Влияние субстанции «алхидин» на процессы перекисного окисления липидов у крыс с моделью резаной кожной раны
Аналогичная картина отмечалась и в отношении содержания в сыворотке крови церулоплазмина, показатели которого, однако, колебались в пределах нормы. Снижение активности СОД при воздействии алхидина сопровождалось тенденцией к увеличению содержания нитритов, образующихся при окислении продуцируемого эндотелием сосудов оксида азота. Полученные результаты подтверждают более ранние данные… Читать ещё >
Влияние субстанции «алхидин» на процессы перекисного окисления липидов у крыс с моделью резаной кожной раны (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
К настоящему времени известно множество препаратов, предлагаемых для ускорения заживления гнойных ран, в их числе значительную часть составляют препараты растительного происхождения. Новая отечественная субстанция, получаемая из верблюжьей колючки киргизской — алхидин, представляет собой биологически активный комплекс, состоящий из полимерного проантоционидина (полифлавон), водорастворимого гетерополисахарида, аминокислот, флавоноидов и микроэлементов. По данным доклинических исследований предполагается, что этот комплекс может обладать обладает антиоксидантными, цитопротекторными и ранозаживляющими свойствами [1].
Настоящая работа имеет своей целью подробное описание антиоксидантного потенциала субстанции алхидин, имея ввиду разработку нового ранозаживляющего препарата.
Работа выполнена на 30 белых беспородных крысах-самцах массой 180 — 220 г. Для проведения исследований использовались животные одного помёта и приблизительно одинаковые по весу. В контрольные и опытные группы отбирались экземпляры из одной партии, внешне здоровые, без видимых дефектов на коже и признаков общей патологии. Выбраковывались крысы с подозрением на наличие спонтанной патологии.
Рану моделировали следующим образом. Раны животным наносились в области спины под общим ингаляционным эфирным наркозом с использованием устройств для фиксации и наркотизации мелких лабораторных животных в эксперименте [2, 3]. Создавали гнойную рану, удаляя кожный лоскут, площадью 3 см2 на спине в межлопаточной области. Края раны фиксировали с помощью тефлонового кольца (подшивали), так, что поверхность раны оставалась открытой. Проводили путем инфицирования поверхности раны взвесью суточной агаровой культуры Staphylococcus aureus штамм 592 в количестве 109 микробных тел. Через 3 дня формировалась типичная гнойная рана. Из 30 крыс, взятых в эксперимент, стандартная гнойная рана была получена у 26.
Все животные были разделены на 2 группы: группа плацебо — животным в течение 7 дней вводили ежедневно, в утренние часы за 30 мин до выдачи в кормушку корма внутрижелудочно 1% крахмальный раствор в объеме 0, 5 мл; группа «алхидин» — в аналогичных условиях животным вводили в том же объеме крахмала взвесь алхидина. В качестве контроля использованы 7 здоровых беспородных крыс.
Описывалось влияние алхидина на показатели свободнорадикальных процессов в сыворотке крови крыс [4, 5, 6, 7].
В табл. 1 приведены количественные данные, характеризующие изменение уровня генерации супероксиданионов в крови крыс под влиянием субстанции «алхидин».
Таблица 1. Влияние алхидина на генерацию супероксид анионов в плазме крови крыс с моделью гнойной раны (n=6).
Группы. | Скорость генерации супероксид анионов (%). | Р < 0, 05. | |
Плацебо. | 79, 9 ± 14, 46. | *. | |
Алхидин. | 47, 4 ± 8, 7. | * **. | |
Контроль (здоровые крысы). | 14, 0 ± 4, 4 (n = 6). | ||
Условные обозначения:
- * - достоверность различий по сравнению с контролем,
- ** - достоверность различий по сравнению с группой плацебо.
Как видно из данных, представленных в таблице, эффект исследуемой субстанции достаточно выражен в отношении скорости генерации супероксиданионов. По сравнению с плацебо алхидин снижает скорость генерации супероксиданионов на 40%. В табл. 2 охарактеризован потенциал влияния субстанции алхидин на уровень генерации оксида азота. Как видно, алхидин в определенной степени уменьшает генерацию оксида азота, причем, это статически значимое различие с эффектом плацебо.
Таблица 2. Влияние алхидина на генерацию оксида азота в плазме крови крыс с моделью гнойной раны (n=6).
