Биотехнологические основы конструирования и использования иммунобиологических препаратов для молодняка крупного рогатого скота

Актуальность темы

диссертации.

Современное ведение мясного и молочного скотоводства, сопровождающееся концентрацией поголовья па небольшой площади, комплектованием животноводческих ферм и комплексов одновозрастными и одновидо-выми животными с генетическим потенциалом, приближенным к однородному, сопровождается быстрым распространением инфекционных заболеваний, которые поражают различные половозрастные группы животных.

Среди болезней крупного рогатого скота ппевмоэнтериты наносят огромный экономический ущерб животноводству. Возбудителями таких инфекций являются вирусы, относящиеся к семействам герпесвирусов (вирус инфекционного ринотрахеита), парамиксовирусов (вирусы парагригша-З и респираторно-синтициальпый вирус), тогавирусов (вирус диареи — болезни слизистых), аденовирусов, ротаи короиавирусов и т. д. Это так называемые «малые» инфекции, которые у здоровых животных с нормальным функционированием иммунной системы протекают бессимптомно без выраженных клинических признаков или животные вообще не переболевают данными инфекциями. Особенно тяжело болеют животные, когда в патологический процесс вовлекается 2 и более вирусов, то есть возникает смешанная или ассоциативная инфекция (17, 129, 151, 166, 208, 250, 275,)Течепие пневмоэпте-ритов развивается в две фазы: первая — вирусная фаза, вторая — бактериальная. При тяжелом течении вирусной фазы инфекции наряду с поражением чувствительных клеток наступает значительное угнетение клеточного и гуморального звеньев иммунитета, на фоне чего условио-патогеппая микрофлора активизируется и у животных развивается «энзоотическая пневмония», приводящая к значительному отходу заболевших животных, снижению их продуктивности (17, 129, 162, 229). Особенностью распространения вирусов инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, респираторпо-синцитиальпой инфекции является то, что данные возбудители у молодняка до 1 месяца могут вызывать энтериты, у более старших животных — респираторные заболевания, а у взрослых половозрелых коров и быков — нарушение воспроизводительной функции. Кроме того, вирус парагриппа-3 широко распространен у телят старше 1-го месячного возраста при нарушениях технологии выращивания, т. е. при стрессовых воздействиях на организм, вызывая поражения дыхательных путей, а ротаи коронавирусы — у новорожденных телят вызывают тяжело протекающие энтериты.

По тропизму все выщеуказаппые возбудители могут репродуцироваться в клетках респираторного и желудочно-кишечного тракта, половых органах, иммунокомпетентиых клетках, то есть они паптроппы. Это обуславливает их высокую коитагиозность и тяжесть течения болезни (17).

Одним из пусковых механизмов поражения животных инфекционными заболеваниями в условиях современной промышленной технологии является снижение иммунологической реактивности организма, которая вызывается рядом факторов — недоразвитостью иммунной системы молодняка (первичный иммунодефицит), пищевые токсикозы, недостаточное и несбалансированное по различным компонентам кормление, а также сильное стрессовое воздействие: так называемый «технологический стресс», обусловленный современной технологией производства продукции животноводства. Составляющими современной промышленной технологии, способствующие вызвать стрессовые воздействия иа организм животных являются безвыгульпое и безвыпаспое содержание животных, транспортировка, изменение микроклимата, формирование больших групп животных, малый фронт кормления, интенсивная эксплуатация (25). Все такие факторы отрицательно отражаются на иммунной системе и обменных процессах организма животных, что приводит к значительному снижению устойчивости к инфекционным заболеваниям, особенно к заболеваниям, возбудителями которых являются ус-ловпо-патогепные микроорганизмы и вирусы. Угнетенная иммунная система под воздействием вышеуказанных факторов не в состоянии противостоять вирусам-возбудителям даже с невысокой патогеиностыо. Вирусы-возбудители респираторных инфекций крупного рогатого скота каждый в отдельности, но особенно в ассоциациях, в свою очередь угпегают отдельные звенья иммунной системы — как клеточные, так и гуморальные. При переболевании животных вирусной диареей поражается в основном клеточное звено иммунитета — снижается количество и функциональная активность лимфоцитов, угнетается биосинтез антител, снижается концентрация общего белка в сыворотке крови. При переболевании ассоциативной инфекцией диарея и инфекционный рипотрахеит, диарея и парагрипп-3 снижается биосинтез антител к данным возбудителям (103,188).

