Генотипоскопический метод идентификации

Первые сообщения о возможности использования анализа молекулы ДНК для идентификации человека сделал в середине 1980;х гг. ученый из Великобритании А. Дж. Джеффрейс (A. J. Jeffreys). Как известно, молекула ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты) — носитель наследственной информации.

Возможность такого исследования основывается на индивидуальности строения некоторых участков молекулы ДНК, их назвали гипервариабельными (ГВ) участками. Строение этих отрезков молекул не только индивидуально у каждого человека, но и строго повторяется во всех органах и тканях тела одного человека.

Теоретически метод генотипоскопической идентификации является самым универсальным, так как с его помощью, в принципе, можно идентифицировать самые различные объекты биологического происхождения, если только в них сохранилось небольшое количество молекул ДНК или их частей.

Используя высокоэффективные технические средства, можно получать результат с вероятностью ошибки меньшей, чем один раз на несколько миллиардов случаев, т. е. выделять одного-единственного человека из всего множества живущих на Земле.

Универсальность и высокая индивидуальность результатов делают этот метод наиболее перспективным среди всех остальных методов идентификации человека в случаях непосредственного исследования объектов биологического происхождения.

Существует несколько вариантов технологии проведения исследований молекулы ДНК в целях идентификации человека. Один из вариантов основан на анализе полиморфизма длин рестрикционных фрагментов ДНК (фрагментов, получаемых путем рассечения молекулы). Сокращенно его называют ПДРФ-анализ (используют в основном для исследования жидкой крови).

Технология такого исследования в общих чертах состоит из следующих этапов:

• 1) выделение молекул ДНК из исследуемого материала (молекулы ДНК находятся в ядрах клеток в структуре ДНК);
• 2) фрагментирование (разделение на фрагменты) молекул ДНК с помощью ферментов — рестриктаз (эндонуклеаз). Существует множество видов рестриктаз, которые разрезают молекулу ДНК в местах, присущих только им, т. е. каждый вид рестриктазы только в том месте, в котором ему положено его химической природой.

После такого воздействия на молекулу ДНК образуется множество фрагментов, которые отличаются друг от друга составом, длиной и, соответственно, молекулярным весом;

• 3) смесь фрагментов ДНК разделяют методом электрофореза в геле. Метод основывается на том, что под воздействием электрического тока фрагменты ДНК передвигаются в специальной среде — геле. Чем они легче и мельче, тем дальше они уходят от стартовой позиции;
• 4) из всего набора фрагментов, расположенных на разных участках электрофоретической пластинки, с помощью специальных зондов выявляют полиморфные фрагменты. Зонды при этом обычно маркируют радиоактивными изотопами или нерадиоактивными метками. Это позволяет получить на специальной мембране видимый набор линий разной ширины, соответствующих числу и виду гипервариабельных (ГВ) фрагментов (своим видом полученная картинка напоминает товарный штрих-код). Расположение отдельных линий варьирует у разных людей, а их совокупность индивидуальна.

Целесообразно проводить параллельное исследование известного по происхождению объекта (от А) и неизвестного (от X). Полученные «картинки» распределения ГВ-фрагментов сравнивают между собой с использованием методов математического анализа. Рассчитывают возможность случайного совпадения изображений. При очень маленькой вероятности случайного совпадения ею пренебрегают и считают, что сравниваемые объекты идентичны, а следовательно, установлена личность человека, от которого произошел ранее неизвестный объект X.

Метод позволяет сравнивать между собой результаты исследования неизменных молекул ДНК из ядер клеток крови, спермы и любых других тканей тела человека. «Картинка» расположения ГВ-фрагменгов не изменяется на протяжении всей жизни человека, она индивидуальна. Полное сходство «ДНК-узоров» наблюдается только у однояйцевых близнецов. У родственников выявляется сходство генотипических узоров, что позволяет устанавливать родство.

Для работы со сложными объектами (следы, изымаемые с мест происшествия), в которых ДНК фрагментирована или (и) повреждена, разработан и активно используется иной метод исследования индивидуальных особенностей молекул ДНК — полимерная цепная реакция (ПЦР). Суть метода в следующем:

1) на первом этапе (естественно, после выделения ДНК из материала) проводится денатурация молекулы ДНК, т.с.

двойная спираль ДНК разделяется на две изолированные цепочки;

• 2) на втором этапе проводится так называемый «отжиг праймеров». Праймеры — реагенты, способные управлять синтезом участков молекулы ДНК, добавляются к молекулам ДНК, после чего они находят «родственные» себе участки цепочки и прикрепляются к ним;
• 3) на третьем этапе происходит синтез участков ДНК, к которым присоединились родственные праймеры. Материал для синтеза участков ДНК отбирается из смеси нуклеотидов, добавленной к предыдущим реагентам.

Таким образом, в результате последовательного взаимодействия реагентов после первого цикла имеющийся материал (участки молекулы ДНК) удваивается. Теоретически после 30-го цикла синтеза (амплификации) в наличии оказывается около 10 млрд копий исходного материала.

С внедрением в практику этой методики исследования ДНК было устранено одно из наиболее существенных препятствий на пути практического медико-криминалистического использования метода. Препятствие это состояло в том, что методом ПДРФ-анализа практически невозможно было решать идентификационные задачи на ограниченном и дефектном молекулярном материале. А именно такой материал имеет место в практических медико-криминалистичесих исследованиях.

