Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Разработка и совершенствование методов трансфекции экзогенной ДНК в эмбриональные клетки кур

Диссертация: Разработка и совершенствование методов трансфекции экзогенной ДНК в эмбриональные клетки кур
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены, обсуждены и одобрены на ежегодных отчетных сессиях отдела «Биотехцентр» ГНУ НИИПЗК им. Афанасьева В. А. (2007 — 2010), а также на VI симпозиуме «Биологические основы терапии онкологических и гематологических заболеваний» (Москва, 2009) — XVIII Международной конференции «СПИД, рак и общественное здоровье» (С.-Петербург, 2009… Читать ещё >

Разработка и совершенствование методов трансфекции экзогенной ДНК в эмбриональные клетки кур (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • 1. Обзор литературы
    • 1. 1. Продуценты белков фармацевтического назначения
    • 1. 2. Генные конструкции
    • 1. 3. Трансгенная птица
      • 1. 3. 1. Получение трансгенных кур с помощью первичных эмбринальных клеток
      • 1. 3. 2. Получение трансгенных кур с помощью долгосрочных линий эмбриональных клеток
      • 1. 3. 3. Трансфекция с помощью сперматозоидов как переносчиков чужеродной ДНК
    • 1. 4. Методы определениея интеграции и экспрессии чужеродной ДНК
  • 2. Материалы и методы
    • 2. 1. Биологический материал
      • 2. 1. 1. Содержание экспериментальной птицы
      • 2. 1. 2. Получение спермы и проведение искусственного осеменения
      • 2. 1. 3. Плазмиды, использованные в работе
    • 2. 2. Проведение трансфекции сперматозоидов
    • 2. 3. Определение интеграции чужеродной ДНК
      • 2. 3. 1. Выделение ДНК из тканей эмбрионов
      • 2. 3. 2. Выделение ДНК из цельной крови
      • 2. 3. 3. Определение интеграции методом ПЦР
    • 2. 4. Методы определения экспрессии встроенного гена
    • 2. 5. Культивирование зародышевых клеток
      • 2. 5. 1. Приготовление ЭТО клеток
      • 2. 5. 2. Приготовление эмбрионального экстракта
      • 2. 5. 3. Выделение и культивирование гонадных примордиальных и бластодермальных зародышевых клеток
    • 2. 6. Гистохимическое и иммуногистохимическое окрашивание эмбриональных клеток
    • 2. 7. Трансфекция первичных примордиальныхклеток и инъекция их в зародышевый серп
      • 2. 7. 1. Стерилизация реципиентов
      • 2. 7. 2. Проведение трансфекции первичных гонадных клеток с помощью липофекции
      • 2. 7. 3. Инъекция трансфецированных гонадных клеток
  • 3. Результаты исследований
    • 3. 1. Разработка и совершенствование методов получения трансгеной птицы с использованием первичных половыхи стволовых клеток кур
      • 3. 1. 1. Получение трансгенных эмбрионов кур с использованием первичной культуры примордиальных клеток
      • 3. 1. 2. Разработка метода получения линии первичных половых клеток
      • 3. 1. 3. Разработка метода получения бластодермальных клеток кур
        • 3. 1. 3. 1. Культивирование бластодермальных клеток с использованием мышиного ЫБ
        • 3. 1. 3. 2. Разработка метода культивирования бластодермальных клеток с эмбриональным экстрактом
    • 3. 2. Разработка и совершенствование методов получения трансгенной ' птицы с использованием сперматозоидов в качестве переносчиков чужеродной ДНК
      • 3. 2. 1. Влияние манипуляционных воздействий и индивидуальных особенностей птицы на эффективность оплодотворения
      • 3. 2. 2. Изучение оптимальных режимов подготовки образцов тканей и условий для проведения ПЦР — анализа
      • 3. 2. 3. Получение трансгенной птицы с геном ГКСФ человека методом опосредованного переноса с помощью сперматозоидов
      • 3. 2. 4. Экспрессия чГКСФ в крови трансгенной птицы
      • 3. 2. 5. Наследование чужеродного гена в поколении Б]
  • 4. Обсуждение результатов исследования
  • 5. Выводы
  • 6. Сведения о практическом использовании результатов исследования
  • 7. Рекомендации по использованию научных выводов

Актуальность работы. В настоящее время биотехнология стремительно занимает передовые рубежи научно-технического прогресса. Этому способствовало два обстоятельства. С одной стороны, бурное развитие современной молекулярной биологии и генетики, благодаря которым можно широко использовать потенциал живых организмов. С другой стороны, большая практическая потребность в новейших технологиях, необходимых для преодоления все возрастающих потребностей в продовольственных товарах и фармацевтических препаратах. Особенно выдающиеся достижения были сделаны после открытия молекулярной структуры генома человека, а также возникновение в результате этого открытия молекулярной генетики, клеточной и генной инженерии.

