nucleotide metabolism. II. Chromatographic separation of acid-soluble nucleotides. // J. Biol. Chem.- 1954.- vol. 209.- P. 23 39.1. Благодарности
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!