Кроме того, вирус диареи крупного рогатого скота репродуцируется в лейкоцитах — лимфоцитах, моноцитах, нейтрофилах, тем самым вызывая лейкопению (103). Вирус инфекционного рипотрахеита, репродуцирующийся в организме телят, угнетает функцию В-лимфоцитов, снижает активность альвеолярных макрофагов (417). Наряду с угнетением иммунной системы поражаются чувствительные клетки дыхательных путей и желудочно-кишечного тракта, которые являются хорошим субстратом для размножения условно-патогенной микрофлоры. Все вышеуказанные вирусы у молодняка крупного рогатого скота вызывают ппевмоэптериты, а у взрослых животных — поражение репродуктивных органов.

Как уже было сказано выше, течение вирусных респираторных и желудочно-кишечных инфекций (ИРТ, ВД, ПГ-3, ротаи коронавирусы) сопровождается состоянием иммуподепрессии. В этой связи в комплекс лечебио-профилактических мероприятий в пораженных стадах необходимо включить препараты, являющиеся стимуляторами иммунной системы, снимающие им-мунодепрессивиое состояние и нормализующие клеточный и гуморальный иммунитет до уровня здоровых животных.

В арсенале медицинских и ветеринарных иммуностимулирующих препаратов важное место отводится производным природных продуктов. В па-стоящее время высокоэффективными препаратами являются иммуностимуляторы животного происхождеиия — АСД, тканевые препараты, изготовленные по методу Филатова, Ти В-активип. Однако АСД и тканевые препараты по Филатову хотя и высокоэффективны, но при введении их животным вызывают значительную антигенную перегрузку, чем усугубляют течение заболевания и восстановления иммунной системы. Ти В-активнп высокоактивные биологические препараты, но в последние годы их производство и применение значительно снизилось. Наиболее перспективным направлением в разработке методов иммуностимулирующей терапии и профилактики заболеваний молодняка является использование производных бактерий и продуктов пчеловодства. Из бактериальных имупостимулирующих препаратов особое место принадлежит целым бактериальным клеткам (вакцина БЦЖ, Bordetella pertussis, Corinebacterium parvum), а также бактериальным полисахаридам из Bact. prodigiosum, Ps. aeruginosa, Salmonella. Бактериальные ли-пополисахариды являются очень сильными иммуностимулирующими препаратами, но обладают высокой токсичностью. Особенно это относится к ли-пополисахаридам, выделяемым из условно-патогенной микрофлоры. Хотя вышеуказанные липополисахариды и являются поликлональиым активаторами В-системы лимфоцитов, по в период постпатальпого развития животных иммунная система имеет контакт с антигенами данных микроорганизмов и организм остается сенсибилизирован. Поэтому после применения данных липополисахаридов как для оценки состояния В-лимфоцитов в системе реакции бласттрансформации, лимфоцитов, так и для стимуляции иммунитета в системе in vitro, отмечается неадекватная реакция — увеличение процента бластов или резкое ухудшение состояния организма, протекающее по типу анафилактического шока (122, 129, 163, 229, 323). В этой связи для разработки иммуностимулирующих препаратов из бактерий желательно использовать только те, которые не имеют контакта с организмом теплокровных животных (152).

Наряду с бактериальными иммуностимуляторами в последние годы значительное внимание уделяется препаратам, изготовленных из продуктов пчеловодства. По имеющимся литературным данным, при использовании человеком и животными пыльцы, перги, прополиса стимулируется Т-система лимфоцитов, особенно субпопуляция Т-хелперов, фагоцитарная активность нейтрофилов, увеличивается активность гуморальных факторов иммунной защиты 89, 121, 127, 131).