В относительно небольшой период учеными были разработаны принципы и методики выделения из генома отдельных генов и их искусственного синтеза на базе функционирующих генных конструкций. Немного позже были разработаны методы внедрения чужеродных генов в геном организмов. Впервые подобная технология была продемонстрирована на бактериях Escherichia coli более тридцати лет назад [Cohen G.N., et al., 1973]. С тех пор технология генетической манипуляции организмов достигла поразительного прогресса и на сегодняшний день воспроизводится на бактериях, грибах, простейших, растениях и животных.

Введение

чужеродных генов животным, с использованием рекомби-нантных конструкций, позволяет получить трансгенных особей, у которых введенные гены могут улучшать породные свойства животных, повышать устойчивость их организма к различным инфекционным заболеваниям, или получать животных-продуцентов физиологически активных продуктов, необходимых в медицине, ветеринарии, животноводстве.

Важнейшим приоритетом создания трансгенных организмов остается получение рекомбинантных белков на их основе. Использование белков в качестве лекарственных средств (инсулин, выделенный из поджелудочной ж: лезы свиньи) впервые было апробировано в 20-е годы прошлого столетиззи^ц. Через 60 лет был получен человеческий инсулин с помощью рекомбинантг^— ных бактерий. Этот инсулин оказался качественным и был адоптирован дгг «—-всех групп пациентов, страдающих диабетом.

В конце 20-го столетия в мире широко развернулись исследования неполучению трансгенных животных. В 1987 году впервые была продемонс рирована возможность получения рекомбинантных белков с молоком тран: генных млекопитающих [Peshon, J.J., et al., 1987].

К началу 21-го столетия было получено уже более 100 лекарственны белков с молоком трансгенных животных. А также получен ряд рекомб нантных протеинов из белка яйца трансгенной птицы [Zhu L., van de Lav M.C. et al., 2005].

Онкология остро нуждается в гематопоэтических факторах роста, ких, как гранулоцитарный колониестимулирующий фактор, эритропоэтин: тому подобных, так как доказана^ эффективность использования гранулощ-."^^^ тарного колония стимулирующего фактора (ГКСФ)? человека против разлиг^=^ ных форм лейкопении, вызванной химиои радиотерапией, при лечении кологических заболеваний. ПССФ восстанавливает иммунную систему обеспечивает возможность применения боле высоких доз препаратов химиотерапии, что повышает эффективность лечения онкологических заболеваний. Технологии получения рекомбинантных белков открывают нош более эффективный путь производства белковых фармацевтических препа^ь-^^а.-тов.

Целью исследований являлась разработка и усовершенствование битзо. технологических методов генетической трансформации эмбриональных ьез-зг-."^-ток кур.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следу^&"о щие задачи:

1. Усовершенствовать методы получения трансгенной химерной птицы при использовании первичных эмбриональных половых клеток.

2. Получить долгосрочные культуры эмбриональных примордиальных (ППК) и бластодермальных (ЭСК) клеток кур.

3. Усовершенствовать методы трансфекции геном гранулоцитарного ко-лониестимулирующего фактора (ГКСФ) человека сперматозоидов петуха с помощью липосом.

4. Получить трансгенных кур с встроенным геном ГКСФ человека с использованием сперматозоидов петуха в качестве переносчиков чужеродной ДНК.

5. Изучить характер экспрессии и наследования целевого гена у трансгенной птицы.

Научная новизна работы. Впервые в нашей стране получены трансгенные куры с геном ГКСФ человека, и продемонстрирована экспрессия этого гена. Определены оптимальные режимы трансфекции гена ГКСФ человека в сперматозоиды петуха-(количественный состав сперматозоидов, режимы обt работки семени, подбор производителей). Продемонстрировано наследование введенного гена у потомков.

Показана возможность успешного культивирования первичных половых клеток (ППК) из гонад ранних эмбрионов птицы на митотически неактивном STO (мышиные эмбриональные фибробласты) монослое и разработан протокол длительного культивирования ППК, с целью их дальнейшего использования для трансфекции.

Впервые разработан метод получения трансгенных химерных эмбрионов птицы в результате трансплантации трансфецированных первичных ППК гонад в зародышевый диск реципиента, предварительно стерилизованного ультрафиолетовым облучением.

