Влияние экстракта маакии амурской на реологические свойства крови, гемостаз и функциональную активность эндотелия при экспериментальной овариоэктомии

Актуальность проблемы. По статистике средняя продолжительность жизни женщин неуклонно растет и более 1/3 своей жизни женщина находится в периоде перии постменопаузы, т. е. в условиях возрастных изменений гомеоста-за, сопровождающихся глубокой перестройкой гормонального профиля и психофизиологических реакций на эти изменения. По прогнозам ВОЗ к 2015 г. 46% женщин окажется в возрасте старше 45 лет. Проблема сохранения здоровья женщин 45−65 лет актуальна и для России в XXI веке, где данная возрастная группа составляет почти одну пятую часть населения (29,6 млн) [2, 94]. В связи с этим более пристального внимания заслуживает вопрос адекватного лечения климактерических проблем, возникающих более чем у 70% женщин в указанный период жизни [38, 91, 98].

У женщин на фоне эстрогенного дефицита, вызванного естественной или хирургической менопаузой, помимо вегетативных и психоэмоциональных симптомов, снижающих качество жизни, отмечен значительный рост сердечнососудистых заболеваний [38, 47, 59, 72, 93, 94, 98], важным звеном патогенеза которых являются нарушения реологических свойств крови, гемостатический дисбаланс, эндотелиальная дисфункция [1, 66, 27, 192, 212, 222, 233]. Гормональная заместительная терапия уменьшает проявления климактерического синдрома, но, в силу наличия серьезных побочных эффектов, не рекомендуется для длительного применения с целью уменьшения риска возникновения сердечно-сосудистых заболеваний [31, 32, 42, 46, 154, 192, 213, 240].

Естественная и послеоперационная эстрогенная недостаточность протекают на фоне ярко выраженного оксидантного стресса [46, 119]. В этих же клинических ситуациях наблюдаются гемореологические расстройства, приводящие к формированию синдрома повышенной вязкости крови, причем в процесс самым непосредственным образом вовлекаются эритроциты — возрастает их агрегация и снижается деформируемость [7, 66, 233]. Следовательно, существуют основания считать активацию перекисного окисления липидов фактором, участвующим в повреждении клеточного звена реологии крови. Сведения о возможности предотвращать негативное влияние липидной пероксидации на реологические функции эритроцитов с помощью антиоксидантов [162, 199] побудили нас к поиску перспективных гемореологических препаратов при гипоэст-рогенемии среди природных антиоксидантов — экстрактов изофлавоноидсодер-жащих растений, поскольку изофлавоноиды относятся к фитоэстрогенам [5, 69, 100, 101, 125,216].

Фитоэстрогены, являясь избирательными модуляторами эстрогеновых рецепторов [38, 52, 69, 101], могут быть реальной альтернативой ЗГТ в условиях эстрогенной недостаточности. Несмотря на высокую потребность, фитоэстро-генные препараты на фармацевтическом рынке представлены весьма скромно. Разработаны фитоэстрогенные препараты из экстракта растения Cimicifuga га-cemosa [5, 90, 128]. Отечественных лекарственных препаратов, обладающих фитоэстрогенной активностью нет. Объектом исследования выбран полифе-нольный комплекс из древесины эндемичного приморского растения семейства бобовые маакии амурской {Maackia amurensis Rupr. et. Maxim.), который был зарегистрирован в 2004 г. в Российской Федерации в качестве фармакологической субстанции (Р № 3 309/01) для изготовления лекарственного препарата «Максар®таблетки, покрытые оболочкой, 60 мг» (Р № 3 294/01). Максар разрешен для клинического применения в качестве гепатопротектора. Высокое содержание изофлавоноидов в экстракте древесины маакии амурской явилось основанием для изучения его эффектов в условиях гипоэстрогенемии.

Цель исследования. Изучить влияние экстракта маакии амурской в сравнении с действием этинилэстрадиола на реологические свойства крови, гемостаз и функциональную активность эндотелия в условиях экспериментальной оварио-эктомии.

Задачи исследования.

1. На модели гипервязкости крови in vitro выявить наиболее эффективный экстракт маакии амурской по его влиянию на вязкость крови и агрегацию тромбоцитов.