В связи с вышеуказанным, использование бактериальных липополиса-харидов и производных продуктов пчеловодства способствует активизации Ти В-лимфоцитов фагоцитоза, угнетение которых отмечается при инфекционном рипотрахеите, вирусной диарее, рсспираторио-сиицитиальиой инфекции, разработка новых препаратов па их основе позволит спять иммупо-депрессивное состояние животных и в то же время ускорит выздоровление животных, больных пневмоэнтеритами.

Важное место в комплексе лечебно-профилактических мероприятий при ппевмоэпгеритах телят, вызванных ИРТ, ВД, ПГ-3, ротаи короиавиру-сами играет специфическая профилактика (пассивная и активная). Однако использование моиовакцин в профилактике ассоциаций не всегда дает положительный эффект, т.к. антитела вырабатываются против одного возбудителя, а патологический процесс вызывается ассоциацией вирусов и бактерий. В этой связи заслуживает интерес использование для специфической профилактики ассоциаций вакцин против 2−3 инфекций, что позволит повысить эффективность вакцинных препаратов. При современном ведении животноводства, связанном с недостатком и несбалансированностью кормления, приводящим к угнетению иммунной системы, специфическая профилактика не всегда достигает нужного эффекта. При этом для снятия иммунодепрес-сивного эффекта стимуляция поствакципального иммунитета с помощью различных препаратов оправдана. В литературе имеется ряд сообщений об использовании иммуностимулирующих препаратов для стимуляции поствакципального иммунитета при парагриппе-3, сальмонеллезе, сибирской язве (150, 282, 335). Для экстренной профилактики и терапии ппевмоэптери-тов телят широкое применение нашли сывороточные препараты, имеющие высокий титр антител к вирусам-возбудителям респираторных инфекций, в частности гипериммунные сыворотки, неспецифический иммуноглобулин, молозивный иммуноглобулин, сыворотка рекопвалесцеитов ОРЗ (252, 424).

Таким образом в мировой науке и практике накоплен значительный опыт борьбы с вирусными респираторными и желудочно-кишечными заболеваниями молодняка крупного рогатого скота, однако для условий Республики Беларусь и стран СНГ он не всегда приемлем.

В связи с вышеизложенным, изучение эпизоотической ситуации разработка новых технологий изготовления новых средств иммунологической профилактики вышеуказанных заболеваний па современном этапе является актуальной задачей ветеринарной пауки и практики. Поэтому паши исследования были направлены на разработку и совершенствование существующих методов иммунологической профилактики и терапии вирусных респираторных заболеваний молодняка крупного рогатого скота.

Цель и задачи исследований.

Целыо настоящих исследований явилась разработка и совершенствование биотехпологических средств и методов иммунологической профилактики и терапии вирусных респираторных и желудочно-кишечных инфекций молодняка крупного рогатого скота.

Для выполнения указанной цели были поставлены следующие задачи:

— изучить распространение инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, парагриппа-3, ротаи коронавирусной инфекций крупного рогатого скота в хозяйствах Республики Беларусь;

— изучить состояние иммунной системы и обменных процессов организма телят при пневмоэнтеритах и коров с заболеваниями репродуктивных органов;

— разработать иммуностимулирующие препараты на основе иепатоген-ных для теплокровных животных бактерий и продуктов пчеловодства, отработать схемы их применения, изучить их влияние па иммунную систему и лечебно-профилактическую эффективность при вирусных респираторных и желудочно-кишечных заболеваниях;

— разработать унифицированные технологии изготовления и применения монои ассоциированных живых и инактивированных культуральных вирус-вакцин для профилактики инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, парагриппа-3, ротаи коронавирусной инфекций крупного рогатого скота;

— разработать комплекс ветеринарио-саиитарных мероприятий по профилактике и терапии вирусных респираторных и желудочно-кишечных инфекций телят.

Научная новизна полученных результатов.

