Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Определение аминокислот и их оптических изомеров в виде o-фталевых и дансильных производных методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Диссертация: Определение аминокислот и их оптических изомеров в виде o-фталевых и дансильных производных методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Практическая значимость работы. Выбраны условия разделения о-фталевых производных энантиомеров двадцати аминокислот, содержащихся в пиве и являющихся активными компонентами лекарственных препаратов. После предколоночной дериватизации с ОФА/НАЦ и ОФА/НМЦ реагентами определен энантиомерный аминокислотный состав нескольких образцов пива и лекарственного препарата «Полиамин». Проведенные исследования… Читать ещё >

Определение аминокислот и их оптических изомеров в виде o-фталевых и дансильных производных методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
  • Глава 1. Определение модифицированных аминокислот методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографией. Обзор реагентов для предколоночной дериватизации аминокислот
    • 1. 1. Определение аминокислот со спектрофотометрическим и флуориметрическим детекторами
    • 1. 2. Определение аминокислот с электрохимическим детектором
    • 1. 3. Дансилхлорид, как модифицирующий реагент для аминокислот
    • 1. 4. Использование о-фталевого реагента для предколоночной дериватизации аминокислот в обращенно-фазовой ВЭЖХ
    • 1. 5. Детектирование о-фталевых производных аминокислот
    • 1. 6. Определение энантиомеров аминокислот после дериватизации с о-фталевым альдегидом
  • ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТ
  • Глава 2. Исходные вещества, аппаратура, методика эксперимента
    • 2. 1. Исходные реактивы и растворы
    • 2. 2. Получение производных аминокислот с о-фталевым альдегидом
    • 2. 3. Получение дансильных производных аминокислот
    • 2. 4. Аппаратура, сорбенты и подвижные фазы
    • 2. 5. Методика хроматографического эксперимента
  • Глава 3. Предколоночная дериватизация аминокислот с о-фталевым альдегидом в обращенно-фазовой ВЭЖХ
    • 3. 1. Исследование устойчивости ОФА/2-МЭ производных аминокислот в процессе разделения на колонке с гидрофобизированным силикагелем
    • 3. 2. Оптимизация условий разделения ОФА/НАЦ производных аминокислот 67 3.2.1 Влияние природы органического растворителя подвижной фазы на селективность разделения ОФА/НАЦ производных аминокислот
      • 3. 2. 2. Влияние рН и ионной силы подвижной фазы на разделение ОФА/НАЦ производных аминокислот
      • 3. 2. 3. Разделение ОФА/НАЦ производных сложной смеси аминокислот 73 3.3 Изучение свойств нового хирального модификатора
  • Ц11)-манделил-(8)-цистеина
    • 3. 3. 1. Чувствительность детектирования ОФА/НАЦ и ОФА/НМЦ производных аминокислот
    • 3. 4. Электрохимическое детектирование ОФА/НАЦ производных аминокислот
  • Глава 4. Определение аминокислот после дериватизации дансилхлоридом методом обращенно-фазовой ВЭЖХ
    • 4. 1. Оптимизация условий получения дансильных производных аминокислот
    • 4. 2. Амперометрическое детектирование дансильных производных аминокислот в обращенно-фазовой ВЭЖХ
  • Глава 5. Определение аминокислот и их оптических изомеров в пиве и фармацевтических препаратах методом обращенно-фазовой ВЭЖХ
    • 5. 1. Определение аминокислот и их энантиомеров в виде о-фталевых 113 производных в пиве
    • 5. 2. Определение аминокислот и их энантиомеров в виде о-фталевых производных в фармацевтических препаратах
    • 5. 3. Определение аминокислот в виде дансильных производных в фармацевтических препаратах
  • ВЫВОДЫ

Актуальность темы

Аминокислотный анализ является хорошо изученным и в то же время развивающимся разделом современной аналитической химии. Определение аминокислот в продуктах питания, напитках и лекарственных препаратах имеет большое значение для контроля технологии производства, оценки качества сырья и готовой продукции, выявления фальсификатов. В последнее время актуально определение D-изомеров аминокислот в пищевых продуктах и медицинских препаратах. Это связано с тем, что влияние на здоровье человека D-изомеров аминокислот изучено мало, но их небольшие количества могут появляться в пищевых продуктах при термической обработке, а в медицинских препаратах при использовании синтетических аминокислот. Наиболее успешно поставленные задачи позволяет решать обращенно-фазовая высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) с предколоночным переводом аминокислот в гидрофобные производные.