Практическая значимость работы. Результаты исследований, полученные при изучении оптимальных приемов культивирования in vitro эмбриональных клеток птицы, могут быть использованы при разработке технологии производства рекомбинантных белков.

Разработано наставление «Способ получения генетически модифицированной сельскохозяйственной птицы при использовании сперматозоидов петуха в качестве переносчиков чужеродной ДНК», утвержденное на заседании секции «Селекция, генетика и биотехнология сельскохозяйственных животных РАСХН», протокол № 5, от 15 октября 2010 г. Предложенный способ отличается высокой эффективностью, простотой, дешевизной и быстротой исполнения.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены, обсуждены и одобрены на ежегодных отчетных сессиях отдела «Биотехцентр» ГНУ НИИПЗК им. Афанасьева В. А. (2007 — 2010), а также на VI симпозиуме «Биологические основы терапии онкологических и гематологических заболеваний» (Москва, 2009) — XVIII Международной конференции «СПИД, рак и общественное здоровье» (С.-Петербург, 2009) — IX Всероссийской научно-практической конференции с международным участием- «Отечественные про-тивоопухолевые препараты» (Н.Новгород, 2010) — заседании секции «Селекция, генетика и биотехнология сельскохозяйственных животных РАСХН» (Дубровицы, 2010).

Личный вклад соискателя. Автор принимал непосредственное участие во всех этапах работы, в т. ч. приготовление микроинструментов для выделения и работы с первичными половыми и бластодермальными клетками птицы (изготовление стеклянных пипеток для инъекции трансфецированных клеток в эмбрион), приготовление питательных сред и рабочих раствороввыделение клеток из эмбрионов птиць1, их культивирование, окрашивание и криоконсервацияполучение семени от петухов, ее оценка, проведение трансфекции сперматозоидов и искусственного осеменения курицвыделение ДНК из крови цыплят и тканей эмбрионов, проведение ПЦР диагностикиполучение крови от птицы, приготовление сыворотки и проведение ИФАанализ и обобщение полученных результатов исследований, написание статей, отчетов и докладов.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 печатных работ, в т. ч. 7 — в журналах, рекомендуемых ВАК РФ.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 102 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, сведений о практическом использовании результатов исследований, рекомендаций по использованию научных выводов, списка использованной литературы, приложений. Работа иллюстрирована 12 таблицами, 12 рисунками и содержит 8 страниц приложений.

Список литературы

включает 107 библиографических источника, в т. ч. 91 на иностранном языке.

ВЫВОДОВ.

1. Разработанные методы получения трансгенной птицы рекомендуются для использования в биотехнологии и клеточной инженерии.

2. Для стерилизации реципиентов при проведении инъекции трансфе-цированных ППК в зону зародышевого серпа рекомендуется облу-чение оплодотворенных яиц ультрафиолетом в течение 2,5 часов.

3. При проведении долгосрочного культивирования ППК в качестве фидерного монослоя рекомендуется использовать митотически неактивные клетки линии STO.

4. Для отделения сперматозоидов петуха от семенной жидкости, рекомендуется центрифугирование эякулята при 220g в течение 5 минут, при этом оптимальное число сперматозоидов, используемых для трансфекции чужеродным геном, составляет 500 млн на дозу.

5. Для трансфекции ППК и для получения трансгенной птицы методом опосредованного переноса чужеродой ДНК сперматозоидами, рекомендуется использование препарата на основе липосом — «Lipofectamin® 2000».