Впервые в условиях Республики Беларусь изучены особенности эпизоотической ситуации по инфекционному рипотрахеиту, вирусной диарее, парагриппу-3, ротаи коропавируспой инфекциям в животноводческих хозяйствах. Впервые теоретически обоснованы и практически использованы технологии изготовления и применения новых иммуностимулирующих препаратов па основе бактериальных липополисахаридов и продуктов пчеловодства при вирусных респираторных и желудочно-кишечных инфекциях крупного рогатого скота (Патенты Республики Беларусь № 2889 (1999 г.), 3913 (2001 г.), Республики Молдова № 889 (1998 г.), 890 (1998 г.), 891 (1998 г.). Установлено явление спонтанной персистепции генома инфекционных вирусов в бактериальных клетках, что приводит к биосиитезу вирусспеци-фических белков в бактериях (диплом па открытие № 291 от 18.10.2005 г.). Разработаны унифицированные технологии изготовления и применения монои ассоциированных живых и инактивированных вакцин для профилактики вирусных респираторных и желудочно-кишечных инфекций телят (патенты Республики Беларусь № 5304 (2003 г.), 10 696 (2008 г), 10 697 (2008 г). Впервые изучено влияние па иммунную систему телят мопои ассоциированных вакцин против респираторных заболеваний и предложены способы стимуляции иммунитета с помощью препаратов бактериального происхождения и препаратов из пчелиной перги. По результатам собственных исследований разработана научная концепция изготовления и применения вакцин и иммуностимуляторов в промышленном животноводстве, предусматривающая регламентированное их использование с учетом состояния иммунной системы организма. Разработана научная основа оптимизации вакци-нопрофилактики респираторных и желудочно-кишечных инфекций телят. Результаты исследований позволяют дополнить и систематизировать научную теорию превентивного применения вакцин и иммуностимуляторов в промышленном животноводстве.

Практическая значимость и реализация результатов исследований.

Результаты экспериментальных исследований обогащают современные знания по вопросам патогенеза, лечения и профилактики вирусных респираторных и желудочно-кишечных инфекций крупного рогатого скота, что позволяет с достаточно высокой точностью и эффективностью производить борьбу с данными заболеваниями. Изучена этиологическая структура возбудителей респираторных и желудочно-кишечных инфекций в животноводческих хозяйствах Республики Беларусь, состояние иммунной системы и обмена веществ при дайной патологии у телят. Разработанные средства, способы и схемы применения иммуностимулирующих и вакцинных препаратов для профилактики и терапии респираторных заболеваний телят позволяют в значительно сократить заболеваемость и непроизводительное выбытие телят. На основании проведенных исследований утвержиеа нормативная документация па 7 живых и ипактивированных вакцин, 14 методических рекомендаций и указаний по совершенствованию ветринарио-сапитарпых мероприятий при пиевмоэнтеритах телят, получено 15 авторских свидетельств и патентов.

Применение указанных разработок! в условиях производства позволяет в 3−5 раз сократить заболеваемость и непроизводительное выбытие молодняка крупного рогатого скота от вирусных респираторных и желудочно-кишечных инфекций.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

— результаты изучения распространения вирусных респираторных и желудочно-кишечных инфекций крупного рогатого скота в Республике Беларусь, позволяющие рационально осуществлять планирование противоэпи-зоотических мероприятий;

— состояние обмена веществ и иммунитета у телят при вирусных респираторных и желудочно-кишечных инфекциях;

— результаты разработки, апробации и внедрения иммунокорригирую-щих препаратов из продуктов пчеловодства, сапрофитных бактерий, тканей животных и препаратов серебра;

— результаты конструирования и внедрения мопо-, би-, трехи четырехвалентных живых и ипактивированных вирус-вакции для специфической профилактики вирусных респираторных и желудочно-кишечных инфекций крупного рогатого скота;

— результаты изучения закономерности иммунного ответа у телят после иммунизации их вакцинами при раздельном и комбинированном применении со стимуляцией поствакципальпого иммунитета, позволяющие получать у животных напряженный иммунитет и снижать заболеваемость телят респираторными инфекциями.

Личный вклад соискателя.

