Обсуждение результатов собственных исследований

Анализируя данные, полученные зарубежными и отечественными исследователями, можно выделить две основные причины гипофункции яичников у коров — несбалансированное или недостаточное кормление и стресс-факторы обусловленные технологией содержания, особенно в сочетании с высокой продуктивностью.

То, что встречаемость гипофункции среди коров-первотелок больше, чем у многотельных коров объясняется более высоким уровнем обмена веществ, а, следовательно, повышенной зависимостью от факторов внешней среды, влияние которых приводит к нарушению гормональной регуляции репродуктивной функции. Sangsritavong S. с соавторами (2002) сообщают, что у лактирующих коров концентрация прогестерона и эстрадиола была ниже, чем у не лактирующих со сходной массой тела. Аналогичные данные были получены и Sartori c соавторами (2002).

Лактация у высокопродуктивных коров, особенно коров-первотелок, требует мобилизации всех резервов организма, повышения уровня потребления корма и метаболизма, что подразумевает более быструю утилизацию стероидных гормонов в печени (Wiltbank M. C. et al., 2000).

Для поддержания необходимого уровня гормонов в крови организм усиливает их выработку фолликулами и желтым телом. При этом многие авторы отмечают увеличение диаметра фолликулов и желтых тел у лактирующих коров по сравнению с телками и нелактирующими коровами (Beam S. W., 1995; De La Sota R. L. et al., 1993; Vasconcelos J. L. M. et al., 2001 и др.).

Такого же мнения придерживается Sartori с соавторами (2002). По их мнению, больший диаметр овуляторного фолликула у лактирующих коров объясняется необходимостью продуцировать большее количество эстрадиола для достижения овуляторной концентрации ЛГ из-за повышенного метаболизма. По данным Vasconcelos J. L. M. с соавторами (1999), несмотря на больший диаметр овуляторного фолликула у высокопродуктивных коров, оплодотворяемость была ниже, по сравнению с коровами с более низкой продуктивностью.

Wiltbank M. C. et al. (2002) пришли к выводу, что пониженная концентрация эстрадиола может быть причиной ановуляторных половых циклов и дисфункции яичников у лактирующих коров из-за изменения концентрации ЛГ.

Существует много методов регуляции функции яичников, но эффективность применения одних и тех же методов разными исследователями сильно варьирует. Большинство исследователей сходятся во мнении, что наиболее эффективны комплексные схемы лечения, сочетающие воздействие нескольких биологически активных веществ. Это позволяет обеспечить физиологически полноценное воздействие на организм животного и вернуть функциональную активность яичникам. Без использования прогестерона и его синтетических аналогов — прогестагенов лечение гипофункции возможно лишь при неглубокой ее форме. Это обусловлено тем, что насыщение организма прогестероном или его аналогами повышает чувствительность гипоталамо-гипофизарной системы к действию экзогенных гонадотропинов. Одновременно после прекращения действия прогестерона, происходит упорядочивание инкреции гипофизом гонадотропных гормонов (Прокофьев М. И., 1983; Прокофьев М. И., 1999; Ельчанинов В. В. и др., 1969).

Применение прогестагенов в разных дозировках приводило во многих исследованиях к сходным результатам. Новизной нашего исследования является определение оптимальной дозировки и изучение сравнительной эффективности применения различных прогестагенов.

В наших исследованиях мы испытали четыре прогестагена: диамол, бутагест, ипогест и ипогестрол. В результате проведенных исследований, все прогестагены показали хороший синхронизирующий эффект (от 60,0 до 96,6%), что позволяет использовать их для восстановления функции яичников и синхронизации охоты.

Логинов А. Г. и Прокофьев М. И. (1981) сообщают, что минимальная доза диамола для торможения овуляции у коров составила 100 мг. Применив его в дозе 20 мг, мы получили 93,3% прихода в охоту, но стельность в индуцированную охоту не имела достоверной разницы по сравнению с контролем и была значительно ниже таковой при использовании ипогеста в такой же дозе (Р<0,05) (табл. № 5). После этого мы решили применить диамол в разных дозах для определения оптимальной дозы, и было установлено, что дозы 50, 70 и 100 мг по эффективности практически равны и превосходят дозы 20 мг (Р<0,01) и 30 мг (табл. № 9). По нашему мнению, для снижения экономических затрат и нагрузки на организм животного, при гипофункции яичников, следует применять диамол в дозе 50 мг.

Результаты опытов по применению бутагеста, ипогеста и ипогестрола в разных дозах так же показали разную эффективность этих прогестагенов при разной дозировке. Эффективность бутагеста и ипогеста была примерно одинаковой при их использовании в дозах 20, 25, и 30 мг (табл. № 7 и № 8), значительно превышая показатели при дозе 10 и 15 мг (Р<0,01). Следовательно, целесообразней использовать их в дозе 20 мг.

Ипогестрол в дозе 20 мг был менее эффективен по сравнению с дозами 25 и 30 мг, где результаты были примерно одинаковыми (Р<0,01). Отсюда следует, что оптимальной дозой для него будет 25 мг.