Показать весь текст

Список литературы

  1. Л.В. 1993. Основы общей эмбриологии / Белоусов Л. В. // М.: Издательство Московского университета. 1993. 149 С.
  2. , А.Д. Воспроизводство и искусственное осеменение сельскохозяйственной птицы / А. Д. Давтян // ВНИТИП, 1999 — 240 С.
  3. , A.B. Трансгенные животные. Приемы конструирования / Кузнецов A.B. // Биотехнология. 1995. — № 3−4. — С. 3−6.
  4. , Г. Ф. Биометрия / Г. Ф. Лакин // М.: Высшая школа. — 1980. — 293 С.
  5. , Ф.В. Справочник по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных / Ф. В. Ожин, Г. В. Паршутин, И. И. Родин, А.Н. и др. // М.: Россельхозиздат. 1977. — 243 С.
  6. , М.И. Изучение интеграции, наследования и экспрессии:--:рекомбинантных генов с молоком кроликов / М. И. Прокофьев, В. В. Елагин // Сельскохозяйственная Биотехнология. 2002. — № 6. — С. 49−54.
  7. , М.И. Методы получения биоинженерных сельскохозяйственных животных / М. И. Прокофьев, В. И. Захарченко Н.М. Сураева // С-х: биология. 1994. — № 4. — С. 12−25.
  8. , М.И. Создание трансгенных кроликов, продуцирующих: с молоком человеческий гранулоцитарный колониестимулирующий фактор / М. И. Прокофьев, С. И. Городецкий, М. Н. Мезина и др. // Сельскохозяйственная биология. — 2003. — № 6. — С. 49−54.
  9. В.В. Биология эмбрионального развития птиц /Л.: Издательство «Наука» 1968. — 145 С.
  10. Г. А. Техника взятия крови у птиц / Г. А. Рыбакова // Птицеводство. 1960. — № 8. — С. 42−43.
  11. , Н.М. Выделение и характеристика первичных половых: клеток из гонад 6−9- дневных эмбрионов кур с целью совершенствования: метода получения трансгенных птиц / Н. М: Сураева, А. Г. Толмазова // ДЦок-лады РАСХН. 2004. — № 2 — С. 29−32.
  12. , Н.М. Изучение эффективности различных способов фекции репортерного гена в эмбриональные клетки кур / Н.М. Сур^ева А. Ю. Барышников, В. И. Фисинин и др. // Известия РАН. — 2008. — №. 1. -—. q 18−23.
  13. , Н.М. Получение, характеристика и долгосрочна культивирование примордиальных и бластодермальных клеток: Кур /Н.М.Сураева, Е. А. Воротеляк, М. И. Прокофьев и др. //Доклады РАН. — 2008- Т. 423. № 3. — С. 408 — 410.
  14. , Н.М., Самойлов А.В: Получение фармацевтических белков с помощью трансгенной птицы //Вестник РОНЦ им. Блохина Н. Н. PAjyiH 2009. Т. 20. — № 4. — С. 19 — 25.
  15. , Н.М. Трансфекция экзогенной ДНК эмбриональных Клеток птицы / Н. М. Сураева. В. В. Мартиросян, А. З. Кесян и др. //Российски^, биотерапевтический журнал. 2010. — № 2. — Т. 9. — С. 59.
  16. , Н.М. Получение трансгенных кур и геном гранулоцлТарНО го колоние-стимулирующего фактора, человека / Н. М. Сураева, В.В. 1У1арти-росян, А. З. Кесян и др. //Российский биотерапевтический журнал. — 20ю jsjo 2.-Т. 9.-С. 60.
  17. Arnosti, D.N. Analysis and function of transcriptional regulatory elements: Insights from Drosophila / D.N. Arnosti // Annu. Rev. Ent. — 2003 — Vol. 48.-P. 579−602.
  18. Arnosti, D.N. Design and function of transcriptional switches in Drosophila / D.N. Arnosti // Insect Biochem. Mol. Biol. 2002. — Vol. 32(Ю) p 1257−1273.
  19. Arnosti, D.N. The eve stripe 2 enhancer employs multiple modes of transcriptional synergy / D.N. Arnosti, S. Barolo, M. Levine, et al. // Development- 1996. Vol. 122. — P. 205−214.
  20. Bon, Chul Koo. Production of germline transgenic chickens expressing enhanced green fluorescent protein using a MoMLV-based retrovirus vector / Bon Chul Koo, Mo Sun Kwon, Bok Ryul Choi // The FASEB Journal. 2006. — Vol.20.-P. 2251−2260.
  21. Bosselman, R.A. Germline transmission of exogenous genes in the chicken / R.A. Bosselman, R.Y. Hsu, T. Boggs, et al. // Science. 1989, Vol. 243. -P. 533−535.
  22. Brackett, B.G. Uptake of heterologous genom by mammalian spermatozoa and its transfer to ova through fertilization / B.G. Brackett, W. Baranska, W. Sawicki, et al.// proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1971. — Vol. 68. — P. 353−355.