Исследования по разработке методов иммунологической профилактики и терапии вирусных респираторных и желудочно-кишечных инфекций, отработке параметров изготовления иммуностимулирующих и вакцинных препаратов проводились лично соискателем. При выполнении комплексных разработок — иммуностимулирующих и вакцинных препаратов личный вклад соискателя составлял от 60 до 100%.

Апробация результатов диссертации Основные положения диссертационной работы доложены и одобрены: на заседаниях и РУП «Институт экспермепталыюй ветеринарии им. С. Н. Вышелесского (1991;2008 гг.) — Международных, Всесоюзных и Республиканских конференциях, симпозиумах и конгрессах:

Научной конференции «Болезни молодняка сельскохозяйственных животных и их профилактика на комплексах», Таллин: 1984; Научной конференции «Вопросы интенсификации и научно-обоснованного ветеринарного обслуживания промышленного животноводства» Кишинев, 1987; Всесоюзной научной конференции «Стресс и иммунитет», Ростов-па-Дону, 1989; Первом иммунологическом съезде Сочи, 1989; Научно-практической конференции «Профилактика и меры борьбы с болезнями молодняка сельскохозяйственных животных» .Минск, 1990; Всесоюзной научно-технической конференции «Современные проблемы иммунологии, биотехнологии и клеточной инженерии в ветеринарной медицине» Нижной-Новгород, 1990; Научной конференции «Siuolailcines veterinarijos problemos», Kaisiadorys, Литва, 1993; Научной конференции «Апитерапия и пчеловодство» (Вильнюс, 1993) — Научно-практической конференции «Збережешсть молодняка с/г тваринзапорука розвитку твариництва Украши», Харьюв, 1994; Научно-практической конференции «Бютехнолопя ветери-нарпих npenapaTiB» Харьюв, 1993; Международной научной конференции «Общая эпизоотология: иммунологические, экологические и методологические проблемы», Харьков, 1995; Международной научной конференции «Иммунодиагностика и иммунотерапия» Витебск, 1995; Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины», Смоленск, 1996; 5-й Научнопрактической конференции по апитерапии «Пчелы и ваше здоровье» г. Сочи, 1996; Международном координационном совещании «Экологические проблемы патологии, фармакологии и терапии животных» Воронеж, 1997; Международной научно-практической конференции «Научно-технический прогресс в сельскохозяйственном производстве», Минск, 1997; Международной научно-практической конференции «Зооаптропопоз-пые болезни, меры профилактики и борьбы» Гродно, 1997; 6-й Научно-практической конференции по апитерапии «Пчелы и ваше здоровье» Рыбное, 1997; Международной научно-практической конференции «Проблемы патологии, санитарии и бесплодия в животноводстве», посвященной 100-летию сот дня рождения академиков АНБ Х. С. Горегляда и М. К. Юсковца, Минск, 1998; 1 итоговой научио-практической конференции БелНИИЭМ. Минск, 1998; Республиканской научно-практической конференции «Инфекция и иммунитет», посвященная 75-летию БелНИИЭМ, Минск, 1999; Учредительной конференции Международной ассоциации парази-тоценологов. Витебск, 1999; Международной научио-практической конференции «Актуальные проблемы патологии сельскохозяйственных животных», посвященной 70-летию БелНИИЭВ им. С. Н. Вышелесского, Минск, 2000; II Международной научио-практической конференции «Апитерапия сегодня — с биологической аптекой пчел в XXI век», Уфа, 2000; 1 Международной научно-практической конференции и пчеловодству и пчелотерапии «От медоцелительства до научной пчелотерапии III тысячелетия» Минск, 2002; Научно-производственной конференции «Внедрение достижений ветеринарной науки в сельскохозяйственное производство», Смоленск, 2002; Международной научно-практической конференции «Современные вопросы патологии сельскохозяйственных животных», Минск, 2003; Шестом-Международном форуме по глобальной вакцинологии «Вакцины и иммунизация» Минск, 2003; Международной научно-практической конференции. «Современное состояние и актуальные проблемы обеспечения ветерииарпого благополучия животноводства». Ялта, 2005; Simpozionul stiintific international consacrat jubileului de 50 ani de la fondarea Institutului de Zootehnie si Medicina Veterinara «Realizari si perspective in cresterea animalelor», Chisinau, 2006; III зЧзд аштерапева’пв Украши. Аштерашя: досягпепня та перспективи розвит-ку. Харюв, 2006.