Для предколоночной дериватизации аминокислот предложено несколько десятков реагентов, из них наибольшими преимуществами обладают о-фталевый альдегид (ОФА) и 5-диметиламинонафталин-1-сульфонилхлорид (дансилхлорид). о-Фталевый альдегид в присутствии серосодержащего нуклеофила быстро и количественно взаимодействует с аминокислотами при комнатной температуре. Актуальным является изучение устойчивости ОФА производных в процессе хроматографического разделения и выбор условий, в которых разложение производных минимально. Хиральные нуклеофилы образуют с аминокислотами диастереомерные производные, что позволяет определять оптические изомеры аминокислот. Известно несколько хиральных модификаторов аминокислот, но каждый из них проявляет энантиоселективность к ограниченной группе аминокислот. В связи с этим необходим поиск и изучение свойств новых, универсальных хиральных нуклеофилов для дериватизации аминокислот.

В отличие от ОФА дансилхлорид легко реагирует с вторичными и первичными аминогруппами, дансильные производные аминокислот устойчивы в условиях ВЭЖХ. Недостаток дансилхлорида — длительность процесса дериватизации, поэтому важно изучение факторов, влияющих на скорость и выход реакции дериватизации, особый интерес представляет исследование воздействия температуры и микроволнового поля. о-Фталевые и дансильные производные аминокислот обладают высокой флуоресценцией и светопоглощением. Селективность и чувствительность определения аминокислот в реальных объектах, что особенно важно при определении низких концентраций D-аминокислот, может повысить амперометрическое детектирование. Для его использования нужны дополнительные исследования, так как мало изучена электрохимическая активность аминокислот, модифицированных ОФА и хиральными нуклеофилами. Электрохимическое детектирование дансильных производных аминокислот до сих пор не применялось, между тем наличие электроактивных групп в структуре дансильных производных делает возможным их окисление и последующее амперометрическое детектирование.

Цель работы состояла в изучении условий предколоночной дериватизации аминокислот о-фталевым альдегидом и дансилхлоридом, выборе оптимальных условий разделения и детектирования аминокислот и их энантиомеров в виде производных и определении Lи Dаминокислот в фармацевтических препаратах и пиве. Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи: изучить устойчивость производных аминокислот с реагентом о-фталевый альдегид/2-меркаптоэтанол (ОФА/2-МЭ) в процессе хроматографирования и провести оптимизацию условий их разделенияизучить влияние состава подвижной фазы на селективность и эффективность разделения аминокислот и их оптических изомеров, модифицированных о-фталевым альдегидом в присутствии N-ацетил-Ь-цистеина (НАЦ) — исследовать энантиоселективность двух новых мультихиральных модификаторов аминокислот Ы-(К)-манделил-(8)-цистеина (НМД) и Ы-фенилацетил-(11)-фенилглицил-(8)-цистеина (НФФЦ) — выбрать оптимальные условия для разделения и детектирования двадцати аминокислот в виде ОФА/НАЦ и ОФА/НМЦ производныхпоказать возможность амперометрического детектирования ОФА/НАЦ производных аминокислотисследовать влияние температуры и микроволнового поля на дериватизацию аминокислот дансилхлоридомоптимизировать условия разделения и электрохимического детектирования дансильных производных аминокислот;