  23. Chang, I.K. Simple method for isolation of primordial germ cells from chick embryos / I.K. Chang, A. Tajima- Y. Yasuda, et al. //Cell Biol. Int. Rep. -1992.- Vol. 16.-P. 853−857.
  24. Chang, K. Effective generation of transgenic pigs and mice by linker based sperm-mediated gene transfer / K. Chang, J. Qian, M.S. Jiang, et al. //BMC Biotechnol. -2002. Vol. 2. — P. 5−10.
  25. , T.T. «Gene-spliced» fish experiments / T.T. Chen, D.A. Powers, RA. Dunham // Science. 1991% - Vol. 8. — P. 779.
  26. Clark, A.J. Gene targeting in livestock: a preview / A.J. Clark, S. Burl, C. Denning, et al. // Transgenic Research. 2000. — Vol. 9. — P. 263−275.
  27. Cohen, G.N. Remplacement total de la methionine par la selenomethionine dans les proteines d’E. coli. / G.N. Cohen, and D.B. Cowie // C. R. Acad. Sci. 1973. — Vol. 244. — P. 680−683.
  28. Current Protocols in molecular biology / Ed. Ausdel F. M., Brent R. // Green Publishing Associates and Wiley-Interscience, 1987.
  29. Dyck, M.K. Making recombinant proteins in animals—different systems, different applications / M.K. Dyck, D. Lacroix, F. Porhier, et al. // Trends Biotechnol. -2003-Vol. 21.-P. 394−399.
  30. Ebara, F. Reproductive characteristics of transgenic (TG) chickens carrying an exogenous gene / F. Ebara and N. Fujihara // Asian J. Androl. 1999. -Vol. l.-P. 139−144.
  31. Eguma, K. In Vivo transfer of foreigen DNA into primordial germ cells (PGCs) of chicken embryos / K. Eguma, T. Soh, M. Hattori, et al. // Transgenic Research 1999. — Vol. 7. — P. 520−523.
  32. Evans, M. G. Establishment in culture of pluripotential cells from mouse embryos / M. G. Evans, M. H. Kaufman // Nature. 1981. — Vol. 292. — P. 154 156.
  33. Eyal-Giladi, H. From cleavage to primitive steak formation: a complementary normal table and a new look at the first stages of the development of the chick / H. Eyal-Giladi and S. Kochav // I. General morphology. Dev. Biol. -1976.-Vol. 49.-P. 321−337.
  34. Fraser, R.A. Efficient incorporation of transfected blastodermal cells into chimeric chiken embryos / R.A. Fraser, R.S. Carsience, M.F. Clark, et al. // Int. J. Dev. Biol. 1993. — Vol. 37. — P. 381.
  35. Frumkin, A. A chicken caudal homologue, CHox-cad, is expressed in the epiblast with posterior localization and in the early endodermal lineage / A. Frumkin, Z. Rangini, A. Ben-Yehuda, et al. // Development. 1991. — Vol. 112(1). -P. 207−219.
  36. Fuijmoto, T. The origin, migration and morphology of the primordial germ cells in the chick embryo / T. Fuijmoto, A. Ukeshima and R. Kiyofaji // Anat. Rec. 1976. — Vol. 185 — P. 139.
  37. Gagne, M. The use of electroporated bovine spermatozoa to transfer fo DNA into oocytes / M. Gagne, F. Pothier, M.A. // Sirard Methods Mol. Biol. -1995.-Vol. 48.-P. 161−166.
  38. Gagne, M.B. Electroporation of bovine spermatozoa to carry foreign DNA in oocytes / M.B. Gagne, F. Pothier, M.A. Sirard // Mol Reprod Dev. -1991.-Vol. 29.-P. 6−15.
  39. Gandolfi, F. Sperm-mediated transgenesis / F. Gandolfi // Theriogenol. -1989-Vol.53.-P. 127−137.
  40. Gandolfi, F. Stimulation of early embryonic development in the sheep by co-culture with oviduct cells / F. Gandolfi and R.M. Moor // J.Reprod. Fertil. -2000.-Vol. 81.-P. 23−28.
  41. Gordon, J.W. Genetic transformation of mouse embryos by microinjections of purified DNA / J.W. Gordon, G.A. Scangos, D.J. Plotkin, et al. // Proc. Natl. Acad. USA. 1980. — Vol. 77. — P. 7380−7384.
  42. Han, J.Y. Production of germline chimeras by transfer of chicken gonadal primordial germ cells maintained in vitro for an extended period / J.Y. Han, T.S. Park, Y.H. Hong, et al. // Theriogenology. 2002. — Vol. 58. — P. 15 311 539.
  43. Han, J.Y. Gene transfer by manipulation of primordial germ cells (PGCs)iin the chicken / J.Y. Han, R.N. Shoffner and K.S. Guise // As.-Aus. J. Anim. Sci. -1994. Vol. 7. — P. 427−434.