Опубликованность результатов.

По теме диссертации опубликовано 105 научных работ, в том числе 7 монографий, 11 статей в изданиях, рекомендованных ВАК Российской Федерации, 32 статьи в журналах и сборниках трудов СНГ, 39 статей и тезисов докладов в материалах конференций, 1 свидетельство па научное открытие, 15 патентов и авторских свидетельств, 14 рекомендаций.

Структура и объем диссертации

.

Диссертационная работа изложена на 438 страницах машинописного текста и состоит из: введения, общей характеристики работы, обзора литературы по теме и выбора направления исследований, изложения общей методики и основных методов исследований, 8 глав собственных исследований, анализа и обобщения результатов исследований, выводов и практических предложений. Список использованной литературы включает 467 наименование работ отечественных и зарубежных авторов. Материалы диссертации иллюстрированы 115 таблицами, 42 фотографиями и рисунками. В приложении на 82 страницах, приводятся документы, подтверждающих результаты отдельных работ, их научную и практическую значимость.

ВЫВОДЫ.

1. Основными причинами возникновении респираторных и желудочно-кишечных заболеваний молодняка крупного рогатого скога в животноводческих хозяйствах Республики Беларусь являются предрасполагающие факторы (иммунодефицитное состояние организма новорожденных телят, наличие стрессовых ситуаций, влияние неблагоприятных экологических факторов внешней среды, нарушение технологии содержания и кормления животных, генетическая однородность стад, вызванная использованием одних и тех же производителей при осеменении коров) и сопутствующие факторы (возбудители респираторных и желудочпо-кпшечпых инфекций телят вирусной и бактериальной этиологии, способность вирусов инфекционного ринотрахеита, диареи, проникать через плацентарный барьер и внутриутробно инфицировать плод с дальнейшей его иммупотолераптностыо и вирусопосительством).

2. В этиологической структуре вирусных респираторных инфекций молодняка крупного рогатого скота в Республике Беларусь основной удельный вес занимают вирусы инфекционного ринотрахеита — 67,6% у коров и 65,8% у телят переболевших ппевмоэнтеритами, 68,8% у клинически здоровых телят старше 6 мес.- диареи соответственно 86,6, 84,1 и 88,9%- парагриппа-3 — 55,9, 71,5, 59,6%. При инфекционных энтеритах антитела к вирусу диареи выявлялись у 64,8% переболевших телят, к ротавирусу — 90,9%, коропавирусу — 80,6%. У больных энтеритами телят установлено наличие антигенов ротавируса — 67,4% (от обследованных), коронавируса — 33,7%, вируса диареи — 35,1%.

3. У больных и переболевших пневмоэптеритами телят отмечается угнетение Т-лимфоцитов (в 1,2 раза), В-лимфоцитов (в 1,28 раза), фагоцитарной активности иейтрофилов периферической крови (в 1,23 раза фагоцитарное число и 1,56 раза — фагоцитарный индекс) — в 2,7 раза снижается количество лизоцимав 1,3 раза бактерицидная активность сыворотки кровив 1,6 раза титр интерферонав 4,3 раза увеличивается количество циркулирующих иммунных комплексовв 1,2−2,2 раза концепрарция пизкомолекуляриых азотистых веществ (мочевины, креатипина и мочевой кислоты) — активность аспартатамииотраисферразы в 3,14 (у больных) и в 3,2 раза (у переболевших) — аланипамииотрапсферразы соответсвено 2,7 и 5,09 разакреатининкипазы в 4,6 и 1,8 раза превышало уровень здоровых животных, по отмечается снижение активности амилазы в 1,05 и 1,16 разщелочной фосфатазы в 1,73 и 1,6 разахолипэстеразы в 1,28 и 1,05 раза, что указывает на системный процесс.