Научная новизна. Исследована устойчивость ОФА/2-МЭ производных аминокислот в процессе разделения на колонке с гидрофобизированным силикагелем. Показано, что степень разложения производных не превышает 10% и уменьшается при повышении скорости потока подвижной фазы. Предложены новые мультихиральные модификаторы аминокислот — М-(К)-манделил-(8)-цистеин и Ы-фенилацетил-(Я)-фенилглицил-(8)-цистеин. Проведено систематическое исследование влияния природы нуклеофильного реагента и состава подвижной фазы на разделение аминокислот и их оптических изомеров в виде ОФА производных. Показано, что М-(11)-манделил-(8)-цистеин обладает большей энантиоселективностыо по сравнению с ранее изученными аналогами. Использование НМЦ для предколоночной дериватизации позволяет методом обращенно-фазовой ВЭЖХ разделить с высоким разрешением энантиомеры всех аминокислот, входящих в состав белков, кроме аргинина (Rs=0.7). Найдены условия электрохимического детектирования дансильных и ОФА/НАЦ производных аминокислот. Сопоставлены метрологические характеристики определения дансильных и ОФА/НАЦ производных аминокислот с использованием амперометрического, флуориметрического и спектрофотометрического детекторов.

Практическая значимость работы. Выбраны условия разделения о-фталевых производных энантиомеров двадцати аминокислот, содержащихся в пиве и являющихся активными компонентами лекарственных препаратов. После предколоночной дериватизации с ОФА/НАЦ и ОФА/НМЦ реагентами определен энантиомерный аминокислотный состав нескольких образцов пива и лекарственного препарата «Полиамин». Проведенные исследования показали, что D-аланин можно использовать в качестве маркера заражения пива молочнокислыми бактериями. Разработана методика определения аминокислот в виде дансильных производных методом ВЭЖХ с амперометрическим детектированием. Содержание аминокислот определено в препарате «Долголет».

На защиту выносятся следующие положения:

1. Результаты исследования устойчивости ОФА/2-МЭ производных аминокислот в процессе хроматограф ичес ко го разделения.

2. Результаты изучения энантиоселективности М-(Л)-манделил-(8)-цистеина и ее сравнения с уже известными хиральными модификаторами.

3. Совокупность данных о влиянии состава подвижной фазы на разделение ОФА/НАЦ и ОФА/НМЦ производных аминокислот.

4. Совокупность данных по определению оптимальных условий дериватизации аминокислот дансилхлоридом.

5. Данные по исследованию условий амперометрического детектирования ОФА/НАЦ и дансильных производных аминокислот.

6. Условия и результаты определения аминокислотного состава пива и некоторых лекарственных препаратов.

Апробация работы. Основное содержание работы изложено в 10 публикациях. Результаты исследований доложены на VIII Всероссийском симпозиуме по жидкостной хроматографии и капиллярному электрофорезу (Москва, 2001 г.), Международной конференции студентов и аспирантов «Ломоносов-2003» (Москва, 2003 г.), Всероссийском симпозиуме «Хроматография и хроматографическое оборудование» (Москва, 2004 г.), II Международном симпозиуме «Разделение и концентрирование в аналитической химии и радиохимии» (Краснодар, 2005 г.), International Congress on Analytical Sciences «ICAS-2006» (Moscow, 2006).

Публикации. По материалам диссертации опубликованы 5 статей и 5 тезисов докладов.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

выводы.

1. Предложен подход, позволяющий оценить устойчивость о-фталевых/2-меркаптоэтанольных производных аминокислот в процессе хроматографического разделения. Показано, что частично разлагаются при разделении в хроматографической колонке о-фталевые/2-меркаптоэтанольные производные валина и лейцина, степень их разложения увеличивается с уменьшением скорости потока.

2. Систематически исследовано влияние состава и рН элюента на удерживание и селективность разделения производных аминокислот с о-фталевым альдегидом/N-ацетил-Ь-цистеином. Установлено, что метанол в качестве компонента подвижной фазы обеспечивает большую селективность разделения диастереомеров аминокислот, чем ацетонитрил. Выбран оптимальный состав подвижной фазы и условия градиентного элюирования для разделения смеси двадцати производных аминокислот.

3. Для дериватизации аминокислот предложен новый мультихиральный реагент — N-®-манделил-(8)-цистеин, позволяющий с высокой селективностью разделять энантиомеры 20 изученных аминокислот.

4. Изучено электрохимическое детектирование аминокислот после дериватизации с о-фталевым альдегидом/М-ацетил-Ь-цистеином, выбран оптимальный потенциал и материал рабочего электрода. Показано, что чувствительность амперометрического детектирования сопоставима с флуориметрическим и выше, чем спектрофотометрического детектирования.