  44. Harel-Markowitz, E. Use of Sperm Plasmid DNA Lipofection Combined with REMI (Restriction Enzyme-Mediated Insertion) for Production of TransgenicJi- Chickens Expressing eGFP (Enhanced* Green Fluorescent Protein) or Human
  45. Follicle-Stimulating Hormone/ E. Harel-Markowitz, M. Gurevich, L.S. Shore, et al. // Biology of Reproduction. 2009. — Vol. 80. — P. 1046−1052.
  46. Hong, Y.H. Improved transfection efficiency^ of chicken gonadal primordial germ cells for the production of transgenic poultry / Y.H.Hong, Y.K. Moon, D.K. Jeong, et al. // Transgenic Research. 1998. — Vol. 7. — P. 247−252.
  47. Houdebine, L.M. The methods to generate transgenic animals and to control transgene expression / L.M. Houdebine // J. Biotechnol. — 2002—Vol. 98 -P. 145−160.
  48. Ivarie, R. Avian transgenesis: progress toward the promise / R. Ivarie // Trends in Biotechnol. 2003. — Vol. 21. — P. 14−19.
  49. Jefferies, H. B. Elongation factor-1 alpha mRNA is selectively translatedfol-lowing mitogenic stimulation / H. B. Jefferies, and G. Thomas // J. Biol. Chem. 1994. — Vol. 269. — P. 4367−4372.
  50. Jonak, J. Sperm-mediated preparation of transgenic Xenopus laevis and transgenic DNA to the next generation / J. Jonak // Mol. Repr. Dev. — 2000. — Vol. 56.-P. 298−300.
  51. Khoo, Y.W. Sperm-mediated gene transfer studies on zebrafish in Singapore / Y.W. Khoo // Mol. Reprod. Dev. 2000. — Vol. 75. — P. 278 — 280.
  52. Lavitrano, M. Sperm cells as vectors for introducing foreign DNA into eggs Genetic transformation of mice / M. Lavitrano, A. Camaioni, V.M. Fazio, et al. // Cell. 1989. — Vol. 57. — P. 717−723.
  53. Lavitrano, M. Sperm-mediated gene transfer: Production of pigs transgenic for a human regulator of complement activation / M. Lavitrano, M. Forni, V. Varzi, et-al. // Transplant. Proc. 1997. — Vol. 29. — P. 3508 — 3509.
  54. Lis, J T. New heat shock puffs and p-galactosidase activity resulting form transformation of Drosophila with, an hsp 70-lacZ hybrid gene / J T. Lis, J. A. Simon, and C. A. Sutton // Cell. 1983. — Vol. 35. — P. 40310.
  55. Ma S Jevnikar, A.M. Transgenic rise for allergy immunotherapy / A.M. Ma S. Jevnikar // Proc. Natl Acad Sci. 2003. — Vol. 23. — P. 559−65.
  56. Maione, B. Sperm-mediated' gene transfer in mice / B. Maione, M. Lavitrano, C. Spadafora, et al. // Mol. Reprod. Dev. 1998. — Vol. 50. — P. 406 409.
  57. Markaki, M. Stable expression of human Growth Hormone over 50 generation in transgenic insect larvae / M. Markaki, D. Drabek, I. Livadaras, et al. // Transgenic Res. 2007.- Vol. 16. — P. 99 — 107.
  58. Martin, G. R. Differentiation of clonal lines of teratocarcinoma cells: formation of embryoid bodies in vitro / G. R. Martin, M. J. Evans // Proc Natl Acad Sci USA. 1975. V. 72. № 4. P. 1441−1445.
  59. Mather-Love, C. Comparison of three nonviral transfection methods for foreign gene expressions in early chicken embryo in ovo / C. Mather-Love, B.S.
  60. Heyer, R. Bradshaw, et al. // Spring Harbor, New York. 1972. — P. 352−355.
  61. Mozdziak, P.E. Development of transgenic chickens expressing bacterial P-galactosidase / P.E. Mozdziak, S. Borwornpinyo, D.W. McCoy, et al. // Developmental Dynamics. — 2003 — Vol. 226. — P. 439 — 445.
  62. Muller, F. Introducing foreign genes into fish eggs with electroporated sperm as a carrier / F. Muller, Z. Ivies, F. Erdelyi, et al. // Mol Mar Biol Biotechnol. 1992. — Vol. Aug-Oct- 1(4−5). — P. 276−81.
  63. Naito, M. Embryonic expression of beta-actin-lacz domestic chicken / M. Naito, K. Agata, K. Otsuka, et al. // Theriogenology. — 1993. — Vol. 40. — P. 509 -519.
  64. Naito, M. Introduction of exogenous DNA into somatic and germ cells of chickens by microinjection into the germinal disc of fertilized ova / M. Naito, E. Sasaki, M. Ohtaki, et al.// Mob Reprod: Dev. 1994. — Vol. 37. — P. 167−171.