4. Разработанные иммуностимулирующие препараты: препарат из пчелиной перги «Апистимулин-А», воздействующий па Т-систему лимфоцитовбактериальный липополисахарид из Вас. alvei (КМИЭВ-11), влияющий на В-систему способствуют активизации угнетенных звеньев иммунитета и обмена веществ при респираторных и желудочно-кишечных заболеваниях телят.

5. При конструировании живых и ипактивированных мопои ассоциированных вакцин против инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, парагриппа-3, ротаи коропавирусиой инфекций выделены и селекционированы производственные штаммы вирусов крупного рогатого скота: ИРТ — КМИЭВ-6- диареи — КМИЭВ-7- парагриппа-3 — КМИЭВ-8- ротавируса — КМИЭВ-3- коропавируса — КМИЭВ-1, которые наиболее активны в антигенном отношении и по своим генетическим характеристикам не отличаются от референтных штаммов. Оптимальным является раздельное культивирование вирусов в роллерных установках на перевиваемых культурах клеток МДБК или СПЭВ с использованием 5%-пого гемогидролизата в качестве ростовой (с сывороткой) и поддерживающей питательной среды, что позволяет достигнуть инфекционного титра вышеуказанных вирусов до 6,5 — 8,0 lg ТЦД 50/мл,. Для инактивации вируса использован теотропип в 0,2% концентрации, в качестве адъюваитаэмульсиген или суспензия активированной целлюлозы.

6.

Введение

живых и инактивированных монои ассоциированных вакцин крупному рогатому скоту приводит к биосинтезу противовирусных аитител (до 5,5 — 7,0 log2), активизации клеточного и гуморального иммунитета, основных показателей обмена веществ. Профилактическая эффективность вакцин в производственных условиях составляет от 88,2 до 97,5%.

7. Вирусы ифекциопного ринотрахеита и диареи, способны проникать в бактериальную клетку, участки их генома интегрироваться в геном бактерий, что в дальнейшем приводит к биосинтезу вирусспецифических белков в бактериальной клетке, а введение бактерий животным позволяет вырабатывать вируснейтрализующие антитела у лабораторных животных в титрах от 3,0+0,2 log2 до 3,5+0,3 log2. Препарат, изготовленный па основе Вас. alvei (КМИЭВ-11) и Вас. subtilis (КМИЭВ-39) приводит к выработке у телят аитител к вирусам ИРТ и ВД в титрах 7,8−8,0 log2 (ИРТ) и 7−7,5 log2 (ВД) в РИГА. Профилактическая эффективность препарата составила в среднем 70%- заболеваемость животных пе превышала 30%, тогда как в контрольной группе заболеваемость составила 62%.

8. Иммунизация телят на фойе активизации иммунитета иммуностимуляторами природного происхождения способствовала усилению специфических клеточных и гуморальных звеньев иммунитета — Ти В-лимфоцитов, концентрации антител и иммуноглобулинов, аитигеисвязывающих клеток, что свидетельствует о формировании более напряженного иммунного ответа.

9. Научно-обоснованные подходы к профилактике и терапии вирусных респираторных и желудочно-кишечных инфекций у телят, включающие комплекс организационно-хозяйственных, технологических, ветеринарно-санитарных и терапевтических мероприятий с использованием иммуностимуляторов, живых и инактивированных вакцин, позволяют в животноводческих хозяйствах снизить заболеваемость в 2−3 раза и в 1,5−2 раза — отход телят по причине инфекционных пневмоэнтеритов.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ.