2. Оценить влияние экстракта маакии амурской в сравнении с действием этинилэстрадиола на реологические свойства крови и эффективность доставки кислорода тканям у крыс при экспериментальной овариоэктомии.

3. Исследовать влияние экстракта маакии амурской в сравнении с действием этинилэстрадиола на перекисное окисление липидов и фосфолипидный состав мембран эритроцитов у крыс после овариоэктомии.

4. Изучить влияние экстракта маакии амурской на эндотелийзависимые эффекты у овариоэктомированных крыс в сравнении с терапией этинилэстра-диолом.

5. Оценить влияние экстракта маакии амурской и этинилэстрадиола на гемостаз крыс с экспериментальной гипоэстрогенемией.

Научная новизна. В условиях экспериментальной гипоэстрогенемии впервые выявлена способность экстракта маакии амурской ослаблять выраженность синдрома повышенной вязкости крови и улучшать эффективность доставки кислорода тканям. Получены приоритетные данные о способности экстракта маакии амурской улучшать реологические свойства эритроцитов и уменьшать агрегацию тромбоцитов. Впервые показано, что у крыс после овариоэктомии экстракт маакии амурской эффективнее, чем этинилэстрадиол снижает процессы липидной пероксидации в мембранах эритроцитов и предупреждает их окислительную модификацию. Новыми являются данные о наличии у экстракта маакии амурской эндотелийпротективной активности, выявленной в условиях экспериментальной овариоэктомии. Установлено, что экстракт маакии амурской, в отличие от этинилэстрадиола, уменьшает активность свертывающей системы крови при экспериментальной гипоэстрогенемии.

Научно-практическая значимость. В результате проведенного исследования получены новые данные фундаментального характера о механизмах формирования синдрома повышенной вязкости крови при овариоэктомии и способах их коррекции с помощью эстрогенов и фитоэстрогенов — изофлавоноидов экстракта маакии амурской. Установлены принципиальные различия в действии гормональной терапии и фитоэстрогенов на реологические свойства крови, гемостаз и эндотелий сосудов в условиях экспериментальной гипоэстрогене-мии. Материалы доклинических исследований специфической активности экстракта маакии амурской вошли в комплект документов для представления в Министерство здравоохранения и социального развития Российской Федерации с целью получения разрешения на клинические исследования препарата по новому показанию в качестве противоклимактерического средства.

Публикации: По теме диссертации опубликовано 12 работ, из них 3 — в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК.

Объем и структура работы: Диссертация изложена на 132 страницах машинописного текста. Состоит из введения, четырех глав, выводов и списка литературы. Библиографический указатель включает 244 источника, из них 111 отечественных и 133 зарубежных. Иллюстративный материал представлен 8 рисунками и 18 таблицами.

105 ВЫВОДЫ.

1. На модели гипервязкости крови in vitro наибольшую гемореологическую активность проявляет суммарный экстракт маакии амурской, содержащий в своем составе изофлавоноиды и стильбены.

2. Экстракт маакии амурской при экспериментальной овариоэктомии уменьшает выраженность синдрома повышенной вязкости крови преимущественно за счет влияния на клеточные параметры реологии крови, увеличивает эффективность доставки кислорода тканям. Этинилэстрадиол в этих условиях уменьшает повышенную вязкость крови как за счет улучшения реологических свойств эритроцитов, так и в результате снижения гематокрита, но при этом не повышает индекс эффективности доставки кислорода тканям.

3. Экстракт маакии амурской в условиях экспериментальной гипоэстрогенемии более эффективно, чем этинилэстрадиол, ограничивает активацию процессов перекисного окисления липидов в мембранах эритроцитов. Экстракт маакии амурской и этинилэстрадиол уменьшают уровень лизофосфолипидов, восстанавливают нормальное соотношение липидов и белка в эритроцитарных мембранах.

4. Экстракт маакии амурской обладает эндотелийпротективной активностью у овариоэктомированных крыс, при этом не уступает этинилэстрадиолу в способности восстанавливать эндотелийзависимую вазодилятацию и потенцировать антиагрегантную активность сосудистой стенки.

5. Экстракт маакии амурской, в отличие от этинилэстрадиола, обладает анти-тромбоцитарным действием, уменьшает коагуляционные свойства крови и препятствует формированию тромба в сосуде при его инициации раствором хлорида железа у крыс после овариоэктомии.