Использование метода генотипоскопии может позволить решить многие проблемы, возникающие при раскрытии и расследовании преступлений. По данным лаборатории генотипоскопии Экспертно-криминалистического центра МВД России, сего помощью возможно следующее:

• 1) устанавливать происхождение крови, спермы и некоторых других объектов от конкретного лица;
• 2) объединять преступления, если их совершило одно и то же лицо и оставило следы биологического происхождения, например сперму;
• 3) определять, не наступила ли беременность от лица, подозреваемого в совершении изнасилования;
• 4) устанавливать конкретных участников событий в случаях обнаружения смешанных следов биологического происхождения (т.е. эксперт при необходимости может сказать, что данное пятно крови образовано кровью нескольких лиц и указать, каких конкретно);
• 5) определять, относятся ли части трупа, обнаруженные отчлененными, к одному или разным телам;
• 6) устанавливать, могут ли конкретные мужчина и женщина быть родителями ребенка.

В принципе, с использованием генотипоскопического метода возможно решение и других, сходных с указанными вопросов, возникающих при раскрытии и расследовании преступлений.

В перспективе имеется возможность создания байка геномной информации по типу дактилоскопического учета, использование которого позволит быстро и эффективно устанавливать лиц, оставивших следы биологического происхождения на месте происшествия.

По результатам исследования генотипа возможны следующие варианты выводов эксперта.

• 1. Происхождение исследованного объекта от конкретного лица исключается.
• 2. Установлена идентичность генотипов человека, оставившего исследуемый объект, и проверяемого лица, следовательно, исследованный объект (кровь, сперма и т. п.) произошел от проверяемого лица (вероятность случайного совпадения генотипов настолько мала, что ею можно пренебречь).
• 3. При использовании ПЦР-анализа для исследования относительно малого количества дефектного анализируемого вещества возможно получение вывода, решающего проблему не на индивидуальном уровне, а на групповом. Например, экспертами может быть получен положительный результат с вероятностью ошибки 1 на 10 тыс. случаев. В этой ситуации к такому выводу следует относиться как к вероятному выводу и использовать его в совокупности с другими доказательствами по делу, как это делается с вероятными выводами других видов экспертиз.

При установлении родителей ребенка возможны несколько вариантов ответа.

• 1. Исключается происхождение ребенка от одного из предполагаемых родителей.
• 2. Исключается происхождение ребенка от обоих предполагаемых родителей.
• 3. Биологическими родителями ребенка являются конкретные мужчина и женщина.

В заключение этого параграфа главы приведем несколько примеров использования метода генотиноскопии из практики Экспертно-криминалистического центра МВД России (ЭКЦ МВД РФ).

• 1. Молодая женщина родила мальчика. Через несколько дней после родов он умер в родильном доме и был передан родителям для захоронения. По прошествии шести месяцев после захоронения младенца у родителей возникло подозрение, что выданный им умерший ребенок не является их сыном. После проведения эксгумации была назначена экспертиза, проведение которой было поручено экспертам ЭКЦ МВД РФ. На разрешение был поставлен вопрос: является ли умерший мальчик ребенком данных мужчины и женщины? На исследование были представлены жидкая кровь предполагаемых родителей и мышечная ткань эксгумированного трупа ребенка. Исследованием было однозначно установлено, что данные мужчина и женщина — родители умершего ребенка.
• 2. В одной из квартир дома был обнаружен труп убитого гр-на N. В ходе оперативно-следственных мероприятий в квартире у подозреваемой М. был обнаружен нож со следами буроватого вещества, похожего на кровь. Была назначена экспертиза, производство которой поручено ЭКЦ МВД РФ. Перед экспертами был поставлен вопрос: не происходит ли кровь, обнаруженная на ноже, от гр-на N. С помощью метода генотипоскопии было установлено, что генотип крови на ноже и генотип крови гр-на N. одинаков, а возможная частота встречаемости такого «отпечатка» ДНК составляет один на 300 млрд человек. Был сделан вывод, что кровь на ноже, обнаруженном в квартире подозреваемой М., является кровью гр-на N.
• 3. У гр-ки А., 15 лет, после пяти недель беременности произошел выкидыш. По ее утверждениям за пять недель до этого события ее изнасилован гражданин М. и зачатие произошло от него. Для подтверждения или опровержения этого утверждения назначили экспертизу, на разрешение которой был поставлен вопрос: не является ли беременность гр-ки А. следствием того, что с ней был совершен половой акт грном М. Проведение экспертизы было поручено ЭКЦ МВД РФ, в качестве исследуемых материалов представлены: ткани плода, кровь гр-ки А., кровь гр-на М. Генотииоскопическим исследованием М. как субъект зачатия был исключен. В ходе следствия выяснилось, что гр-ка А. встречалась с грном Н., генотипоскопическим исследованием было установлено, что именно от него и произошло зачатие.
• 4. В лесном массиве были обнаружены фрагменты кожи. В целях установления видовой и половой принадлежности указанных фрагментов была назначена экспертиза, проведение которой поручили ЭКЦ МВД РФ. Методом генотипоскопии было установлено, что кожа принадлежит мужчине.

В ходе оперативно-розыскных мероприятий была выявлена семья Б., у которой пропал мальчик 15 лет. По времени наступления указанных событий не исключалось, что кожа могла происходить от пропавшего мальчика.

Генотипоскопическим исследованием крови мужа и жены Б. и кожных фрагментов неизвестного мужчины с использованием РПЦ-анализа (реакции цепной полимеризации) было установлено, что неизвестный является сыном мужа и жены Б.

Метод генотипоскопии в настоящее время очень активно внедряется в практику правоохранительной деятельности, и это не дань моде, а следствие его революционных возможностей. С помощью этого метода практически решаются правоохранительные задачи, которые ранее были неразрешимыми. Кроме того, научно подготовлено еще более широкое его использование в решении многообразных задач идентификации личности человека и животных по следам и объектам биологического происхождения. С появлением этого метода наука и практика получили универсальный инструмент группового и индивидуального установления любых объектов живой природы.