5. Исследовано влияние температуры и микроволнового излучения на образование дансильных производных аминокислот. Установлено, что нагревание реакционной смеси до 40 °C и действие микроволнового поля ускоряет реакцию дансилирования аминокислот, но уменьшает её выход.

6. Показана возможность амперометрического детектирования дансильных производных аминокислот после разделения методом обращенно-фазовой ВЭЖХ. Определены условия хроматографического разделения и амперометрического детектирования дансильных производных исследованных аминокислот.

7. Определено содержание аминокислот и их энантиомеров в ряде образцов пива и лекарственных препаратов.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Г. А. Основные процессы пивоварения. Брожение пивного сусла. // Пиво и напитки. 2001. № 4. С. 20−21.
  2. Friedman М. Chemistry, nutrition and microbiology of D-amino acids. // J. Agric. Food Chem. 1999. V. 47. № 9. P. 3457−3479.
  3. Т. А., Нидервизер А. Аминокислоты и олигопептиды. Хроматография. Практическое приложение метода. Ч. 1. М.: Мир, 1986. 37 с.
  4. AAA-Direct and AminoPac PA 10 Product Manual, Dionex Corporation, 2003.63 p.
  5. Toyoka Т., Ishibashi M., Terao T. Sensitive determination of N-terminal prolyl peptides by high-performance liquid chromatography with laser-induced fluorescence detection. // J. Chromatogr. A. 1994. V. 661. № 1−2. P. 105−112.
  6. Molnar-Perl I. Derivatization and chromatographic behavior of the o-phtaldialdehyde amino acid derivatives obtained with various SH-group-containing additives. // J. Chromatogr. A. 2001. V. 913. № 1−2. P. 283−302.
  7. Koller M., Eckert H. Derivatization of peptides for their determination by chromatographic methods. //Anal. Chim. Acta. 1997. V. 352. № 1−3. P. 31−59.
  8. Fermo I., Diomede L., Paroni R. Serum amino acid analysis with pre-column derivatization: comparison of the o-phthaldialdehyde and N, N-diethyl-2,4-dinitro-5-fluoroaniline methods. // J. Chromatogr. 1990. V. 534. № 1. P. 23−32.
  9. Gifford L.A., Owusu-Daaku F.T.K., Stevens A.J. Acenaphthene fluorescence derivatisation reagents for use in high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr. A. 1995. V. 715. № 2. P. 201−212.
  10. Krause I., Bockhardt A., Neckermann H., Henle Т., Klostermeyer H. Simultaneous determination of amino acid and biogenic amines by reversed-phase high-performance liquid chromatography. //J. Chromatogr. A. 1995. V. 715. № 1. P. 67−79.
  11. Molnar-Perl I. Quantitation of amino acids and amines in the same matrix by high-performance liquid chromatography, either simultaneously or separately. // J. Chromatogr. A. 2003. V. 987. № 1−2. P. 291−309.
  12. Drnevich D., Vary T. Analysis of physiological amino acids using dabsyl derivatization and reversed-phase liquid chromatography. // J. Chromatogr. 1993. V. 613. № 1. P. 137−144.
  13. Roturier J.M., Bars D.Le., Gribon J.C. Separation and identification of hydrophilic peptides in dairy products using FMOC derivatization. // J. Chromatogr. A. 1995. V. 696. № 2. P. 209−217.
  14. Gustavsson В., Betner I. Fully automated amino acid analysis for protein and peptide hydrolysates by precolumn derivatization with 9-fluorenyl methylchloroformate and 1-aminoadamantane.//J. Chromatogr. 1990. V. 507. P. 67−77.
  15. Molnar-Perl I. Role of chromatography in the analysis of sugars, carboxylic acids and amino acids in food. // J. Chromatogr. A. 2000. V. 891. № 1. P. 1−32.