Группы. | мкмоль/л. | Р < 0, 05. | |
Плацебо. | 45, 3 + 8, 36. | *. | |
Алхидин. | 25, 1 ± 1, 33. | * **. | |
Контроль. | 3, 1 ± 0, 208. | ||
Условные обозначения:
- * - достоверность различий по сравнению с контролем,
- ** - достоверность различий по сравнению с группой плацебо.
В табл. 3 приведены данные, характеризующие воздействие алхидина на уровень нитратов. Как видно из приведенных данных, значимого влияния алхидина на содержание нитритов в крови в условиях нашего наблюдения выявить не удалось.
Таблица 3 — Влияние алхидина на содержание нитритов (NO2-) в сыворотке крови крыс с моделью кожной раны (n=6).
Группы. | нМ/мг белка. | Р < 0, 05. | |
Плацебо. | 16, 4 ± 1, 7. | *. | |
Алхидин. | 20, 8 ± 1, 8. | *. | |
Контроль. | 8, 8 ± 1, 2. | ||
Условные обозначения:
- * - достоверность различий по сравнению с контролем,
- ** - достоверность различий по сравнению с группой плацебо.
Таблица 4 содержит данные, относящиеся к концентрации в эритроцитах крови продукта ПОЛ — малонового диальдегида.
Таблица 4 — Влияние алхидина на содержание малонового диальдегида в эритроцитах крови крыс с моделью кожной раны (n=6).
Группы. | мкмоль/мл. | Р < 0, 05. | |
Плацебо. | 28, 3 ± 3, 15. | *. | |
Алхидин. | 10, 39 ± 0, 5. | * **. | |
Контроль. | 6, 96 ± 0, 297. | ||
Условные обозначения:
- * - достоверность различий по сравнению с контролем,
- ** - достоверность различий по сравнению с группой плацебо.
Таблица 5 — Влияние суттигена и алхидина на содержание каталазы в эритроцитах крови крыс с моделью кожной раны (n=6).
Группы. | мкмоль/л. | Р < 0, 05. | |
Плацебо. | 0, 133 ± 0.052. | *. | |
Алхидин. | 0, 60 ± 0, 08. | * **. | |
Контроль. | 0, 792 ± 0, 086. | ||
Условные обозначения:
- * - достоверность различий по сравнению с контролем,
- ** - достоверность различий по сравнению с группой плацебо.
Как следует из данных табл. 4, алхидин более чем в 2 раза по сравнению с плацебо уменьшают содержание малонового диальдегида.
Как видно из данных табл. 5, уровень одного из ферментов системы антиоксидантной защиты — каталазы эритроцитов меняется под влиянием введения алхидина. Алхидин обеспечивает повышение этого показателя в 4, 5 раза.
В табл. 6 приведены данные, характеризующие влияние исследуемого соединения на уровень активности ещё одного фермента антиоксидантной защиты — глютатионпероксидазы (ГПО).
Установлено, что под влиянием алхидина происходит повышение концентрации ГПО на 22, 6% по сравнению с плацебо.
В табл. 7 приведены данные, характеризующие влияние алхидина на уровень средних молекул.
Таблица 6 — Влияние алхидина на содержание глютатионпероксидазы в эритроцитах крови крыс с моделью кожной раны (n=6).
Группы. | мкмоль/мл/мин. | Р. | |
Плацебо. | 58, 2 ± 3, 72. | *. | |
Алхидин. | 71, 4 + 6, 7. | * **. | |
Контроль. | 82, 81+ 3, 7. | ||
Условные обозначения:
- * - достоверность различий по сравнению с контролем,
- ** - достоверность различий по сравнению с группой плацебо.
Таблица 7- Влияние алхидина на уровень средних молекул у крыс с моделью кожной раны (n=6).
Группы. | Условные единицы. | Р. | |
Плацебо. | 0, 22 ± 0, 043. | *. | |
Алхидин. | 0, 1 ± 0, 013. | * **. | |
Контроль. | 0, 07 ± 0, 0022 (n=5). | ||
Условные обозначения:
- * - достоверность различий по сравнению с контролем,
- ** - достоверность различий по сравнению с группой плацебо.