  65. Naito, M. Production of germline chimeric chickens, with high transmission rate of donor-derived gametes, produced by transfer of primordial germ cells / M. Naito, A. Tajima and T. Kuwana // Mol. Reprod. Dev. 1994. -Vol. 39.-P. 153−161.
  66. Naito, M. Efficient transfection of chicken blastoderms in vivo by lipofection and electroporation using green fluorescent protein- gene as a marker / M. Naito, A. Sano, T. Tagami, et al. // Anim. Sci. J. 2000. — Vol. 71(4). — P. 377 -385.
  67. Naito, M. Effect of soft X-ray irradiation on the migratory ability of primordial germ cells in chickens / M. Naito, T. Harumi, T. Minematsu, et al. // British Poultry Science. 2007. — Vol. 48. — P. 121−126.
  68. Nakanishi, A. Gene transfer in the chicken by sperm-mediated methods /
  69. A. Nakanishi and A. Iritani // Mol. Repr. Dev. 1993. — Vol. 36. — P. 258 — 261.
  70. Nieukoop, P.D. Primordial germ cells in the chordates: embryogenesis and phylogenesis / P.D. Nieukoop and L.A. Sutasurya // Cambridge University Press. 1979.
  71. Ono, T. Transfer of male or female primordial germ cells of quail into chicks embryonic gonads / T. Ono, R. Yokoi and H. Aoyama // Exp. Anim. -1996. Vol. 45. — P. 347 — 352.
  72. Pain, B. Chicken embryonic stem cells and transgenic strategies / B. Pain, P. Chenevier, J. Samarut // Cells Tissues Organs. 1999. — Vol. 165(3−4) — P. 212−219.
  73. Paldi, A. cisEffect of lacZ sequences in transgenic mice / A. Paldi, L. Deltour and J. Jami // Transgenic Res. 1993. — Vol. 2. — P. 325−329.
  74. Palmiter, R.D. Heterologous introns can enchance expression of transgenes in mice / R.D. Palmiter, E.P. Sandgren, M.R. Avarbock, et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1991. — Vol. 88. — P. 478−482.
  75. Park, T.S. Derivation and characterization of pluripotent embryonic germ cells in chicken / T.S. Park and J.Y. Han // Molecular Reproduction and development. 2000. — Vol. 56. — P. 475−482.
  76. Peshon, J J., Spermatid-specific expression of protamine 1 in transgenic mice / J.J. Peshon, R.R. Behringer // Proc. Acad. Sci. 1987. — USA. — Vol. 84. -P. 5316−5319.
  77. Peltola, H. The elimination of indigenous measles, mumps and rubella from Finland by a 12-year, two-dose vaccination program / H. Peltola, O.P. Heinonen, M. Valle, et al. //New Engl J Med. 1994. — Vol. 331. -P. 1397−402.
  78. Petitte, J.N. Producing of somatic and germline chimeras in the chicken by transfer of early blastodermal cells / J.N. Petitte, M.E. Clark, G. Liu, et al. // Development. 1990. — Vol. 12. — P. 185−189.
  79. Petitte, J.N. Accessing the genome of the chicken using germline chimeras. In Manipulation of the Avian Genome / J.N. Petitte, C.L. Brazolot, M.E.
  80. Clark, et al. // CRC Press Inc. 1993. — P. 81−102.
  81. Pettite, J.N. Growth factors during early event in avian embryo development / J.N. Petitte // J.Poult. Sci. 2002. — Vol.39, № 4. — P. 205−228.
  82. Petitte, J.N. Avian pluripotent stem cells / J.N. Petitte, G. Liu, Z. Yang // Mechanisms of Development. 2004. — Vol. 121. — P. 1159−1168.
  83. Prasher, D.C. Primary structure of the Aequorea victoria green-fluorescent protein / D.C. Prasher, V.C. Eckenrode, W.W. Ward // Gene. 1992. -Vol. 111.-P.229−233.
  84. Prasher, D.C. Nucleoside phosphotransferase from barley. Characterization and evidence for ping pong kinetics involving phosphoryl enzyme / D.C. Prasher, M.C. Carr, D.H. Ives, et al. // J. Biol. Chem. 1982. — Vol. 257(9).-P. 4931−4939.
  85. Resnick, J: L. Long-term proliferation of mouse primordial germ cells in culture / J.L. Resnick, L.S. Bixler, L. Cheng, et al. // Nature. 1992. — Vol. 292. -P. 550−551.