  16. Liu H.J. Determination of amino acids by precolumn derivatization with 6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate and high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection. // J. Chromatogr. A. 1994. V. 670. № 1−2. P. 59−66.
  17. Antonis K.D., Brown P.R., Cohen S.A. High-performance liquid chromatographic analysis of synthetic peptides using derivatization with 6-Aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate. //Anal. Biochem. 1994. V 223. № 2. P. 191−197.
  18. Caudill W.L., Wightman R.M. Trinitrobenzenesulfonic acid: a chromophore, electrophore and pre-column derivatizing agent for high-performance liquid chromatography of alkylamines. //Anal. Chim. Acta. 1982. V. 141. P. 269−278.
  19. И.Н., Карцова Jl.A., Черкас Ю. В. Определение аминокислот в сыворотке крови человека методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии в режиме изократического элюирования. // Журн. аналит. химии. 2000. Т. 55. № 1.С. 66−74.
  20. Yu J., Li J., Krull I.S., Gohen S.A. Polymeric 6-aminoquinoline, an activated carbamate reagent for derivatization of amines and amino acids by high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr. 1994. V. 658. № 2. P. 249−260.
  21. Sanz M.A., Gastillo G., Hernandez A. Isocratic high-performance liquid chromatographic method for quantitative determination of lysine, histidine and tyrosine in foods. // J. Chromatogr. A. 1996. V. 719. P. 195−201.
  22. Gros G., Labouesse B. Study of dansylation reaction of amino acids, peptides and proteins. // European J. Biochem. 1969. V. 7. № 4. P. 463−470.
  23. Zhou J., Lunte S.M. Membrane-based on-column mixer for capillary electrophoresis/electrochemistry.//Anal. Chem. 1995. V. 67. № 1. P. 13−18.
  24. Jong C., Hunges G.J., Wilson К J. Amino Acid analyses by high-performance liquid chromatography. An evaluation of the usefulness of pre-column Dns derivatization. // J. Chromatogr. 1982. V. 241. № 2. P. 345−359.
  25. Bayer E., Grom E., Kaltenegger B. Separation of amino acids by high-performance liquid chromatography. // Anal. Chem. 1976. V. 48. № 8. P. 1106−1109.
  26. Л.А. Хроматография белков и нуклеиновых кислот. М.: Наука, 1985. 536 с.
  27. Faist V., Drusch S., Kiesner С. Determination of lysinoalanine in foods containing milk protein by high-performance liquid chromatography after derivatization with dansyl chloride. // Int. Dairy J. 2000. V. 10. № 5−6. P. 339−346.
  28. И.Н., Карцова Л. А., Колмакова И. В. Анализ нейромедиаторных аминокислот и биогенных аминов в спинномозговой жидкости методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. // Журн. аналит. химии. 1997. Т. 52. № 7. С. 767−772.
  29. Sternson L.A., Stobaugh J.F., Repta A.J. Rational design and evaluation of improved o-phthalaldehyde-like fluorogenic reagents. // Anal. Biochem. 1985. V. 144. № 1. P. 233−246.
  30. Barnett R., Jencks W.P. Diffusion-controlled and concerted base catalysis in the decomposition of hemithioacetals. // J. Am. Chem. Soc. 1969. V. 91. № 24. P. 6758−6765.
  31. Barnett R., Jencks W.P. Base-catalyzed hemithioacetal decomposition at a diffusion-controlled rate. // J. Am. Chem. Soc. 1967. V. 89. № 23. P. 5963−5964.
  32. D.F., Luowski W. 1-Arylisoindoles. // J. Am. Chem. Soc. 1964. V. 86. № 19. P. 41 524 158.
  33. Duchateau A.L.L., Knuts H., Boesten J.M.M., Guns J.J. Enantioseparation of amino compounds by derivatization with o-phthalaldehyde and d-3-mercapto-2-methylpropionic acid. // J. Chromatogr. 1992. V. 623. № 2. P. 237−245.