Как видно из данных приведенных в таблицах №№ 7 — 10, эффективность прогестагенов применения различных прогестагенов в их оптимальных дозах варьирует. По сравнению с телками, у лактирующих коров на протяжении полового цикла отмечалась пониженная концентрация эстрадиола и прогестерона, несмотря на значительно больший размер овуляторного фолликула и желтого тела и повышенную продукцию этих гормонов (Sartori R. et al., 2000). При гипофукции яичников показатели содержания этих гормонов так же находятся на минимальных уровнях, что подтверждается нашими исследованиями (табл. № 11).

За последнее десятилетие появились данные утверждающие, что концентрации гормонов в периферической крови сильно отличаются от концентрации в крови локальной кровеносной системы репродуктивных органов. Так, разница концентраций прогестерона в крови, взятой из яремной вены и яичниковой вены может доходить до 800 раз. Данные сведения предполагают необходимость создания совершенно новых методик, что отодвигает общее решение проблем, связанных с нормированием технологий кормления и содержания на более отдалённую перспективу (Abecia J. et al., 1999; Lozano J. et al., 1998).

Vasconcelos J. L. M. с соавторами (2001) считают, что пониженная концентрация прогестерона может быть причиной пониженной оплодотворяемости. Для изучения динамики эндогенного прогестерона до и после применения прогестагенов и определения причин их разной эффективности, мы исследовали кровь коров при гипофункции яичников без применения прогестагенов и после их применения (табл. № 11).

Как видно из приведенных данных, до введения прогестагенов во всех опытных группах концентрация прогестерона находится на минимальном уровне, а после их введения начинает расти и через 168 часов достигает максимума. Наибольший уровень прогестерона был в группе получавшей диамол, он был достоверно выше уровней концентрации при использовании других прогестагенов (Р<0,05), контроля со спонтанной охотой (Р<0,05), а уровень гормона в крови не обработанных первотелок с гипофункцией яичников превосходил в 15,3 раза (Р<0,001). В группах получавших бутагест и ипогест концентрация прогестерона находилась примерно на одном уровне и была достоверно ниже, чем при введении диамола (Р<0,01). В подопытной группе получавшей ипогестрол концентрация прогестерона была более чем в два раза ниже, чем при введении остальных прогестагенов (Р<0,001). Показатели прихода в охоту и оплодотворяемости в этой группе при использовании оптимальной дозы так же были значительно ниже.

Если сравнить результативность применения оптимальных доз прогестагенов и концентрацию эндогенного прогестерона после их применения, становится очевидным, что уровень прогестерона в сыворотке крови положительно коррелирует с оплодотворяемостью в индуцированную охоту. Многие авторы так же считают, что причиной пониженной оплодотворяемости может быть низкая концентрация прогестерона (Wehrman M. E. et al, 1993; Xu Z. Z. et al, 1997). Большинство авторов сходятся во мнении, что это обусловлено увеличением частоты импульсов ЛГ, вызывающей преждевременное созревание ооцитов (Roberson M. S. et al., 1989; Bergfeld D. R. et al., 1991; Adams G. P. et al., 1992; Revah I. et al., 1996).

Из полученных нами данных следует, что концентрация прогестерона 2,7 — 4 нг/мл сыворотки крови через 168 часов после параэнтерального введения прогестагенов способствует приходу в охоту 90 — 100% коров-первотелок при оплодотворяемости в индуцированную охоту 60 — 70% животных.

В проведенных ранее исследованиях установлено, что использование для стимуляции гонадотропной функции яичников только прогестагенов значительно снижает оплодотворяемость в синхронизированную охоту. Многие авторы объясняют это снижением качества ооцита в персистирующем фолликуле (Mihm et al., 1994; Sanchez T. et al., 1993; Savio J. D. et al., 1993; Kinder J. E. et al., 1996; Ahmad N. et al., 1996). По нашему мнению, хотя это и имеет место, но основной причиной снижения оплодотворяемости в индуцированную охоту является неадекватный гормональный фон, возникающий потому, что как высокая, так и низкая концентрация прогестерона в крови изменяет частоту пульсов ЛГ и ФСГ. При этом основную роль играет ЛГ — при низкой концентрации задерживается созревание фолликула или происходит его кистозное перерождение, а при высокой — наблюдается раннее созревание и овуляция фолликула, что так же снижает уровень стельности из-за плохого развития желтого тела, неспособного поддерживать достаточный уровень прогестерона. Этого мнения придерживается и ряд других исследователей (Whisnant C. S. et al., 1985; King R. S. et al., 1994; DeSouza M. M. et al., 1995; Wiltbank J. N. et al., 2002).

Как видно из приведенных выше данных, в большинстве опытов стельность после осеменения в индуцированную охоту превышала контрольную. Аналогичные данные получали и другие авторы (Ramirez-Godinez J. A. et al., 1981; Воробьев Н. Н., 1980 и др.). Это объясняется более благоприятным гормональным фоном возникающим под комплексным воздействием прогестагена, ГСЖК и простагландина.