Влияние алхидина проявляется и в уровне концентрации средних молекул: алхидин снижают этот показатель примерно вдвое. Интегральные параметры, характеризующие состояние системы ПОЛ-АОЗ, описывались в аналогичных условиях и приведены в следующей таблице. Как можно судить по данным таблицы, алхидин угнетал интенсивность ПОЛ, снижая содержание в сыворотке как диеновых конъюгатов, так и оснований Шиффа.
Введение
алхидина сопровождалось существенным увеличением общей антиокислительной активности. При этом, через неделю после начала введения алхидина активность СОД в сыворотке крови уменьшалась на 36, 5%.
Таблица 8. Влияние алхидина на показатели свободнорадикальных процессов в сыворотке крови крыс.
Показатели. | Плацебо. | Алхидин. | |
Величина перекисной хемилюминесценции, усл. ед. | 7, 40 +/- 0, 99. | 4, 53 +/- 0, 61***. | |
Диеновые конъюгаты, нМ/мг белка. | 0, 99 +/- 0, 12. | 0, 28 +/- 0, 36*. | |
Шиффовы основания, усл. ед./мг белка. | 4, 87 +/- 0, 36. | 3, 39 +/- 0, 35**. | |
Антиокислительная активность, усл. ед./мг белка. | 0, 82 +/- 0, 03. | 1, 12 +/- 0, 03*. | |
Активность супероксиддисмутазы (СОД), ед./мг белка. | 1, 93 +/- 0, 03. | 1, 32 +/- 0, 07*. | |
Церулоплазмин, мг%. | 34, 7 +/- 3, 9. | 29, 0 +/- 2, 1. | |
Примечание: В каждом определении объединяли сыворотку крови от 2−3 животных. Различие с плацебо достоверно: * p < 0, 001; ** p < 0, 01; *** p < 0, 05.
Аналогичная картина отмечалась и в отношении содержания в сыворотке крови церулоплазмина, показатели которого, однако, колебались в пределах нормы. Снижение активности СОД при воздействии алхидина сопровождалось тенденцией к увеличению содержания нитритов, образующихся при окислении продуцируемого эндотелием сосудов оксида азота. Полученные результаты подтверждают более ранние данные [1] об антиокислительном действии алхидина. По-видимому, антиоксидантные свойства алхидина связаны с его антирадикальной активностью, то есть способностью непосредственно связывать свободные радикалы, образующиеся в организме из молекулярного кислорода, а также при перекисном окислении липидов, в частности, гидроксильный (ОН) и пероксильный (ROO.) радикалы [8].
алхидин антиоксидантный ранозаживляющий нитрат.
- 1. Рахимова А. К. Цитопротекторные свойства лекарственных препаратов /А.К. Рахимова, Д. Д. Кусаинова, А. Е. Гуляев.- Алматы, 2007. 340с.
- 2. Билич Г. Л. Влияние некоторых стимуляторов репарации на заживление операционных ран у молодых животных /Г.Л.Билич, А. З. Бузина // Здравоохранение Казахстана.- 1971.-№ 12. С. 141−143.
- 3. Лазарев Н. В. Воспроизведение заболеваний у животных для экспериментально-терапевтических исследований /Н.Л.Лазарев. — М.: Медгиз, 1954. 391с.
- 4. Экспресс-метод определения антирадикальной активности лекарственных веществ /Т.В.Починок, М. Л. Тараховский, В. А. Портнягина и др. //Хим.-фармацевт. журн.- 1985. N 5. C. 565−569.
- 5. Оценка антиокислительной и антирадикальной активности веществ и биологических объектов /Т.В.Починок, М. Л. Тараховский, В. А. Портнягина и др. //Биофизика.- 1992. Т.37. C.1041−1047.
- 6. Возрастные изменения активности свободнорадикальных процессов в тканях и сыворотке крови крыс /В.Н.Анисимов, А. В. Арутюнян, Т. И. Опарина и др. //Физиол. журн. им. И. М. Сеченова.- 1999. Т.-84. С. 502−507.
- 7. Антиоксидазная активность сыворотки крови /Г.И.Клебанов, Ю. О. Теселкин, И. В. Бабенкова и др. //Вестн. РАМН.- 1999. № 2. С.15−22.
- 8. Sawada M, Carlson J.C. Changes in superoxide radical and lipid peroxide formation in the brain, heart and liver during the lifetime of the rat /М.Sawada, J.C.Carlson //Mech.Ageing Dev.-1987.-Vol. 41.-P.125−137.