  34. Einarsson S., Folestad S., Josefsson B. Separation of amino acid enantiomers using precolumn derivatization with o-phthalaldehyde and 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-l-thio-P-glucopyranoside. Hi. Liq. Chromatogr., 1987. V. 10. № 8−9. P. 1589−1601.
  35. Buck R.H., Krummen K. High-performance liquid chromatographic determination of enantiomeric amino acids and amino alcohols after derivatization with o-phthaldialdehyde and various chiral mercaptans. // J. Chromatogr., 1987. V. 387 P. 255−265.
  36. Dorresteijn R.C., Berwald L.G., Zomer G., Wieten G., Beuvery E.C. Determination of amino acids using o-phthalaldehyde-2-mercaptoethanol derivatization. Effect of reaction conditions. // J. Chromatogr. A. 1996. V. 724 P. 159−167.
  37. Simons S. S, Johnson D.F. Reaction of o-phthalaldehyde and thiols with primary amines: formation of l-alkyl (and aryl) thio-2-alkylisoindoles. // J. Org. Chem. 1978. V.43. № 14. P. 2886−2891.
  38. В.И., Воронина Р. Д., Филатова Д. Г., Зоров Н. Б. // Журн. аналит. химии. 2000. Т. 55. № 12. С. 1277−1280.
  39. Stobaugh J.F., Repta A.J. Autoxidation of l-(tert-butylthio)-2-(n-propyl)isoindole. // J. Org. Chem. 1984. V.49. № 22. P. 4306−4309.
  40. J.F., Repta A.J., Sternson L.A., Garren K.W. // Anal. Biochem. 1983. V. 135. № 2. P. 495−504.
  41. Jacobs W.A., Leburg M.W., Madaj E.J. Stability of o-phthalaldehyde-derived isoindoles. // Anal. Biochem. 1986. V. 156. № 2. P. 334−340.
  42. Allison L.A., Mayer G.S., Shoup R o-Phthalaldehyde derivatives of amines for high-speed liquid chromatography/electrochemistry. // Anal. Chem. 1984. У. 56. № 7. P. 1089−1096.
  43. Donzanti B.A., Yamamoto B.K. An improved and rapid HPLC-EC method for the isocratic separation of amino acid neurotransmitters from brain tissue and microdialysis perfusates. // Life Sciences. 1988. V. 43. № 11. P. 913−922.
  44. Kucera P., Umgat H. Design of a post-column fluorescence derivatization system for use with microbore columns. // J. Chromatogr. 1983. V. 255 P. 563−579.
  45. Godel H., Graser Т., Foldi P., Pfaender P., Furst P. Measurement of free amino acids in human biological fluids by high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr. 1984. V. 297. № 1. P. 49−61.
  46. Svedas V.K., Galaev I.J., Borisov I.L., Berezin I.V. The interaction of amino acids with o-phthaldialdehyde: A kinetic study and spectrophotometric assay of the reaction product. // Anal. Biochem. 1980. V. 101. P. 188−195.
  47. Wong O.S., Sternson L.A., Schowen R.L. Reaction of o-phthalaldehyde with alanine and thiols: kinetics and mechanism. // J. Amer. Chem. Soc. 1985. V. 107. № 22. P. 6421−6422.
  48. Nakamura H., Matsumoto A., Tamura Z. On the stability of isoindole-type fluorophores derived from o-phthalaldehyde, primary amino compounds and thiols. // Anal. Lett. 1982. V. 15. №A17. P. 1393−1410.
  49. Cronin J.D.H., Pizzarello S., Gandy W.E. Amino acid analysis with o-phthalaldehyde detection: Effects of reaction temperature and thiol on fluorescence yields. // Anal. Biochem. 1979. V. 93. № 1. P. 174−179.
  50. Jacobs W.A. O-Phthalaldehyde-sulfite derivatization of primary amines for liquid chromatography-electrochemistry. //J. Chromatogr. 1987. V. 392. P. 435−441.
  51. Turiak G., Volicer L. Stability of o-Phthalaldehyde-sulfite derivatives of amino acids and their methyl esters: electrochemical and chromatographic properties. // J. Chromatogr. 1994. V. 668. P. 323−329.
  52. Oates M.D., Cooper B.R., Jorgenson J.W. Quantitative amino acid analysis of individual snail neurons by open tubular liquid chromatography. // Anal. Chem. 1990. V. 62. № 15. P. 1573−1577.