Многие авторы сообщают о различных морфофункциональных нарушениях в яичниках при использовании ГСЖК в терапевтических дозах. Шейкин В. Н. (1991) рекомендует применять диамол в сочетании с 3000 ИЕ ГСЖК. Доза применяемая нами (1000 ИЕ) слишком низкая для самостоятельной активации фолликулогенеза, но в комплексе с прогестагеном и простагландином обеспечивает физиологически полноценную охоту у обработанных животных. При этом стельность после осеменения в индуцированную охоту была выше, чем в контроле на 4,4 — 34,9%, за исключением группы получавшей ипогестрол.

Введение

простагландина одновременно с ГСЖК позволяет резко снизить концентрацию прогестерона в крови и создать условия для Ребаунд-эффекта. ГСЖК в сочетании с выделенными в кровь под воздействием Ребаунд-эффекта эндогенным ФСГ и ЛГ способствует активации фолликулогенеза. К моменту прихода в охоту концентрация прогестерона была минимальной и практически равнялась концентрации до применения прогестагенов (02, — 0,4 нг/мл).

В опыте, где вместо нативного ГСЖК применяли фоллигон и фоллимаг, стельность в индуцированную охоту превышала контрольную на 12,2% и 7,4% соответственно. Разница может объясняться различной активностью этих препаратов.

В то же время применение синтетического аналога гонадотропин-рилизинг гормона (сурфагона), хотя и способствовало приходу животных в охоту, показало более низкий процент оплодотворяемости в индуцированную охоту, чем в контроле (на 0,6%) при этом приход в охоту был более растянут, по сравнению с другими группами. Это говорит о недостаточном выделении эндогенного ФСГ и ЛГ в ответ на введение сурфагона для эффективной индукции гонадотропной функции яичников.

Осеменение в следующую после индуцированной спонтанную охоту показало снижение оплодотворяемости по сравнению с предыдущим и контрольными группами. По всей видимости, это связано с длительным дисфункциональным состоянием яичников, в результате чего произошли глубокие морфологические изменения его ткани приводящее к нарушению развития растущих фолликулов и ухудшению их качества. Кроме того, как уже говорилось выше, на функцию яичников огромное влияние оказывает высокий уровень молочной продуктивности и другие стресс-факторы обусловленные промышленной технологией содержания.

Высокопродуктивные коровы имеют специфику биохимических процессов, обусловливающую реактивность организма, отличную от реактивности организма низкои умеренно лактирующих коров, т. е. коров с удоем до 3000 кг молока в год (Butler W. R., 1998).

Варианты рационов кормления, удовлетворяющие и стимулирующие высокую молочную продуктивность, зачастую отрицательно влияют на репродуктивную функцию и, наоборот, при рационах, оптимизирующих функционирование репродуктивной системы, невозможна реализация генетически запрограммированной высокой молочной продуктивности (Шолда О., 1983; Darwash A. et al., 1999).

По данным Порфирьева И. А. (1998), продолжительность предыдущей лактации влияла на частоту дисфункции. У 964 коров с продолжительностью предыдущей лактации 300 и менее суток, дисфункцию яичников наблюдали в 3,95% случаев; у 359 коров с продолжительностью лактации 300 — 340 суток — в 4,7% случаев; у 147 с продолжительностью предшествующей лактации 341 — 380 день — 6,8%, а при 381 и более суток — 8,2% случаев.

Секреция прогестерона слабо функционирующим в результате недостаточного уровня кормления желтым телом была снижена, также как и концентрация ЛГ. При этом количество ЛГ-рецепторов в лютеальных клетках и выделение прогестерона в ответ на ведение экзогенного ЛГ не отличалось от контрольного.(Schrick F. N. et al., 1992; Burns P. D. et al., 1997). При низкой упитанности телок фолликулы были меньше и развивались медленнее, чем у телок с нормальной упитанностью (Bossis L. et al., 1999).

Это говорит о том, что для эффективной профилактики функциональных расстройств репродуктивной функции необходима оптимизация продуктивности до физиологически приемлемых показателей и создание параметров микроклимата исключающих возникновение долговременных стресс-факторов. Но с экономической точки зрения это выполнить проблематично, а, следовательно, единственной возможностью профилактики и лечения дисфункции яичников остается применение гормональных и других биологически активных препаратов.

Наиболее целесообразно сочетать применение биологически активных веществ с физиологическими методами воздействия на организм коров при дисфункции яичников: активный моцион, умеренная влажность и освещенность, применение щадящих технологий доения и содержания. Хороший эффект дает применение ректального массажа матки и использование быков-пробников.

Во всех опытных группах (кроме получавшей бутагест в дозе 20 мг), сервис-период был больше, чем в контроле, что обуславливается длительным состоянием анафродизии. Несмотря на это, индекс осеменения был ниже, следовательно, гормональная стимуляция создает более благоприятные условия для оплодотворения и развития плода, чем у спонтанно циклирующих коров.

Применение прогестагенов в комплексе с биологически активными веществами позволяет снизить экономические затраты на содержание бесплодных коров. Так, комплексное применение бутагеста с ГСЖК и простагландином позволило сократить сервис-период на 21,6 суток на корову (табл.6), при этом экономический эффект в расчете на одну корову составил рублей 1807,65 рублей в год.