  86. Rieth, A. Electroporation of bovine spermatozoa to carry DNA containing highly repetitive sequences into oocytes and detection of homologous recombination events / A. Rieth, F. Pothier, M.A. Sirard.// Mol. Reprod. Dev. -2000. Vol. 57(4). — P. 338−345.
  87. Rottmann, O.J. Liposome mediated gene transfer via spermatozoa into avian egg cells / O.J. Rottmann, R. Antes, P. Hoefer, et al.// J. Anim. Breed. Gen. -1992.-Vol. 109.-P. 64−70.
  88. Royer, C. Biosynthesis and cocoonexport of recombinant globular protein in transgenic silkworms / C. Royer, A. Jalabert, M. Da Rocha, et al. // Transgenic Res. 2005. — Vol. 14. — P. 463 — 472.
  89. Salter, D.W. Gene insertion into the chick germline by retroviruses / D.W. Salter, EJ. Smith, S.H. Hughes, et al. // Polt. Sei. 1986. — Vol. 65. — P. 1445−1458.
  90. Shemesh, M. Gene integration into bovine sperm genome and its expression in transgenic offspring / M. Shemesh, M. Gurevich, E. Harel-Markowitz, et al. // Mol. Reprod. Dev. 2000. — Vol. 56. — P. 306−308.
  91. Shyu, A.B. The double lives of shuttling mRNA binding proteins / A.B. Shyu and M.F. Wilkinson // Cell. 2000. — Vol. 102. — P. 135−138.
  92. Simkiss, K. Transfer of primordial germ cell DNA between embryos / K. Simkiss, K. Rowlett, N. Bumstead, et al.// Protoplasma. 1989. — Vol. 151. — P. 164−166.
  93. Simon, G. Lillico. Transgenic chickens as bioreactors for protein-based drugs / Simon G. Lillico., Michael J. McGrew., Adrian Sherman, et al.// Drug discovery today. 2005. — Vol.10. — P. 191 — 196.
  94. Tang, X. Effects of dehydroepiandrosterone (DHEA) on hepatic lipid metabolism parameters and lipogenic gene mRNA expression in broiler chickens / X. Tang, H. Ma, S. Zou, W. Chen. // Lipids. 2007. — Vol. 42. — P. 1025−1033.
  95. Tajima, A. Study on the concentration of circulating primordial germ cells (cPGS) in early chick embryos / A. Tajima, H. Hayashi, A. Kamizumi, et al. // J. Exp. Zool. 1999. — Vol. 280. — P. 265−267.
  96. Tajima, A. Producing of germline chimeras by transferof primordial germ cells in the domestic chicken (Gallus domesticus) / A. Tajima, M. Naito, Y. Yasuda, et al. // Theriogenology. 1993. — Vol.40(3). — P. 509−19.
  97. Vick, L.E. Transgenic birds from transformed primordial germ cells / L.E. Vick, L. Ying and K. Simkiss // Proc. R. Soc. Lond. S.B. 1993. — Vol. 251. -P. 179−182.
  98. Wang, Y. Progress toward the culture and transformation of chicken blastodermal cells / Y. Wang, C.F. Brooks, S.A. Jones, et al. // Stem Cells. — 2006. -Vol. 24.-P. 1638−1645.
  99. West, A. G Insulators: many functions, many mechanisms / A.G. West, M. Gaszner, G. Felsenfeld // Genes Dev. 2002: — Vol. 16. — P. 271−288.
  100. Wu, Z. Transient transgene* transmission to piglets by intrauterine insemination of spermatozoa incubated with DNA fragments / Z. Wu, Z. Li, J. Yang // Mol Reprod Dev. 2008. — Vol: 75(1). — P. 26−32.
  101. Yasuda, Y. A method to obtain avian germline chimeras using isolated primordial germ cells / Y. Yasuda- A. Tajima, T. Fujimoto, et al. // J. Repr. Fert. — 1992. Vol. 96. — P. 521−528.
  102. Yonezawa, T. Detection of transgene in progeny at different developmental stages following testis-mediated gene transfer / T. Yonezawa, Y. Furuhata, K. Hirabayashi, et al. // Mol Reprod Dev. 2001. — Vol. 60(2). — P. 196 201.
  103. Young, W.S. In situ hybridization and Northen analyses of the expression of protein kinase C genes oligodeoxyribonucleotide probes / W.S. Young // Focus. -1991.-Vol. 13.-P. 46−49.
  104. Zhan, Y. Predominant transgene expression in exocrine pancreas directedby the CMV promoter / Y. Zhan, J.L. Brady, A. M. Johnston, et al. II DNA Cell. Biol. 2000. — Vol. 19. — P. 639−645.
  105. Zhu, L. Production of monoclonal antibody in eggs of chimeric chicken / L. Zhu, van de M.C. Lavoir, P. Leighton, et al.// Nat. Biotechnol. — 2005. — Vol. 23.-P. 1159−1169.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!