  53. Smith S., Sharp T. Measurement of GABA in rat brain microdialysates using o-phthalaldehyde-sulfite derivatization and high-performance liquid chromatography with electrochemical detection. //J. Chromatogr. B. 1994. V. 652. P. 228−233.
  54. Agilent Zorbax column selection guide for analytical HPLC. Agilent Technologies Inc. USA, 2001.30 р.
  55. К.И., Бражников B.B., Волков С. А., Зельвенский В. Ю., Ганкина Э. С., Шатц В. Д. Аналитическая хроматография. Москва.: Химия, 1993. С. 312.
  56. E.JI., Ициксон Л. Б., Брауде Е. В. Практическая высокоэффективная жидкостная хроматография. М.: Химия, 1986.242 с.
  57. X. Жидкостная хроматография при высоких давлениях. М.: Мир, 1980. 245 с.
  58. Schuster R. Determination of amino acids in biological, pharmaceutical, plant and food samples by automated precolumn derivatization and high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr. 1988. V. 431. P. 271−284.
  59. Aswad D.W. Determination of D- and L-aspartate in amino acid mixtures by high-performance liquid chromatography after derivatization with a chiral adduct of o-phthaldialdehyde. //Anal. Biochem. 1984. V. 137. № 2. P. 405−409.
  60. Thompson J.A., Holtzmann J.L., Tzuru M., Lerman C. R Procedure for the chiral derivatization and chromatographic resolution of R-(+) and S-(-) propranolol. // J. Chromatogr. 1982. V. 238. № 2. P. 470−475.
  61. C.H. Методы совершенствования хроматографических систем и механизмы удерживания в ВЭЖХ. Орел.: Орел ГТУ, 2000. С. 38.
  62. Barkholt V., Jensen A.L. Amino acid analysis: Determination of cysteine plus half-cystine in proteins after hydrochloric acid hydrolysis with a disulfide compound as additive. // Anal. Biochem. 1989. V. 177. № 2. P. 318−322.
  63. А., Хендлер Ф., Смит Э., Хилл Р., Леман И. Основы биохимии. М.: Мир, 1981. 879 с.
  64. Gorog S., Gazdag М. Enantiomeric derivatization for biomedical chromatography. // J. Chromatogr. B. 1994. V. 659. P. 51−84.
  65. Bovingdon M.E., Webster R.A. Derivatization reactions for neurotransmitters and their automation.//J. Chromatogr. B. 1994. V. 659. P. 157−183.
  66. Scaloni A., Simmaco M., Bossa F. D-amino acid analysis. // Methods in molecular biology. 2003.V. 211. P. 169−180.
  67. Amelung W., Zhang X. Determination of amino acid enantiomers in soil. // Soil Biology & Biochemistry. 2001. V. 33. № 4−5. P. 553−562.
  68. Gulyaeva N., Zaslavsky A., Lechner P., Chait A., Zaslavsky B. Relative hydrophobicity of organic compounds measured by partitioning in aqueous two phase systems. // J. Chromatogr. B. 2000. V. 743. P. 187−194.
  69. Joseph H., Davies P. Electrochemical activity of o-phthaldialdehyde mercaptoethanol derivatives of amino acids. //J. Chromatogr. 1983. V. 277. № 1. P. 125−130.
  70. Oates M.D., Jorgenson J.W. Determination of naphthalene-2,3-dicarboxaldehyde-labeled amino acids by open tubular liquid chromatography with electrochemical detection. //Anal. Chem. 1989. V. 61. № 5. P. 432−435.
  71. А.Я., Яшин Я.И Аналитические возможности жидкостного хроматографа «Цвет Яуза» с электрохимическими детекторами. // Журн. Рос.хим.общества им. Д. И. Менделеева. 2002. Т. 66. № 4. С. 109−115.
  72. М.И., Будников Г. К. Электрохимическое детектирование в высокоэффективной жидкостной хроматографии. // Журн. аналит. химии. 2000. Т. 55. № 11. С. 1206.
  73. Fekkes D. State-of-the-art of high-performance liquid chromatographic analysis of amino acids in physiological samples. // J. Chromatogr. B. 1996. V. 682. № 1. P. 3−22.