Проведенные исследования позволяют рекомендовать производству следующие нормативные документы:

1. Вирусвакцина живая культуральпая против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, ТУ РБ 28 493.223−97;

2. Вирусвакцина живая культуральпая против вирусной диареи крупного рогатого скота, ТУ РБ 28 493.224−97;

3. Вирусвакцина живая культуральпая против парагриппа-3 крупного рогатого скотаТУ РБ 28 493.225−97;

4.Бивалептная живая культуральпая вирусвакцина против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скотаТУ РБ 750 971.006−98;

5. Вирусвакцина трехвалентная живая культуральпая против инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи и парагриппа-3 крупного рогатого скотаТУ РБ 600 049 353.033−2002;

6. Поливалентная ииактивироваииая культуральпая вирус-вакцина против инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, ротаи короиавируспой инфекции крупного рогатого скота «Тетравак», ТУ BY 600 049 853. 099−2007;

7 Ассоциированная вакцина против ротаи короиавируспой инфекций новорожденных телят, ТУ BY 600 049 853. 093 — 2008;

8. Рекомендации по диагностике, профилактике и терапии инфекционных заболеваний телят — утверждены ГУВ Минсельхозпрода Республики Беларусь 24.07.1991 г.

9. Методические рекомендации по диагностике и профилактике инфекционных заболеваний молодняка крупного рогатого скота — рассмотрены и утверждены секцией ветеринарии НТС Агропромсоюза ССР Молдова 10 июля 1990 г., протокол № 1.

10. Методические рекомендации по оценке функциональной активности В-лимфоцитов сельскохозяйственных животных /Утверждены па заседании секции иммунологии и биотехнологии ВАСХНИЛ 27 ноября 1991. Москва, 1991, 11 с.

11. Использование протаргола с глобулином для профилактики и терапии смешанных вирусных респираторных инфекций молодняка крупного рогатого скота. Рекомендации, рассмотрены и утверждены секцией ветеринарии НТС Агропромсоюза ССР Молдова 10 июля 1990 г., протокол № 1.

12. Методические рекомендации по комплексной профилактике и терапии ппевмоэнтеритов телят — рассмотрены и утверждены отделом ветеринарии управления сельского хозяйства Смоленской области 6 апреля.

1994 г.

13. Методические рекомендации по иммунологической диагностике, профилактике и терапии ппевмоэптеритов телят вируспо-бактериальпой этиологии — рассмотрены и одобрены НТС секции производства и переработки продуктов животноводства и ветеринарии Минсельхозпрода Республики Беларусь 29 декабря 1996 г., протокол № 4.

14. Методические указания по профилактике и мерам борьбы с ротаи коронавирусой инфекцией телят (Утверждены НТС секции производства и переработки продуктов животноводства и ветеринарии Минсельхозпрода Республики Беларусь, протокол № 1 от 27.01.1998);

15. Методические рекомендации по профилактике, лечению и мерам борьбы с ппевмоэптсритами телят (Утверждены ГУВ Минсельхозпрода Республики Беларусь 20.12.1999 г.);

16. Методические рекомендации по дифференциальной диагностике респираторных и желудочно-кишечных заболеваний телят вирусной и бактериальной этиологии (Утверждены ГУВ Минсельхозпрода Республики Беларусь 20.12.1999 г.);

17. Ветерипарно-сапитарные требования для племенных животноводческих хозяйств (ферм) Республики (Утверждены НТС секции животноводства и ветеринарии Минсельхозпрода Республики Беларусь 9 августа 2002 г., протокол № 2);

18. Ветерипарпо-сапитарпые требования для элеверов и госплемпредпрнятий Республики Беларусь Утверждены (НТС секции животноводства и ветеринарии Минсельхозпрода Республики Беларусь 25 октября 2002 г., протокол № 3);

19. Ветерипарно-сапитарные требования для племенных заводов Республики Беларусь, поставляющих ремонтных бычков па элеверы (Утверждены НТС секции животноводства и ветеринарии Минсельхозпрода Республики Беларусь 25 октября 2002 г., протокол № 3);

20. Методические указания по эпизоотологическому обследованию животноводческих предприятий (Утверждены ГУВ Минсельхозпрода Республики Беларусь 10.04.2005 г.).

21. Методические рекомендации по профилактике ппевмоэптеритов телят технологическими методами (Утверждены ГУВ Минсельхозпрода Республики Беларусь 10.04.2005 г.).

22. Экологические методы профилактики и терапии ппевмоэптеритов телят (методические указания) (Утверждены председателем Комитета Правительства Республики Дагестан по ветеринарии Российской Федерации 07.02.2006 г.).