  74. Teerlink T. Derivatization of posttranslationally modified amino acids. // J. Chromatogr. B. 1994. V. 659. № 1−2. P. 185−207.
  75. Simmaco M., Biase D., Barra D., Bossa F. Automated amino acid analysis using precolumn derivatization with dansylchloride and reversed-phase high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr. 1990. V. 504. № 1. P. 129−138.
  76. Microwave-enhanced chemistry. Fundamentals, sample preparation and applications. / Ed. by H.M. Kingston, S.J.Haswell. Washington: ACS, 1997. 25 p.
  77. В.Г. Технология пивоваренного и безалкогольного производств. М.: Колос, 1998.447 с.
  78. П.М. Технология бродильных производств. М.: Пищевая промышленность, 1980. с. 560.
  79. Ф., Лхотский А. Пивоварение. М: Пищевая промышленность, 1978.623 с.
  80. Г. А. Основные процессы пивоварения. Брожение пивного сусла. // Пиво и напитки. 2001. № 2. С. 20−22.
  81. Г. А. Основные процессы пивоварения. Брожение пивного сусла. // Пиво и напитки. 2001. № 3. С. 14−16.
  82. Г. А. Основные процессы пивоварения. Брожение пивного сусла. // Пиво и напитки. 2001. № 5. С. 14−15.
  83. С.И. Биохимические и физико-химические основы технологии солода и пива. М.: Колос, 1999.186 с.
  84. Т.В. Роль штаммовых характеристик дрожжей в формировании вкуса и аромата пива. // Brauwelt. Мир пива. 1997. № 1. С. 35−37.
  85. Е.Д., Ерошкина Е. В. Значение расы дрожжей в формировании вкуса и аромата пива. // Пиво и напитки. 1999. № 1. С. 24−26.
  86. Методы анализа в пивоварении. Сборник методов Среднеевропейской технической аналитической комиссии по пивоварению (МЕБАК). / Под. ред. Г. Пфеннингера. -Цюрих. 1996. С. 83−87.
  87. Hausch М., Bruckner Н. Occurrence of D-amino acids in fermented foods. // Food Biotechnology. 1990. V. 4. № 1. P. 604−607.
  88. Bruckner H., Hausch M., Wittner R., Godel H. Chiral amino acid analysis in fermented foods using o-phthaldialdehyde and novel N-acyl-L-cysteines. // Fresenius J. Anal. Chem. 1989. V. 333. № 7. P. 775−776.
  89. Bruckner H., Westhauser T. Chromatographic determination of D-amino acids as native constituents of vegetables and fruits. // Chromatographia. 1994. V. 39. № 7−8. P. 419−426.
  90. Liardon R., Hurrell R.F. Amino acid racemization in heated and alkali-treated proteins. // J. Agric. Food Chem. 1983. V. 31. P. 432−437.
  91. Bruckner H., Hausch M. Gas chromatographic detection of D-amino acids as common constituents of fermented foods. // Chromatographia. 1989. V. 28. № 9−10. P. 487−493.
  92. Izquierdo-Pulido M., Marine-Font A., Carmen Vidal-Carou M. Effect of tyrosine on tyramine formation during beer fermentation. // Food Chemistry. 2000. V. 70. № 3. P. 329 332.
  93. Bruckner H., Erbe T. Chromatographic determination of amino acid enantiomers in beers and raw materials used for their manufacture. // J. Chromatogr. A. 2000. V. 881. № 1. P. 8191.
  94. Armstrong D.W., Ekborg-Ott K.H. Evaluation of the concentration and enantiomeric purity of selected three amino acids in fermented malt beverages (beers). // Chirality. 1996. V. 8. P. 49−57.
  95. Фармакопейная статья предприятия 42−90 173 101. Раствор для инфузий «Полиамин». 2001. 11 с.
  96. В.Н., Заксас Н. П. Химический и микроэлементный состав биологически активной добавки «Долголет» и ее модификаций по макро- и микроэлементному составу. // Микроэлементы в медицине. 2001. Т. 2. № 1. С. 52−54.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!